五種抗鴿球蟲(chóng)藥物的篩選試驗(yàn)

鴿子是鴿子最重要的疾病之一。主要癥狀包括腹瀉、食欲減少、瘦體重、生長(zhǎng)發(fā)育緩慢。如果嚴(yán)重，可能會(huì)導(dǎo)致大量死亡。該病主要危害幼鴿,一旦暴發(fā)球蟲(chóng)病死亡率很高,成年鴿一般為亞臨床感染,體重出現(xiàn)下降。據(jù)報(bào)道,美國(guó)華盛頓地區(qū)曾暴發(fā)過(guò)鴿球蟲(chóng)病,鴿子在1-2d內(nèi)全部死亡。國(guó)內(nèi)也有因鴿球蟲(chóng)病引起鴿子死亡的報(bào)道。目前,尚沒(méi)有專用于鴿的抗球蟲(chóng)藥,防治鴿球蟲(chóng)病的藥物均為抗雞球蟲(chóng)藥。為增加抗鴿球蟲(chóng)病的藥物種類,我們選擇常用的5種抗雞球蟲(chóng)藥,采用人工感染的方法進(jìn)行鴿球蟲(chóng)病防治試驗(yàn),評(píng)價(jià)其抗鴿球蟲(chóng)病的防治效果,為養(yǎng)鴿戶提供更多可選擇的抗球蟲(chóng)藥物。1材料和方法1.1培養(yǎng)培養(yǎng)學(xué)生子從上海某養(yǎng)鴿場(chǎng)采集糞便,實(shí)驗(yàn)室分離球蟲(chóng),孢子化后接種乳鴿傳代增殖,收集培養(yǎng)孢子化后,4℃保存?zhèn)溆?。?jīng)對(duì)球蟲(chóng)種類初步鑒定,所收集到的球蟲(chóng)卵囊為混合蟲(chóng)種,其中拉氏艾美耳球蟲(chóng)(Eimerialabbeana)約70%、鴿艾美耳球蟲(chóng)(E.columbae)約30%。1.2測(cè)試?guó)澴?月齡左右肉鴿,飼養(yǎng)于經(jīng)高溫消毒的、無(wú)球蟲(chóng)的籠子中,飼喂玉米,自由飲水。感染前連續(xù)檢查3d糞便,確保無(wú)球蟲(chóng)感染。1.3克球、卡爾、托曲珠利選擇5種常用的抗雞球蟲(chóng)藥物。地克珠利:山東達(dá)易科技開(kāi)發(fā)有限公司煙臺(tái)藥業(yè)分公司,商品名“定克球”,批號(hào)20090403,使用有效濃度1×10-6?；前粪瓙哼c:天津生機(jī)集團(tuán)股份有限公司,商品名“克球”,批號(hào)20081102,使用有效濃度300×10-6?；前仿冗拎衡c:施瑞客(天津)生物技術(shù)有限公司,商品名“球可伏”,批號(hào)20090401,使用有效濃度300×10-6。托曲珠利:四川拜耳動(dòng)物保健品有限公司,商品名“百球清”,批號(hào)2009032501,使用有效濃度25×10-6。白頭翁散:河南鼎盛生物醫(yī)藥有限公司,商品名“球必妥”,批號(hào)20090401,使用有效濃度500×10-6。1.4平均局部感染設(shè)5個(gè)感染用藥組、1個(gè)感染不用藥組、1個(gè)不感染不用藥組,每組5只鴿,每批35只鴿。重復(fù)3次,共計(jì)105只。在確定鴿子無(wú)球蟲(chóng)感染后,隨機(jī)分組并調(diào)整各組體重基本相同,用藥組感染前2d開(kāi)始通過(guò)飲水給藥,至感染后5d。各感染組每只鴿經(jīng)嗉囊接種孢子化卵囊15×104個(gè)。感染后每天觀察鴿子的臨床癥狀。在感染后第0、3、6、9、12、15天,收集糞便,參照《動(dòng)物球蟲(chóng)病診斷技術(shù)》國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行定量檢查,檢測(cè)各組每克糞便卵囊數(shù)(OPG)。感染后15d,試驗(yàn)結(jié)束。1.5測(cè)試指標(biāo)1.5.1臨床癥狀觀察對(duì)死亡率、鴿的精神、食欲、飲水、糞便等常規(guī)情況觀察。1.5.2卵囊相對(duì)減少率卵囊相對(duì)減少率=(感染對(duì)照組OPG-用藥組OPG)/感染對(duì)照組OPG×100。2結(jié)果2.1虎的一般情況試驗(yàn)期間,鴿子沒(méi)有發(fā)生因球蟲(chóng)感染或藥物因素發(fā)生的死亡。鴿的精神、食欲、飲水比較正常。感染對(duì)照組的糞便在感染后第6-9天略微變稀,第9天后逐漸正常,其余各組都排出青白色正常糞便。2.2克珠利和抗鮑球蟲(chóng)的感染情況第1批試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。從表1可知,感染不用藥組從感染后第3-15天的糞便中均有卵囊排出,排卵囊高峰出現(xiàn)在接種后第9天。所有藥物均對(duì)鴿球蟲(chóng)的繁殖具有明顯抑制作用,均是在感染后第6天開(kāi)始有卵囊排出,而在感染后第15天均未發(fā)現(xiàn)卵囊。其中磺胺氯吡嗪鈉和磺胺喹惡啉鈉的效果最好,僅在感染后第6天發(fā)現(xiàn)極少量的卵囊,相對(duì)卵囊減少率分別為99.9%和99.8%。其次為白頭翁散和托曲珠利,相對(duì)卵囊減少率分為為95.6%和93.1%。地克珠利的效果一般,相對(duì)卵囊減少率僅為67.4%。不感染不用組的糞便在整個(gè)試驗(yàn)中未發(fā)現(xiàn)有卵囊。第2批試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。從表2可知,磺胺氯吡嗪鈉組在感染后第3-15天未發(fā)現(xiàn)有卵囊,完全抑制了球蟲(chóng)的繁殖?；前粪瓙哼c組僅在接種后第9天發(fā)現(xiàn)有少量卵囊排出,卵囊減少率為99.7%;白頭翁散組僅在感染后第6天和第9天有少量卵囊排出,卵囊減少率為99.8%,二者幾乎完全抑制球蟲(chóng)的繁殖。托曲珠利在感染后第6、9、12天有少量排出,卵囊減少率為92.7%。地克珠利組效果較差,感染后第3-15天均有卵囊排出,卵囊減少率僅為79.6%。第3批試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。從表3可知,磺胺氯吡嗪鈉組僅在感染后第6天有極少量排出,磺胺喹惡啉鈉組僅在感染后第6、9天有少量卵囊排出,2組的卵囊減少率分別為99.9%和99.8%。白頭翁散在感染后第6、9、12天有卵囊排出,卵囊減少率為91.0%。托曲珠利和地克珠利在感染后第3-12天均有卵囊排出,卵囊減少率分別為88.4%和77.9%。綜合以上結(jié)果可知,磺胺喹惡啉鈉、磺胺氯吡嗪鈉的抗鴿球蟲(chóng)效果最好,3批試驗(yàn)的平均相對(duì)卵囊減少率分別為99.9%(99.9%-100%)和99.5%(98.8%-99.8%),幾乎殺死所有蟲(chóng)體。其次為白頭翁散和托曲珠利,平均相對(duì)卵囊減少率分別為96.7%(91.0%-99.8%)和92.0%(88.4%-93.1%)。地克珠利的效果一般,平均相對(duì)卵囊減少率僅為75.6%(67.3%-79.6%)(見(jiàn)表4)。3磺胺類藥物的聯(lián)合應(yīng)用鴿的飼養(yǎng)一般以飼喂玉米、黃豆、大麥等糧食原料為主,故一般藥物很難混入飼料,因此,選擇防治鴿球蟲(chóng)病的藥物一般以飲水劑為宜,利于現(xiàn)場(chǎng)使用。本次試驗(yàn)所用抗球蟲(chóng)藥物均為飲水劑,所用劑量均是參照雞的使用推薦量,在試驗(yàn)中未發(fā)現(xiàn)因藥物而產(chǎn)生的中毒現(xiàn)象,說(shuō)明藥物對(duì)鴿子是安全的。在3次試驗(yàn)中,均設(shè)立了不感染不用藥組,在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中均未發(fā)現(xiàn)有球蟲(chóng),說(shuō)明試驗(yàn)中未發(fā)生球蟲(chóng)交叉感染。本研究結(jié)果顯示,磺胺氯吡嗪鈉、磺胺喹惡啉鈉的抗鴿球蟲(chóng)效果最好,其次為白頭翁散和托曲珠利,而地克珠利效果一般?；前粪瓙哼c、磺胺氯吡嗪鈉為磺胺類藥物,該類藥物不僅能治療球蟲(chóng)病,而且有殺菌作用,因此該類藥物是治療球蟲(chóng)病首選藥物之一。已報(bào)道的用于鴿球蟲(chóng)病防治的磺胺類藥物有磺胺二甲嘧啶、磺胺喹惡啉、三甲氧芐胺嘧啶、磺胺氯吡嗪等。在本研究中,磺胺氯吡嗪和磺胺喹惡啉均幾乎完全抑制了球蟲(chóng)的繁殖,表明該兩種藥對(duì)鴿球蟲(chóng)具有高效作用,值得在鴿球蟲(chóng)病的臨床防治中推廣應(yīng)用。但是該類藥物有較強(qiáng)的毒副作用,特別是對(duì)雛禽,易導(dǎo)致出血性綜合征,與抗菌增效劑聯(lián)合應(yīng)用可使藥效顯著提高,降低毒性反應(yīng)。地克珠利和托曲珠利均為三嗪類藥物,具有廣譜的抗球蟲(chóng)活性。在本次試驗(yàn)所選用的5種藥物中,地克珠利的抗鴿球蟲(chóng)效果最差,平均卵囊減少率僅為75.6%;而托曲珠利的卵囊減少率為92.0%,效果明顯好于地克珠利。不同于已有研究,寧長(zhǎng)申等、張曉根等在治療肉鴿球蟲(chóng)病中,以0.5mg/kg劑量地克珠利飲水連用5天,球蟲(chóng)卵囊轉(zhuǎn)陰率達(dá)33.3%-66.7%,平均卵囊減少率高達(dá)92.9%-99.5%,而25mg/kg劑量百球清組的卵囊轉(zhuǎn)陰率為16.7%-60%,卵囊減少率為35%-91.4%,效果差于地克珠利。造成這種差異的原因可能是由于用藥方法不同:本試驗(yàn)為預(yù)防性用藥,而寧長(zhǎng)申、張曉根等為治療性用藥。妥曲珠利抗球蟲(chóng)機(jī)制是干擾球蟲(chóng)細(xì)胞核的分裂和線粒體的作用,從而影響蟲(chóng)體的呼吸、代謝功能,對(duì)球蟲(chóng)在細(xì)胞內(nèi)的所有發(fā)育階段均有殺滅作用。Vercruysse研究發(fā)現(xiàn),5、10和15mg/kg妥曲珠利均能有效抑制卵囊的繁殖,卵囊減少量與劑量呈正相關(guān),完全抑制鴿球蟲(chóng)卵囊排出的最小劑量為20mg/kg·d。本研究所用劑量為25mg/kg,在感染后第15天均未發(fā)現(xiàn)有球蟲(chóng)排出,與已有研究一致。白頭翁散是一個(gè)中藥制劑,具有清熱解毒、涼血止痢之功效,對(duì)細(xì)菌、阿米巴等具有明顯的抑制作用。球蟲(chóng)主要在腸道上皮細(xì)胞內(nèi)大量增殖,破壞了腸黏膜的完整性,引起腸黏膜發(fā)