滅菌制劑和無菌制劑南京工業(yè)大學(xué)藥學(xué)院陳國(guó)廣第6章滅菌制劑和無菌制劑本章學(xué)習(xí)要求掌握滅菌的概念和物理滅菌法。了解物理滅菌法的常用設(shè)備。熟悉D、Z、F、Fo值的含義。了解化學(xué)滅菌法和無菌操作法。熟悉空氣濾過的原理及影響因素。了解空氣濾過的常用設(shè)備。熟悉空氣凈化的標(biāo)準(zhǔn)、測(cè)定方法及潔凈室的設(shè)計(jì)。熟悉冷凍干燥的基本原理。第6章滅菌制劑和無菌制劑掌握注射劑的概念、分類、特點(diǎn)及質(zhì)量要求。熟悉注射劑的給藥途徑。掌握注射用水的概念及質(zhì)量要求。掌握注射劑的附加劑。了解注射用油及非水溶劑。第6章滅菌制劑和無菌制劑掌握熱原的概念、性質(zhì)、污染途徑及除去方法。掌握溶解度的概念、影響溶解度的因素及增加溶解度的方法。掌握溶解速度的概念及影響因素。掌握濾過的概念。熟悉濾過的原理、方法、影響因素及濾過器。第6章滅菌制劑和無菌制劑掌握注射劑的制備過程。了解注射劑新產(chǎn)品試制的主要工作。掌握滲透壓的調(diào)節(jié)。掌握輸液的概念和質(zhì)量要求。掌握營(yíng)養(yǎng)輸液和血漿代用液的概念、種類、質(zhì)量要求。第6章滅菌制劑和無菌制劑掌握注射用無菌粉末、凍干制品。掌握滴眼劑的概念和質(zhì)量要求。熟悉滴眼劑的附加劑和制備過程。了解滴眼劑的藥物吸收途徑及影響因素。第6章滅菌制劑和無菌制劑第一節(jié)概述一、基本概念滅菌和無菌制劑：直接注入體內(nèi)或直接接觸創(chuàng)傷面、粘膜等的一類制劑。滅菌(sterilization)：應(yīng)用物理或化學(xué)等方法將物體上或介質(zhì)中所有微生物繁殖體及其芽孢全部殺滅或除去的手段。滅菌法(thetechniqueofsterilization)：殺滅或除去所有微生物繁殖體和芽孢的方法或技術(shù)。第6章滅菌制劑和無菌制劑無菌(sterility)：在任一指定的物體、介質(zhì)或環(huán)境中無任何活的微生物。無菌操作(aseptictechnique)：在整個(gè)操作中利用或控制一定的條件，使產(chǎn)品避免被微生物污染的一項(xiàng)操作方法和技術(shù)。第6章滅菌制劑和無菌制劑消毒(disinfection)：以物理或化學(xué)等方法殺滅物體上或介質(zhì)中的病原微生物。消毒劑：對(duì)病原微生物具有殺滅或除去作用的物質(zhì)。防腐(antisepsis)：用物理或化學(xué)等方法抑制微生物的生長(zhǎng)與繁殖，亦稱抑菌。防腐劑：對(duì)微生物的生長(zhǎng)與繁殖具有抑制作用的物質(zhì)，亦稱抑菌劑。第6章滅菌制劑和無菌制劑二、滅菌制劑與無菌制劑的定義與分類1、定義滅菌制劑：采用某一物理或化學(xué)方法將殺滅或除去所有活的微生物繁殖體和芽孢的一類藥物制劑。無菌制劑：采用某一無菌操作方法或技術(shù)制備的不含任何活的微生物繁殖體和芽孢的一類藥物制劑。第6章滅菌制劑和無菌制劑2、制劑分類按給藥途徑：無菌制劑和非無菌制劑(即限菌制劑)。按除去活微生物的制備工藝：滅菌制劑和無菌制劑。廣義上，無菌制劑和非無菌制劑都規(guī)定有染菌的限度，前者要求不得檢出活菌，后者限制染菌的種類與數(shù)量。第6章滅菌制劑和無菌制劑3、常用的滅菌和無菌制劑(1)注射用制劑：注射劑、輸液、注射粉針等；(2)眼用制劑：滴眼劑、眼用膜劑、軟膏劑、凝膠劑等；(3)植入型制劑：植入片等；(4)創(chuàng)面用制劑：潰瘍、燒傷及外傷用溶液、軟膏劑、氣霧劑等。(5)手術(shù)用制劑，止血海綿劑和骨蠟等。第6章滅菌制劑和無菌制劑第二節(jié)滅菌與無菌技術(shù)藥劑學(xué)中滅菌法可分為三大類：即物理滅菌、化學(xué)滅菌、無菌操作法。第6章滅菌制劑和無菌制劑一、物理滅菌法(一)干熱滅菌法1、干熱空氣滅菌法一般認(rèn)為繁殖型細(xì)菌在100℃以上干熱1小時(shí)即被殺死。耐熱性細(xì)菌芽孢在120℃以下長(zhǎng)時(shí)間加熱也不死亡，在140℃前后則殺菌效率急劇增長(zhǎng)。第6章滅菌制劑和無菌制劑(1)干熱滅菌條件，有的藥典規(guī)定為180℃，1小時(shí)以上；有的為160-170℃，2-4小時(shí)，此是大致的標(biāo)準(zhǔn)而已，必須通過實(shí)驗(yàn)，在保證滅菌完全同時(shí)對(duì)滅菌物品無損害的前提下，制訂該物品的干熱滅菌條件。(2)時(shí)間必須由滅菌物品全部達(dá)到特定溫度的計(jì)算。第6章滅菌制劑和無菌制劑(3)適用于耐高溫的玻璃制品、金屬制品以及不允許濕氣透的油脂類(如油性軟膏基質(zhì)、注射用油等)和耐高溫的粉末化學(xué)藥品等。(4)熱原經(jīng)250℃，30分鐘；或200℃以上高溫至少45分鐘，可遭破壞。(5)缺點(diǎn)是穿透力弱，溫度不易均勻，而且由于滅菌溫度過高，不適用橡膠、塑料及大部分藥品。第6章滅菌制劑和無菌制劑2、火焰滅菌法系指火焰直接灼燒滅菌的方法。滅菌迅速、可靠、簡(jiǎn)便，適用于耐火材質(zhì)(如金屬、玻璃及瓷器等)的物品與用具，不適合于藥物。第6章滅菌制劑和無菌制劑3、高速風(fēng)滅菌法高速風(fēng)滅菌法，應(yīng)用的風(fēng)速為30-80m/s，風(fēng)溫度高為190℃，由于降低了安瓿周圍的滯流層的厚度，使安瓿內(nèi)液體迅速升溫。2ml的安瓿注射液應(yīng)用此法，能于3分鐘的短時(shí)間內(nèi)升高至140℃；對(duì)于耐熱性高的嗜熱脂肪芽孢桿菌，溫度達(dá)到130℃以上，就呈現(xiàn)顯著滅菌效果。第6章滅菌制劑和無菌制劑(二)濕熱滅菌法由于蒸氣比熱大，穿透力強(qiáng)，容易使蛋白變性，同時(shí)還有作用可靠，操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，濕熱滅菌法是應(yīng)用最廣泛的一種滅菌方法。本法包括熱壓滅菌法，流通蒸氣滅菌法和低溫間歇滅菌等方法。根據(jù)藥品性質(zhì)進(jìn)行選用。第6章滅菌制劑和無菌制劑本法一般公認(rèn)為最可靠的濕熱滅菌法。應(yīng)用大于常壓的水蒸氣如1kg/cm2熱壓蒸氣15-20分鐘，能殺滅所有細(xì)菌增殖體和芽孢。1、熱壓滅菌法第6章滅菌制劑和無菌制劑熱壓滅菌所需的溫度及與溫度相當(dāng)?shù)膲毫皶r(shí)間如下：(1)115℃，1.7atm(67kPa，7.1kg/cm2)，30min；(2)121℃，2.0atm(97kPa，11kg/cm2)，20min；(3)126℃，2.4atm(139kPa，14.1kg/cm2)，15min。濕熱滅菌一般要求F0＝1-12分。第6章滅菌制劑和無菌制劑熱壓滅菌適用于耐高溫和耐高壓蒸氣的所有藥物制劑、玻璃容器、金屬容器、瓷器、橡皮塞、濾膜、過濾器等。第6章滅菌制劑和無菌制劑熱壓滅菌用的滅菌器種類很多，但其基本結(jié)構(gòu)大同小異。熱壓滅菌器密閉耐壓，有排氣口安全閥，壓力表和溫度計(jì)等部件。有的通蒸氣加熱，有的用煤氣、電熱或木炭等加熱。常用的有手提式熱壓滅菌器等。第6章滅菌制劑和無菌制劑第6章滅菌制劑和無菌制劑熱壓滅菌器使用時(shí)應(yīng)注意的問題：

(1)應(yīng)先進(jìn)行滅菌條件實(shí)驗(yàn)，確保滅菌效果。滅菌器的構(gòu)造、被滅菌物體積、數(shù)量、排布均對(duì)滅菌的溫度有一定影響。第6章滅菌制劑和無菌制劑(2)必須將滅菌器內(nèi)的空氣排出。如果滅菌器內(nèi)的空氣存在，則壓力表上所表示的壓力是滅菌器內(nèi)蒸氣和空氣二者的總壓而非單純的蒸氣壓力，結(jié)果壓力雖然到達(dá)預(yù)定的水平，但溫度達(dá)不到。若壓力表預(yù)定的水平一致，而溫度達(dá)不到，則可能有空氣沒有排盡，也可能壓力表失靈，也可能不是飽和蒸氣，應(yīng)找出原因，加以解決。第6章滅菌制劑和無菌制劑由于水蒸氣被空氣稀釋，妨礙了水蒸氣與滅菌物品的充分接觸，而降低了水蒸氣的滅菌效果。附有真空裝置的熱壓滅菌器，在通入蒸氣前將順內(nèi)空氣抽出，可加快預(yù)熱過程，縮短滅菌時(shí)間。減壓還可有效地將多孔性物質(zhì)中空氣驅(qū)除，有利于水蒸氣的穿透，同時(shí)滅菌器內(nèi)溫度均勻。第6章滅菌制劑和無菌制劑(3)滅菌時(shí)間必須由全部藥液溫度達(dá)到所要求的溫度時(shí)算起，在開始升溫時(shí)，要求一定的預(yù)熱時(shí)間。例如250-500ml輸液瓶，預(yù)熱時(shí)間為15-30分鐘。第6章滅菌制劑和無菌制劑一般滅菌器上，均裝有壓力表和溫度計(jì)，但通常是測(cè)定滅菌器內(nèi)的溫度，而不是被滅菌物內(nèi)的溫度，因此最好能設(shè)計(jì)直接測(cè)定被滅菌物內(nèi)溫度的裝置。為了確保滅菌溫度，常使用溫度批示劑如利用某些熔點(diǎn)正好是滅菌所需溫度的化學(xué)藥品作指示，以判斷滅菌溫度是否達(dá)到。第6章滅菌制劑和無菌制劑方法是將少量的藥物封裝于安瓿內(nèi)，與滅菌物一起放入滅菌器的上下部位滅菌，滅菌后觀察藥品是否熔化，但化學(xué)藥品指示劑不能表明保持該溫度的確切時(shí)間。將耐熱的芽孢封裝于安瓿內(nèi)浸透于干紙條中，制成生物性指示劑，廣泛地試驗(yàn)滅菌設(shè)備及方法，但用于藥劑的常規(guī)生產(chǎn)中，應(yīng)使用非致病性、有抵抗力、不產(chǎn)生熱原的菌種，此外，國(guó)內(nèi)現(xiàn)已采用滅菌溫度和時(shí)間自動(dòng)控制記錄的裝置。第6章滅菌制劑和無菌制劑(4)滅菌完畢后，停止加熱，一般必須使壓力表所指示的壓力逐漸下降到零，才能放出鍋內(nèi)蒸氣，使鍋內(nèi)壓力與大氣壓相等后，稍稍打開滅菌鍋待10~15分鐘，再全部打開，這樣可避免內(nèi)外壓力差太大而使物品沖出鍋外和使玻璃瓶炸裂(必須注意，以免發(fā)生工傷事故)。為了縮短滅菌周期，也有對(duì)滅菌器內(nèi)盛有溶液的容器噴霧水冷卻，以加速冷卻。

第6章滅菌制劑和無菌制劑2、流通蒸氣滅菌流通蒸氣滅菌是不密閉的容器內(nèi)，用蒸氣滅菌，壓力與大氣壓相等，即100℃的蒸氣滅菌，時(shí)間30-60min。缺點(diǎn)：不能保證殺滅所有的芽孢，如破傷風(fēng)桿菌等厭氧性菌的芽孢，制備過程中要盡可能避免污染，這點(diǎn)必須充分注意。目前我國(guó)藥廠生產(chǎn)注射劑，特別是1-2ml注射劑及不耐高熱的品種，可考慮采用這種滅菌法。第6章滅菌制劑和無菌制劑3、煮沸滅菌法煮沸滅菌法就是把安瓿或其他物品(如注射器、注射針頭等)放入水中煮沸滅菌，一般是100℃，30-60min。此法滅菌效果差，必要時(shí)加入抑菌劑。第6章滅菌制劑和無菌制劑加有適當(dāng)抑菌劑時(shí)，藥液經(jīng)100℃，30分鐘加熱，可殺死抵抗力強(qiáng)芽孢。所用的抑菌劑：三氯叔丁醇(0.2-0.5%)、甲酚(0.1-0.3%)、苯酚(0.1-0.5%)、氯甲酚(0.05-0.1%)、硝酸苯汞或醋酸苯汞(0.001-0.002%)。第6章滅菌制劑和無菌制劑4、低溫間歇滅菌法低溫間歇滅菌法：將待滅菌的制劑或藥品，用60-80℃加熱1小時(shí)，將其中的細(xì)菌繁殖體殺死，然后在室溫或孵卵箱中放置24小時(shí)，讓其中的芽孢發(fā)育成為繁殖體，再二次加熱將其消滅為止；加熱和放置需連續(xù)操作三次以上，至全部芽孢消滅為止。第6章滅菌制劑和無菌制劑低溫間歇滅菌法適用于必須用熱法滅菌但又不耐較高溫度的制劑或藥品。缺點(diǎn)：時(shí)間長(zhǎng)，消滅芽孢的效果不夠完全。應(yīng)用本法滅菌的制劑或藥品，除本身具有抑菌能力者外，須加適量抑菌劑，以增加滅菌效力。第6章滅菌制劑和無菌制劑5、影響濕熱滅菌的因素(1)微生物的種類和數(shù)量各細(xì)菌對(duì)熱的抵抗力相差很大，處于不同發(fā)育階段，所需滅菌的溫度與時(shí)間也不相同，繁殖期的微生物對(duì)高溫比衰老時(shí)期的抵抗力大。第6章滅菌制劑和無菌制劑每個(gè)容器的細(xì)菌數(shù)，控制在10個(gè)以內(nèi)為宜。最初菌數(shù)愈少，達(dá)到滅菌時(shí)間愈短。最初菌數(shù)增多也增加了耐熱個(gè)體出現(xiàn)的幾率，即使細(xì)菌全部殺滅，而注射液中細(xì)菌體過多，亦會(huì)引起臨床上的不良反應(yīng)，所以整個(gè)性產(chǎn)過過程應(yīng)盡可能避免微生物污染，盡可能縮短生產(chǎn)過程，并力求在灌封后立即菌。芽孢＞繁殖體＞衰老體。第6章滅菌制劑和無菌制劑(2)蒸氣性質(zhì)蒸氣有飽和、濕飽和、過熱三種。飽和蒸氣熱含量較高，熱的穿透力較大，滅菌效力高。濕飽和蒸氣帶有水分，熱含量較低，穿透力差，滅菌效力較低。過熱蒸氣溫度高于飽和蒸氣，但穿透力差，滅菌效力低。第6章滅菌制劑和無菌制劑(3)注射液的性質(zhì)注射液若含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如糖類、蛋白質(zhì)等，對(duì)微生物可能有一種保護(hù)作用，能增強(qiáng)其抗熱性。第6章滅菌制劑和無菌制劑(4)pH藥液pH對(duì)細(xì)菌的活性也有影響。通常微生物在中性液中耐熱性最大，在堿性溶液中次之；酸性不利于微生物的發(fā)育。一般生物堿鹽類的注射液，因pH較低，用流通蒸氣滅菌即可。第6章滅菌制劑和無菌制劑(5)藥物的穩(wěn)定性溫度增高，化學(xué)反應(yīng)速度增加，時(shí)間愈長(zhǎng)，起反應(yīng)的物質(zhì)愈多，因此不能只看到滅菌殺死細(xì)菌的一面，也要看到保證藥物有效性的一面，為此在能達(dá)到滅菌的前提下，可適當(dāng)降低溫度或縮短滅菌時(shí)間。實(shí)踐證明在力求避免微生物污染和嚴(yán)格質(zhì)量控制的條件下，維生素C注射液用流通蒸氣滅菌15分鐘；氯化鈉注射液用115℃，30分鐘是可行的。第6章滅菌制劑和無菌制劑(三)射線滅菌系采用輻射、微波和紫外線殺死微生物和芽孢的方法。1、輻射滅菌系采用放射性同位素素(60Co和137Cs)放射的

射線殺死微生物和芽孢的方法。輻射滅菌劑量一般為2.5×104Gy(戈瑞)。第6章滅菌制劑和無菌制劑適合于熱敏物料和制劑，常用于維生素、抗生素、激素、生物制品、中藥材和中藥制劑、醫(yī)療器械、藥用包裝材料及藥用高分子材料等。特點(diǎn)是不升高產(chǎn)品溫度，穿透力強(qiáng)，滅菌效率高，但設(shè)備貴，有潛在危險(xiǎn)性，對(duì)某些藥物(特別是溶液型)可能產(chǎn)生藥效降低或產(chǎn)生毒性物質(zhì)和發(fā)熱物質(zhì)等。第6章滅菌制劑和無菌制劑2、微波滅菌系采用微波(頻率為300MHz-300kMHz)照射產(chǎn)生熱能殺死微生物和芽孢的方法。適合于液體和固體物料，對(duì)固體物料有干燥作用。特點(diǎn)是能穿透到介質(zhì)和物料深部，表里加熱一致，且具有低溫、常壓、高效、快速(2-3min)、低能耗、無污染、易操作、易維護(hù)，產(chǎn)品保質(zhì)期長(zhǎng)(可延長(zhǎng)1/3以上)等。第6章滅菌制劑和無菌制劑3、紫外線滅菌法一般用于滅菌的紫外線波長(zhǎng)是200-300nm，滅菌力最強(qiáng)的是波長(zhǎng)為254nm的紫外線。紫外線進(jìn)行直線傳播，其強(qiáng)度與距離平方成比例地減弱，并可被不同的表面反射，其穿透作用微弱，但較易穿透清潔空氣及純凈的水，其中懸浮物或水中鹽類增多時(shí)，則穿透程度顯著下降，所以紫外線廣泛作空氣滅菌和表面滅菌之用。第6章滅菌制劑和無菌制劑一般在6-15m3的空間可裝置30瓦(或36-48)紫外線燈一只，燈距離地面以2.5m到3m為宜。濕度過大可降低滅菌效果，相對(duì)濕度以45％-60％比較適宜，溫度宜于10-55℃范圍。紫外線燈管必須保證無塵油垢，否則輻射強(qiáng)度將大力為降低。普通玻璃可吸收紫外線，因此安瓿中藥物不能用此法滅菌。第6章滅菌制劑和無菌制劑紫外線的殺菌效率，還取決于微生物的敏感性，如在一平面上輻射強(qiáng)度為通常應(yīng)用的最小強(qiáng)度2mw/cm2(30瓦紫外線燈于距1米處強(qiáng)度為85mw/cm2)時(shí)殺死枯草桿菌芽孢需1100秒，而對(duì)溶血性鏈球菌，則僅需275秒?？纱致哉J(rèn)為在紫外線燈下直接暴露，一般繁殖型微生物約3-5分鐘，芽孢約10分鐘即可死亡。紫外線對(duì)酵母特別是霉菌殺菌力較弱。第6章滅菌制劑和無菌制劑紫外線對(duì)人體如照射過久，能產(chǎn)生結(jié)合膜炎及皮膚燒灼等現(xiàn)象。一般均在操作前開啟紫外線燈約半小時(shí)至一小時(shí)，然后進(jìn)行操作。各種規(guī)格的紫外線燈，皆規(guī)定了有效使用時(shí)間，一般為3000小時(shí)。故每次使用應(yīng)登記開啟時(shí)間，并定期進(jìn)行滅菌效果的檢查，也可用具有對(duì)254nm靈敏的照度計(jì)，來測(cè)定其輻射強(qiáng)度。第6章滅菌制劑和無菌制劑(四)過濾除菌法過濾除菌法是使藥物溶液通過無菌的特定濾器，除去活的或死的微生物而得到不含微生物的濾液。適于不耐熱的藥液的滅菌。第6章滅菌制劑和無菌制劑(1)能有效除凈微生物，溶液通過濾器順暢，濾器容易清洗，操作簡(jiǎn)便。(2)孔徑大小必須足以阻止細(xì)菌和芽孢進(jìn)入濾孔之內(nèi)，大約為0.2μm。過濾除菌的濾器要求：第6章滅菌制劑和無菌制劑(3)采用微孔薄膜作滅菌濾器，一般選用孔徑0.22μm的濾膜。(4)G6號(hào)垂熔玻璃漏斗，其濾孔直徑在1.5μm以下，可以除去細(xì)菌，對(duì)藥物不吸附，也不影響藥液的pH，常用滅菌濾器。第6章滅菌制劑和無菌制劑1、F與F0值在滅菌中的意義與作用無菌檢驗(yàn)往往難以檢出極微量微生物，為了保證產(chǎn)品無菌，有必要對(duì)滅菌方法的可靠性進(jìn)行驗(yàn)證是很必要的。主要原因：①滅菌溫度多系測(cè)量滅菌器內(nèi)的溫度，不是滅菌物體內(nèi)的溫度；②無菌檢驗(yàn)方法也在局限性，難以用現(xiàn)行的無菌檢驗(yàn)法檢出微量的微生物。

(五)滅菌參數(shù)第6章滅菌制劑和無菌制劑D值為在一定溫度下殺死被滅菌物品中微生物90％所需時(shí)間；也可定義為降低微生物一個(gè)十位數(shù)或一個(gè)對(duì)數(shù)值(如log100降低到log10)所需的時(shí)間。2、D值（時(shí)間）第6章滅菌制劑和無菌制劑微生物致死間曲線與D值微生物死亡速度屬一級(jí)過程。dN/dt=-kt，即lgN0-lgNt=kt/2.303D=t=2.303(lg100-lg10)/kD值因微生物的種類、環(huán)境、滅菌溫度不同而各異。第6章滅菌制劑和無菌制劑3、Z值(溫度)在不同溫度下對(duì)特定的微生物在特定介質(zhì)或環(huán)境中求得D值后，Z值為降低一個(gè)lgD值所需升高的溫度數(shù)，即滅菌時(shí)間減少到原來的1/10時(shí)所需升高的溫度或在相同滅菌時(shí)間內(nèi)，殺滅99%的微生物所需要提高的溫度。Z=(T2-T1)/(lgD2-lgD1)，即D2/D1=10(T2-T1)/Z

第6章滅菌制劑和無菌制劑F(或F0)值可作用驗(yàn)證滅菌可靠性的參數(shù)。

(1)F值F值為在一定溫度(T)，給定Z值所產(chǎn)生的干熱滅菌效果與參比溫度(T0)給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效果相同時(shí)所相當(dāng)?shù)臅r(shí)間(equivalenttime)，以分為單位。4、F值與F0值(時(shí)間)第6章滅菌制劑和無菌制劑F=

t10(T-T0)/Z

t是測(cè)量被滅菌物溫度的時(shí)間間隔，一般為0.5-1.0或更小，T是每個(gè)

t測(cè)量被滅菌的溫度，T0是參比溫度。

第6章滅菌制劑和無菌制劑(2)F0值F0值為在一定滅菌溫度(T)、Z值為10℃所產(chǎn)生的濕熱滅菌效果與121℃，Z值為10℃所產(chǎn)生的滅菌效果相同時(shí)所相當(dāng)?shù)臅r(shí)間(min)。

第6章滅菌制劑和無菌制劑物理F0=

t10(T-121)/Z也就是說F0是將各種滅菌溫度使微生物的致死力轉(zhuǎn)換為滅菌物品完全暴露于121℃使微生物致死效力。第6章滅菌制劑和無菌制劑生物F0=D121℃×(lgN0-lgNt)Nt為滅菌后預(yù)計(jì)達(dá)到的微生物殘存數(shù)，即染菌度概率(probabilityofnonsterility)，當(dāng)Nt為10-6時(shí)(原有菌數(shù)的百萬分之一)，可認(rèn)為滅菌效果較可靠。第6章滅菌制劑和無菌制劑F0值的計(jì)算對(duì)于驗(yàn)證滅菌效果極為有用，當(dāng)產(chǎn)品以121℃濕熱滅菌時(shí)，滅菌器內(nèi)的溫度雖能迅速升到121℃，而被滅菌物品內(nèi)部則不然，由于包裝材料性能及其他因素影響而使升溫度各異，而F0將隨著產(chǎn)品溫度(T)變化而呈指數(shù)的變化，故溫度即使很小的差別(如0.1-1)將對(duì)F0值產(chǎn)生顯著的影響。同時(shí)，要求測(cè)定滅菌物品內(nèi)的實(shí)際溫度，故用F0來監(jiān)測(cè)滅菌效果有重要的意義。第6章滅菌制劑和無菌制劑由于F0是將不同滅菌溫度折算到相當(dāng)于121℃濕熱滅菌時(shí)的效力，故F0值可作為滅菌過程的比較參數(shù)。

為了使F0測(cè)定準(zhǔn)確，先應(yīng)選擇靈敏度高，重現(xiàn)性好，精密度為0.1的熱電偶，并對(duì)熱電偶進(jìn)行校驗(yàn)。滅菌時(shí)應(yīng)將熱電偶的探針置于被測(cè)物的內(nèi)部，經(jīng)滅菌器通向柜外的溫度記錄儀，有些滅菌記錄儀附有F0計(jì)算器，在滅菌過程中和滅菌后，自動(dòng)顯示F0值。第6章滅菌制劑和無菌制劑為了確保滅菌效果，還應(yīng)注意兩個(gè)問題：①根據(jù)F0=D121℃

(logN0-logNt)，若N越大，即被滅菌物中微生物越多，則滅菌時(shí)間越長(zhǎng)，故生產(chǎn)過程中應(yīng)盡量減少微生物的污染，應(yīng)采取各種措施使每個(gè)容器的含菌數(shù)控制在10以下。②計(jì)算F0時(shí)，應(yīng)適當(dāng)考慮增加安全因素，一般增加50％，如規(guī)定F0為8分，則實(shí)際操作應(yīng)控制F0為12分。

第6章滅菌制劑和無菌制劑影響F0值的因素：①容器大小、形狀及熱的穿透性等。②滅菌產(chǎn)品溶液的性質(zhì)、填充量等。③容器在滅菌器中的數(shù)量及分布等。第6章滅菌制劑和無菌制劑二、化學(xué)滅菌法本法是指用化學(xué)藥品直接作用于微生物而將其殺死，同時(shí)不應(yīng)損害制品的質(zhì)量。常用的方法有：①氣體滅菌法；②應(yīng)用化學(xué)殺菌劑。第6章滅菌制劑和無菌制劑(一)氣體滅菌法1、環(huán)氧乙烷環(huán)氧乙烷沸點(diǎn)為10.9℃，室溫下為氣體，在水中溶解度很大，1ml水中可溶195ml(20℃，760mmHg)，易穿透塑料，紙板及固體粉末，暴露于空氣中環(huán)氧乙烷就可從這些物質(zhì)消散，環(huán)氧乙烷對(duì)大多數(shù)固體呈惰性。第6章滅菌制劑和無菌制劑環(huán)氧乙烷的殺菌作用，由于其為烷化劑的性質(zhì)，使菌體蛋白的-COOH、-NH2、-SH、-OH的H，被-CH2-CH2-OH所取代。可用于塑料容器、對(duì)熱敏感的固體藥物、紙或塑料包裝的藥物、橡膠制品、注射筒、注射針頭、衣著敷料及器械等。但是，一些塑料、皮革及橡膠與環(huán)氧乙烷有強(qiáng)親和力，故需長(zhǎng)達(dá)12-24小時(shí)通空氣驅(qū)除。第6章滅菌制劑和無菌制劑環(huán)氧乙烷具可燃可爆，用時(shí)需用惰性氣體二氧化碳或氟利昂稀釋。環(huán)氧乙烷的吸入毒性較大與氨相近，無氨樣的剌激嗅味，損害皮膚及眼粘膜，可產(chǎn)生水泡或結(jié)膜炎，故應(yīng)用時(shí)要注意。第6章滅菌制劑和無菌制劑用環(huán)氧乙烷滅菌的程序：將滅菌物品置于滅菌器內(nèi)后，減壓排除空氣，預(yù)熱，環(huán)氧乙烷采用混合氣，一般用環(huán)氧乙烷12％和氟利昂88％或用環(huán)氧乙烷10％和二氧化碳90％，在減下輸入混合氣，保持一定濃度、濕度、及溫度，以過一定時(shí)間后，抽真空排除環(huán)氧乙烷，然后送入無菌空氣完全排除環(huán)氧乙烷的濃度為850-900mg/L(3小時(shí)、45℃)，45mg/L(5小時(shí)，45℃)，相對(duì)濕度以40％-60％為宜溫度為22-55℃。第6章滅菌制劑和無菌制劑2、甲醛甲醛溶液加熱熏蒸，每立方米空間用40％甲醛溶液30m1室內(nèi)相對(duì)濕度宜高，以增進(jìn)甲醛氣體滅菌效果。第6章滅菌制劑和無菌制劑第6章滅菌制劑和無菌制劑3、丙二醇丙二醇用于室內(nèi)空氣滅菌具有不揮發(fā)性和無引火性等特點(diǎn)，滅菌用量為1ml/m3，將丙二醇置蒸發(fā)器中加熱，使蒸氣彌漫全室。第6章滅菌制劑和無菌制劑4、乳酸用乳酸蒸氣滅菌用量為2ml/m3，殺菌力雖不及甲醛，但對(duì)人無害。第6章滅菌制劑和無菌制劑5、過氧乙酸過氧乙酸用于車間滅菌，效力比相同濃度的甲醛大兩倍半，對(duì)粘膜、眼部無剌激性，對(duì)木制品、金屬制品、醫(yī)療器械均無影響。第6章滅菌制劑和無菌制劑(二)應(yīng)用化學(xué)殺菌劑在制劑工業(yè)上應(yīng)用化學(xué)殺菌劑，其目的在于減少微生物的數(shù)目，以控制無菌狀況至一定水平?；瘜W(xué)殺菌劑并不能殺死芽孢，僅對(duì)繁殖體有效?；瘜W(xué)殺菌劑的效果，依賴于微生物的種類及數(shù)目，物體表面光滑或多孔與否，以及化學(xué)殺菌劑的性質(zhì)。常用的有0.1％-0.2％新潔爾滅溶液、75％酒精等。由于化學(xué)殺菌劑常施用于物體表面，也要注意其濃度不要過高，以防其化學(xué)腐蝕作用。第6章滅菌制劑和無菌制劑三、無菌操作法無菌操作法在技術(shù)上并非滅菌操作，是整個(gè)過程控制在無菌條件下進(jìn)行的一種操作方法。適用于一些不耐熱藥物的注射劑、眼用劑、皮試液、海綿劑和創(chuàng)傷制劑的制備。第6章滅菌制劑和無菌制劑無菌操作場(chǎng)所：①無菌操作室第6章滅菌制劑和無菌制劑②層流潔凈工作臺(tái)第6章滅菌制劑和無菌制劑③無菌操作柜。無菌操作柜分小型無菌操作與聯(lián)合無菌操作兩種。小型無菌操作柜又稱單人無菌柜，式樣有單面式與雙面式兩種。聯(lián)合無菌操作柜是由幾個(gè)小型操作柜聯(lián)合制成，以使原料的精制，傳遞分裝及成品暫時(shí)存放等工作全部在柜內(nèi)進(jìn)行。近年來，采用層流潔凈工作臺(tái)作無菌操作，使用方便，效果可靠。第6章滅菌制劑和無菌制劑(一)無菌操作前工作無菌操作前無菌操作室或無菌操作所用的一切用具、材料以及環(huán)境均須應(yīng)用滅菌法滅菌：1)定期應(yīng)用環(huán)氧乙烷、甲醛、丙二醇或乳酸等對(duì)空氣進(jìn)行較徹底的滅菌。每天工作前開啟紫外線一小時(shí)，中午休息時(shí)間也要開0.5-1小時(shí)。第6章滅菌制劑和無菌制劑2)用3%酚溶液、2%煤酚皂溶液、0.2％新潔爾滅溶液或75％酒精等用對(duì)室內(nèi)的空間、用具(桌椅等)、地面、墻壁等噴灑或擦試。3)其它用具：盡量用熱壓滅菌法或干熱滅菌法滅菌。第6章滅菌制劑和無菌制劑(二)無菌操作操作人員進(jìn)入操作之前要洗澡并換上已經(jīng)滅菌的工作服和清潔的鞋子，不使頭發(fā)、內(nèi)衣等露出來，以免造成污染機(jī)會(huì)。安瓿要150-180℃，2-3小時(shí)干熱滅菌；橡皮塞要以121℃，1小時(shí)熱壓滅菌；有關(guān)器具、機(jī)器都要經(jīng)過滅菌。用無菌操作法制備的注射劑，大多要加入抑菌劑。小量無菌制劑的制備，也可在無菌操作柜中進(jìn)行。第6章滅菌制劑和無菌制劑(三)無菌檢查法藥劑或藥品經(jīng)滅菌或無菌操作法處理后，需經(jīng)無菌檢驗(yàn)證實(shí)已無微生物生存，方能使用。滅菌效果，應(yīng)以殺死芽孢為標(biāo)準(zhǔn)(細(xì)菌的芽孢具有較強(qiáng)的的抗熱力，不易殺死)。在藥劑中選擇滅菌方法，與微生物學(xué)上的要求不盡相同，要達(dá)到滅菌的目的，且要保證藥穩(wěn)定性。第6章滅菌制劑和無菌制劑法定的無菌檢查法，包括有試管接種法和薄膜過濾法。薄膜過濾用于無菌檢查的突出優(yōu)點(diǎn)，在于可濾過較大量的樣品可濾除抑菌性物質(zhì)，濾過后的薄膜，即可直接接種于培養(yǎng)基管中，或直接用顯微鏡觀察，故此法靈敏度高，不易產(chǎn)生假陰性結(jié)果，檢測(cè)次數(shù)減少，節(jié)省培養(yǎng)基，操作比較簡(jiǎn)單。第6章滅菌制劑和無菌制劑第三節(jié)空氣凈化技術(shù)一、概述空氣凈化分工業(yè)凈化(塵埃粒子)和生物凈化(塵埃粒子和微生物)。第6章滅菌制劑和無菌制劑二、潔凈室空氣凈化標(biāo)準(zhǔn)1、含塵濃度單位體積空氣中所含粉塵的個(gè)數(shù)(計(jì)數(shù)濃度)或毫克量(重量濃度)。第6章滅菌制劑和無菌制劑2、浮塵濃度的測(cè)定方法①光散射式粒子計(jì)數(shù)法②濾膜顯微鏡計(jì)數(shù)法③光電比色計(jì)數(shù)法第6章滅菌制劑和無菌制劑3、凈化方法常見的可分為三類：(1)一般凈化指標(biāo)是溫度和濕度，采用初效過濾器。(2)中等凈化指標(biāo)是溫度、濕度、含塵量和塵埃粒子(0.15-0.25mg/m3，塵埃粒子不得大于1.0

m)，采用初、中效過濾器。(3)超凈凈化

指標(biāo)是溫度、濕度、含塵量和塵埃粒子，初、中、高效過濾器。第6章滅菌制劑和無菌制劑4、潔凈室的凈化度標(biāo)準(zhǔn)(1)藥品生產(chǎn)管理規(guī)范中凈化度標(biāo)準(zhǔn)潔凈級(jí)別塵粒數(shù)(粒/升)粒徑

0.5m塵粒數(shù)(粒/英尺3)粒徑

0.5m溫度(℃)相鄰級(jí)別室間壓差濕度(%)菌落數(shù)1003.510018-26正壓40-60<11000035010000<31000003500100000<10＞100000350001000000/第6章滅菌制劑和無菌制劑(2)美國(guó)聯(lián)邦潔凈室標(biāo)準(zhǔn)(209B)中凈化度標(biāo)準(zhǔn)潔凈級(jí)別塵粒數(shù)(粒/升)粒徑(

m)溫度(℃)相鄰級(jí)別室間壓差(mmHg)濕度(%)風(fēng)速(m/s)照度(Lx)1003.50.519.4-251.330-450.351076-16141000350.5100003502.30.55.01000003500250.55.0第6章滅菌制劑和無菌制劑三、空氣濾過1、潔凈室的要求潔凈室應(yīng)保持正壓，潔凈室之間按潔凈度等級(jí)的高低依次相連，并有相應(yīng)的壓差以防止低級(jí)別潔凈室的空氣逆流到高級(jí)別潔凈室。潔凈室的溫度宜保持18~26℃，相對(duì)濕度40~60%。第6章滅菌制劑和無菌制劑在室內(nèi)環(huán)境中，懸浮粒狀物質(zhì)的粒徑絕大多數(shù)是小于10μm的粒子，而且其粒度分布在4μm附近和1μm以下出現(xiàn)峰值，因此潔凈室技術(shù)中以0.5μm和5.0μm作為劃分潔凈度等級(jí)的標(biāo)準(zhǔn)粒徑。潔凈室的空氣凈化方法多采用空氣濾過法。第6章滅菌制劑和無菌制劑2、空氣濾過方式、機(jī)理及其影響因素(1)濾過方式空氣濾過屬于介質(zhì)濾過，可分為表面濾過和深層濾過。(2)空氣濾過機(jī)理慣性作用、擴(kuò)散作用、攔截作用、靜電作用、吸附作用、重力作用和分子間的范德華力等。(3)影響空氣過濾的主要因素粒徑、過濾風(fēng)速、介質(zhì)纖維直徑和密實(shí)性、附塵作用。第6章滅菌制劑和無菌制劑3、單元空氣濾過器形式單元空氣濾過器形式：板式、楔式、袋式和折疊式。第6章滅菌制劑和無菌制劑4、空氣過濾器的特性(1)過濾效率()=1-C2/C1多級(jí)串聯(lián)過濾

=(C1-Cn)/C1=1-(1-1)(1-2)(1-n)(2)穿透率(K)和凈化率(Kc)K=C2/C1=1-，Kc=1/K=C1/C2(3)容塵量：系過濾器允許積塵的最大量。一般容塵量定為阻力增大到原來的兩倍或過濾效率降至初值的85%以下的積塵量。第6章滅菌制劑和無菌制劑5、空氣過濾器按效率分類(1)初效濾過器主要濾除粒徑大于5μm的懸浮粉塵，防止中、高效濾過器被大粒子堵塞，以延長(zhǎng)中、高效濾過器的壽命。通常設(shè)在上風(fēng)側(cè)的新風(fēng)濾過，又稱預(yù)濾器(prefilter)，一般采用易于拆卸的平板型和袋型。第6章滅菌制劑和無菌制劑(2)中效濾過器主要濾除粒徑大于1μm的塵粒，一般置于高效濾過器前，以保護(hù)高效濾過器，中效濾過器外形結(jié)構(gòu)大體與初效濾過器相似，主要區(qū)別是濾材不同。第6章滅菌制劑和無菌制劑(3)高效濾過器(HEPA)主要用于濾除粒徑小于1μm的塵埃，對(duì)粒徑0.3μm的塵粒的濾過效率在99.97%以上，一般裝在通風(fēng)系統(tǒng)的末端，必須在中效濾過器的保護(hù)下使用。高效濾過器主要采用折疊式空氣濾過器。高效濾過器的特點(diǎn)是效率高、阻力大、不能再生、安裝時(shí)正反方向不能倒裝。第6章滅菌制劑和無菌制劑6、各級(jí)濾過器的組合濾過器的組合方式使空氣由初效到高效通過，逐級(jí)凈化。組合的濾過氣的組別不同，得到不同的凈化效果。中效空氣凈化系統(tǒng)采用二級(jí)過濾裝置(初效-中效)；高效空氣凈化系統(tǒng)采用三級(jí)過濾裝置(初效-中效-高效)。第6章滅菌制劑和無菌制劑第6章滅菌制劑和無菌制劑第6章滅菌制劑和無菌制劑四、凈化室的設(shè)計(jì)生產(chǎn)區(qū)域：一般生產(chǎn)區(qū)(沒有潔凈度要求)、控制區(qū)(10萬級(jí))、潔凈區(qū)(1萬級(jí))和無菌區(qū)(100級(jí))。第6章滅菌制劑和無菌制劑1、潔凈區(qū)基本布局與內(nèi)部結(jié)構(gòu)潔凈區(qū)一般由潔凈室、氣閘、風(fēng)淋、亞污染區(qū)、廁所、洗澡間、更衣室等組成。各部分的布置必須符合生產(chǎn)工藝的前體下，明確人、物流以及空氣流向，以保證潔凈室的潔凈度。第6章滅菌制劑和無菌制劑潔凈室布置的基本原則：(1)同級(jí)別潔凈室盡可能安排在一起；(2)不同級(jí)別的潔凈室由低級(jí)向高級(jí)安排，彼此相連的房間應(yīng)設(shè)隔門，按潔凈等級(jí)設(shè)計(jì)相應(yīng)壓差(一般10Pa左右)，門的開啟方向朝著潔凈度級(jí)別高的房間；(3)潔凈室內(nèi)的設(shè)備布置盡量緊湊，以降低潔凈室的面積；(4)潔凈室內(nèi)不安排窗戶，或窗戶與潔凈室之間隔以封閉式外走廊；第6章滅菌制劑和無菌制劑(5)潔凈室的門要求密封，人、物進(jìn)出口裝有氣閘；(6)潔凈室的照明度按GMP規(guī)定應(yīng)超過300lx；(7)無菌區(qū)紫外燈，一般安裝在無菌工作區(qū)之上側(cè)；(8)潔凈室的墻壁、地面等要便于清掃，防濕、防霉，不易開裂，不易燃燒等。第6章滅菌制劑和無菌制劑潔凈室的人流、物流和空氣流:第6章滅菌制劑和無菌制劑2、潔凈室對(duì)人員、物件的要求(1)對(duì)人的要求在潔凈室內(nèi)人是粉塵和細(xì)菌的主要污染源。操作人員進(jìn)入潔凈室之前必須水洗(洗手、洗臉、淋浴等)，更衣鞋帽，空氣吹淋(風(fēng)淋)；工作服必須專用，盡量蓋罩全身，減少皮包外露，衣料采用發(fā)塵少、不易吸附、不易脫落的緊密尼龍、滌綸等織物。第6章滅菌制劑和無菌制劑(2)對(duì)物的要求使用的原料、儀器、設(shè)備等在進(jìn)入潔凈室前均需清潔處理。按一次通過方式，邊滅菌邊送入無菌室內(nèi)。第6章滅菌制劑和無菌制劑3、潔凈室的氣流形式①層流：空氣流以平行線方式流動(dòng)，亦稱平行流。層流又分垂直層流和水平層流，常用于100級(jí)的潔凈區(qū)。②亂流：氣流具有不規(guī)則的運(yùn)動(dòng)軌跡，也稱紊流?？山档头蹓m濃度，具有一定的空氣凈化作用。第6章滅菌制劑和無菌制劑第6章滅菌制劑和無菌制劑第6章滅菌制劑和無菌制劑4、送風(fēng)與回風(fēng)潔凈室常采用側(cè)面和頂部的送風(fēng)方式，回風(fēng)一般安裝于墻下。室內(nèi)的潔凈度與送、回風(fēng)口的布置形式以及換氣次數(shù)有關(guān)，可達(dá)1000-100000級(jí)。第6章滅菌制劑和無菌制劑第6章滅菌制劑和無菌制劑第四節(jié)冷凍干燥技術(shù)一、概述1、定義冷凍干燥(freezedrying)，是將需要干燥的藥物溶液預(yù)先凍結(jié)成固體。然后在低溫低壓條件下，從凍結(jié)狀態(tài)不經(jīng)液固而直接升華除去水分的一種干燥方法，亦稱升華干燥。第6章滅菌制劑和無菌制劑2、冷凍干燥的優(yōu)點(diǎn)(1)不耐熱藥物可避免因高熱而分解變質(zhì)；(2)產(chǎn)品質(zhì)地疏松，加水后迅速溶解恢復(fù)原藥液特性；(3)含水量低，一般在1%~3%范圍內(nèi)，同時(shí)干燥在真空中進(jìn)行，不易氧化，有利于產(chǎn)品長(zhǎng)期貯存；(4)因污染機(jī)會(huì)相對(duì)減少，產(chǎn)品中的微粒物質(zhì)比用其它方法生產(chǎn)者少；(5)產(chǎn)品劑量準(zhǔn)確，外觀優(yōu)良。第6章滅菌制劑和無菌制劑二、冷凍干燥原理及曲線1、冷凍干燥原理當(dāng)壓力低于4.597mmHg時(shí)，不管溫度如何變化，水只有以固態(tài)或氣固存在。第6章滅菌制劑和無菌制劑2、冷凍干燥曲線及其分析第6章滅菌制劑和無菌制劑三、冷凍干燥的工藝過程冷凍干燥工藝條件對(duì)保證產(chǎn)品質(zhì)量極為重要，對(duì)于新產(chǎn)品應(yīng)首先測(cè)定產(chǎn)品的低共熔點(diǎn)，然后控制冷凍溫度在低共熔點(diǎn)以下，以保證冷凍干燥的順利進(jìn)行。低共熔點(diǎn)是在水溶液冷卻過程中，冰和溶質(zhì)同時(shí)析出結(jié)晶混合物(低共熔混合物)時(shí)的溫度。第6章滅菌制劑和無菌制劑冷凍干燥的工藝主要包括三個(gè)過程：預(yù)凍、升華干燥和再干燥。1、預(yù)凍預(yù)凍方法有速凍法和慢凍法。預(yù)凍溫度應(yīng)低于產(chǎn)品共熔點(diǎn)的10~20℃。第6章滅菌制劑和無菌制劑2、升華干燥升華干燥有一次升華干燥和反復(fù)預(yù)凍升華干燥。(1)一次升華干燥適用于低共熔點(diǎn)-10~-20℃的制品，且溶液濃度、黏度不大，裝量厚度在10~15mm的情況。(2)反復(fù)預(yù)凍升華干燥適用于某些熔點(diǎn)較低，或結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜黏稠如蜂蜜、蜂王漿等產(chǎn)品。此法可縮短冷凍干燥周期，處理一些難于凍干的產(chǎn)品。第6章滅菌制劑和無菌制劑3、再干燥當(dāng)升華干燥階段完成后，為了盡可能除去殘余的水，需要進(jìn)一步干燥。再干燥的溫度根據(jù)制品的性質(zhì)確定。第6章滅菌制劑和無菌制劑四、冷凍干燥設(shè)備冷凍干燥設(shè)備由制冷系統(tǒng)、真空系統(tǒng)、加熱系統(tǒng)和控制系統(tǒng)4部分組成。第6章滅菌制劑和無菌制劑第五節(jié)濾過技術(shù)一、概述濾過系指將固液混合物強(qiáng)制性通過多孔介質(zhì)，使固體沉積或截留在多孔性介質(zhì)上而使液體通過，從而達(dá)到固-液分離的操作。通常多孔性介質(zhì)稱為濾過介質(zhì)或?yàn)V材；截留在濾過性介質(zhì)上的固體稱為濾餅；通過濾過性介質(zhì)的液體稱為濾液。第6章滅菌制劑和無菌制劑二、濾過機(jī)理與影響因素1、濾過機(jī)理根據(jù)固體粒子在的濾材中被截留的方式不同，將濾過過程分為介質(zhì)濾過和濾餅濾過。第6章滅菌制劑和無菌制劑(1)介質(zhì)濾過介質(zhì)濾過系指藥液通過濾過介質(zhì)時(shí)固體粒子被截留而達(dá)到固-液分離的操作。介質(zhì)濾過的機(jī)理有：表面(篩析)截留作用和深層截留作用。第6章滅菌制劑和無菌制劑①表面(篩析)截留作用(膜濾過或表面濾過)濾過介質(zhì)起篩網(wǎng)作用，常用的有篩析作用的介質(zhì)有微孔濾膜、超濾膜和反滲透膜等。②深層截留作用(深層濾過)固體粒子通過慣性、重力、擴(kuò)散等作用而沉積在濾過介質(zhì)的空隙內(nèi)部搭接形成“架橋”或?yàn)V渣層，也可能由于靜電力或范德華力而被吸附于孔隙內(nèi)部。第6章滅菌制劑和無菌制劑屬于深層濾過的介質(zhì)有：砂濾棒、垂熔玻璃濾器、多孔陶瓷、石棉濾過板等。膜濾過和深層濾過的濾過速度與阻力主要由濾過介質(zhì)所控制，如果藥液中固體粒子含量少于0.1%時(shí)屬于介質(zhì)濾過。第6章滅菌制劑和無菌制劑(2)濾餅濾過固體粒子聚集在濾過介質(zhì)表面之上，濾過的攔截作用主要由所沉積的濾餅起作用，此濾過稱濾餅濾過。如果藥液中固體含量大于1%時(shí)，濾過可形成初始濾餅層。濾過速度與阻力主要受濾餅的影響，如藥材浸出液的濾過屬于濾餅濾過。第6章滅菌制劑和無菌制劑2、影響濾過的因素液體的流動(dòng)遵循Poiseuile公式：

V=Pr4t/8L式中，V－過濾容量；P－操作壓力；r－流過層中毛細(xì)管半徑；t－過濾時(shí)間；－液體粘度；L－毛細(xì)管長(zhǎng)度；V/t－過濾速度。第6章滅菌制劑和無菌制劑三、濾過介質(zhì)與助濾劑1、常用濾過介質(zhì)①濾紙(普通和分析用)；②脫脂棉(口服液體過濾)；③織物(精濾前的預(yù)濾，或注射劑脫碳過濾)；④燒結(jié)金屬(注射劑初濾)；⑤多孔塑料(1、5、7m，其中1m可用于注射劑過濾)；⑥垂熔玻璃(廣泛用于注射劑過濾)；⑦多孔陶瓷(主要用于注射劑精濾)；⑧微孔濾膜(主要用于注射劑精濾和除菌過濾)。第6章滅菌制劑和無菌制劑2、常用的助濾劑①硅藻土(主要成分二氧化硅)；②活性碳(有較強(qiáng)的吸附熱原和微生物的能力，能吸附生物堿類藥物)；③滑石粉(吸附性小，能吸附溶液中過量不溶性的揮發(fā)油和色素，適用于含粘液、樹膠較多的液體)；④紙漿(有助濾和脫色作用，中藥注射劑中應(yīng)用較多)。第6章滅菌制劑和無菌制劑3、過濾裝置(1)垂熔玻璃濾器通常有垂熔玻璃漏斗、濾球和濾棒三種。垂熔玻璃濾器在注射劑生產(chǎn)中常作精濾或膜濾前的預(yù)濾。垂熔玻璃濾器第6章滅菌制劑和無菌制劑A、垂熔玻璃濾器型號(hào)3號(hào)和G2號(hào)常壓過濾；4號(hào)和G3號(hào)減壓或加壓過濾；6號(hào)以及G5、G6號(hào)用于無菌過濾。第6章滅菌制劑和無菌制劑B、垂熔玻璃濾器特點(diǎn)特點(diǎn)：①化學(xué)穩(wěn)定性強(qiáng)，除強(qiáng)堿與氫氟酸外幾乎不受化學(xué)藥品的腐蝕，對(duì)藥液的pH值無影響。②濾過時(shí)無渣脫落，對(duì)藥物無吸附作用；③易于清洗，可以熱壓滅菌。垂熔漏斗使用后要用水抽洗，并以1%-2%硝酸鈉硫酸液浸泡處理。缺點(diǎn)：價(jià)格較貴，脆而易破，操作壓力不能超過98kPa。第6章滅菌制劑和無菌制劑(2)微孔濾膜過濾器理化性質(zhì)：熱穩(wěn)定性、化學(xué)性能穩(wěn)定；纖維酯膜不適于酮類、酯類、乙醚-乙醇混合溶液、強(qiáng)酸強(qiáng)堿；尼龍膜或聚四氟乙烯膜化學(xué)穩(wěn)定性好。用途：主要用于注射劑精濾和除菌過濾。優(yōu)點(diǎn)：微孔孔徑小，截留能力強(qiáng)；孔徑大小均勻；濾速快；濾膜無介質(zhì)的遷移；無交叉污染。缺點(diǎn)：易堵塞，有些濾膜化學(xué)性質(zhì)不理想。第6章滅菌制劑和無菌制劑微孔濾膜的分類：①醋酸纖維膜：適合于無菌濾過，檢驗(yàn)分析測(cè)定，如過濾低分子量、水溶液、酒類、油類；②硝酸纖維膜：適用于水溶液、空氣、油類、酒類除去微粒和細(xì)菌，不耐酸堿，溶于有機(jī)溶劑，可以在120℃、30分鐘熱壓滅菌；③醋酸纖維和硝酸纖維混合膜：性質(zhì)與硝酸纖維膜類同，可適用于pH3~10范圍，10~20%乙醇，50%甘油，30~50%的丙二醇，而2%聚山梨酯80對(duì)膜有顯著影響；第6章滅菌制劑和無菌制劑④聚酰胺(尼龍)膜：適合于濾過弱酸、稀酸、堿類和普通溶劑，如丙酮、二氯甲烷、醋酸乙酯濾過；⑤聚四氟乙烯膜：用于濾過酸性、堿性、有機(jī)溶劑的液體，可耐260℃高溫；⑥耐有機(jī)溶劑專用膜：除100%乙醇、甲酸乙酯、二氯乙烷、酮類外，有耐溶劑性，可作為酸性、堿性溶液，一般溶液的濾過；第6章滅菌制劑和無菌制劑⑦聚偏氟乙烯膜(PVDF)：濾過精度0.22~5.0μm，具有耐氧化性和耐熱性，適用于pH1~12，A型，一般型<50℃(壓差0.3MPa)，高溫型<80℃(壓差0.2MPa)；B型，<90℃(壓差0.2MPa)；⑧其它，如聚碳酸酯膜、聚砜膜、聚氯乙烯膜、聚乙烯醇醛膜、聚丙烯膜。第6章滅菌制劑和無菌制劑內(nèi)裝微孔濾膜

進(jìn)液口出液口微孔濾膜濾器第6章滅菌制劑和無菌制劑(3)板框式壓濾機(jī)板框壓濾機(jī)第6章滅菌制劑和無菌制劑板框式壓濾機(jī)應(yīng)用與特點(diǎn)應(yīng)用：多用于注射劑預(yù)濾，以及粘性和顆粒較大的浸出液濾過。特點(diǎn)：濾過面積大，截留固體多，經(jīng)濟(jì)耐用，濾材可以任意選擇，適于大生產(chǎn)。主要缺點(diǎn)：清潔較麻煩。第6章滅菌制劑和無菌制劑(4)砂濾棒品種：硅藻土濾棒和多孔素瓷濾棒。應(yīng)用：硅藻土濾棒一般使用于粘度高，濃度較大濾液的濾過；多孔素瓷濾棒多用于低粘度液體的濾過。特點(diǎn)：易于脫沙，對(duì)藥液吸附性強(qiáng)，難于清洗，且有改變藥液pH值的情況。主要用于大生產(chǎn)粗濾。砂濾棒第6章滅菌制劑和無菌制劑(5)壓濾器可用加壓或減壓的方法將濾液壓入濾器內(nèi)，通過包有濾布或?yàn)V紙的多孔性空心圓柱濾過。本濾器使用方便，操作簡(jiǎn)單。缺點(diǎn)：濾過表面積小，濾過效率不太高。第6章滅菌制劑和無菌制劑(6)其他濾器如普通漏斗(玻璃和布氏)、超濾裝置、鈦濾器、多孔聚乙烯燒管過濾器等。鈦濾器第6章滅菌制劑和無菌制劑第6章滅菌制劑和無菌制劑第六節(jié)注射劑一、概述(一)定義注射劑指藥物制成的供注入體內(nèi)的滅菌溶液、乳濁液和混懸液，及供臨用前配成溶液或混懸液的無菌粉末或濃縮液。在注射液生產(chǎn)過程中常常遇到的問題是澄明度、化學(xué)穩(wěn)定性、無菌及熱原等問題。第6章滅菌制劑和無菌制劑注射劑第6章滅菌制劑和無菌制劑(二)一般質(zhì)量要求1、無菌：不得含有任何活的微生物和芽孢。2、無熱原：鱟試劑法和家兔法。3、澄明度：不得有肉眼可見的渾濁或異物(>50μm)。4、安全性：不引起對(duì)組織的刺激性和發(fā)生毒性反應(yīng)。5、滲透壓：輸液要求等滲、等張性。6、pH:4-9(血液pH7.4)。7、穩(wěn)定性：具有必要的物理和化學(xué)穩(wěn)定性，以確保產(chǎn)品在儲(chǔ)存期內(nèi)安全有效。第6章滅菌制劑和無菌制劑8、降壓物質(zhì)：符合規(guī)定，確保用藥安全，如復(fù)方氨基酸注射液。9、澄清度：是檢查藥品溶液的混濁程度，即濁度。10、不溶性微粒：用以檢查靜脈注射液(裝量100ml或100ml以上者)中不溶性微粒。規(guī)定：100ml或100ml以上的注射液中的不溶性微粒每1ml中含10μm以上的不溶性微粒不得過20粒，含25μm以上的不溶性微粒不得過2粒。第6章滅菌制劑和無菌制劑(三)注射劑的特點(diǎn)1、劑量準(zhǔn)確，作用快。2、適用于病情嚴(yán)重或不能口服用藥的病人。3、適用于不宜口服的藥物。4、發(fā)揮局部定位作用。5、注射給藥不方便，且產(chǎn)生疼痛。6、制劑要求嚴(yán)格，生產(chǎn)過程復(fù)雜，費(fèi)用高，需要有特殊的給藥器械(注射器等)，嚴(yán)格無菌以及不同的注射技術(shù)。第6章滅菌制劑和無菌制劑(四)常用的注射方法有如下幾種：1、皮下注射皮下注射(subcutaneousrout，SC)是注射于真皮與肌肉之間的松軟組織內(nèi)，適用于劑量為2ml以內(nèi)，而沒有刺激性的注射劑，比口服給藥吸收快而完全。注射后5-15分鐘即生效。第6章滅菌制劑和無菌制劑2、皮內(nèi)注射皮內(nèi)注射(intradermalrout，ID)是注射于表皮與真皮之間，一次劑量為0.2ml以內(nèi)，常用于過敏試驗(yàn)或疾病診斷。第6章滅菌制劑和無菌制劑3、肌肉注射肌肉注射(intramuscularroute，IM)是注射于肌肉組織中，藥量在5ml以內(nèi)。由于肌肉血管豐富，藥物的吸收比皮下更迅速完全。第6章滅菌制劑和無菌制劑4、靜脈注射靜脈注射(intravenousroute，IV)分靜推注(一般用量5-50ml)和靜脈滴注(可達(dá)數(shù)千毫升)。對(duì)注射用藥物要求澄明，無渾濁、沉淀，無異物和致熱原。第6章滅菌制劑和無菌制劑油溶液和混懸液或乳濁液會(huì)引起毛血細(xì)管栓塞，一般不宜采用靜脈給藥，但粒徑<1

m的乳濁液可靜脈給藥。凡能導(dǎo)致紅細(xì)胞溶解或使蛋白質(zhì)沉淀的藥液，均不宜靜脈給藥。為了使藥液在血液中維持較長(zhǎng)時(shí)間或不斷補(bǔ)充大量液體，可采用靜脈滴注法。第6章滅菌制劑和無菌制劑5、脊椎腔注射脊椎腔注射(vertebracavalroute)是注射于脊椎四周蜘蛛膜下腔內(nèi)，藥量在10ml以內(nèi)。由于神經(jīng)組織比較敏感，且脊椎液緩沖容量小、循環(huán)慢，對(duì)注射藥液要求必須等滲，pH5.0-8.0，注射要緩慢。第6章滅菌制劑和無菌制劑6、動(dòng)脈內(nèi)注射動(dòng)脈內(nèi)注射(intra-arterialroute)是注入靶區(qū)動(dòng)脈末端，如診斷動(dòng)脈造影劑、肝動(dòng)脈栓塞劑。第6章滅菌制劑和無菌制劑7、其他如心內(nèi)注射、穴位注射、鞘內(nèi)注射、滑膜腔內(nèi)注射和關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射(封閉針)。第6章滅菌制劑和無菌制劑二、注射劑的處方組分(一)注射用原料符合藥典或國(guó)家藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

粉針劑示意圖安瓿注射劑示意圖第6章滅菌制劑和無菌制劑(二)注射用溶劑1、注射用水(1)基本概念①注射用水為純化水經(jīng)蒸餾所得的蒸餾水(配制注射劑)；②滅菌注射用水(注射用無菌粉末的溶劑或注射劑的稀釋劑)；③純化水為經(jīng)蒸餾法、離子交換法、反滲透法等制得的供藥用的水(配制普通藥劑的溶劑或試驗(yàn)用)。第6章滅菌制劑和無菌制劑(2)注射用水的質(zhì)量要求注射用水為蒸餾水或去離子水經(jīng)蒸餾所得，又稱為重蒸餾水。質(zhì)量要求：氯化物、硫酸鹽、硝酸鹽、亞硝酸鹽、二氧化碳、易氧化物、不揮發(fā)物、重金屬等項(xiàng)應(yīng)符合藥典規(guī)定，pH應(yīng)為5.0-7.0，氨含量不超過0.00002%，熱原檢查應(yīng)符合規(guī)定，并規(guī)定應(yīng)于制備后12h內(nèi)使用。第6章滅菌制劑和無菌制劑2、注射用油(油性注射劑只能供肌內(nèi)注射)(1)注射用油的質(zhì)量要求注射用油應(yīng)無異臭，無酸敗味；在10℃時(shí)應(yīng)保持澄明。酸值、碘值、皂化值是評(píng)定注射用油的重要指標(biāo)。中國(guó)藥典規(guī)定：碘值79~128；皂化值185~200；酸值不大于0.56；過氧化物應(yīng)符合規(guī)定。第6章滅菌制劑和無菌制劑酸值說明油中游離脂肪酸的多少，酸值高質(zhì)量差，也可看出酸敗的程度。碘值說明油中不飽和鍵的多少，碘值高，則不飽和鍵的多，油易氧化，不適合注射劑。皂化值表示油中游離脂肪酸和結(jié)合成酯的脂肪酸的總量多少，也可看出油的種類和純度。注射用油應(yīng)貯于避光密閉潔凈容器中，避免日光、空氣接觸，還可考慮加抗氧劑。第6章滅菌制劑和無菌制劑(2)注射用油的種類①植物油植物油是由各種脂肪酸的甘油酯所組成。用于注射的主要有麻油(最適合用的注射用油，含天然的抗氧劑，是最穩(wěn)定的植物油)、茶油、花生油、玉米油、橄欖油、棉籽油、豆油、蓖麻油及桃仁油等。第6章滅菌制劑和無菌制劑②油酸乙酯油酸乙酯(aethylisoleas)能與脂肪油混溶，貯藏會(huì)變色，加抗氧劑，如含37.5%沒食子丙酯、37.5%BHT(二叔丁對(duì)甲酚)及25%BHA(二叔丁對(duì)甲氧酚)的混合抗氧劑用量為0.03%(v/v)效果最佳，可于150℃、1h滅菌。③苯甲酸芐酯苯甲酸芐酯(ascabin)能與乙醇、脂肪油混溶。第6章滅菌制劑和無菌制劑3、其他注射用非水溶劑(1)乙醇乙醇(ethanol)能與水、甘油、揮發(fā)油等混溶，作注射溶劑濃度可達(dá)50％，但10％時(shí)可能會(huì)有溶血作用或疼痛感。(2)丙二醇丙二醇(propyleneglycol，PG)即1，2-丙二醇，能與水、乙醇、甘油混溶，常用量10％-60％，皮下或肌注時(shí)有局部刺激性，可供靜注或肌注。第6章滅菌制劑和無菌制劑(3)聚乙二醇聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)能與水、乙醇混溶，PEG300和PEG400均可做注射溶劑，由于PEG300的降解產(chǎn)物可能會(huì)致腎病變，因而PEG400更常用。第6章滅菌制劑和無菌制劑(4)甘油甘油(glycerin)能與水、乙醇混溶，但在揮發(fā)油和脂肪油中不溶，由于粘度和剌激性較大，不能單獨(dú)做注射溶劑用，常用濃度1％-50％。第6章滅菌制劑和無菌制劑(5)二甲基乙酰胺二甲基乙酰胺(dimethylacetamide，DMA)能與水、乙醇混溶，對(duì)藥物的溶解范圍大，為澄明中性溶液。連續(xù)使用時(shí)，應(yīng)注意其慢性毒性。第6章滅菌制劑和無菌制劑(三)注射劑的主要附加劑1、注射劑附加劑的主要作用(1)增加藥物的理化穩(wěn)定性；(2)增加主藥的溶解度；(3)抑制微生物生長(zhǎng)；(4)減輕疼痛或?qū)M織的刺激性等。第6章滅菌制劑和無菌制劑2、常用附加劑pH和等滲調(diào)節(jié)劑、增溶劑、局麻劑、抑菌劑、抗氧劑等。(1)緩沖劑醋酸(0.22%)-醋酸鈉(0.8%)；枸櫞酸(0.5%)-枸櫞酸鈉(4.0%)；酒石酸(0.65%)-酒石酸鈉(1.2%)；磷酸氫二鈉(1.7%)-磷酸二氫鈉(0.71%)；碳酸氫鈉(0.005%)-碳酸鈉(0.06%)；乳酸(0.1%)。第6章滅菌制劑和無菌制劑(2)抑菌劑苯甲醇(1-2%)、羥丙丁酯和羥丙甲酯(0.01-0.015%)、苯酚(0.5-1.0%)、三氯叔丁醇(0.25-0.5%)、硫柳汞(0.001-0.02%)。(3)局麻劑利多卡因(0.5-1.0%)、鹽酸普魯卡因(1.0%)、苯甲醇(1-2%)、三氯叔丁醇(0.3-0.5%)。第6章滅菌制劑和無菌制劑(4)等滲調(diào)節(jié)劑氯化鈉(0.5-0.9%)、葡萄糖(4-5%)、甘油(2.25%)。(5)抗氧劑亞硫酸鈉(0.1-0.2%)、亞硫酸氫鈉(0.1-0.2%)、焦亞硫酸鈉(0.1-0.2%)、硫代硫酸鈉(0.1%)。(6)螯合劑EDTA-2Na(0.01-0.05%)、枸櫞酸、酒石酸等。第6章滅菌制劑和無菌制劑(7)增溶劑，潤(rùn)濕劑，乳化劑聚氧乙烯蓖麻油(1-65%)、聚山梨酯20(0.01%)、聚山梨酯40(0.05%)、聚山梨酯80(0.04-4.0%)、聚維酮(0.2-1.0%)、聚乙二醇-蓖麻油(7.0-11.5%)、卵磷脂(0.5-2.3%)、PluronicF-68(0.21%)。(8)助懸劑明膠(2.0%)、甲基纖維素(0.03-1.05%)、羧甲基纖維素(0.05-0.75%)、果膠(0.2%)。第6章滅菌制劑和無菌制劑(9)填充劑乳糖(1-8%)；甘氨酸(1-10%)；甘露醇(1-10%)。(10)穩(wěn)定劑肌酐(0.5-0.8%)；甘氨酸(1.5-2.25%)；煙酰胺(1.25-2.5%)；辛酸鈉(0.4%)。(11)保護(hù)劑乳糖(2-5%)；蔗糖(2-5%)；麥芽糖(2-5%)；人血白蛋白(0.2-2%)。第6章滅菌制劑和無菌制劑三、注射劑的制備(一)注射劑的工藝流程注射劑的一般生產(chǎn)過程包括：原輔料和容器的前處理、稱量、配制、過濾、灌封、滅菌、質(zhì)量檢查、包裝等步驟?？偭鞒逃芍扑?、安瓿前處理、配料及成品四個(gè)部分組成，其中環(huán)境區(qū)域劃分為控制區(qū)與潔凈區(qū)。第6章滅菌制劑和無菌制劑注射劑生產(chǎn)工藝流程圖第6章滅菌制劑和無菌制劑(二)注射用水的制備注射用水的工藝過程:(1)原水處理自來水細(xì)過濾電滲析或反滲透裝置陽離子樹脂床脫氣塔陰離子樹脂床混合樹脂床。(2)蒸餾法制備多效蒸餾水機(jī)或氣壓式蒸餾水機(jī)熱貯水器(80℃)

注射用水(應(yīng)在80℃以上或在4℃以下或滅菌后密封保存，或65℃以上保溫循環(huán)存放)。第6章滅菌制劑和無菌制劑(1)原水處理原水處理處理方法有離子交換法、電滲析法及反滲透法。①離子交換法：利用陽、陰離子樹脂可以除去絕大部分陽、陰離子，對(duì)熱原、細(xì)菌也有一定的清除作用。其主要優(yōu)點(diǎn)是水質(zhì)化學(xué)純度高，所需設(shè)備簡(jiǎn)單，耗能小，成本低。離子交換法處理原水的工藝，一般可采用陽床、陰床、混合床的組合形式。第6章滅菌制劑和無菌制劑混合樹脂床串聯(lián)第6章滅菌制劑和無菌制劑②電滲析法依據(jù)在電場(chǎng)作用下離子定向遷移及交換膜的選擇性透過而設(shè)計(jì)，即陽離子交換膜裝在陰極端，顯示強(qiáng)烈的負(fù)電場(chǎng)，只允許陽離子通過；陰離子交換膜裝在陽極端，顯示強(qiáng)烈的正電場(chǎng)，只允許陰離子通過。當(dāng)原水含鹽量高達(dá)3000mg/L時(shí)，不宜采用離子交換法制備純化水，但電滲析法仍適用。它不用酸堿處理，較離子交換法經(jīng)濟(jì)。第6章滅菌制劑和無菌制劑負(fù)極陽離子膜淡水陰離子膜正極鹽水+——+++————++鹽水電滲析法原理第6章滅菌制劑和無菌制劑③反滲透法(reverseosmosis)一般情況下，一級(jí)反滲透裝置能除去一價(jià)離子90-95%，二價(jià)離子98-99%，同時(shí)能除去微生物和病毒，但除去氯離子的能力達(dá)不到藥典要求；二級(jí)反滲透裝置能徹底除去氯離子。有機(jī)物的排除率與其分子量有關(guān)，分子量大于300的化合物幾乎全部除盡，故可除去熱原。反滲透法除去有機(jī)物微粒、膠體物質(zhì)和微生物的原理，一般認(rèn)為是機(jī)械過篩作用。反滲透法制備注射用水的膜材：醋酸纖維膜和聚酰胺膜。第6章滅菌制劑和無菌制劑純水鹽溶液1.醋酸纖維素膜2.聚酰胺膜反滲透法圖示施加的外壓力第6章滅菌制劑和無菌制劑(2)蒸餾法主要有塔式和亭式蒸餾水器、多效蒸餾水器和氣壓式蒸餾水器。第6章滅菌制劑和無菌制劑第6章滅菌制劑和無菌制劑(三)熱原1、定義熱原(pyrogen)是注射后能引起人體特殊致熱反應(yīng)的物質(zhì)，是微生物的一種內(nèi)毒素(endotoxin)，存在于細(xì)菌的細(xì)胞膜和固體膜之間，是由磷脂、脂多糖(lipopolysaccharide)和蛋白質(zhì)所組成的復(fù)合物。致熱能力最強(qiáng)的是革蘭氏陰性桿菌，大致可認(rèn)為熱原=內(nèi)毒素=脂多糖，分子量一般為1106左右。第6章滅菌制劑和無菌制劑2、熱原的性質(zhì)(1)水溶性：能溶于水。(2)耐熱性：60℃，1h不受影響，100℃也不分解，但在250℃，30-45min；200℃，60min；或180℃，3-4h可使熱原徹底破壞。在通常注射劑的熱壓滅菌中熱原不易被破壞。第6章滅菌制劑和無菌制劑(3)過濾性：熱原體積小，約1-5nm，一般濾器均可通過，即使微孔濾膜，也不能截留，但可被活性碳吸附。(4)不揮發(fā)性：本身不揮發(fā)，但可隨水蒸氣中的霧滴帶入蒸餾水。(5)其他：能被強(qiáng)酸強(qiáng)堿破壞，也能被強(qiáng)氧化劑，如高錳酸鉀或過氧化氫等破壞，超聲波及某些表面活性劑如去氧膽酸鈉也能使之破壞。第6章滅菌制劑和無菌制劑3、熱原的主要污染途徑(1)注射用水：是熱原污染的主要來源；(2)原輔料；(3)容器、用具、管道與設(shè)備等；(4)制備過程與生產(chǎn)環(huán)境；(5)輸液器具。第6章滅菌制劑和無菌制劑4、熱原的去除方法(1)高溫法：250℃，30min以上。(2)酸堿法：重鉻酸鉀硫酸清洗液或稀氫氧化鈉液。(3)吸附法：活性碳用量0.05~0.5%(w/v)。(4)離子交換：10%#301弱堿性陰離子交換樹脂和8%#122弱酸性陽離子交換樹脂，可除去丙球注射液中熱原。(5)凝膠過濾法：二乙氨基乙基葡聚糖凝膠(分子篩)。(6)反滲透法：通過三醋酸纖維膜除去熱原。(7)超濾法：3.0~15nm超濾膜。(8)其他方法：如二次以上濕熱滅菌，或適當(dāng)提高滅菌溫度和時(shí)間，以及微波等。第6章滅菌制劑和無菌制劑(四)注射劑的配制步驟1、原料的準(zhǔn)備計(jì)算原料用量稱量(兩人核對(duì))，可酌情增加投料量。原料(附加劑)實(shí)際用量=原料(附加劑)理論用量原料成品標(biāo)示量百分?jǐn)?shù)/原料(附加劑)實(shí)際含量原料(附加劑)用量=實(shí)際配液量成品含量％實(shí)際配液量=實(shí)際灌注量＋實(shí)際灌注時(shí)損耗量第6章滅菌制劑和無菌制劑2、注射容器的處理(1)安瓿的種類和式樣制造安瓿的玻璃：①硬質(zhì)中性玻璃(低硼酸硅鹽玻璃，化學(xué)穩(wěn)定性好，適合近中性或弱酸性的注射劑)；②含鋇玻璃(耐堿性好，適合堿性較強(qiáng)的注射劑，如磺胺嘧啶鈉注射液)；③含鋯玻璃(具有更高的化學(xué)穩(wěn)定性，耐酸、堿性能好，可盛乳酸鈉、碘化鈉、酒石酸銻鈉等)。第6章滅菌制劑和無菌制劑安瓿式樣采用有頸安瓿和粉末安瓿，規(guī)格分1、2、5、10、20ml。國(guó)標(biāo)GB2637-1995規(guī)定水針劑使用的安瓿一律為曲頸易折安瓿。易折安瓿分色環(huán)易折安瓿和點(diǎn)刻痕易折安瓿。兩室注射容器：下隔室裝無菌粉末，上隔室盛溶劑，中間用特制的隔膜分開。第6章滅菌制劑和無菌制劑(2)安瓿的質(zhì)量要求①應(yīng)無色透明；②應(yīng)具有低的膨脹系數(shù)、優(yōu)良的耐熱性；③熔點(diǎn)低；④不得有氣泡、麻點(diǎn)及砂粒；⑤應(yīng)具有足夠的物理強(qiáng)度；⑥應(yīng)具有高度的化學(xué)穩(wěn)定性。第6章滅菌制劑和無菌制劑(3)安瓿的檢查物理檢查：外觀、尺寸、應(yīng)力、清潔度、物理穩(wěn)定性等。化學(xué)檢查：耐酸、堿性和中性檢查。裝藥試驗(yàn)：安瓿與藥液的相容性。(4)安瓿的切割和圓口第6章滅菌制劑和無菌制劑(5)安瓿的洗滌一般用離子交換水灌瓶蒸煮；質(zhì)量較差的用0.5%醋酸水溶液。安瓿洗滌設(shè)備：噴淋式、超聲波和氣水噴射式安瓿洗滌機(jī)組。第6章滅菌制劑和無菌制劑加壓噴射氣水洗滌機(jī)第6章滅菌制劑和無菌制劑(6)安瓿的干燥和滅菌一般置于120-140℃干燥；180℃，1.5h干熱滅菌。一般350℃經(jīng)5min，能達(dá)到安瓿滅菌目的。大生產(chǎn)中多采用隧道式烘箱，主要由紅外線發(fā)射裝置和安瓿傳送裝置組成。滅菌好的空安瓿存放柜應(yīng)有凈化空氣保護(hù)，安瓿存放時(shí)間不應(yīng)超過24小時(shí)。第6章滅菌制劑和無菌制劑隧道式紅外線干燥箱第6章滅菌制劑和無菌制劑3、注射液的配制(1)配制用具的選擇與處理常用裝有攪拌器的夾層鍋配液，以便加熱或冷卻。配制用具的材料：玻璃、耐酸堿搪瓷、不銹鋼、聚乙烯等。配制濃鹽酸不宜用不銹鋼容器；需加熱的藥液不宜選用塑料容器。(2)配制方法濃配法和稀配法。第6章滅菌制劑和無菌制劑(3)注意事項(xiàng)①配制環(huán)境要清潔，一般并不要求無菌，但所用器具和原料及附加劑盡可能無菌；②配制劇毒藥品，嚴(yán)格稱量和核對(duì)，并謹(jǐn)防交叉污染；③對(duì)不穩(wěn)定性藥物應(yīng)注意調(diào)配順序，有時(shí)還要控制溫度和避光操作；④對(duì)不易濾清的藥液可加入0.1-0.3%的活性碳處理，小量注射液可用紙漿處理；第6章滅菌制劑和無菌制劑使用活性炭時(shí)要注意其對(duì)藥物的吸附作用，特別對(duì)小劑量藥物如生物堿等的吸附，要通過加炭前后藥物含量的變化，確定能否使用?；钚蕴吭谒嵝匀芤褐形阶饔脧?qiáng)，在堿性溶液中有時(shí)出現(xiàn)“膠溶”或脫吸附作用，反而使雜質(zhì)增多，故活性炭最好用酸處理并活化后使用。第6章滅菌制劑和無菌制劑⑤注射用油要在150~160℃，1~2小時(shí)滅菌，冷卻后使用。⑥藥液配好后，要進(jìn)行半成品測(cè)定，一般主要包括pH、含量等項(xiàng)，合格后才能濾過灌封。第6章滅菌制劑和無菌制劑4、注射液的過濾注射液過濾常用的濾器有垂熔玻璃濾器、砂濾棒、板框壓濾器、膜濾器等。在注射液生產(chǎn)中，一般采用二級(jí)過濾。預(yù)濾(砂濾棒、垂熔玻璃漏斗、板框式壓濾機(jī)或預(yù)濾膜)→精濾(濾膜)。第6章滅菌制劑和無菌制劑5、注射液的灌封(100級(jí))封口有拉封和頂封，主張拉封(對(duì)藥液影響小)。灌封操作分手工灌封和機(jī)械灌封。注意事項(xiàng)：劑量準(zhǔn)確；藥液不沾瓶；通惰性氣體時(shí)既不能使藥液濺至瓶頸，又使安瓿空間空氣除盡。出現(xiàn)問題：劑量不準(zhǔn)；封口不嚴(yán)；出現(xiàn)大頭、焦頭、癟頭、爆頭等。第6章滅菌制劑和無菌制劑常用的惰性氣體有氮?dú)夂投趸?。高純度的氮?dú)饪刹唤?jīng)處理，純度差的氮?dú)饪上韧ㄟ^緩沖瓶，然后經(jīng)硫酸、堿性焦性沒食子酸、1%高錳酸鉀溶液處理。二氧化碳可用裝有濃硫酸、硫酸銅溶液、1%高錳酸鉀溶液與50%甘油溶液的洗氣瓶處理。通氣時(shí)安瓿先通氣，再灌注藥液，最后又通氣。通氣效果，可用測(cè)氧儀進(jìn)行殘余氧氣的測(cè)定。第6章滅菌制劑和無菌制劑6、滅菌與檢漏一般1~5ml安瓿可用流動(dòng)蒸汽100℃30min滅菌；10~20ml安瓿使用100℃45min滅菌。凡能耐熱產(chǎn)品，宜采用115℃30min滅菌。要求按滅菌效果F0大于8進(jìn)行檢驗(yàn)收。檢漏一般應(yīng)用滅菌檢漏兩用器。第6章滅菌制劑和無菌制劑五、注射劑的質(zhì)量檢查1、澄明度檢查原因：微粒堵塞毛細(xì)血管形成血栓方法：目力檢查法和全自動(dòng)機(jī)檢法問題：白點(diǎn)多由原料或安瓿產(chǎn)生；纖維多因環(huán)境污染所致；玻璃屑往往由圓口和灌封不當(dāng)所致。第6章滅菌制劑和無菌制劑傘棚式安瓿檢查燈

1白色底板2黑色背景3日光燈

傘棚式安瓿檢查燈第6章滅菌制劑和無菌制劑2、熱原檢查原因：熱原體溫異常升高方法：家兔法(藥典法定方法)和鱟試驗(yàn)法(limuluslysatetest)鱟試驗(yàn)法原理是利用鱟(limuspolyphemus)的變形細(xì)胞溶解物(amebecytelysate)與內(nèi)毒素間的凝聚反應(yīng)。第6章滅菌制劑和無菌制劑鱟試驗(yàn)法比家兔法靈敏度高，操作簡(jiǎn)單，實(shí)驗(yàn)費(fèi)用少；特別適用于某些不能用家兔進(jìn)行的熱原檢測(cè)的品種，如放射性制劑、腫瘤抑制劑等。但由于對(duì)革蘭陰性菌以外的內(nèi)毒素不夠靈敏，尚不能取代家兔的熱原試驗(yàn)法。第6章滅菌制劑和無菌制劑3、無菌檢查任何注射劑在滅菌操作完成后，必須抽出一定數(shù)量的樣品進(jìn)行無菌試驗(yàn)，以檢查制品的滅菌質(zhì)量。通過無菌操作