細(xì)胞凋亡稱為細(xì)胞凋亡。核酶：核酶是具有催化活性的RNA分子，通過催化靶位點(diǎn)核酸鏈中磷酸二酯鍵的斷裂特異性地剪切底物分子，從而阻斷基因的表達(dá)。DNA半保存復(fù)制：每個(gè)子代分子的一條鏈來自親代DNA,另一條則是合成的，這種復(fù)制方式稱為DNA的半保存復(fù)制〔semiconservative replication)?；再|(zhì)的轉(zhuǎn)變和生物學(xué)活性的喪失，這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的變性作用。性等方面都存在差異。蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)：pH值時(shí)，蛋白質(zhì)解離成正、負(fù)離子的趨勢(shì)和程度相等，即為兼性離子或兩性離子，凈電荷為零，此時(shí)溶液的pH值稱為該蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。高通量測(cè)序技術(shù)HTS：是對(duì)傳統(tǒng)Sanger測(cè)序革命性的轉(zhuǎn)變，以此對(duì)幾十萬到幾百萬條核酸成為可能，所以又被稱為深度測(cè)序。異性分析的方法。Denovo測(cè)序：也稱為從頭測(cè)序，不需要任何現(xiàn)有的序列資料就可以對(duì)某個(gè)物種進(jìn)展測(cè)序，利用生物信息學(xué)分析手段對(duì)序列進(jìn)展拼接、組裝，從而獲得該物種的基因組圖譜。酶活性轉(zhuǎn)變，這種調(diào)整方式稱為酶促化學(xué)修飾調(diào)整。原始的調(diào)整方式。氨基酸的等電點(diǎn)：pHpH,稱為該氨基酸的等電點(diǎn)。別構(gòu)效應(yīng)：性轉(zhuǎn)變的現(xiàn)象.它是細(xì)胞內(nèi)最簡(jiǎn)潔的調(diào)整方式。蛋白質(zhì)的復(fù)性：指在肯定條件下，變性的蛋白質(zhì)分子恢復(fù)其原有的自然構(gòu)象并恢復(fù)生物活性的現(xiàn)象。它是細(xì)胞中一類能夠識(shí)別并結(jié)合到不完全折疊或裝配的蛋白質(zhì)上以幫助這些多肽正確折疊、轉(zhuǎn)運(yùn)或防止它們聚攏的蛋白質(zhì)，其本身不參與終產(chǎn)物的形成。SangerDNA聚合酶來延長(zhǎng)結(jié)合在待定序列模板上于雙脫氧核苷三磷酸缺乏所需要的3-OH集團(tuán)，使延長(zhǎng)的寡聚核苷酸選擇性的在G、A、TC處終止。同源蛋白：是指在不同有機(jī)體中實(shí)現(xiàn)同一功能的蛋白質(zhì)〔修飾方式〕，構(gòu)造與功能，以及各個(gè)蛋白質(zhì)之間相互作用。性.究生命現(xiàn)象，通過對(duì)生物大分子信息的獵取、加工、分類、檢索、分析與比較，最終獲得其生物學(xué)意義的一門科學(xué)和爭(zhēng)論方法。子氧生成水，這一電子傳遞體系成為呼吸鏈。氧化磷酸化：NADHFADH2將電子傳遞給O2的過程與ADPATP的生成。糖異生：由非糖物質(zhì)〔如丙酮酸、乳酸、甘油等〕作為前體合成葡萄糖或糖原的過程。簡(jiǎn)答題舉例說明蛋白質(zhì)的構(gòu)造及其功能的關(guān)系。爭(zhēng)論蛋白質(zhì)一級(jí)構(gòu)造與功能的關(guān)系主要是：爭(zhēng)論多肽鏈中不同部位的殘基與生物功能的關(guān)系。例1鐮刀型貧血病患者血紅細(xì)胞合成了一種不正常的血紅蛋白〔Hb-S〕，它與正常的血紅蛋白〔Hb-A〕的差異：僅僅在于βN6〔Hb-A〕6Hb-輸氧力量下降，易發(fā)生溶血這說明白蛋白質(zhì)分子構(gòu)造與功能關(guān)系的高度統(tǒng)一性。例2一級(jí)構(gòu)造的局部斷裂與蛋白質(zhì)的激活 體內(nèi)的某些蛋白質(zhì)分子初合成時(shí)常帶有抑制肽，呈無活性狀態(tài)稱為蛋白質(zhì)原。蛋白質(zhì)原的局部肽鏈以特定的方式斷裂后，才變?yōu)榛钚苑肿?。例：胰島素，在剛合成時(shí)，是一個(gè)比成熟的胰島素分子大一倍多的單鏈多肽，稱為前胰島素原。前胰島素原的N-末端有一段肽鏈，稱為信號(hào)肽.信號(hào)肽被切去，剩下的是胰島素原。胰島素原比胰島素分子多一段C肽，只有當(dāng)C肽被切除后才成為有51個(gè)殘基，分A、B兩條鏈的胰島素分子單體.例3同源蛋白同源蛋白：是指在不同有機(jī)體中實(shí)現(xiàn)同一功能的蛋白質(zhì)。同源蛋白中的一酸稱可變殘基。不同種屬的可變殘基有很大變化?？捎糜谕茢嗌矬w間親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近。親緣關(guān)系相近者，氨基酸差異少，反之則多〔進(jìn)化樹〕。如細(xì)胞色素C.蛋白質(zhì)的構(gòu)象與功能的關(guān)系別構(gòu)效應(yīng)：又稱變構(gòu)效應(yīng)，是指寡聚蛋白與配基結(jié)合，轉(zhuǎn)變蛋白質(zhì)構(gòu)象，導(dǎo)致蛋白質(zhì)生物活性轉(zhuǎn)變的現(xiàn)象.它是細(xì)胞內(nèi)最簡(jiǎn)潔的調(diào)整方式.例：血紅蛋白的別構(gòu)效應(yīng)象轉(zhuǎn)變與氧的結(jié)合力量增加。簡(jiǎn)述測(cè)定蛋白質(zhì)的一級(jí)構(gòu)造的測(cè)定根本操作步驟。①多肽鏈的拆分：由多條多肽鏈組成的蛋白質(zhì)分子，必需先進(jìn)展拆分?？捎?mol/L尿素或6mol/L②測(cè)定蛋白質(zhì)分子中多肽鏈的數(shù)目：通過測(cè)定末端氨基酸殘基的摩爾數(shù)與蛋白質(zhì)摩爾數(shù)之間的關(guān)系，即可確定多肽鏈的數(shù)目。③二硫鍵的斷裂：幾條多肽鏈通過二硫鍵交聯(lián)在一起。用過量的-巰基乙醇處理，使二硫法或巰基復(fù)原法拆分多肽鏈間的二硫鍵。④測(cè)定每條多肽鏈的氨基酸組成，并計(jì)算出氨基酸成分的分子比；N-末端和C-末端★末端氨基酸的測(cè)定：多肽鏈末端氨基酸分為兩類，N-端氨基酸和C-端氨基酸。在肽鏈氨基酸挨次分析中，最重要的是N-端氨基酸分析法。⑥多肽鏈斷裂成多個(gè)肽段肽段或肽碎片，并將其分別開來。⑦測(cè)定每個(gè)肽段的氨基酸挨次。⑧確定肽段在多肽鏈中的次序：利用兩套或多套肽段的氨基酸挨次彼此間的穿插重疊，拼湊出整條多肽鏈的氨基酸挨次。⑨確定原多肽鏈重二硫鍵的位置：一般承受胃蛋白酶處理沒有斷開二硫鍵的多肽鏈，再利同其它方法分析的肽段進(jìn)展比較，確定二硫鍵的位置。3RAAGly苷酸：無側(cè)鏈；雙面角可自由轉(zhuǎn)動(dòng)，無空間位阻；任意扭曲，柔性大；常消滅在需要扭曲或轉(zhuǎn)折的肽鏈片段中。Ala：小，側(cè)鏈只有一個(gè)甲基；無化學(xué)活性，在蛋白質(zhì)分子中可處于內(nèi)部或外表。Leu，Ile，Val帶有分支的支鏈ＡＡ，產(chǎn)生的位阻也更大；易于在蛋白質(zhì)分子中固定于肯定的位置，并有利于鏈的折疊。Ｐro一種亞氨酸，具有固定的構(gòu)型；α氨基與側(cè)鏈Ｃ原子成環(huán)，很強(qiáng)的立體化學(xué)效應(yīng)，使端或彎曲部位；常暴露于蛋白質(zhì)分子外表。AAPhe疏水作用很強(qiáng)；而Try，Trp帶極性側(cè)鏈，疏水性較差；Ｔry酚基易解離，易形成較強(qiáng)的氫鍵，故常消滅在分子內(nèi)；AAAASer，Thr側(cè)鏈帶有羥基，可形成氫鍵，也可通過水分子間形成氫鍵，化學(xué)性質(zhì)活潑，具有重要的功能；Cys有巰基〔－ＳＨ〕，易氧化形成帶的二硫鍵的胱氨酸；與金屬離子如Fe，Zn，Cu等配內(nèi)部，形成特定的模體(motif)構(gòu)造。Met疏水性大，柔性大，常埋藏在蛋白質(zhì)分子內(nèi)部。AAAsp，Glu兩個(gè)-coo-帶負(fù)電荷，在蛋白質(zhì)內(nèi)部形成鹽鍵；常位于蛋白質(zhì)分子外表與鈣結(jié)合；相互作用的位點(diǎn)。Asn,Gln側(cè)鏈雖有極性，但不易解離，不帶電荷，易形成氫鍵。AALys,Arg：一般帶正電荷，存在于蛋白質(zhì)分子外表；可與酸性氨基酸殘基，肽鏈Ｃ端，核酸中的磷酸基團(tuán)形成鹽鍵；與蛋白質(zhì)活性有關(guān)；Lys長(zhǎng)側(cè)鏈可自由伸展在外，與蛋白質(zhì)結(jié)合功能有關(guān)；Arg可沿著側(cè)鏈卷曲埋藏在蛋白質(zhì)分子內(nèi)，也可與蛋白質(zhì)分子內(nèi)的氧形成氫鍵，從而穩(wěn)定蛋白質(zhì)；與酶的催化功能有關(guān)；His含咪唑基，參與酶促反響中的質(zhì)子傳遞反響，為多種酶的活性中心；易于金屬離子形成配位化合物，參與組成各種金屬蛋白。AA4、測(cè)定蛋白質(zhì)的一級(jí)構(gòu)造，其樣品應(yīng)到達(dá)什么樣的要求？A.樣品必需純〔>97%以上〕；知道蛋白質(zhì)的分子量；知道蛋白質(zhì)由幾個(gè)亞基組成；測(cè)定蛋白質(zhì)的氨基酸組成；并依據(jù)分子量計(jì)算每種氨基酸的個(gè)數(shù)。E.測(cè)定水解液中的氨量，計(jì)算酰胺的含量。生物體的構(gòu)造層次生物分子是生物體特有的有機(jī)化合物生物分子，其中近半數(shù)是小分子，分子量一般在500以下。其余都是生物小分子的聚合物，分子量很大，一般在一萬以上，有的高達(dá)1012，因而稱為生物大分子。生物分子具有簡(jiǎn)單有序的構(gòu)造生物分子都有自己特有的構(gòu)造。生物大分子的分子量大，構(gòu)件種類多，數(shù)量大，排列挨次千變?nèi)f化，因而其構(gòu)造格外簡(jiǎn)單。估量?jī)H蛋白就有1010-1012。生物分子又是有序的，〔組織性存在于生命體系中。生物構(gòu)造具有特別的層次生物用少數(shù)幾種生物元素〔C、H、O、N、S、P)構(gòu)成小分子構(gòu)件，如氨基酸、核苷酸、成細(xì)胞器、細(xì)胞、組織、器官、系統(tǒng)和生物體。蛋白質(zhì)的自我剪接并用正常肽鍵將兩側(cè)蛋白質(zhì)多肽鏈連接起來。3個(gè)明顯的特點(diǎn):蛋白質(zhì)剪切完全由蛋白質(zhì)內(nèi)含子的氨基酸介導(dǎo)。蛋白質(zhì)剪切是一個(gè)分子內(nèi)過程。蛋白質(zhì)剪切不需要輔酶或代謝能，其過程主要涉及鍵的重排。4步:在剪切體的上游，intein的第一個(gè)殘基半胱氨酸或絲氨酸(Ser1)的側(cè)鏈發(fā)生N-S或N-O通過剪切位點(diǎn)C末端的半胱氨酸或絲氨酸攻擊線性酯鍵中間體形成分枝酯鍵中間體；InteinC末端剪切處的天冬酰胺環(huán)化形成琥珀酰亞胺環(huán)，同時(shí)分枝酯鍵中間體斷裂，C末端琥珀酰亞胺環(huán)的inteinextein。倒數(shù)其次個(gè)氨基酸組氨酸對(duì)于鄰近天冬酰胺的環(huán)化有關(guān)心作用；琥珀酰亞胺環(huán)水解，extein之間的酯鍵發(fā)生O-N或S-N?；嘏?，產(chǎn)生穩(wěn)定自然的肽鍵。7、寫出兩種以上測(cè)定蛋白分子量的方法及原理?！?〕依據(jù)化學(xué)成分測(cè)定最小相對(duì)分子質(zhì)量①此法首先利用化學(xué)分析方法測(cè)定蛋白質(zhì)分子中某一特別成分的百分含量。②然后，假定蛋白質(zhì)分子中該成分只有一個(gè)，據(jù)其百分含量可計(jì)算出最低相對(duì)分子質(zhì)量。③最小相對(duì)分子質(zhì)量＝〔成分的相對(duì)分子、原子質(zhì)量〕/成分的百分含量。④假設(shè)蛋白質(zhì)分子中所含成分不是一個(gè)單位量的倍數(shù)?！?〕超離心法60000～80000r/minSSSvedberg〕方程計(jì)算蛋白質(zhì)分子的相對(duì)分子質(zhì)量?！?〕凝膠過濾洗脫體積大。測(cè)得幾種標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的洗脫體積〔Ve〕；以相對(duì)分子質(zhì)量對(duì)數(shù)〔logM〕對(duì)Ve作圖，得標(biāo)準(zhǔn)曲線；logM=K1-K2Ve，再測(cè)出未知樣品洗脫體積〔Ve〕；從標(biāo)準(zhǔn)曲線上可查出樣品蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量?！?〕SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法SDS和巰基乙醇〔翻開二硫鍵〕處理，蛋白質(zhì)變性〔肽鏈伸展〕SDS結(jié)合，形成SDS-蛋白質(zhì)復(fù)合物，不同蛋白質(zhì)分子的均帶負(fù)電〔SDS〕；且荷質(zhì)比一樣〔蛋白質(zhì)分子大，結(jié)合SDS多；分子小，結(jié)合SDS〕。②不同蛋白質(zhì)分子具有相像的構(gòu)象。③用幾種標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)值對(duì)它們的遷移率作圖；④測(cè)出待測(cè)樣品的遷移率；⑤從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品的相對(duì)分子質(zhì)量。簡(jiǎn)述目前覺察的熱休克蛋白的功能有哪些？熱休克蛋白是熱休克反響中轉(zhuǎn)錄合成的一組特別糖蛋白。其中HSP70是最保守和最重要的一種蛋白質(zhì)，HSP70具有多種生物學(xué)功能，包括分子伴侶功能，參與腫瘤免疫，抗細(xì)胞凋HSP70HSP70HSP70在腫瘤免疫方面的作用；HSP70HSP70①參與蛋白質(zhì)的折疊；ATP③維持細(xì)胞蛋白自穩(wěn)；④提高細(xì)胞對(duì)應(yīng)激原的耐受性。HSP70在腫瘤免疫方面的作用①HSP②HSP70-腫瘤抗原肽復(fù)合物，一方面可以激活非特異性腫瘤免疫，這類抗腫瘤免疫與T細(xì)胞的活化有關(guān)；另一方面可以激活特異性腫瘤免疫，在抗腫瘤中發(fā)揮主要作用，③HSP70可以加工并提呈腫瘤抗原，激發(fā)抗腫瘤細(xì)胞的特異性反響。④還可以作為抗原提呈分子直接將腫瘤抗原提呈給T細(xì)胞，而激發(fā)T細(xì)胞介導(dǎo)的特異性抗腫瘤細(xì)胞免疫。HSP70細(xì)胞凋亡(apoptosis)，又稱程序性細(xì)胞死亡(Progmmedcelldeath,PCD)，是指細(xì)胞在空、核裂開和DNA簡(jiǎn)述朊病毒與瘋牛病的關(guān)系傳染性海綿狀腦病或稱朊病毒病(priondiseases)是一種致命的腦病，該病嚴(yán)峻威逼著流行國家家畜的安康。PrionProtein,PrP)。朊病毒假說認(rèn)為，當(dāng)正常朊蛋白PrPC(對(duì)蛋白酶敏感)構(gòu)象特別變化時(shí)可形成致病朊病毒PrPScFraser等于1992年首次證明瘋牛病具有傳染性,并證明其病原體也是朊病毒。目前，關(guān)于朊病毒的致病機(jī)理，普遍認(rèn)為正常朊蛋白PrPC通過構(gòu)象轉(zhuǎn)變轉(zhuǎn)變?yōu)镻rPSc是致病的主要緣由,由于缺乏PrPC性，而假設(shè)將PrPScPrPSc導(dǎo)致了病原學(xué)一個(gè)全理論概念的產(chǎn)生：并非全部病原體都必需具有核酸(DNA或RNA)成分才能對(duì)宿主產(chǎn)生致病作用和生殖后代。簡(jiǎn)述生物體內(nèi)蛋白質(zhì)降解的主要途徑。路、以及胱天蛋白酶水解途徑等?！?〕溶酶體是真核細(xì)胞內(nèi)重要的細(xì)胞器，內(nèi)含60多種酸性水解酶，分解蛋白質(zhì)、核酸、多糖和脂類。溶酶體降解蛋白質(zhì)是一條非特異性蛋白降解系統(tǒng)，真核細(xì)胞內(nèi)90%以上的長(zhǎng)壽蛋白和一局部短壽蛋白都是在溶酶體中降解的應(yīng)的酶降解，然后通過溶酶體膜的載體蛋白運(yùn)送到胞液，補(bǔ)充胞液的代謝庫。泛素—