文件號：AA第1版頁數(shù)PAGE5共5頁試劑標準操作規(guī)程項目直膽紅素(DBIL)方法釩酸鹽氧化法，兩點終點法儀器H7600系列編寫人日期審核人日期批準人日期文件分發(fā)部門和/或個人本規(guī)程自年月日起實施 目錄檢測原理標本采集與處理2.1受檢者的準備2.2靜脈采血2.3抗凝劑2.4標本處理3.試劑3.1試劑3.2校準血清3.3試劑與校準血清的穩(wěn)定性4.儀器5.操作6.計算7.操作性能7.1精密度7.2準確度7.3靈敏度7.4可報告范圍7.5特異性7.6干擾8.參考值9.臨床意義附錄A:參數(shù)1.檢測原理膽紅素是老化的紅細胞中血紅蛋白的代謝產(chǎn)物，血液中總膽紅素和直接膽紅素的含量測定有利于肝病和黃疸病的診斷。直接膽紅素增高見于阻塞性黃疸和肝細胞性黃疸。釩酸鹽膽紅素膽綠素pH=3.0標本采集與處理2.1受檢者的準備：病人空腹12h，不飲酒24h后采集血樣。體檢對象抽血前應有兩周的的正常狀況記錄。注意有無應用影響測試項目的藥物。此外，對于體檢者，采血的季節(jié)都應做相關記錄，因為樣本中各項目的含量有季節(jié)性變動，為了前后比較應在每年同一季節(jié)檢驗。應囑體檢對象在抽血前24小時內不做劇烈運動。2.2靜脈采血：除非是臥床的病人，一般在采血時取坐位。體位影響水分在血管內外的分布，會影響測試項目的濃度。在采血前至少應靜坐5分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時間不超過1分鐘，穿刺成功后立即松開止血帶。2.3抗凝劑：血漿多主張用EDTANa2（1mg/mL）抗凝。2.4標本處理：血標本室溫放置30min～45min后離心分離血清或血漿，置潔凈試管加蓋低溫保存。3．試劑3.1試劑：本科使用上海華臣生物試劑有限公司DBIL試劑盒，為液體雙試劑，各組分如下：品牌：華臣生物試劑包裝規(guī)格見試劑說明書試劑1酒石酸緩沖液pH2.9(含有界面活性劑)0.1mol/L試劑2磷酸緩沖液pH7.010mmol/L釩酸鈉4mmol/L3.2校準血清：使用上海華臣生物試劑有限公司提供的校準血清。校準頻次：空白定標：每日需做試劑空白定標。全點定標：試劑換批號使用時或質控結果超過規(guī)定的2SD范圍，需要全點定標。3.3試劑與校準血清的穩(wěn)定性：原包裝試劑儲存在2-8℃至標簽所示失效日期。試劑開瓶后，在儀器中至少可保存20試劑儲存在18-22℃穩(wěn)定15天，試劑應避免污染。試劑R1顏色為無色，試劑R2顏色為無色，當試劑變色，按照試劑失效處理。多項校準血清在2-8℃儲存至標簽所示失效日期，復溶后-20℃保存，可穩(wěn)定半個月，只可凍融一次，避免反復凍融。參見校準血清說明書。4．儀器H7600系列型號儀器。5．操作樣品為血清或EDTA抗凝血漿。本法為終點法。參數(shù)見后附，附錄A。試劑參數(shù)設置、定標操作以及樣本檢測常規(guī)操作，見儀器操作規(guī)程。ΔAΔA測定ΔA標準c＝ΧCΔA標準式中：c——測定血清中直接膽紅素濃度，μmol/L；ΔA測定——標本管吸光度；ΔA標準——標準管吸光度；CO——校準血清中直接膽紅素濃度，μmol/L；7．操作性能7.1精密度：批內CV<7％,批間CV<10％。7.2準確度：測量結果在質控血清靶值±2SD范圍內。不同方法學試劑的質控結果之間會存在差異，使用時請確保質控選擇與試劑的方法學保持一致7.3靈敏度：直接膽紅素濃度為：20μmol/L時，顯色吸光度A450nm為0.158～0.194。7.4可報告范圍：血清與試劑用量之比為3:240:60時，測定上限為400μmol/L。7.5特異性：測量值在給定值的90%-110％范圍內。7.6干擾：內源性干擾物溶血為1000mg/ml、脂血2000mg/ml、抗壞血酸300mg/ml對測試結果無明顯影響。8．參考值0～6.8μmol/L9．臨床意義膽紅素是老化的血紅細胞中血紅蛋白的代謝產(chǎn)物,血液中總膽紅素和直接膽紅素的含量測定有利于肝病和黃疸病的診斷。直接膽紅素是紅肝細胞代謝后生成，經(jīng)膽道系統(tǒng)隨膽汁一起排泄。由于各種原因引起的肝內阻塞及肝外阻塞，使膽汁排泄途徑受阻或排泄不