香菇多糖超高壓提取工藝優(yōu)化研究

蘑菇是世界著名的蘑菇之一，屬于擔子菌、傘菌和開口科。香菇多糖常見的提取方法有熱水浸提、酸浸提、酶解法、超聲輔助、微波輔助等1材料和方法1.1材料和試劑干香菇，本市超市；無水乙醇、硫酸、葡萄糖、苯酚(均為AR)，上海麥克林試劑有限公司。1.2技有限責任公司UHP900×2-Z型超高壓處理裝置，包頭科發(fā)高壓科技有限責任公司；RE2L旋轉蒸發(fā)儀，滎陽市科瑞儀器廠；TDL-50B臺式低速離心機，上海安亭科學儀器廠；752N紫外可見分光光度計，上海儀電分析儀器有限公司。1.3測試方法1.3.1香菇粗多糖的提取香菇多糖的提取流程香菇→烘干→粉碎(過80目篩)→保存?zhèn)溆谩Q取一定質(zhì)量的香菇粉，加水→裝袋、密封→超高壓提取→離心分離(5000r/min，20min)→濃縮(上清液減壓濃縮)→醇沉(3倍體積95%的乙醇中)→靜置(4℃冰箱，24h)→再離心(5000r/min，20min)→干燥→香菇粗多糖。1.3.2關于蘑菇葡萄糖含量的測定香菇多糖含量的測定采用苯酚-硫酸法1.3.3提取率計算提取率(LNT)=(提取的多糖量/提取的香菇粉樣品量)×100%1.3.4提取溫度和保壓時間按1.3.1的方法，每次準確稱取10g香菇粉5份，加水混勻密封，進行超高壓提取香菇多糖。固定條件為壓力400MPa，料液比1∶30g/mL，提取溫度50℃和保壓時間6min。分別設定壓力(200MPa、300MPa、400MPa、500MPa和600MPa)、料液比(g/mL)(1∶10、1∶20、1∶30、1∶40和1∶50)、提取溫度(30℃、40℃、50℃、60℃和70℃)、保壓時間(2min、4min、6min、8min和10min)，進行單因素試驗，每組重復3次，取平均值。1.3.5正交試驗設計在1.3.4試驗基礎上，選取1.4處理數(shù)據(jù)試驗數(shù)據(jù)采用Excel整理，采用正交設計助手進行數(shù)據(jù)分析。2結果與分析2.1單因素試驗2.1.1lnt提取率由圖1可知，當壓力<400MPa時，LNT提取率隨著壓力的增加逐漸升高，當壓力≥400Mpa時，LNT提取率變化不大。這是由于壓力的增加，使香菇細胞破裂程度和數(shù)量增加，多糖的傳質(zhì)和溶解速率增加，提取率升高。當壓力達到400MPa后，香菇細胞幾乎完全破碎，再加大壓力，提取率不再升高。故取最適壓力為400MPa。2.1.2料液比對多糖提取率的影響由圖2可知，當料液比<1∶30(g/mL)時，LNT提取率隨著溶劑的量的增加而升高，當料液比≥1∶30(g/mL)時，LNT提取率變化緩慢但不明顯。這是因為溶劑用量的增加，增大了香菇細胞內(nèi)外的濃度差，傳質(zhì)速率加快，多糖溶出增多，提取率上升；但溶劑用量達到一定值時，溶質(zhì)基本完全溶解出來，而不再明顯變化。故取料液比為1∶30(g/mL)。2.1.3不同提取溫度對多糖提取率的影響由圖3可知，LNT提取率隨著溫度的升高而提高，最后趨于穩(wěn)定，當提取溫度≥50℃時，再繼續(xù)升高提取溫度，LNT提取率變化也不顯著而趨于平緩。這是因為提取溫度升高，提高了多糖的溶解度，加快了多糖溶出，促使提取率提高；當超過50℃時，多糖溶出基本徹底，提取率不再明顯變化。故取提取溫度為50℃。2.1.4lnt的提取由圖4可知，保壓時間<6min時，LNT提取率隨著保壓時間的增加而提高，當保壓時間≥6min時，LNT提取率也基本不再變化。這是因為在超高壓下，香菇細胞的破裂需要一定的時間。延長保壓時間，香菇細胞破裂數(shù)量增多，多糖溶出也增多，提高了提取率；當時間大于6min后，多糖被基本徹底溶出，提取率不再明顯提高。故取保壓時間6min為宜。2.2正交試驗的結果由表2可知，4個因素的影響大小依次為：3lnt提取率本文采用超高壓提取LNT，得到最優(yōu)提