醫(yī)學檢驗技術(shù)作業(yè)指導(dǎo)書TOC\o"1-2"\h\u26783第一章檢驗技術(shù)概述 310761.1檢驗技術(shù)的發(fā)展歷程 454641.2檢驗技術(shù)的分類與特點 4112532.1微生物學檢驗技術(shù) 4268612.2生物化學檢驗技術(shù) 4211922.3免疫學檢驗技術(shù) 424012.4分子生物學檢驗技術(shù) 417872第二章標本采集與處理 5311732.1標本采集的原則與方法 5174832.1.1標本采集原則 528032.1.2標本采集方法 5307222.2標本保存與運輸 647912.2.1標本保存 6281922.2.2標本運輸 696602.3標本處理與分析 6317622.3.1標本處理 6126712.3.2標本分析 66173第三章血液學檢驗技術(shù) 6325143.1血常規(guī)檢驗 6112013.1.1檢驗?zāi)康?6113083.1.2檢驗方法 6220583.1.3檢驗項目 7227583.1.4注意事項 718543.2血型鑒定與交叉配血 7282893.2.1檢驗?zāi)康?7245863.2.2檢驗方法 7232703.2.3檢驗項目 7275453.2.4注意事項 898833.3血液生化檢驗 870323.3.1檢驗?zāi)康?8173183.3.2檢驗方法 834503.3.3檢驗項目 894283.3.4注意事項 93190第四章尿液檢驗技術(shù) 9266084.1尿液理學檢驗 930914.1.1尿量測定 9294164.1.2尿液顏色與透明度觀察 981624.1.3尿液比重測量 989534.1.4尿液酸堿度測定 9123714.2尿液化學檢驗 9261984.2.1尿液蛋白質(zhì)檢測 1010984.2.2尿糖檢測 1071424.2.3尿酮體檢測 10113564.2.4尿膽原和尿膽紅素檢測 10128094.3尿液沉渣檢驗 1012814.3.1尿液沉渣鏡檢 1011664.3.2尿液沉渣自動化檢測 1028472第五章糞便檢驗技術(shù) 10151605.1糞便理學檢驗 1070265.1.1概述 10136985.1.2糞便外觀檢查 11247755.1.3糞便量測定 11137075.1.4糞便比重測定 11109335.2糞便化學檢驗 11192755.2.1概述 1166525.2.2糞便隱血試驗 11190715.2.3糞便膽色素測定 1164965.2.4糞便脂肪測定 11104825.3糞便寄生蟲檢驗 12279775.3.1概述 12204915.3.2糞便原蟲檢驗 12157765.3.3糞便蠕蟲檢驗 12966第六章生化檢驗技術(shù) 12213366.1血清生化檢驗 12211246.1.1概述 12203606.1.2檢驗方法 12236416.1.3注意事項 1340926.2尿液生化檢驗 13301426.2.1概述 13219286.2.2檢驗方法 1322526.2.3注意事項 1390636.3組織勻漿生化檢驗 13290446.3.1概述 13163546.3.2檢驗方法 13133886.3.3注意事項 1323453第七章免疫學檢驗技術(shù) 14114977.1免疫熒光檢驗 1493377.1.1概述 14306857.1.2原理 1466977.1.3操作步驟 14158247.2酶聯(lián)免疫吸附試驗 14213557.2.1概述 14287587.2.2原理 1487187.2.3操作步驟 15200737.3時間分辨熒光免疫分析 15133137.3.1概述 15301257.3.2原理 155127.3.3操作步驟 1512014第八章分子生物學檢驗技術(shù) 1583568.1核酸提取與純化 15223898.1.1概述 15283728.1.2方法 1656778.1.3注意事項 16135548.2聚合酶鏈反應(yīng) 16170618.2.1概述 1687588.2.2方法 16218788.2.3注意事項 16169138.3基因測序技術(shù) 17134678.3.1概述 1745068.3.2方法 179518.3.3注意事項 1723875第九章微生物學檢驗技術(shù) 1780339.1細菌檢驗 1744699.1.1概述 17255749.1.2細菌檢驗基本流程 17155479.1.3細菌檢驗注意事項 1890069.2病毒檢驗 18145089.2.1概述 1827199.2.2病毒檢驗基本流程 18221929.2.3病毒檢驗注意事項 183049.3真菌檢驗 1862209.3.1概述 1818079.3.2真菌檢驗基本流程 19303839.3.3真菌檢驗注意事項 1911144第十章檢驗結(jié)果分析與報告 19703710.1檢驗結(jié)果的判讀與分析 19488010.1.1檢驗結(jié)果的判讀 191566910.1.2檢驗結(jié)果的分析 19578310.2檢驗報告的撰寫與審核 19913710.2.1檢驗報告的撰寫 19373310.2.2檢驗報告的審核 191574110.3檢驗結(jié)果的質(zhì)量控制與改進 201215210.3.1檢驗結(jié)果的質(zhì)量控制 201360110.3.2檢驗結(jié)果的改進 20第一章檢驗技術(shù)概述1.1檢驗技術(shù)的發(fā)展歷程檢驗技術(shù)在醫(yī)學領(lǐng)域的發(fā)展歷史悠久，其起源可以追溯到古代醫(yī)學實踐。在我國，早在公元前，醫(yī)學家們就已經(jīng)開始使用簡單的檢驗方法，如觀察尿液、糞便等排泄物來診斷疾病?？茖W技術(shù)的發(fā)展，檢驗技術(shù)逐漸從簡單的觀察法發(fā)展至更為精確的實驗方法。從20世紀初開始，檢驗技術(shù)進入了一個新的發(fā)展階段。微生物學、生物化學、免疫學等學科的興起，為檢驗技術(shù)的發(fā)展提供了理論依據(jù)。20世紀50年代，自動化分析儀器和生物技術(shù)的應(yīng)用，使得檢驗技術(shù)得到了飛速發(fā)展。進入21世紀，分子生物學、生物信息學等領(lǐng)域的不斷突破，為檢驗技術(shù)的發(fā)展注入了新的活力。1.2檢驗技術(shù)的分類與特點檢驗技術(shù)按照檢測對象和檢測方法的不同，可分為以下幾類：2.1微生物學檢驗技術(shù)微生物學檢驗技術(shù)主要用于檢測病原微生物，包括細菌、真菌、病毒等。這類檢驗技術(shù)具有高度特異性，能夠準確判斷病原體的種類，為臨床治療提供依據(jù)。2.2生物化學檢驗技術(shù)生物化學檢驗技術(shù)通過對生物體內(nèi)各種化學成分的定量分析，反映機體的生理和病理狀態(tài)。這類檢驗技術(shù)具有廣泛的應(yīng)用范圍，包括血糖、血脂、肝功能、腎功能等檢測項目。2.3免疫學檢驗技術(shù)免疫學檢驗技術(shù)是利用抗原抗體反應(yīng)原理，檢測體內(nèi)免疫相關(guān)物質(zhì)的方法。這類檢驗技術(shù)具有較高的靈敏度和特異性，常用于病毒、細菌、腫瘤標志物等檢測。2.4分子生物學檢驗技術(shù)分子生物學檢驗技術(shù)基于分子生物學原理，對生物體的基因、蛋白質(zhì)等分子進行檢測。這類檢驗技術(shù)具有高靈敏度、高特異性、高通量等特點，為疾病診斷、治療和預(yù)防提供了有力支持。檢驗技術(shù)的特點主要包括：（1）高度特異性：檢驗技術(shù)能夠準確識別檢測對象，為臨床診斷提供可靠依據(jù)。（2）高靈敏度：檢驗技術(shù)對檢測對象具有極高的敏感度，能夠檢測到低濃度的目標物質(zhì)。（3）快速準確：自動化儀器的應(yīng)用，檢驗技術(shù)能夠在短時間內(nèi)完成大量檢測任務(wù)，提高診斷效率。（4）廣泛應(yīng)用：檢驗技術(shù)在臨床醫(yī)學、預(yù)防醫(yī)學、法醫(yī)學等多個領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。（5）發(fā)展迅速：科學技術(shù)的不斷進步，檢驗技術(shù)不斷涌現(xiàn)出新的方法和手段，為醫(yī)學發(fā)展注入新的活力。，第二章標本采集與處理2.1標本采集的原則與方法2.1.1標本采集原則標本采集是醫(yī)學檢驗技術(shù)中的環(huán)節(jié)，其原則包括以下幾點：（1）合法性原則：采集標本需遵循相關(guān)法律法規(guī)，保證患者的合法權(quán)益。（2）準確性原則：保證采集的標本真實、準確，避免因操作失誤導(dǎo)致的檢驗結(jié)果失真。（3）及時性原則：及時采集標本，避免因時間拖延導(dǎo)致標本變質(zhì)、污染等。（4）無菌操作原則：在采集過程中，嚴格遵循無菌操作規(guī)程，避免標本污染。2.1.2標本采集方法（1）血液標本采集：包括靜脈血、動脈血、毛細血管血等。采集時，應(yīng)根據(jù)檢驗項目要求選擇合適的采集部位和采血量。（2）尿液標本采集：根據(jù)檢驗?zāi)康?，可采用隨機尿、晨尿、24小時尿等。采集時，應(yīng)保證尿液標本清潔、新鮮。（3）糞便標本采集：采集時應(yīng)注意選取糞便的代表性部分，避免污染。（4）分泌物標本采集：如痰液、前列腺液等，采集時需注意無菌操作。（5）組織標本采集：包括活檢、手術(shù)切除等，采集時應(yīng)遵循無菌操作原則，并保證組織新鮮。2.2標本保存與運輸2.2.1標本保存（1）血液標本：采集后應(yīng)及時分離血清或血漿，低溫保存。（2）尿液標本：采集后應(yīng)在2小時內(nèi)送檢，若不能及時送檢，需冷藏保存。（3）糞便標本：采集后應(yīng)在1小時內(nèi)送檢，若不能及時送檢，需冷藏保存。（4）分泌物標本：采集后應(yīng)及時送檢，避免污染。（5）組織標本：采集后應(yīng)在2小時內(nèi)送檢，若不能及時送檢，需低溫保存。2.2.2標本運輸（1）血液標本：采用專用采血管采集，密封良好，避免震蕩。（2）尿液、糞便、分泌物標本：采用專用容器收集，密封良好，避免污染。（3）組織標本：采用專用容器收集，密封良好，低溫運輸。2.3標本處理與分析2.3.1標本處理（1）血液標本：分離血清或血漿，進行相關(guān)檢驗項目。（2）尿液、糞便、分泌物標本：進行相關(guān)檢驗項目。（3）組織標本：進行病理切片、免疫組化等檢驗項目。2.3.2標本分析（1）血液標本：分析血液常規(guī)、生化、免疫等指標。（2）尿液標本：分析尿液常規(guī)、尿蛋白、尿糖等指標。（3）糞便標本：分析糞便常規(guī)、糞便潛血等指標。（4）分泌物標本：分析分泌物常規(guī)、微生物培養(yǎng)等指標。（5）組織標本：分析組織結(jié)構(gòu)、細胞形態(tài)等指標。第三章血液學檢驗技術(shù)3.1血常規(guī)檢驗3.1.1檢驗?zāi)康难Ｒ?guī)檢驗是對血液中紅細胞、白細胞、血紅蛋白、血小板等基本參數(shù)進行檢測，以評估患者的健康狀況和疾病發(fā)展情況。3.1.2檢驗方法血常規(guī)檢驗通常采用自動化血液分析儀進行，包括以下步驟：（1）樣本采集：采用真空采血管采集患者靜脈血液。（2）樣本處理：將采集的血液樣本進行離心，分離血漿和血細胞。（3）檢測：將處理后的血液樣本放入自動化血液分析儀進行檢測。3.1.3檢驗項目血常規(guī)檢驗主要包括以下項目：（1）紅細胞計數(shù)（RBC）（2）血紅蛋白濃度（HGB）（3）白細胞計數(shù)（WBC）（4）血小板計數(shù)（PLT）（5）紅細胞壓積（HCT）（6）平均紅細胞體積（MCV）（7）平均紅細胞血紅蛋白含量（MCH）（8）平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）3.1.4注意事項進行血常規(guī)檢驗時，應(yīng)注意以下事項：（1）保證采血過程順利，避免溶血。（2）樣本采集后盡快進行檢測，以免影響檢測結(jié)果。（3）分析儀器應(yīng)定期進行校準，保證檢測準確性。3.2血型鑒定與交叉配血3.2.1檢驗?zāi)康难丸b定與交叉配血是為了保證輸血安全，防止輸血過程中發(fā)生不良反應(yīng)。3.2.2檢驗方法血型鑒定與交叉配血主要包括以下步驟：（1）樣本采集：分別采集患者和供血者的靜脈血液。（2）血型鑒定：采用凝集反應(yīng)法、免疫學法等方法進行ABO血型和Rh血型的鑒定。（3）交叉配血：將患者和供血者的紅細胞與血清進行交叉配血試驗。3.2.3檢驗項目血型鑒定與交叉配血主要包括以下項目：（1）ABO血型鑒定（2）Rh血型鑒定（3）交叉配血試驗3.2.4注意事項進行血型鑒定與交叉配血時，應(yīng)注意以下事項：（1）保證采血過程順利，避免溶血。（2）樣本采集后盡快進行檢測，以免影響檢測結(jié)果。（3）嚴格遵守操作規(guī)程，保證檢測準確性。3.3血液生化檢驗3.3.1檢驗?zāi)康难荷瘷z驗是對血液中的各種生化指標進行檢測，以評估患者的生理功能和疾病狀態(tài)。3.3.2檢驗方法血液生化檢驗通常采用自動化生化分析儀進行，包括以下步驟：（1）樣本采集：采用真空采血管采集患者靜脈血液。（2）樣本處理：將采集的血液樣本進行離心，分離血清。（3）檢測：將處理后的血清樣本放入自動化生化分析儀進行檢測。3.3.3檢驗項目血液生化檢驗主要包括以下項目：（1）血糖（GLU）（2）尿素氮（BUN）（3）肌酐（CR）（4）總蛋白（TP）（5）白蛋白（ALB）（6）球蛋白（GLB）（7）膽固醇（CHOL）（8）甘油三酯（TG）（9）高密度脂蛋白膽固醇（HDLC）（10）低密度脂蛋白膽固醇（LDLC）（11）谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）（12）谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）（13）堿性磷酸酶（ALP）（14）γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT）3.3.4注意事項進行血液生化檢驗時，應(yīng)注意以下事項：（1）保證采血過程順利，避免溶血。（2）樣本采集后盡快進行檢測，以免影響檢測結(jié)果。（3）分析儀器應(yīng)定期進行校準，保證檢測準確性。第四章尿液檢驗技術(shù)4.1尿液理學檢驗?zāi)蛞豪韺W檢驗主要包括尿量的測定、尿液顏色與透明度的觀察、尿液比重的測量以及尿液的酸堿度測定等。4.1.1尿量測定尿量測定是尿液理學檢驗的基礎(chǔ)項目，通常采用尿量計進行測量。測量時，需保證尿液容器清潔，尿液無損失，且在規(guī)定時間內(nèi)完成測定。4.1.2尿液顏色與透明度觀察尿液顏色與透明度觀察是通過肉眼觀察尿液的外觀特征。正常尿液呈淡黃色，透明。尿液顏色的改變可能受到食物、藥物等因素的影響，而尿液透明度的改變可能提示泌尿系統(tǒng)疾病。4.1.3尿液比重測量尿液比重測量是反映尿液濃縮稀釋程度的重要指標。測量方法有尿比重計法、折射儀法等。正常尿液比重為1.0101.030。尿比重異?？赡芴崾灸I臟功能異常。4.1.4尿液酸堿度測定尿液酸堿度測定是了解尿液酸堿平衡的重要手段。常用方法有pH試紙法、酸堿度計法等。正常尿液pH值為5.07.0。尿液酸堿度的改變可能反映腎臟疾病或其他系統(tǒng)性疾病。4.2尿液化學檢驗?zāi)蛞夯瘜W檢驗主要包括尿液蛋白質(zhì)、尿糖、尿酮體、尿膽原、尿膽紅素等項目的檢測。4.2.1尿液蛋白質(zhì)檢測尿液蛋白質(zhì)檢測是了解腎臟濾過功能的重要指標。常用方法有尿蛋白定性試驗和尿蛋白定量試驗。正常尿液蛋白質(zhì)排泄量為0150mg/24h。尿蛋白異常可能提示腎臟疾病。4.2.2尿糖檢測尿糖檢測是了解血糖控制情況的重要手段。常用方法有尿糖定性試驗和尿糖定量試驗。正常尿液尿糖含量為00.5g/24h。尿糖異?？赡芴崾咎悄虿〉燃膊?。4.2.3尿酮體檢測尿酮體檢測是了解糖代謝狀況的重要指標。常用方法為尿酮體試紙法。正常尿液尿酮體含量為陰性。尿酮體陽性可能提示糖尿病酮癥酸中毒等疾病。4.2.4尿膽原和尿膽紅素檢測尿膽原和尿膽紅素檢測是了解肝臟功能和膽道系統(tǒng)疾病的重要手段。常用方法為尿膽原和尿膽紅素試紙法。正常尿液尿膽原和尿膽紅素含量為陰性。尿膽原和尿膽紅素異常可能提示肝臟疾病或膽道系統(tǒng)疾病。4.3尿液沉渣檢驗?zāi)蛞撼猎鼨z驗是對尿液中的有形成分進行觀察和分析，以了解泌尿系統(tǒng)疾病的重要手段。4.3.1尿液沉渣鏡檢尿液沉渣鏡檢是將尿液離心后，取沉渣進行顯微鏡觀察。正常尿液沉渣鏡檢可見少量紅細胞、白細胞、上皮細胞等。尿液沉渣異?？赡芴崾久谀蛳到y(tǒng)疾病。4.3.2尿液沉渣自動化檢測尿液沉渣自動化檢測是利用尿液沉渣分析儀對尿液沉渣進行檢測。尿液沉渣自動化檢測具有快速、準確、重復(fù)性好的特點，有助于提高尿液檢驗的效率和準確性。第五章糞便檢驗技術(shù)5.1糞便理學檢驗5.1.1概述糞便理學檢驗是通過對糞便的形態(tài)、顏色、氣味等外觀特征及含量指標進行觀察和測量，以了解消化系統(tǒng)的功能狀態(tài)和疾病情況。糞便理學檢驗主要包括糞便外觀檢查、糞便量測定、糞便比重測定等。5.1.2糞便外觀檢查糞便外觀檢查主要包括顏色、形狀、氣味等方面的觀察。正常糞便呈黃色或黃褐色，形狀為圓柱形，質(zhì)地軟硬適中，氣味呈臭味。異常糞便可能表現(xiàn)為以下幾種情況：1）黑色糞便：見于上消化道出血、服用活性炭等。2）紅色糞便：見于下消化道出血、食用大量紅色食物等。3）白色糞便：見于膽道阻塞、服用某些藥物等。4）黏液便：見于腸道炎癥、細菌性痢疾等。5）膿血便：見于急性細菌性痢疾、潰瘍性結(jié)腸炎等。5.1.3糞便量測定正常成人每日排便量為100200g。糞便量增多見于消化不良、急性腸炎等；糞便量減少見于便秘、腸道狹窄等。5.1.4糞便比重測定正常糞便比重為1.0251.035。糞便比重降低見于消化不良、腹瀉等；糞便比重升高見于便秘、腸道狹窄等。5.2糞便化學檢驗5.2.1概述糞便化學檢驗是通過檢測糞便中的化學成分，了解消化系統(tǒng)功能狀態(tài)及疾病情況。主要包括糞便隱血試驗、糞便膽色素測定、糞便脂肪測定等。5.2.2糞便隱血試驗糞便隱血試驗用于檢測糞便中是否存在微量血液。陽性結(jié)果提示消化道出血，見于消化性潰瘍、腫瘤、炎癥等。5.2.3糞便膽色素測定糞便膽色素測定用于了解膽道功能。正常糞便中膽紅素含量約為100mg/100g。膽色素含量升高見于溶血性疾病、膽道阻塞等；膽色素含量降低見于膽道狹窄、膽汁淤積等。5.2.4糞便脂肪測定糞便脂肪測定用于了解脂肪消化吸收功能。正常糞便中脂肪含量約為10g/100g。脂肪含量升高見于消化不良、膽道疾病等；脂肪含量降低見于營養(yǎng)不良、吸收不良等。5.3糞便寄生蟲檢驗5.3.1概述糞便寄生蟲檢驗是通過檢測糞便中的寄生蟲及其卵，了解人體感染寄生蟲的情況。主要包括糞便原蟲檢驗、糞便蠕蟲檢驗等。5.3.2糞便原蟲檢驗糞便原蟲檢驗主要用于檢測糞便中原蟲滋養(yǎng)體、包囊等。常見原蟲有阿米巴滋養(yǎng)體、隱孢子蟲等。陽性結(jié)果提示感染相應(yīng)原蟲。5.3.3糞便蠕蟲檢驗糞便蠕蟲檢驗主要用于檢測糞便中蠕蟲蟲卵、成蟲等。常見蠕蟲有鉤蟲、蛔蟲、絳蟲等。陽性結(jié)果提示感染相應(yīng)蠕蟲。糞便蠕蟲檢驗有助于臨床診斷和治療寄生蟲病。第六章生化檢驗技術(shù)6.1血清生化檢驗6.1.1概述血清生化檢驗是醫(yī)學檢驗技術(shù)中的一項重要內(nèi)容，主要用于檢測血清中的各種生物化學成分，包括蛋白質(zhì)、糖類、脂質(zhì)、酶類等。通過對血清生化指標的檢測，可以了解患者的生理和病理狀態(tài)，為臨床診斷和治療提供重要依據(jù)。6.1.2檢驗方法（1）蛋白質(zhì)測定：包括總蛋白、白蛋白、球蛋白等指標的測定。常用的方法有凱氏定氮法、雙縮脲法等。（2）糖類測定：包括血糖、糖化血紅蛋白等指標的測定。常用的方法有酶聯(lián)免疫吸附法、葡萄糖氧化酶法等。（3）脂質(zhì)測定：包括總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇等指標的測定。常用的方法有酶聯(lián)免疫吸附法、高效液相色譜法等。（4）酶類測定：包括谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶等指標的測定。常用的方法有連續(xù)監(jiān)測法、酶聯(lián)免疫吸附法等。6.1.3注意事項（1）采集樣本時，應(yīng)保證樣本新鮮、無污染。（2）檢測過程中，應(yīng)嚴格遵守操作規(guī)程，保證檢驗結(jié)果的準確性。（3）對于異常結(jié)果，應(yīng)進行復(fù)檢，以排除檢驗過程中的誤差。6.2尿液生化檢驗6.2.1概述尿液生化檢驗是對尿液中的生物化學成分進行檢測，以了解腎臟功能和全身代謝狀況。尿液生化檢驗主要包括蛋白質(zhì)、糖類、尿酸、尿素等指標的測定。6.2.2檢驗方法（1）蛋白質(zhì)測定：采用沉淀法、比色法等。（2）糖類測定：采用葡萄糖氧化酶法、酶聯(lián)免疫吸附法等。（3）尿酸測定：采用尿酸酶法、比色法等。（4）尿素測定：采用酶聯(lián)免疫吸附法、高效液相色譜法等。6.2.3注意事項（1）采集尿液樣本時，應(yīng)保證尿液新鮮、無污染。（2）檢測過程中，應(yīng)嚴格遵守操作規(guī)程，保證檢驗結(jié)果的準確性。（3）對于異常結(jié)果，應(yīng)進行復(fù)檢，以排除檢驗過程中的誤差。6.3組織勻漿生化檢驗6.3.1概述組織勻漿生化檢驗是對生物組織中的生物化學成分進行檢測，以了解組織的生理和病理狀態(tài)。組織勻漿生化檢驗主要包括蛋白質(zhì)、糖類、脂質(zhì)、酶類等指標的測定。6.3.2檢驗方法（1）蛋白質(zhì)測定：采用凱氏定氮法、雙縮脲法等。（2）糖類測定：采用酶聯(lián)免疫吸附法、葡萄糖氧化酶法等。（3）脂質(zhì)測定：采用酶聯(lián)免疫吸附法、高效液相色譜法等。（4）酶類測定：采用連續(xù)監(jiān)測法、酶聯(lián)免疫吸附法等。6.3.3注意事項（1）采集組織樣本時，應(yīng)保證樣本新鮮、無污染。（2）檢測過程中，應(yīng)嚴格遵守操作規(guī)程，保證檢驗結(jié)果的準確性。（3）對于異常結(jié)果，應(yīng)進行復(fù)檢，以排除檢驗過程中的誤差。第七章免疫學檢驗技術(shù)7.1免疫熒光檢驗7.1.1概述免疫熒光檢驗技術(shù)是將免疫學原理與熒光標記技術(shù)相結(jié)合的一種檢測方法，主要用于檢測細胞表面抗原、細胞內(nèi)抗原及組織中抗原抗體反應(yīng)。該方法具有靈敏度高、特異性好、快速簡便等優(yōu)點，在臨床檢驗、疾病診斷和科學研究等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。7.1.2原理免疫熒光檢驗技術(shù)的基本原理是利用熒光標記的抗體與待測抗原發(fā)生特異性結(jié)合，形成抗原抗體復(fù)合物，通過熒光顯微鏡觀察或熒光檢測儀器檢測，從而確定抗原的存在和分布。7.1.3操作步驟（1）樣品制備：將待測樣品進行適當?shù)念A(yù)處理，如細胞涂片、組織切片等。（2）熒光標記抗體：根據(jù)待測抗原選擇相應(yīng)的熒光標記抗體。（3）抗原抗體結(jié)合：將熒光標記抗體加入樣品中，37℃孵育一定時間，使抗原與抗體充分結(jié)合。（4）洗滌：去除未結(jié)合的抗體，洗滌干凈。（5）熒光顯微鏡觀察或熒光檢測儀器檢測：觀察樣品中的熒光信號，判斷抗原的存在和分布。7.2酶聯(lián)免疫吸附試驗7.2.1概述酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）是一種基于酶標記技術(shù)的免疫學檢測方法，具有靈敏度高、特異性好、操作簡便等優(yōu)點，廣泛應(yīng)用于臨床檢驗、疾病診斷和科學研究等領(lǐng)域。7.2.2原理ELISA的基本原理是利用酶標記的抗體與待測抗原發(fā)生特異性結(jié)合，形成抗原抗體復(fù)合物，通過加入底物顯色，檢測酶活性，從而確定抗原的存在和含量。7.2.3操作步驟（1）包被抗原：將抗原固定在微孔板上，4℃過夜。（2）洗滌：去除未固定的抗原，洗滌干凈。（3）加入酶標記抗體：將酶標記抗體加入微孔板，37℃孵育一定時間。（4）洗滌：去除未結(jié)合的抗體，洗滌干凈。（5）加入底物：加入底物溶液，37℃孵育一定時間。（6）終止反應(yīng)：加入終止液，終止酶反應(yīng)。（7）檢測吸光度：用酶標儀檢測吸光度，計算抗原含量。7.3時間分辨熒光免疫分析7.3.1概述時間分辨熒光免疫分析（TRFIA）是一種基于時間分辨技術(shù)的免疫學檢測方法，具有靈敏度高、特異性好、線性范圍寬等優(yōu)點，可用于檢測微量的抗原或抗體。7.3.2原理時間分辨熒光免疫分析的基本原理是利用不同熒光標記的抗體與待測抗原發(fā)生特異性結(jié)合，通過時間分辨技術(shù)區(qū)分不同熒光標記的抗體，從而實現(xiàn)對待測抗原的定量檢測。7.3.3操作步驟（1）樣品制備：將待測樣品進行適當?shù)念A(yù)處理。（2）熒光標記抗體：選擇合適的熒光標記抗體。（3）抗原抗體結(jié)合：將熒光標記抗體加入樣品中，37℃孵育一定時間。（4）洗滌：去除未結(jié)合的抗體，洗滌干凈。（5）時間分辨熒光檢測：利用時間分辨熒光檢測儀器檢測樣品中的熒光信號，計算抗原含量。第八章分子生物學檢驗技術(shù)8.1核酸提取與純化8.1.1概述核酸提取與純化是分子生物學檢驗技術(shù)的基礎(chǔ)步驟，其主要目的是從生物樣品中分離出高質(zhì)量的核酸，為后續(xù)實驗提供可靠的模板。核酸提取與純化過程包括細胞裂解、核酸分離、去除雜質(zhì)和核酸純化等步驟。8.1.2方法（1）細胞裂解：采用物理、化學或酶法等方法破壞細胞壁和細胞膜，使核酸暴露出來。（2）核酸分離：利用核酸與蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等物質(zhì)的差異，通過離心、過濾等方法將核酸分離出來。（3）去除雜質(zhì)：采用酚/氯仿抽提、乙醇沉淀等方法去除樣品中的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等雜質(zhì)。（4）核酸純化：利用核酸純化柱、磁珠等方法進一步純化核酸，去除殘留的雜質(zhì)。8.1.3注意事項（1）樣品處理過程中要避免核酸降解。（2）選用合適的裂解方法和裂解液，保證核酸充分釋放。（3）嚴格控制實驗條件，避免核酸污染。8.2聚合酶鏈反應(yīng)8.2.1概述聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）是一種在體外條件下，通過模擬生物體內(nèi)DNA復(fù)制過程，大量擴增特定DNA片段的技術(shù)。PCR技術(shù)在分子生物學檢驗中具有重要應(yīng)用價值。8.2.2方法（1）模板DNA制備：將提取的核酸進行適當處理，使其成為適合PCR反應(yīng)的模板。（2）引物設(shè)計：根據(jù)目標片段的序列，設(shè)計特異性引物。（3）混合反應(yīng)體系：將模板DNA、引物、dNTPs、緩沖液和DNA聚合酶等成分混合，配制PCR反應(yīng)體系。（4）循環(huán)擴增：在PCR儀器中進行變性、退火、延伸等循環(huán)反應(yīng)，擴增目標DNA片段。（5）分析結(jié)果：通過瓊脂糖凝膠電泳、紫外檢測等方法分析擴增產(chǎn)物。8.2.3注意事項（1）避免污染：PCR反應(yīng)過程中要嚴格控制污染，保證實驗結(jié)果的準確性。（2）優(yōu)化實驗條件：根據(jù)目標片段的特點，調(diào)整反應(yīng)體系和反應(yīng)參數(shù)。（3）選擇合適的引物：保證引物的特異性，提高擴增效率。8.3基因測序技術(shù)8.3.1概述基因測序技術(shù)是分子生物學檢驗技術(shù)的重要組成部分，其目的是測定生物體基因組的序列，為研究基因功能、遺傳變異等提供重要信息。8.3.2方法（1）DNA提取與純化：同8.1節(jié)所述。（2）文庫構(gòu)建：將提取的DNA進行片段化、接頭連接等操作，構(gòu)建測序文庫。（3）測序：采用Sanger測序、高通量測序等方法進行測序。（4）數(shù)據(jù)分析：對測序結(jié)果進行質(zhì)量控制、比對、注釋等分析。8.3.3注意事項（1）保證DNA提取質(zhì)量：高質(zhì)量DNA是測序成功的關(guān)鍵。（2）優(yōu)化文庫構(gòu)建：根據(jù)測序平臺和實驗?zāi)康倪x擇合適的文庫構(gòu)建方法。（3）數(shù)據(jù)質(zhì)量控制：對測序數(shù)據(jù)進行嚴格的質(zhì)量控制，保證分析結(jié)果的準確性。第九章微生物學檢驗技術(shù)9.1細菌檢驗9.1.1概述細菌檢驗是微生物學檢驗技術(shù)中的重要組成部分，主要包括細菌的分離、培養(yǎng)、鑒定和藥敏試驗等。細菌檢驗對于臨床診斷、治療及疾病防控具有重要意義。9.1.2細菌檢驗基本流程（1）標本采集與處理：根據(jù)不同感染部位，采取相應(yīng)的標本，如血液、尿液、分泌物等。采集過程中要嚴格無菌操作，避免污染。（2）細菌分離與培養(yǎng)：將標本接種于適宜的培養(yǎng)基上，如血平板、巧克力平板等，置于適宜的溫度和濕度下培養(yǎng)。（3）細菌鑒定：根據(jù)細菌的形態(tài)、染色特點、生理生化特性等，對分離出的細菌進行鑒定。（4）藥敏試驗：采用紙片擴散法、微量稀釋法等方法，檢測細菌對常見抗生素的敏感性。9.1.3細菌檢驗注意事項（1）嚴格無菌操作，防止標本污染。（2）選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，提高細菌檢出率。（3）對分離出的細菌進行準確的鑒定和藥敏試驗，為臨床治療提供依據(jù)。9.2病毒檢驗9.2.1概述病毒檢驗是微生物學檢驗技術(shù)中的一大類，主要用于檢測病毒感染、病毒性疾病診斷和病毒病原學研究。病毒檢驗方法包括病毒分離、核酸檢測、血清學檢測等。9.2.2病毒檢驗基本流程（1）標本采集與處理：根據(jù)病毒感染部位，采集相應(yīng)的標本，如呼吸道分泌物、血液、糞便等。（2）