連錢草水提物抗炎及鎮(zhèn)痛作用研究

連草是嘴唇科多年生草本植物的活血之王。它對潮濕、干燥、清熱解毒、祛瘀、消腫也非常有效。用于黃疸、腮腺炎、膽囊炎、膽石癥、結(jié)石、肝腎、膀胱結(jié)節(jié)、多發(fā)膿毒癥、傷口、傷口、濕疹、跌倒和損傷、瘧疾、產(chǎn)后痙攣、腹痛、鵝腕風、痛等疾病的1'。連錢草主要含有揮發(fā)油類、萜類、黃酮類、甾體類、有機酸類和生物堿類等活性成分,有著廣泛的藥理活性［2］。本實驗應用角叉菜膠致大鼠足趾腫脹法和棉球致大鼠肉芽腫法觀察連錢草水提物的抗炎作用;小鼠熱板法和小鼠醋酸扭體法觀察連錢草水提物的鎮(zhèn)痛作用。為進一步研究開發(fā)連錢草藥材提供藥理學依據(jù)。1實驗動物與儀器1.1藥物和試劑連錢草水提物,本單位自制;阿司匹林片(批號:20070215,桂林漓江制藥廠);羅通定片(廣州康和藥業(yè)有限公司,批號:080901);角叉菜膠(遼寧省藥物研究所)。1.2動物昆明種小鼠,Wistar大鼠,均由廣西醫(yī)科大學實驗動物中心提供,動物合格證號:SCXK桂2003-2003。1.3主要儀器GJ-8402熱板測痛儀,浙江寧海白石電子醫(yī)療儀器廠;JA1003型上皿電子天平,上海精科天平廠;SKP.01電熱恒溫培養(yǎng)箱,湖北黃石市醫(yī)療器械廠。2大鼠棉球肉芽腫案2.1抗炎作用［3］2.2.1對角叉菜膠所致大鼠足腫的影響取正常健康大鼠60只,雌雄各半,體重250~300g。隨機分為6組,每組10只,即對照組,模型組,阿司匹林組(30mg/kg),連錢草水提物(8、4、2g/kg)3個劑量組。灌胃給藥體積均為0.2mL/100g,對照組給予等體積蒸餾水。連續(xù)灌胃給藥9d,末次給藥后1h,用1%角叉菜膠生理鹽水液每只0.1mL左后足跖皮下注射,用千分卡尺測量致炎前和致炎后1、2、3、5、7h足跖厚度,計算致炎后不同時間腫脹值。2.2.2對大鼠棉球肉芽組織增生的影響取正常健康大鼠50只,雌雄各半,體重250~300g。隨機分為5組,每組10只,即對照組,阿司匹林組(30mg/kg),連錢草水提物(8、4、2g/kg)3個劑量組。腹腔注射戊巴比妥鈉30mg/kg麻醉,剪去大鼠蹊部鼠毛,用碘酒消毒,75%酒精棉脫碘后,切一1.0cm長切口,用眼科鑷子將20mg的高壓滅菌棉球從切口處植入皮下,隨即縫合皮膚。從手術(shù)當日開始,連續(xù)灌胃給藥7d,灌胃給藥體積均為0.2mL/100g體重,模型對照組給予等體積蒸餾水。末次給藥后24h,打開切口,將棉球連同周圍結(jié)締組織一起取出,剔除脂肪組織,在70℃烘箱中恒溫干燥48h后,應用分析天平稱重,將稱得的重量減去棉球重量(20mg),即得肉芽腫重量。2.2鎮(zhèn)痛作用［3］2.2.1小鼠熱板法將50只預先經(jīng)篩選的雌性小鼠(除去反應過敏<5s及遲鈍>30s的小鼠)隨機分5組,即對照組(等體積蒸餾水),陽性藥羅通定組(30mg/kg),連錢草水提物大中小劑量組(8、4、2g/kg)。先測出各組小鼠給藥前的痛閾值后,分別灌胃給蒸餾水,羅通定及連錢草水提物,測30、60、90、120min痛閾值。2.2.2小鼠扭體法取昆明種小白鼠50只,雌雄各半,隨機分為5組,每組10只。分組、給藥同2.2.1。連續(xù)灌胃給藥7d,末次給藥后1h,各鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2mL/只,5min后計數(shù)15min內(nèi)各鼠出現(xiàn)的扭體反應次數(shù)。2.4統(tǒng)計學方法采用SPSSl1.0系統(tǒng)軟件自動處理,計量資料用(ue0af±s)表示采用方差分析,(P<0.05)為差異有統(tǒng)計學意義。3連錢草水提物對大鼠角叉菜膠所致足冷試驗結(jié)果的影響3.2.1對角叉菜膠所致大鼠足腫的影響和對照組比較,模型對照組致炎后足趾腫脹率顯著增高,提示模型復制成功。和模型組比較,連錢草水提物8g/kg劑量組在致炎后1、2、3、5h,4g/kg劑量在組致炎后2h,可顯著降低大鼠對角叉菜膠所致足趾腫脹率(P<0.01,P<0.05),結(jié)果見表1。3.2.2對大鼠棉球肉芽組織增生的影響和對照組比較,連錢草水提物8、4g/kg劑量組可明顯抑制大鼠棉球肉芽組織干重(P<0.05),結(jié)果見表4。3.3連錢草水提物對小鼠熱板痛閾的影響3.3.1對醋酸所致小鼠扭體實驗的影響和對照組比較,連錢草水提物8g/kg劑量對小鼠扭體次數(shù)明顯少于對照組,差異有顯著性意義(P<0.01)。結(jié)果見表3。3.3.2對小鼠熱板痛閾的影響和對照組比較,連錢草水提物8g/kg劑量對小鼠在藥后60min、90min,4g/kg劑量組在藥后60min,可顯著延長小鼠熱板痛閾,(P<0.01,P<0.05)。結(jié)果見表4。4抗炎和鎮(zhèn)痛作用炎癥是一種防御反應,表現(xiàn)為紅、腫、熱、痛和功能障礙。在炎癥過程中,一方面損傷因子直接或間接造成組織和細胞的破壞,另一方面通過炎癥充血和滲出反應,以稀釋、殺傷和包圍損傷因子,同時通過實質(zhì)和間質(zhì)細胞的再生使受損的組織得以修復和愈合,炎癥是損傷和抗損傷的統(tǒng)一過程。在有些情況下,炎癥是潛在有害,炎癥反應是一些疾病的發(fā)病基礎(chǔ),如嚴重的超敏反應炎癥過于劇烈時可以威脅病人的生命。目前,臨床上使用的抗炎藥物分甾體抗炎藥和非甾體抗炎藥,臨床效果顯著,但是存在著嚴重的不良反應而限制其在臨床上的使用。某些中藥或中藥的復方試劑具有良好的抗炎作用,且具有