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文檔簡介

DNA和RNA的細(xì)胞化學(xué)Brachet反應(yīng)實驗原理甲基綠—派洛寧（Methylgreen-Pyronin）為堿性染料，它能分別與細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA結(jié)合而呈現(xiàn)不同顏色。當(dāng)甲基綠與派洛寧作為混合染料時，甲基綠和染色質(zhì)中DNA選擇性結(jié)合顯示綠色或藍(lán)色；派洛寧與核仁、細(xì)胞質(zhì)中的RNA選擇結(jié)合顯示紅色。其原因可能是兩種染料的混合染液中有競爭作用，同時兩種核酸分子都是多聚體，而其聚合程度有所不同。甲基綠易與聚合程度高的DNA結(jié)合呈現(xiàn)綠色。而派洛寧則與聚合程度較低的RNA結(jié)合呈現(xiàn)紅色，但解聚的DNA也能和派洛寧結(jié)合呈現(xiàn)紅色。即RNA對派洛寧親和力大，被染成紅色，而DNA對甲基綠親和力大，被染成藍(lán)綠色。實驗準(zhǔn)備（一）器材

顯微鏡、鑷子、載玻片、蓋玻片、吸水紙

（二）材料

洋蔥鱗莖表皮

（三）試劑

1．Unna試劑：甲基綠—派洛寧（Methylgreen-Pyronin）染色液

配制注意事項：

（1）Pyronin可加熱助溶。

（2）Methylgreen批號不同，染色效果差別很大。商品Methylgreen?；煊屑谆?，影響染色效果，應(yīng)先把藥品放在分液漏斗中，加入足量的氯仿，用力振蕩，然后靜置，直到洗脫甲基紫為止，最后干燥備用?！痉椒ㄅc步驟】

1．用鑷子撕取洋蔥鱗莖內(nèi)表皮一小塊，置于載玻片上。

2．滴一滴Unna試劑，染色30min。

3．蒸餾水洗兩次，吸水紙吸去多余的水分。

4．蓋上蓋玻片，鏡檢。

對照片：

撕取洋蔥鱗莖內(nèi)表皮，經(jīng)5%三氯醋酸中90℃水浴處理15min。再經(jīng)70%乙醇洗片刻，然后按步驟1-4制片觀察。

實驗預(yù)期結(jié)果

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