人員衛(wèi)生和微生物

基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)

2023/10/71一、第二十九條所有人員都應(yīng)當(dāng)接受衛(wèi)生要求的培訓(xùn)，企業(yè)應(yīng)當(dāng)建立人員衛(wèi)生操作規(guī)程，最大限度地降低人員對(duì)藥品生產(chǎn)造成污染的風(fēng)險(xiǎn)。

GMP!!藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范2010年版2023/10/72一、第二十條

凡在潔凈區(qū)工作的人員（包括清潔工和設(shè)備維修工）應(yīng)當(dāng)定期培訓(xùn)，使無(wú)菌藥品的操作符合要求。培訓(xùn)的內(nèi)容應(yīng)當(dāng)包括衛(wèi)生和微生物方面的基礎(chǔ)知識(shí)。未受培訓(xùn)的外部人員（如外部施工人員或維修人員）在生產(chǎn)期間需進(jìn)入潔凈區(qū)時(shí)，應(yīng)當(dāng)對(duì)他們進(jìn)行特別詳細(xì)的指導(dǎo)和監(jiān)督GMP!!藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范2010年版無(wú)菌附錄2023/10/73主要內(nèi)容一、人員衛(wèi)生二、微生物基礎(chǔ)知識(shí)2023/10/74法規(guī)要求

第三十條人員衛(wèi)生操作規(guī)程應(yīng)當(dāng)包括與健康、衛(wèi)生習(xí)慣及人員著裝相關(guān)的內(nèi)容。生產(chǎn)區(qū)和質(zhì)量控制區(qū)的人員應(yīng)當(dāng)正確理解相關(guān)的人員衛(wèi)生操作規(guī)程。企業(yè)應(yīng)當(dāng)采取措施確保人員衛(wèi)生操作規(guī)程的執(zhí)行。

一、人員衛(wèi)生2023/10/75法規(guī)要求

第三十一條企業(yè)應(yīng)當(dāng)對(duì)人員健康進(jìn)行管理，并建立健康檔案。直接接觸藥品的生產(chǎn)人員上崗前應(yīng)當(dāng)接受健康檢查，以后每年至少進(jìn)行一次健康檢查

一、人員衛(wèi)生2023/10/76法規(guī)要求

第三十二條企業(yè)應(yīng)當(dāng)采取適當(dāng)措施，避免體表有傷口、患有傳染病或其他可能污染藥品疾病的人員從事直接接觸藥品的生產(chǎn)。

一、人員衛(wèi)生2023/10/77法規(guī)要求

體表傷口患有傳染病：

呼吸道傳染病：流行性感冒，肺結(jié)核，腮腺炎，麻疹，百日咳等（空氣傳播）

體表傳染病：血吸蟲(chóng)病，沙眼，狂犬病，破傷風(fēng)，淋病等（接觸傳播）

一、人員衛(wèi)生2023/10/78法規(guī)要求

其他可能污染藥品疾?。浩ぐ_、真菌感染的皮膚病等一、人員衛(wèi)生2023/10/79法規(guī)要求

其他可能污染藥品疾?。浩ぐ_、真菌感染的皮膚病等一、人員衛(wèi)生2023/10/710法規(guī)要求

第三十三條

參觀人員和未經(jīng)培訓(xùn)的人員不得進(jìn)入——生產(chǎn)區(qū)和質(zhì)量控制區(qū)，特殊情況確需進(jìn)入的，應(yīng)當(dāng)事先對(duì)個(gè)人衛(wèi)生、更衣等事項(xiàng)進(jìn)行指導(dǎo)。

一、人員衛(wèi)生2023/10/711法規(guī)要求

第三十五條進(jìn)入潔凈生產(chǎn)區(qū)的人員不得化妝和佩帶飾物。

一、人員衛(wèi)生2023/10/712摘下個(gè)人飾物：耳環(huán)、手表、戒指、項(xiàng)鏈等不得留長(zhǎng)指甲提醒：進(jìn)入潔凈區(qū)人員不得化妝，否則需清洗去除化妝品2023/10/713一、人員衛(wèi)生人體是一個(gè)永不休止的污染媒介。人是藥廠中最不清潔的成份，是最大的污染源。我體檢過(guò)了,沒(méi)問(wèn)題!2023/10/714

人類是第一的(主要)污染源。人們每24小時(shí)就會(huì)脫落皮膚表面上最外層的皮細(xì)胞。這等于每天高達(dá)109（1000，000，000）=10億個(gè)細(xì)胞的數(shù)量。2023/10/715人帶來(lái)的污染來(lái)源人的頭發(fā)和皮膚液滴衣著化妝品和珠寶手飾人的操作（生產(chǎn)過(guò)程中人員不當(dāng)?shù)牟僮魉鸬幕祀s和誤差）

2023/10/716人是

最大的

污染源人體內(nèi)外表面廣泛存在微生物人體攜帶的微生物根據(jù)衛(wèi)生情況不同因人而異2023/10/717未洗的手清水漂洗的手2023/10/718洗凈的手洗凈的手

(用皂液)(用消毒劑)2023/10/719難以覺(jué)察的口腔微滴（說(shuō)話、噴嚏）人是最大的

污染源2023/10/720坐著不動(dòng)能產(chǎn)生10萬(wàn)個(gè)顆粒走能產(chǎn)生500萬(wàn)個(gè)顆粒跑能產(chǎn)生1500萬(wàn)個(gè)顆粒人是最大的污染源2023/10/721人是第一的(主要)污染源。怎么辦？2023/10/722根據(jù)污染源查找解決方法2023/10/723工作服及其質(zhì)量應(yīng)當(dāng)與生產(chǎn)操作的要求及操作區(qū)的潔凈度級(jí)別相適應(yīng)，其式樣和穿著方式應(yīng)當(dāng)能夠滿足------保護(hù)產(chǎn)品和人員的要求。法規(guī)要求：附錄第二十四條2023/10/724人是第一的(主要)污染源。清洗、包裹

根據(jù)不同潔凈區(qū)要求，穿戴不同衣服2023/10/725人是第一的(主要)污染源。包裹物件包括：帽子、口罩、眼罩、無(wú)菌服、鞋子/鞋套、手套2023/10/726解決方法

人的頭發(fā)和皮膚

清洗、包裹2023/10/727第一步：

用清水潤(rùn)濕雙手及手腕以上10厘米洗手2023/10/728第二步：

均勻涂上洗手液洗手2023/10/729第三步：

掌心相對(duì)，手指并攏相互摩擦

洗手2023/10/730第四步：手心對(duì)手背沿指縫相互摩擦交換進(jìn)行

洗手2023/10/731第五步：

掌心相對(duì)，雙手交叉，沿指縫相互摩擦

洗手2023/10/732第六步：彎曲各手指關(guān)節(jié)，在另一手掌旋轉(zhuǎn)搓擦，交換進(jìn)行

洗手2023/10/733第七步：一手握另一手大拇指旋轉(zhuǎn)搓擦，交換進(jìn)行

洗手2023/10/734第八步：搓洗手腕，交換進(jìn)行。

洗手2023/10/735第九步：將手及手腕用水沖洗干凈，最后才可以用干凈的手將干凈的水龍頭關(guān)掉。洗手2023/10/736第十步：然后在烘手器下吹干洗手2023/10/737洗手手的細(xì)菌對(duì)照實(shí)驗(yàn)2023/10/738未洗的手漂洗的手

(只用清水)2023/10/739洗凈的手洗凈的手

(用皂液)(用消毒劑)2023/10/740從上到下需要將頭發(fā)、胡須等相關(guān)部位遮蓋、包裹。穿上合適的鞋子和/或鞋套。確保包裹效果。避免帶入潔凈區(qū)外的污染物更潔凈衣2023/10/741萬(wàn)級(jí)更衣：連體服須將鞋套套好，

戴上手套，手套將袖口包裹更潔凈衣2023/10/742法規(guī)要求：附錄第二十四條正確穿戴潔凈服，必須包蓋全部頭發(fā)、胡須及腳部，并能阻留人體脫落物；口罩要罩住口鼻；潔凈鞋應(yīng)能遮蓋住全腳。并定期按規(guī)定清洗。離開(kāi)潔凈室，必須脫掉潔凈服裝。

2023/10/743更衣頭發(fā)應(yīng)完全包在帽子內(nèi)YESNONO2023/10/744潔凈區(qū)更衣不能配戴手表、首飾2023/10/745更衣YESNO鞋套不能有破損2023/10/746定時(shí)或在任何關(guān)鍵操作前，應(yīng)消毒手套2023/10/747填寫批記錄后，手套應(yīng)消毒2023/10/748主要內(nèi)容一、人員衛(wèi)生二、微生物基礎(chǔ)知識(shí)2023/10/749微生物的危害微生物中也有一部分能引起人及動(dòng)、植物發(fā)生病害，這些具有致病性的微生物，稱為病原微生物。從藥品生產(chǎn)的衛(wèi)生學(xué)而言，微生物對(duì)藥品的原料、生產(chǎn)環(huán)境和成品的污染是造成生產(chǎn)失敗、可以導(dǎo)致產(chǎn)品腐敗變質(zhì)、成品不合格的重要因素。2023/10/750微生物的危害2023/10/751微生物的危害2023/10/752

在藥品生產(chǎn)過(guò)程中，根據(jù)GMP中潔凈度級(jí)別要求以及產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，對(duì)物料、產(chǎn)品、生產(chǎn)環(huán)境需進(jìn)行控制的污染（有害）微生物主要為

細(xì)菌和真菌（霉菌、酵母菌）。藥品生產(chǎn)需控制的微生物2023/10/753微生物五大共性體積小，面積大；吸收多，轉(zhuǎn)化快；生長(zhǎng)旺，繁殖快；適應(yīng)強(qiáng)，易變異；分布廣，種類多；2023/10/754微生物的概念

是所有形體微小，單細(xì)胞或個(gè)體結(jié)構(gòu)較為簡(jiǎn)單的多細(xì)胞，甚至沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的低等生物的通稱。肉眼不能直接觀察到微生物，必須經(jīng)光鏡或電鏡放大幾百倍，乃至幾萬(wàn)倍方能看到。2023/10/755微生物的分類微生物類群十分龐雜，主要包括細(xì)菌、放線菌、真菌（霉菌、酵母菌）、立克次體、螺旋體、枝原體、衣原體與病毒等，還包括顯微藻類和原生動(dòng)物。2023/10/756幾種微生物的比較2023/10/757細(xì)菌的大小圖

2023/10/758細(xì)菌的繁殖

(1)充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水）(2)適宜的酸堿度(3)合適的溫度(4)必要的氣體環(huán)境（CO2和氧氣）

生長(zhǎng)繁殖的條件

2023/10/759繁殖最適條件對(duì)比2023/10/760微生物的分類按細(xì)胞結(jié)構(gòu)的有無(wú)，可分為兩大類群非細(xì)胞型微生物（不具細(xì)胞結(jié)構(gòu)）

無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，無(wú)產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，由單一核酸（DNA/RNA）和蛋白質(zhì)衣殼組成，必須在活細(xì)胞內(nèi)增殖。如：病毒、噬菌體、類病毒和朊病毒2023/10/761烈性噬菌體生活周期概要2023/10/762埃博拉病毒

virus-ebola噬菌體2023/10/763禽流感病毒2023/10/764流感病毒

virus-influenza2023/10/765微生物的分類細(xì)胞型微生物原核細(xì)胞型：?jiǎn)渭?xì)胞生物，細(xì)胞核分化程度低，只有DNA盤繞而成的擬核，無(wú)核仁和核膜。如：細(xì)菌、放線菌、螺旋體、立克次體、衣原體、枝原體等2023/10/766細(xì)菌的形態(tài)2023/10/767大腸埃希菌

Escherichiacoli

金黃色葡萄球菌Staphylococcusaureus2023/10/768沙門菌Salmonella銅綠假單孢菌

Pseudomonasaeruginosa2023/10/769枯草芽孢桿菌

Bacillussubtilis生孢梭菌

Clostridium

2023/10/770放線菌2023/10/771細(xì)菌的繁殖二分裂的無(wú)性繁殖（即裂殖，通過(guò)細(xì)胞分裂的方式繁殖）一般細(xì)菌約20~30分鐘繁殖一代

細(xì)菌的繁殖方式

2023/10/772<==細(xì)菌細(xì)胞分裂的電鏡超薄切片圖桿菌二分裂過(guò)程模式圖2023/10/773細(xì)菌的繁殖速度細(xì)菌一般每20-30分鐘即可分裂一次2023/10/774勾端螺旋體2023/10/775立克次體（rickettsiae）

一種微小的寄生的細(xì)菌。

右圖是動(dòng)物的淋巴細(xì)胞，紅色的是寄生的立克次體。2023/10/776衣原體

姬姆薩染色，油鏡10*100，見(jiàn)到一個(gè)大單核細(xì)胞，胞漿內(nèi)有球形和橢圓形的包含體——衣原體。2023/10/777枝原體掃描電鏡圖片枝原體（mycoplasma）以前被認(rèn)為是最小的能獨(dú)立存活的原核生物，以前也被認(rèn)為是地球上迄今為止被發(fā)現(xiàn)的最小的細(xì)胞生物。全世界90%的豬體內(nèi)寄生著枝原體。2023/10/778微生物的分類細(xì)胞型微生物真核細(xì)胞型：細(xì)胞核的分化程度高，有核膜、核仁和染色體，能進(jìn)行有絲分裂。如：真菌（酵母菌、念珠菌、霉菌）、藻類等。2023/10/779真菌單細(xì)胞：呈圓形或卵圓形。如酵母菌、白色念珠菌。多細(xì)胞：由菌絲和孢子組成，并交織成團(tuán)，稱絲狀菌或霉菌。結(jié)構(gòu)復(fù)雜，個(gè)體較大的，如蘑菇。2023/10/780真菌：酵母菌形態(tài)：通常有球狀、卵圓狀、橢圓狀、柱狀和香腸狀等。結(jié)構(gòu)：2023/10/781酵母菌2023/10/782酵母菌繁殖方式

無(wú)性繁殖——芽殖(主要方式)、

裂殖

有性繁殖——產(chǎn)生子囊孢子

2023/10/783白色念珠菌2023/10/784霉菌Mold是一些絲狀真菌的通稱，其菌體由分枝或不分枝的菌絲構(gòu)成，許多菌絲交織成團(tuán)。

大?。壕z直徑約2~10μm，比一般的桿菌及放線菌菌絲約寬幾到幾十倍。

2023/10/785黑曲霉可引起燒傷病人皮膚感染或真菌性肺部感染2023/10/786青霉菌及其菌落2023/10/787霉菌繁殖方式無(wú)性繁殖——無(wú)性孢子繁殖（最常見(jiàn)），菌絲也可延伸、分枝而生長(zhǎng)。有性繁殖——有性孢子繁殖（不常見(jiàn)）2023/10/788霉菌繁殖方式2023/10/789因?yàn)殒咦臃敝呈敲咕闹饕敝撤绞剑咦訑?shù)量大，具一定抗性，繁殖能力極強(qiáng),一條菌絲可產(chǎn)生很多個(gè)孢子，孢子又可生長(zhǎng)發(fā)育為菌絲，所以潔凈室一旦發(fā)生霉菌污染，必須立即采取措施，否則擴(kuò)散越廣越難控制。真菌對(duì)熱的抵抗力不強(qiáng)，一般加熱60～70℃1小時(shí)即被殺死，對(duì)干燥、日光、紫外線和一些化學(xué)消毒劑有抵抗力，但對(duì)2.5％碘酒、10％甲醛、過(guò)氧乙酸則較敏感。2023/10/790芽孢某些細(xì)菌到一定的生長(zhǎng)階段，在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形、橢圓形或圓柱形的、對(duì)不良環(huán)境條件具較強(qiáng)抗性的休眠體，稱為芽孢。能形成芽孢的細(xì)菌均為G+菌。2023/10/791芽孢在條件適宜時(shí)，芽孢可形成新的菌體。一個(gè)細(xì)菌只形成一個(gè)芽孢，一個(gè)芽孢也只能形成一個(gè)菌體。芽孢的形成不是細(xì)菌的繁殖方式，而是營(yíng)養(yǎng)缺乏的一種反應(yīng)，是細(xì)菌的休眠狀態(tài)。與芽孢相比，未形成芽孢而具有繁殖能力的菌體稱為繁殖體。2023/10/792芽孢的特征含水量低（40%）不易著色有多層厚而致密的膜結(jié)構(gòu)（壁）含有2,6-吡啶二羧酸（DPA）及耐熱性很強(qiáng)的酶2023/10/793微生物及無(wú)菌知識(shí)培訓(xùn)一、前言

我們所生活的環(huán)境中，到處都存在著大量的微生物。在一般空氣中，微生物達(dá)800~3500個(gè)/m3，在土壤中達(dá)1~500×108個(gè)/g，在嚴(yán)重污染的水中可達(dá)107個(gè)/ml。（飲用水要求細(xì)菌總數(shù)≤100個(gè)/ml，大腸桿菌≤3個(gè)/ml。經(jīng)水塔或貯水池貯存后，短期內(nèi)可繁殖至105~106個(gè)/ml。）人的頭皮上有140萬(wàn)個(gè)/cm2，兩手上約有4~40萬(wàn)個(gè)，1g指甲污垢有38億個(gè)，1g糞便可達(dá)10~1000億個(gè)?？梢哉f(shuō)微生物是無(wú)處不在，無(wú)處不有。許多以前被人們認(rèn)為是極端（高溫、高壓、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、低溫等）甚至是致死的環(huán)境，現(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)生活著各種類型的微生物（稱為極端微2023/10/794生物）。事實(shí)說(shuō)明，微生物有特別頑強(qiáng)的生存、繁殖和變異能力來(lái)適應(yīng)環(huán)境。

微生物種類繁多，有的對(duì)人有益，有的有害，有的無(wú)益也無(wú)害。但在藥品生產(chǎn)過(guò)程中，不可能對(duì)環(huán)境中的各種微生物加以區(qū)別對(duì)待，為保證藥品的安全有效，需要對(duì)其進(jìn)行控制?？諝庵械奈⑸锒鄶?shù)附著在灰塵上，或以芽孢形式懸浮于空氣中，1μm以下者處于懸浮狀態(tài)，10μm以上者會(huì)逐漸沉下來(lái)而形成菌塵。所以也要對(duì)塵粒進(jìn)行控制。

大量臨床資料表明，注射劑（尤其是靜脈注射劑）如污染了7~12μm的塵粒，可導(dǎo)致熱原反應(yīng)、肺動(dòng)脈炎、微血栓或異物肉芽腫等，嚴(yán)重的還會(huì)致人死命。而如果污染了細(xì)菌，輕則局部紅腫化膿，重則引起全身細(xì)菌性感2023/10/795染。因此，對(duì)微生物和塵粒進(jìn)行更加嚴(yán)格的控制對(duì)于針劑生產(chǎn)潔凈室非常重要。

人是潔凈室最大的污染源，占90%左右。一般男性每人每分鐘向周圍排放1000個(gè)以上的含菌粒子，女性為750個(gè)以上。穿無(wú)菌服時(shí)，靜止時(shí)的發(fā)菌量為10~300個(gè)/min，一般活動(dòng)時(shí)發(fā)菌量為150~1000個(gè)/min，行走時(shí)發(fā)菌量為900~2500個(gè)/min?？人砸淮伟l(fā)菌量為70~700個(gè)/min，噴嚏一次為4000~60000個(gè)/min。所以在潔凈室中，人的數(shù)量和活動(dòng)應(yīng)有特別嚴(yán)格的限制。

二．微生物簡(jiǎn)介

2023/10/796微生物是廣泛存在于自然界的一群體形微小（直徑小于1mm）、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、肉眼看不見(jiàn)，必須藉助光學(xué)或電子顯微鏡放大數(shù)百至數(shù)萬(wàn)倍才能觀察到的生物。需要說(shuō)明的是，微生物是一個(gè)比較籠統(tǒng)的概念，界線有時(shí)非常模糊。如單細(xì)胞藻類和一些原生動(dòng)物也應(yīng)算是微生物，但通常它們并不放在微生物中進(jìn)行研究。

微生物具有以下特點(diǎn)：①體積小，面積大；②吸收多，轉(zhuǎn)化快（2000倍體重/h）；③生長(zhǎng)旺，繁殖快（20min分裂一次）；④易變異，適應(yīng)強(qiáng)；⑤分布廣，種類多（10萬(wàn)種以上）。

微生物按其結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及生活習(xí)性等差異可分成三大類：

1．真核細(xì)胞型細(xì)胞核的分化程度較高，有核膜、核仁和染色體；胞質(zhì)內(nèi)有完整的細(xì)胞2023/10/797器（如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核糖體及線粒體等）。真菌屬于此類型微生物。

2．原核細(xì)胞型細(xì)胞核分化程度低，僅有原始核質(zhì)，沒(méi)有核膜與核仁；細(xì)胞器不很完善。這類微生物種類眾多，有細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體和放線菌。

3．非細(xì)胞型沒(méi)有典型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，亦無(wú)產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，只能在活細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖。體積微小，能通過(guò)除菌濾器。病毒屬于此類型微生物。

微生物在自然界中的分布極為廣泛，空氣、土壤、江河、湖泊、海洋等都有數(shù)量不等、種類不一的微生物存在。在人類、動(dòng)物和植物的體表及其與外界相通的腔道中也有多種微生物存在。

2023/10/798絕大多數(shù)微生物對(duì)人類和動(dòng)、植物的生存是有益而必需的。自然界中氮、碳、硫等多種元素循環(huán)靠微生物的代謝活動(dòng)來(lái)進(jìn)行。例如空氣中的大量氮?dú)庵挥幸揽课⑸锏淖饔貌拍鼙恢参镂?，土壤中的微生物能將?dòng)、植物蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)含氮化合物，以供植物生長(zhǎng)的需要，而植物又為人類和動(dòng)物所利用。因此，沒(méi)有微生物，植物就不能新陳代謝，而人類和動(dòng)物也將無(wú)法生存。

另一方面，由極少數(shù)微生物引起的傳染病發(fā)病快、死亡率高、傳播迅速、傳播范圍廣，嚴(yán)重危害著人民健康。

三．微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)

2023/10/7991．細(xì)菌（原核單細(xì)胞生物）

細(xì)菌按形狀可分為：球菌（0.5~2μm）、桿菌（長(zhǎng)1~5μm，寬0.3~1μm）和螺形菌（大小與桿菌相似）。

按革蘭氏染色法染色的不同，分為革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌。革蘭氏陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁表面含較多的磷壁酸，會(huì)產(chǎn)生外毒素，如金黃色葡萄球菌；革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁表面多含脂蛋白和脂多糖，會(huì)產(chǎn)生內(nèi)毒素（即熱原），如大腸桿菌。

細(xì)菌一般有細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核，有的還有莢膜、鞭毛、菌毛和芽胞等特殊結(jié)構(gòu)。

細(xì)菌一般為無(wú)性繁殖，以二分法繁殖，幾十分鐘或1~2小時(shí)分裂一次。

2023/10/7100資料：關(guān)于芽孢

在溫度逐漸降低或營(yíng)養(yǎng)缺乏時(shí)，芽胞桿菌屬（如炭疽桿菌）及梭狀芽胞桿菌屬（如破傷風(fēng)桿菌）能在菌體內(nèi)形成一個(gè)折光性很強(qiáng)的不易著色小體，稱為芽胞。芽胞是處于休眠狀態(tài)的細(xì)菌，并非細(xì)菌的繁殖體，當(dāng)環(huán)境適宜時(shí)，可恢復(fù)生長(zhǎng)繁殖。

芽胞在自然界分布廣泛，要注意防止污染。芽胞的抵抗力強(qiáng)，對(duì)熱力、干燥、輻射、化學(xué)消毒劑等理化因素均有強(qiáng)大的抵抗力，用一般的方法不易將其殺死。有的芽胞可耐100℃沸水煮沸數(shù)小時(shí)。殺滅芽胞最可靠的方法是高壓蒸汽滅菌。當(dāng)進(jìn)行消毒滅菌時(shí)往往以芽胞是否被殺死作為判斷滅菌效果的指標(biāo)。

2．霉菌（絲狀真菌的通稱，真核多細(xì)胞生物）

2023/10/7101霉菌是真菌的一部分。在培養(yǎng)基上長(zhǎng)成絨毛狀或棉絮狀的菌絲體的真菌統(tǒng)稱為霉菌。

霉菌細(xì)胞呈狹長(zhǎng)的管狀，稱為菌絲。菌絲直徑比細(xì)菌、放線菌大，約2~10μm。菌絲分枝連接，交錯(cuò)集合在一起的總體稱為菌絲體。

霉菌大多數(shù)是多細(xì)胞微生物，菌絲細(xì)胞由細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核和各種細(xì)胞器組成。細(xì)胞壁很薄，往往在表面產(chǎn)生色素，使菌落出現(xiàn)各種顏色。

霉菌靠孢子繁殖，有無(wú)性繁殖和有性繁殖兩種方式，以無(wú)性繁殖為主。

有些真菌可用釀酒造醬，或用于發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸、葡萄糖酸、酶、抗生素（如青霉素、頭孢菌素）；少數(shù)真菌能引起各種真菌病。真菌產(chǎn)生的真菌毒素（如黃曲霉素）有毒。

2023/10/71023．酵母菌（真核單細(xì)胞生物，屬真菌）

酵母菌以單細(xì)胞存在，呈圓形、卵圓形和香腸形，比細(xì)菌大，細(xì)胞長(zhǎng)5~30μm，寬1~5μm。細(xì)胞結(jié)構(gòu)有細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核和各種細(xì)胞器等。

酵母菌的增殖分無(wú)性繁殖和有性繁殖兩個(gè)階段，有三種方式：芽殖、裂殖、孢子生殖。

酵母菌是重要的工業(yè)微生物，用于釀酒，生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白、B族維生素、核酸、輔酶A、細(xì)胞色素C等。一般對(duì)人體無(wú)害。

4．放線菌（原核單細(xì)胞生物）

放線菌有生長(zhǎng)發(fā)育良好的菌絲體，呈分枝狀，菌絲寬為0.2~1.2μm，革蘭氏陽(yáng)性。其內(nèi)部構(gòu)造與細(xì)菌相似，無(wú)完整的細(xì)胞核。菌落常呈幅射狀，因此稱放線菌。

2023/10/7103繁殖方式為無(wú)性孢子繁殖。最適pH6.7~7.5，溫度25~30℃。

放線菌可用于生產(chǎn)抗生素、維生素和酶類，少數(shù)可引起人畜放線菌病。

5．病毒

病毒是一類體積十分微小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，只含一種核酸（DNA或RNA），沒(méi)有產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，只能在活細(xì)胞內(nèi)以復(fù)制方式增殖的非細(xì)胞型微生物。病毒在自然界分布非常廣泛，在所有其它生物中都有病毒寄居。病毒是最常見(jiàn)的致病微生物，人類傳染病中大約75%是由病毒引起的。

病毒體主要由核酸和蛋白質(zhì)組成。病毒體積微小，最大直徑300nm（如牛痘病毒），最小直徑20nm（如口蹄疫病毒），絕大多數(shù)在2023/10/7104150nm以下，能通過(guò)細(xì)菌濾器，用普通光學(xué)顯微鏡看不見(jiàn)，必須用電子顯微鏡放大數(shù)千至數(shù)萬(wàn)倍才能看見(jiàn)。形態(tài)多呈球形，少數(shù)為桿狀或磚形。噬菌體（細(xì)菌病毒）有呈蝌蚪狀的。

朊病毒于1982年發(fā)現(xiàn)，它很特殊，與一般病毒不同，是一種異常蛋白質(zhì)，不含有核酸。與瘋牛?。ㄅ：＞d狀腦?。┘叭丝搜攀喜￡P(guān)系密切。其復(fù)制方式不明。

四．微生物的營(yíng)養(yǎng)

1．水分：水占細(xì)胞漿的70%～90%，是細(xì)胞的重要組成成分。較普遍的觀點(diǎn)認(rèn)為：只有2023/10/7105在含水的環(huán)境中微生物才能存活。但也有人發(fā)現(xiàn)在無(wú)水碳?xì)浠衔镏形⑸锟砷L(zhǎng)期存活。

2．碳源：碳源是構(gòu)成細(xì)胞的重要物質(zhì)。有些微生物的碳源必須來(lái)自有機(jī)碳化合物如糖、蛋白質(zhì)、脂肪、有機(jī)酸等（同時(shí)利用其化學(xué)能），屬異養(yǎng)型；有些微生物不需有機(jī)碳化合物，以CO2為碳源，屬自養(yǎng)型（分為光能自養(yǎng)型和化能自養(yǎng)型）。

3．氮源：氮是組成蛋白質(zhì)和核酸的重要元素。

4．無(wú)機(jī)鹽類：細(xì)菌所需無(wú)機(jī)鹽包括磷、硫、鎂、鐵、鉀、鈉、鈣、氯、錳、鋅、鈷、銅等。其中磷、硫、鎂、鉀、鈉、鐵需要量較多，其他只需微量。

5．生長(zhǎng)因子：生長(zhǎng)因子是某些微生物生長(zhǎng)發(fā)2023/10/7106育所必需，而其自身又不能合成的一類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。包括維生素、嘌呤和嘧啶等。五．微生物生長(zhǎng)的影響因素

1．營(yíng)養(yǎng)物

2．pH值：各種微生物都有其最適宜的pH值，大多數(shù)細(xì)菌最適pH為6.8~7.4，但一般有較大的容忍度，在4~9也可存活和生長(zhǎng)，少數(shù)細(xì)菌能在極端pH值范圍內(nèi)生長(zhǎng)。真菌適于pH值3~6的微酸性環(huán)境，但在2~10也可生長(zhǎng)。

3．溫度：微生物適于生長(zhǎng)繁殖要有適宜的溫度，當(dāng)超過(guò)其最低或最高可耐受的溫度時(shí)，即停止生長(zhǎng)或死亡。一般細(xì)菌最適溫度為2023/10/710730~40℃，真菌為20~30℃。

4．氧氣：大多數(shù)細(xì)菌和所有霉菌都是需氧菌（在有氧環(huán)境中才能生長(zhǎng)），少數(shù)細(xì)菌是厭氧菌（在無(wú)氧環(huán)境中才能生長(zhǎng)），有些細(xì)菌和酵母菌是兼性需氧厭氧的，在有氧或無(wú)氧環(huán)境中都能生長(zhǎng)繁殖。

5．滲透壓：微生物細(xì)胞膜和所有生物膜一樣是一種半透膜，可讓水自由通過(guò)，對(duì)溶質(zhì)則有選擇性。由于細(xì)胞壁的保護(hù)，微生物能存活在低滲透壓的水中。而在高滲溶液（如高濃度的鹽溶液或糖溶液、40%甘油）中，細(xì)胞會(huì)脫水并停止生長(zhǎng)繁殖。但也有一些專性耐高鹽細(xì)菌只有在高鹽（10~15%）條件下才生長(zhǎng)。

6．表面張力：表面活性劑可降低表面張力2023/10/7108它是影響細(xì)菌生長(zhǎng)的因素之一。很多革蘭氏陰性菌，特別是大腸菌群可很好地在表面活性劑包圍的介質(zhì)中生長(zhǎng)，而大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌在表面張力低時(shí)（0.05N/m）不能很好生長(zhǎng)。陽(yáng)離子表面活性劑對(duì)很多有機(jī)體有毒性，陰離子表面活性劑毒性很小，非離子表面活性劑幾乎沒(méi)有毒性，并可成為某些微生物的營(yíng)養(yǎng)物。

六．消毒與滅菌

消毒與滅菌是微生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)中最基本的操作，從事藥品生產(chǎn)和檢驗(yàn)的人員都應(yīng)當(dāng)了解消毒與滅菌的方法及其意義，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，否則會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量，危害患者安全。

1．概念

2023/10/71091．概念

無(wú)菌——不存在活的生物（GMP指