第1頁(yè)補(bǔ)：原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序第2頁(yè)補(bǔ)：原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序IMN第3頁(yè)補(bǔ)：原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序IMN第4頁(yè)補(bǔ)：原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序IMN編碼區(qū)第5頁(yè)補(bǔ)：原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序IMN非編碼區(qū)編碼區(qū)第6頁(yè)補(bǔ)：原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序IMN非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)第7頁(yè)補(bǔ)：原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序IMN非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游第8頁(yè)補(bǔ)：原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序IMN非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游第9頁(yè)補(bǔ)：原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序IMN非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游第10頁(yè)補(bǔ)：原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序IMN非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游開啟子第11頁(yè)補(bǔ)：原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序IMN非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游與RNA聚酶結(jié)合位點(diǎn)開啟子第12頁(yè)補(bǔ)：原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序IMN非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游與RNA聚酶結(jié)合位點(diǎn)開啟子終止子第13頁(yè)補(bǔ)：原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序IMN非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游與RNA聚酶結(jié)合位點(diǎn)開啟子終止子編碼區(qū)非編碼區(qū)第14頁(yè)補(bǔ)：原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序IMN非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游與RNA聚酶結(jié)合位點(diǎn)開啟子終止子編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼蛋白質(zhì),連續(xù)不間斷第15頁(yè)補(bǔ)：原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序IMN非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游與RNA聚酶結(jié)合位點(diǎn)開啟子終止子編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼蛋白質(zhì),連續(xù)不間斷不編碼蛋白質(zhì)，有調(diào)控作用第16頁(yè)補(bǔ)：真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序IMN第17頁(yè)補(bǔ)：真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序非編碼區(qū)非編碼區(qū)IMN第18頁(yè)補(bǔ)：真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)IMN第19頁(yè)補(bǔ)：真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)上游與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)IMN第20頁(yè)補(bǔ)：真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)開啟子編碼區(qū)上游與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)IMN第21頁(yè)補(bǔ)：真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)開啟子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)IMN第22頁(yè)補(bǔ)：真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)開啟子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游外顯子與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)IMN第23頁(yè)補(bǔ)：真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)開啟子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游外顯子內(nèi)含子與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)IMN第24頁(yè)補(bǔ)：真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)開啟子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游外顯子內(nèi)含子與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)IMN第25頁(yè)補(bǔ)：真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序編碼區(qū)非編碼區(qū)外顯子：能編碼蛋白質(zhì)序列內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì)序列編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)開啟子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游外顯子內(nèi)含子與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)IMN第26頁(yè)補(bǔ)：真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)1.2基因工程基本操作程序編碼區(qū)非編碼區(qū)外顯子：能編碼蛋白質(zhì)序列內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì)序列不編碼蛋白質(zhì)，有調(diào)控作用編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)開啟子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游外顯子內(nèi)含子與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)IMN第27頁(yè)1.2基因工程基本操作程序第28頁(yè)一目標(biāo)基因獲取1.2基因工程基本操作程序IMN第29頁(yè)一目標(biāo)基因獲取1.2基因工程基本操作程序IMN(一)目標(biāo)基因：第30頁(yè)一目標(biāo)基因獲取1.2基因工程基本操作程序IMN(一)目標(biāo)基因：主要指是編碼蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)基因；第31頁(yè)一目標(biāo)基因獲取1.2基因工程基本操作程序IMN(一)目標(biāo)基因：主要指是編碼蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)基因；也能夠是一些含有調(diào)控作用因子。第32頁(yè)一目標(biāo)基因獲取1.2基因工程基本操作程序IMN(一)目標(biāo)基因：主要指是編碼蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)基因；也能夠是一些含有調(diào)控作用因子。(二)獲取目標(biāo)基因慣用方法第33頁(yè)一目標(biāo)基因獲取1.2基因工程基本操作程序IMN(一)目標(biāo)基因：主要指是編碼蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)基因；也能夠是一些含有調(diào)控作用因子。(二)獲取目標(biāo)基因慣用方法從自然界已經(jīng)有物種中分離用人工方法合成第34頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因第35頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(1)基因文庫(kù)概念第36頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(1)基因文庫(kù)概念第37頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(1)基因文庫(kù)概念將含有某種生物不一樣基因許多DNA片段,導(dǎo)入受體菌群體中儲(chǔ)存,各個(gè)受體菌分別含有這種生物不一樣基因,稱為基因文庫(kù)。第38頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(1)基因文庫(kù)概念將含有某種生物不一樣基因許多DNA片段,導(dǎo)入受體菌群體中儲(chǔ)存,各個(gè)受體菌分別含有這種生物不一樣基因,稱為基因文庫(kù)。(2)基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)第39頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN第40頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(2)基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)包含了一個(gè)生物全部基因基因文庫(kù)叫做基因組文庫(kù)。第41頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(2)基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)包含了一個(gè)生物全部基因基因文庫(kù)叫做基因組文庫(kù)。包含了一個(gè)生物一部分基因基因文庫(kù)叫做部分基因文庫(kù)。第42頁(yè)IMN(3)基因文庫(kù)構(gòu)建第43頁(yè)IMN(3)基因文庫(kù)構(gòu)建①直接分離法第44頁(yè)IMN(3)基因文庫(kù)構(gòu)建①直接分離法第45頁(yè)IMN(3)基因文庫(kù)構(gòu)建①直接分離法基因組文庫(kù)構(gòu)建第46頁(yè)IMN(3)基因文庫(kù)構(gòu)建②反轉(zhuǎn)錄法：第47頁(yè)IMN(3)基因文庫(kù)構(gòu)建②反轉(zhuǎn)錄法：第48頁(yè)IMN(3)基因文庫(kù)構(gòu)建②反轉(zhuǎn)錄法：mRNAcDNA(互補(bǔ)DNA)雙鏈DNA反轉(zhuǎn)錄DNA聚合酶第49頁(yè)IMN(3)基因文庫(kù)構(gòu)建②反轉(zhuǎn)錄法：mRNAcDNA(互補(bǔ)DNA)雙鏈DNAcDNA文庫(kù)構(gòu)建反轉(zhuǎn)錄DNA聚合酶第50頁(yè)IMN基因組DNA文庫(kù)與cDNA文庫(kù)比較第51頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(2)怎樣從基因文庫(kù)中得到所需要基因第52頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(2)怎樣從基因文庫(kù)中得到所需要基因依據(jù)：目標(biāo)基因相關(guān)信息。第53頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(2)怎樣從基因文庫(kù)中得到所需要基因依據(jù)：目標(biāo)基因相關(guān)信息。如：依據(jù)基因核苷酸序列基因功效基因在染色體上位置基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特征。第54頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因2.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目標(biāo)基因第55頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(1)PCR——聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)2.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目標(biāo)基因第56頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(1)PCR——聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是一項(xiàng)生物體外復(fù)制特定DNA片段核酸合成技術(shù)。經(jīng)過(guò)此技術(shù)，可在短時(shí)間內(nèi)獲取大量目標(biāo)基因。2.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目標(biāo)基因第57頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(1)PCR——聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)2.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目標(biāo)基因(2)原理：第58頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(1)PCR——聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)2.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目標(biāo)基因(2)原理：DNA雙鏈復(fù)制第59頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(1)PCR——聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)2.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目標(biāo)基因(2)原理：DNA雙鏈復(fù)制(3)前提：第60頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(1)PCR——聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)2.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目標(biāo)基因(2)原理：DNA雙鏈復(fù)制(3)前提：一段已知目標(biāo)基因核苷酸序列第61頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(1)PCR——聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)2.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目標(biāo)基因(2)原理：DNA雙鏈復(fù)制(3)前提：一段已知目標(biāo)基因核苷酸序列(4)條件：第62頁(yè)一目標(biāo)基因獲取IMN1.從基因文庫(kù)中獲取目標(biāo)基因(1)PCR——聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)模板DNA；DNA引物（做開啟子）；四種脫氧核苷酸；DNA聚合酶等。2.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目標(biāo)基因(2)原理：DNA雙鏈復(fù)制(3)前提：一段已知目標(biāo)基因核苷酸序列(4)條件：第63頁(yè)IMN利用PCR技術(shù)擴(kuò)增第64頁(yè)IMN(5)過(guò)程：變性、退火、延伸三步曲第65頁(yè)IMN(5)過(guò)程：變性、退火、延伸三步曲第66頁(yè)IMN(5)過(guò)程：變性、退火、延伸三步曲變性第67頁(yè)IMN(5)過(guò)程：變性、退火、延伸三步曲變性退火第68頁(yè)IMN(5)過(guò)程：變性、退火、延伸三步曲變性退火延伸第69頁(yè)IMN(6)方式：以_____方式擴(kuò)增，即_____（n為擴(kuò)增循環(huán)次數(shù)）第70頁(yè)IMN(6)方式：