PAGE專題七eq\b\lc\|\rc\(\a\vs4\al\co1(,,,,,,,,))生物技術(shù)實踐[理清——知識聯(lián)系][記清——主干術(shù)語]1．制作果酒、果醋、腐乳、泡菜利用的微生物分別是酵母菌、醋酸菌、毛霉(主要)和乳酸菌，異化作用類型分別是兼性厭氧型、需氧型、需氧型、厭氧型。2．制作果酒和果醋的實驗流程：挑選葡萄→沖洗→榨汁→酒精發(fā)酵→醋酸發(fā)酵。3．制作果酒和果醋的發(fā)酵裝置中充氣口的作用是在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進行充氣，排氣口是在酒精發(fā)酵時排出CO2，出料口用來取樣。4．制作果酒時溫度一般控制在18～25℃，時間為10～12d，前期需氧后期不需氧；制作果醋時溫度控制在30～35℃，時間為7～8d，始終需氧。5．毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。6．腐乳制作的實驗流程：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。7．加鹽腌制時間約為8d左右，配制鹵湯中的酒的含量一般控制在12%左右。8．用鹽腌制時，注意控制鹽的用量：鹽的濃度過低，不足以抑制微生物的生長，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過高會影響腐乳的口味。食鹽的作用：抑制微生物的生長，避免腐敗變質(zhì)；析出水分，使豆腐變硬，在后期制作過程中不易酥爛；調(diào)味作用，給腐乳以必要的咸味；浸提毛酶菌絲上的蛋白酶。9．配制鹵湯：鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的。酒的作用：防止雜菌污染以防腐；與有機酸結(jié)合形成酯，賦予腐乳風(fēng)味；酒精含量的高低與腐乳后期發(fā)酵時間的長短有很大關(guān)系，酒精含量越高，對蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長；酒精含量過低，蛋白酶的活性高，加快蛋白質(zhì)的水解，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗，難以成塊。10．微生物培養(yǎng)基的成分一般包括水、無機鹽、碳源、氮源及生長因子等。11．消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。12．制備固體培養(yǎng)基的步驟包括計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板等。13．純化微生物常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，平板劃線法可以分離微生物但不能對微生物進行計數(shù)，稀釋涂布平板法既可分離微生物也可以對微生物進行計數(shù)。14．平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，這就是菌落。15．稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。16．對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法。對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。17．DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，在濃度0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。18．DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質(zhì)可溶于酒精，可利用冷卻的酒精對提取的DNA進行純化。19．在雞血細胞液中加入一定量蒸餾水并用玻璃棒攪拌，過濾后收集濾液，可獲取含DNA的濾液；切碎洋蔥，加入一定量洗滌劑和食鹽，攪拌研磨，過濾后收集濾液，可獲取含DNA的濾液。20．處理植物組織時需要進行研磨，其目的是破碎細胞壁，使核物質(zhì)容易溶解在NaCl溶液中；研磨不充分會使DNA的提取量減少，影響實驗結(jié)果，導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍色等。21．用二苯胺鑒定DNA，在沸水浴的條件下呈現(xiàn)藍色。22．目前常用的加酶洗衣粉的酶制劑有四類：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶，其中，應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。23．探究加酶洗衣粉與普通洗衣粉洗滌效果的實驗自變量是洗衣粉的種類；探究加酶洗衣粉洗滌的最佳溫度條件實驗的自變量是水的溫度。24．一般來說，酶更適合采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定，而細胞多采用包埋法固定化。這是因為細胞個大，而酶分子很?。粋€大的難以被吸附或結(jié)合，而個小的酶容易從包埋材料中漏出。25．酵母細胞固定化的步驟：酵母菌的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母菌細胞混合→固定化酵母細胞。26．如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色，說明海藻酸鈉的濃度偏低，固定的酵母細胞數(shù)目較少；如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說明海藻酸鈉的濃度偏高，制作失敗，需要再作嘗試。[澄清——思維誤區(qū)]關(guān)注點1誤認為兼性厭氧與“有氧、無氧”都一樣[澄清]酵母菌在有氧條件下進行有氧呼吸，大量繁殖；在無氧條件下，進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和CO2，產(chǎn)生的酒精對其他微生物和酵母菌本身都具有毒害作用，所以在無氧條件下酵母菌不能大量繁殖。關(guān)注點2誤認為釀酒和釀醋所利用的微生物相同[澄清]釀酒和釀醋所利用的微生物不同，前者為酵母菌——真核生物；后者為醋酸菌——原核生物。二者本質(zhì)區(qū)別是有無以核膜為界限的細胞核。關(guān)注點3不明確腐乳前期發(fā)酵和后期發(fā)酵的作用[澄清]前期發(fā)酵的主要作用是創(chuàng)造條件讓毛霉生長，使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同參與生化反應(yīng)的過程，即通過各種輔料與腐乳的緩慢水解作用，生成腐乳的香氣。關(guān)注點4誤認為腐乳制作中食鹽的作用只是調(diào)節(jié)風(fēng)味[澄清]食鹽在腐乳制作中的作用有：①析出豆腐中的水分，有利于豆腐塊成形；②抑制雜菌；③形成腐乳的風(fēng)味；④殺死毛霉等微生物，有利于菌體內(nèi)蛋白酶、脂肪酶等發(fā)揮作用。關(guān)注點5不明確影響腐乳口味的因素有哪些[澄清]影響腐乳口味的因素有：①豆腐的含水量；②鹽的用量；③酒的用量；④香辛料的種類和用量；⑤其他輔料的種類；⑥發(fā)酵溫度和時間。關(guān)注點6不能區(qū)分選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基[澄清]按照培養(yǎng)基的用途，可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物生長，促進所需要的微生物的生長。如在某培養(yǎng)基中加入青霉素，則能抑制細菌的生長，對真菌的生長無影響。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成的，用以鑒別不同類別的微生物。如伊紅美藍培養(yǎng)基能指示大腸桿菌的存在。關(guān)注點7平板冷凝后，不明確平板倒置的目的[澄清]平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。關(guān)注點8不了解影響加酶洗衣粉洗滌效果的因素[澄清]影響加酶洗衣粉洗滌效果的因素有水溫、水量、水質(zhì)、洗衣粉的用量，衣物的質(zhì)料、大小及浸泡時間和洗滌的時間等。在實驗中應(yīng)控制好自變量之外的無關(guān)變量。關(guān)注點9不明確酵母細胞固定化實驗中，海藻酸鈉和氯化鈣的作用[澄清]海藻酸鈉作為酵母菌的包埋劑。氯化鈣能與海藻酸鈉反應(yīng)，形成凝膠珠。關(guān)注點10不明確DNA粗提取和鑒定實驗中，兩次使用蒸餾水的作用[澄清]第一次加蒸餾水，使雞血細胞吸水漲破；第二次加蒸餾水，使含DNA的NaCl溶液濃度降低，析出DNA分子。eq\a\vs4\al(,,傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和微生物的利用)1．傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用(填圖)(1)果酒和果醋的制作：(2)腐乳的制作：①制作原理：②實驗流程及影響因素：2．圖解識記微生物的培養(yǎng)、分離與計數(shù)(填圖)[考什么———————考點·考法探究]考點(一)果酒、果醋和腐乳的制作1．(2017·江蘇高考)(多選)如圖是探究果酒與果醋發(fā)酵的裝置示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是()A．改變通入氣體種類，可以研究呼吸作用類型對發(fā)酵的影響B(tài)．果酒發(fā)酵中期通入氮氣，酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸C．果醋的發(fā)酵周期與實驗設(shè)定的溫度密切相關(guān)D．氣體入口與氣體出口可以交換使用解析：選ABC改變通入氣體的種類，例如分別通入氮氣和氧氣，可研究無氧呼吸和有氧呼吸對發(fā)酵的影響；果酒發(fā)酵中期通入氮氣，更利于創(chuàng)造無氧條件，酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸；果醋發(fā)酵的菌種是醋酸桿菌，其生長的適宜溫度是30～35℃，溫度能影響醋酸桿菌的代謝，從而影響果醋的發(fā)酵周期；氣體的入口必須伸入培養(yǎng)液中，氣體出口不能伸入培養(yǎng)液中，如果氣體的入口和出口交換，會導(dǎo)致發(fā)酵液噴出。2．(2016·江蘇高考)下列關(guān)于中學(xué)“腐乳的制作”實驗，敘述正確的是()A．加鹽主要是為了調(diào)節(jié)水分，利于毛霉生長B．加料酒主要是為了滅菌，避免腐敗變質(zhì)C．發(fā)酵過程中起主要作用的是乳酸桿菌D．實驗室制作的腐乳不宜直接食用解析：選D加鹽主要是為了抑制雜菌的生長，同時也可析出水分，有利于腐乳成形，因此加鹽的目的主要是抑制雜菌生長而不是調(diào)節(jié)水分；加料酒可以抑制微生物的生長，同時能使腐乳具有獨特的風(fēng)味，但不能滅菌；在腐乳制作的發(fā)酵過程中起主要作用的是毛霉；實驗室制作的腐乳因未經(jīng)質(zhì)量鑒定，不宜直接食用。eq\a\vs4\al([聯(lián)知識])eq\a\vs4\al(解讀發(fā)酵裝置圖)裝置圖結(jié)構(gòu)或操作目的充氣口醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進行充氣排氣口酒精發(fā)酵時用來排出CO2長而彎曲的膠管防止空氣中微生物的污染制酒時關(guān)閉充氣口制醋時充氣口連接氣泵，輸入無菌空氣考點(二)微生物的實驗室培養(yǎng)和分離3．(2017·南京二模)某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A，研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素等配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)。實驗的主要步驟如下圖所示。下列有關(guān)敘述錯誤的是()A．培養(yǎng)基中加入化合物A作為唯一碳源，目的是為了篩選目的菌B．實驗培養(yǎng)過程中進行振蕩培養(yǎng)，可使目的菌和培養(yǎng)液充分接觸C．實驗操作過程中，獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是防止外來雜菌污染D．將固體培養(yǎng)基得到的目的菌重復(fù)多次上述實驗的目的是獲得大量菌種解析：選D培養(yǎng)基中化合物A為唯一碳源，可以篩選能高效降解化合物A的細菌；實驗培養(yǎng)過程中進行振蕩培養(yǎng)，既可使目的菌和培養(yǎng)液充分接觸，又可以增加培養(yǎng)液中溶氧量；微生物培養(yǎng)過程中要進行無菌操作，防止外來雜菌的污染；將固體培養(yǎng)基得到的目的菌重復(fù)多次上述實驗是為了純化高效降解化合物A的細菌。4．(2015·江蘇高考)人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動物的胃，可用來發(fā)酵處理秸稈，提高秸稈的營養(yǎng)價值。為了增強發(fā)酵效果，研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，并對其降解纖維素能力進行了研究。請回答下列問題：(1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項不需要的是________(填序號)。①酒精燈②培養(yǎng)皿③顯微鏡④無菌水(2)在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是________________________________________________________________________________________________。(3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時，若試管口粘附有培養(yǎng)基，需要用酒精棉球擦凈的原因是________________________________________________________________________________________________。(4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩選到了幾株有透明降解圈的菌落(見下圖)。圖中降解圈大小與纖維素酶的________有關(guān)。圖中降解纖維素能力最強的菌株是______(填圖中序號)。(5)研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4，在不同溫度和pH條件下進行發(fā)酵，測得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見下圖，推測菌株________更適合用于人工瘤胃發(fā)酵，理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：(1)在樣品稀釋和涂布平板過程中，需要在酒精燈火焰附近進行操作，培養(yǎng)皿用于盛放培養(yǎng)基并培養(yǎng)細菌，無菌水做稀釋的溶劑，此處唯一用不到的是顯微鏡。(2)在涂布平板時，要取少量菌懸液滴加到培養(yǎng)基表面，因為如果滴加菌懸液量過多，菌懸液就會堆積在培養(yǎng)基表面影響分離效果。(3)在向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時，如果試管口粘附有培養(yǎng)基，就很容易使棉塞受到污染，因此，需要用無菌的酒精棉球?qū)⒃嚬芸诓潦酶蓛簟?4)因為剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，且不與纖維素降解產(chǎn)物反應(yīng)。所以在剛果紅培養(yǎng)基平板上，菌落周圍有透明降解圈是纖維素被降解的結(jié)果，降解圈大小由纖維素酶的活性和量決定。圖中菌落①周圍的降解圈最大，因此其降解纖維素的能力最強。(5)考慮到人工瘤胃的發(fā)酵過程會使發(fā)酵液酸性增加，溫度升高，在這個前提下觀察在不同溫度和pH條件下測得的發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果圖，從圖中可以看出，在高溫和低pH條件下都是J4菌株中的纖維素酶的活性較高，因而該菌株更適合用于人工瘤胃發(fā)酵。答案：(1)③(2)培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果(3)避免培養(yǎng)基污染棉塞(4)量與活性①(5)J4發(fā)酵過程會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高eq\a\vs4\al([聯(lián)知識])eq\a\vs4\al(微生物純化方法的比較)方法平板劃線法稀釋涂布平板法圖示平板劃線法稀釋涂布平板法操作注意事項(1)接種環(huán)的灼燒：①第一次劃線前：殺死接種環(huán)上的微生物，避免污染培養(yǎng)物②之后每次劃線前：殺死殘留菌種，保證每次劃線菌種來自上次劃線末端③劃線結(jié)束后：殺死殘留菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者(2)灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后再進行操作，以免溫度太高殺死菌種(3)劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連(4)劃線用力要大小適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破(1)稀釋操作時，每支試管及其中的9mL水、移液管等均需滅菌；操作時，試管口和移液管應(yīng)在離火焰1～2cm處(2)涂布平板時：①涂布器用體積分數(shù)為70%的酒精消毒，取出時讓多余酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃②不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精③酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適，移液管管頭不要接觸任何物體優(yōu)點可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離既可以計數(shù)，又可以觀察菌落特征缺點不能計數(shù)吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不顯著，容易蔓延適用范圍適用于好氧菌適用于厭氧菌和兼性厭氧菌目的在培養(yǎng)基上形成由單個菌種繁殖而來的子細胞群體——菌落培養(yǎng)平板冷凝后倒置培養(yǎng)，使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，防止皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基造成污染[怎樣考———————考題·考情分析]1．(2015·江蘇高考)關(guān)于“腐乳的制作”實驗，下列敘述錯誤的是()A．將腐乳坯堆積起來會導(dǎo)致堆內(nèi)溫度升高，影響毛霉生長B．腐乳坯若被細菌污染，則腐乳坯表面會出現(xiàn)黏性物C．勤向腐乳坯表面噴水，有利于毛霉菌絲的生長D．裝壇階段加入料酒，可有效防止雜菌污染解析：選C毛霉有氧呼吸能釋放大量能量，大部分以熱能形式散失，堆內(nèi)溫度過高會影響毛霉生長。毛霉是絲狀真菌，若腐乳坯表面出現(xiàn)黏性物，可能是被其他雜菌污染。毛霉是好氧真菌，經(jīng)常向腐乳坯表面噴水，不利于毛霉菌絲的生長。料酒能抑制微生物的生長，故能有效防止雜菌污染。2．(2015·江蘇高考)做“微生物的分離與培養(yǎng)”實驗時，下列敘述正確的是()A．高壓滅菌加熱結(jié)束時，打開放氣閥使壓力表指針回到零后，開啟鍋蓋B．倒平板時，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C．為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D．用記號筆標記培養(yǎng)皿中菌落時，應(yīng)標記在皿底上解析：選D在高壓滅菌的操作過程中，加熱結(jié)束后應(yīng)讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，待壓力表的壓力降到零時，打開放氣閥，旋松螺栓，打開蓋子。倒平板時，用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，而不是完全取下放到一邊。接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后應(yīng)在火焰旁冷卻后，再用其挑取菌落。在微生物的培養(yǎng)中，一般將培養(yǎng)皿倒置，在皿底上用記號筆做標記。3.(2015·江蘇高考)(多選)右圖為蘋果酒的發(fā)酵裝置示意圖，下列敘述錯誤的是()A．發(fā)酵過程中酒精的產(chǎn)生速率越來越快B．集氣管中的氣體是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生的CO2C．發(fā)酵過程中酵母種群呈“J”型增長D．若發(fā)酵液表面出現(xiàn)菌膜，最可能原因是發(fā)酵瓶漏氣解析：選ABC酵母菌發(fā)酵過程中因營養(yǎng)物質(zhì)的消耗、pH的變化等，酒精的產(chǎn)生速率會越來越慢。集氣管收集的氣體除酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生的CO2外，還有有氧呼吸產(chǎn)生的CO2。發(fā)酵過程中，隨著營養(yǎng)物質(zhì)消耗pH降低等，酵母菌的繁殖速度會變慢，其種群不會呈“J”型增長。發(fā)酵液表面出現(xiàn)的菌膜可能是醋酸菌在有氧條件下繁殖產(chǎn)生的，說明發(fā)酵瓶可能漏氣。4．(2016·江蘇高考)(多選)漆酶屬于木質(zhì)素降解酶類，在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過程，相關(guān)敘述正確的是()A．生活污水中含有大量微生物，是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品B．篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物，通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落C．在涂布平板上長出的菌落，再通過劃線進一步純化D．斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物，可在常溫下長期保存菌株解析：選BC生活污水中含木質(zhì)素的物質(zhì)相對較少，產(chǎn)漆酶菌株也較少，不宜作為分離產(chǎn)漆酶菌株的樣品；產(chǎn)漆酶菌株可降解木質(zhì)素，在篩選培養(yǎng)基中加入木質(zhì)素可篩選產(chǎn)漆酶的菌株，篩選時可通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落；在涂布平板上生長的菌落可能還有其他雜菌，可再通過平板劃線法進一步純化；對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法，即在－20℃的冷凍箱中保存。5．(2017·江蘇高考)下列關(guān)于“腐乳的制作”實驗，敘述正確的是()A．控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調(diào)味B．腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用C．毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉D．成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要由細菌產(chǎn)生解析：選B控制發(fā)酵溫度主要目的是利于菌種繁殖和代謝；腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用；毛霉的作用主要是分解蛋白質(zhì)和脂肪；成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要是毛霉產(chǎn)生的菌絲。6．(2017·江蘇高考)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中，對環(huán)境有嚴重危害。小明同學(xué)準備依據(jù)如圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題：(1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有____________。(2)將采集到的樣品接種培養(yǎng)，苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸________，以達到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集，應(yīng)進一步____________，以便于菌落計數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)物質(zhì)外，還必須添加________。(3)右圖為連續(xù)劃線法示意圖，在圖中____________(填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。(4)采用比色測定法(使用苯酚顯色劑)檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進行顯色反應(yīng)，下表中1～5號比色管的苯酚濃度應(yīng)分別為____________。管號123456苯酚濃度(mg/L)1如果廢水為50mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，則需將殘留液稀釋________(填序號：①5②10③20)倍后，再進行比色。解析：(1)富集培養(yǎng)基中蛋白胨、苯酚都是含碳的有機物，可作為碳源。(2)欲富集酚降解菌，隨轉(zhuǎn)接次數(shù)的增加，應(yīng)逐漸增加培養(yǎng)基中苯酚的含量；若接種培養(yǎng)后平板上菌落過于密集，則應(yīng)進一步稀釋后再進行涂布，以降低平板上菌落密度，便于菌落計數(shù)與分離；平板培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，除含有水、營養(yǎng)物質(zhì)(碳源、氮源、無機鹽等)外，還需添加瓊脂作為凝固劑。(3)利用連續(xù)劃線法接種時，最后的劃線區(qū)域(③)中，菌體的密度較小，容易獲得單菌落。(4)因系列濃度梯度中6號比色管中苯酚濃度為1mg/L，故1～5號比色管中的苯酚濃度應(yīng)分別為0mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L；根據(jù)題意，廢水為50mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，要使稀釋后的苯酚殘留液濃度介于0～1mg/L，需將殘留液稀釋20倍左右。答案：(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀釋涂布凝固劑(3)③(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8③本節(jié)內(nèi)容在近三年高考中幾乎年年考。以選擇題的形式考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)，以選擇題或非選擇題的形式考查微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用，因此微生物的培養(yǎng)和利用是考查的重點。復(fù)習(xí)備考時，在抓雙基的基礎(chǔ)上，注意知識間的橫向聯(lián)系，提高綜合分析問題和解決問題的能力。—————————————————————————一、選擇題1．(2017·蘇州一模)下列有關(guān)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)及其在食品生產(chǎn)中應(yīng)用的敘述，正確的是()A．釀酒過程中密封的時間越長，產(chǎn)生的酒精量就越多B．釀制果醋所需酵母菌和醋酸菌的發(fā)酵底物、條件相同C．制作腐乳時需利用毛霉產(chǎn)生的酶分解豆腐中的蛋白質(zhì)等物質(zhì)D．制作果酒、果醋的微生物須在無菌條件下才能發(fā)酵解析：選C酒精是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生的，在一定的時間內(nèi)，密封的時間越長，產(chǎn)生的酒精量就越多，但酒精達到一定濃度會抑制無氧呼吸，導(dǎo)致酒精量不再增加；釀制果醋的過程是先使酵母菌通過無氧呼吸產(chǎn)生果酒，再利用醋酸菌把果酒發(fā)酵成果醋，前者的發(fā)酵底物是糖類，條件是18～25℃、無氧，后者的發(fā)酵底物是酒精，條件是30～35℃，需氧；制作腐乳主要利用的是毛霉分泌的蛋白酶和脂肪酶，它們能夠分解豆腐中的蛋白質(zhì)、脂肪等物質(zhì)；自然發(fā)酵時，葡萄汁等沒有嚴格滅菌，酵母菌、醋酸菌也能發(fā)酵。2．(2017·揚州一模)下列有關(guān)制作果酒、果醋和腐乳的敘述，錯誤的是()A．果酒的制作過程中既涉及有氧呼吸又涉及無氧呼吸B．果醋發(fā)酵溫度較高，且發(fā)酵過程要特別注意氧氣的供應(yīng)C．變酸的酒表面的菌膜含醋酸菌，腐乳的“皮”為毛霉菌絲D．發(fā)酵過程中所有的相關(guān)反應(yīng)都是在微生物的細胞內(nèi)進行的解析：選D腐乳制作過程中，蛋白質(zhì)和脂肪的水解反應(yīng)發(fā)生在毛霉的細胞外。3．下列關(guān)于果酒、果醋和腐乳制作的敘述，正確的是()A．一般用含糖量較高的水果來制作果酒B．果醋發(fā)酵包括有氧發(fā)酵和無氧發(fā)酵C．制作腐乳時，應(yīng)防止毛霉以外的其他微生物生長D．都是利用微生物胞內(nèi)酶催化獲得最終產(chǎn)品解析：選A醋酸菌是嚴格好氧菌，所以果醋發(fā)酵只有有氧發(fā)酵；參與腐乳發(fā)酵的微生物有青霉、毛霉、曲霉、酵母，其中主要是毛霉；果酒、果醋是利用微生物胞內(nèi)酶催化獲得最終產(chǎn)品，腐乳制作是利用毛霉分泌的蛋白酶和脂肪酶，屬于胞外酶。4．(2017·南京二模)如圖裝置可用于生物技術(shù)實踐的相關(guān)實驗。下列有關(guān)敘述正確的是()A．制作果酒、果醋或腐乳時，所需控制的溫度都是相同的B．乙裝置可以先用于果酒的制作，后用于果醋的制作C．用裝置甲制作腐乳時，自下而上隨著豆腐塊加高逐漸減少用鹽量D．裝置乙中b為排氣口，c為充氣口，可防止空氣中微生物的污染解析：選B制作果酒、果醋或腐乳時，控制的溫度分別是18～25℃、30～35℃、15～18℃；用裝置甲制作腐乳時，越接近瓶口微生物感染機會越多，所以加鹽量應(yīng)增大；裝置乙中b為充氣口，c為排氣口，排氣口長而彎曲可防止空氣中微生物的污染。5．下列有關(guān)“微生物的分離與培養(yǎng)”實驗的敘述，正確的是()A．利用平板劃線法可對微生物進行接種、純化、分離和計數(shù)B．對培養(yǎng)皿進行編號或?qū)N進行標注時，應(yīng)使用記號筆在皿底標記C．倒平板時，應(yīng)將打開的培養(yǎng)皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上D．將好氧型菌株接種到培養(yǎng)液中需靜置培養(yǎng)，防止培養(yǎng)液沾染試管壁引發(fā)污染解析：選B利用平板劃線法可對微生物進行接種、純化和分離，但不能計數(shù)；在微生物的培養(yǎng)中，一般將培養(yǎng)皿倒置，在皿底上用記號筆做標記；倒平板時左手拿培養(yǎng)皿，右手拿錐形瓶，左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，倒入培養(yǎng)基后立即蓋上培養(yǎng)皿皿蓋；將好氧型菌株接種到培養(yǎng)液中需振蕩培養(yǎng)，以增加溶液的溶氧量。6．(2017·南通一模)養(yǎng)殖池中存在的有毒物質(zhì)主要是氨及亞硝酸，這兩種物質(zhì)可被硝化細菌吸收利用。若要對養(yǎng)殖池底泥中硝化細菌分離與計數(shù)，則()A．需要配制添加一定濃度氨鹽的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，以篩選硝化細菌B．應(yīng)對采集底泥使用的工具進行滅菌，全部接種過程均需在酒精燈火焰旁進行C．可以采用平板劃線法進行計數(shù)，還需與未接種的空白培養(yǎng)基同時培養(yǎng)D．應(yīng)將培養(yǎng)基置于30℃恒溫下培養(yǎng)12h后，統(tǒng)計培養(yǎng)基中全部菌落數(shù)解析：選B牛肉膏蛋白胨本身含有氮源，無法篩選硝化細菌；平板劃線法可以分離菌種，但不能用于計數(shù)；培養(yǎng)過程中應(yīng)每隔一段時間觀察，直到菌落穩(wěn)定開始計數(shù)。7．下列有關(guān)生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯誤的是()A．腐乳制作中酒精含量過高會延長腐乳成熟時間B．制作果醋時中斷通氧會引起醋酸菌死亡C．若固定化酵母細胞時CaCl2溶液濃度過低，將很難形成凝膠珠D．加酶洗衣粉中的酶制劑的作用是直接洗去衣服上的污垢解析：選D腐乳制作中酒精含量過高，抑制酶的活性，故會延長腐乳成熟時間；醋酸菌是好氧菌，中斷通氧會引起醋酸菌死亡；CaCl2溶液的作用是使膠體聚沉，濃度過低，不易形成凝膠珠；加酶洗衣粉中的酶制劑有的是將大分子污垢分解成小分子，從衣物上脫落下來，有的本身不能去除衣物上的污垢，而是使纖維的結(jié)構(gòu)變得蓬松，如纖維素酶。8.(2017·南通二模)在分離、純化大腸桿菌實驗中，劃線接種(甲)、培養(yǎng)結(jié)果(乙)如右圖。有關(guān)敘述錯誤的是()A．接種前應(yīng)對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌B．連續(xù)劃線的目的是獲得單個細菌形成的菌落C．接種過程中至少需要對接種環(huán)灼燒5次D．甲中a區(qū)域為劃線的起始位置解析：選D在分離、純化大腸桿菌實驗中，接種前應(yīng)對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌；連續(xù)劃線的目的是獲得單個細菌形成的菌落；接種過程中，接種前要灼燒，每次劃線后均需灼燒，至少需要對接種環(huán)灼燒5次；據(jù)甲和乙對比，甲中d區(qū)域為劃線的起始位置。9．(2017·揚州一模)(多選)下列有關(guān)“微生物的分離與培養(yǎng)”實驗的敘述，錯誤的是()A．高壓蒸汽滅菌鍋加蓋時應(yīng)按順時針方向依次旋緊螺栓B．選擇培養(yǎng)基可以鑒定某種微生物的種類C．待培養(yǎng)基冷卻至室溫時倒平板D．統(tǒng)計樣品中活菌數(shù)量時，接種方法可采用稀釋涂布平板法解析：選ABC高壓蒸汽滅菌鍋加蓋時，將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)，再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓，使螺栓松緊一致；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定培養(yǎng)基中某種微生物的種類；待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時倒平板；稀釋涂布平板法可用于活菌數(shù)量的計數(shù)。10．(2017·南通二模)(多選)下列有關(guān)果酒、果醋和腐乳制作的比較，正確的是()A．主要菌種不一定是真核生物B．溫度控制必須保證微生物繁殖最快C．發(fā)酵過程會釋放熱量D．可通過色、香、味等對產(chǎn)品進行評價解析：選ACD果醋制作利用的菌種是醋酸菌，是原核生物；發(fā)酵溫度和微生物繁殖最快的溫度不一定相同，如腐乳制作的發(fā)酵溫度為15～18℃，此溫度并不是毛霉繁殖最快的溫度；三種發(fā)酵過程中，菌種都會進行細胞呼吸釋放熱量。二、非選擇題11．某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數(shù)。請回答與此實驗相關(guān)的問題：(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細菌培養(yǎng)提供了________________和________________。(2)為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣本的平板置于____________中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37℃。要使該實驗所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時在另一平板上接種________作為對照進行實驗。(3)培養(yǎng)20h后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的________，這說明湖水樣品中有多種細菌。一般說來，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細菌污染的程度越________(填“高”或“低”)。(4)如下圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請分析接種的具體方法。獲得圖A效果的接種方法是________________，獲得圖B效果的接種方法是________________。某同學(xué)在純化土壤中的細菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是_______________________________________________________________，應(yīng)當(dāng)怎樣操作？______________________________________________________。(5)如果在培養(yǎng)基中加入青霉素，可以用于篩選耐________的真菌，這種培養(yǎng)基(按功能分)被稱為____________。解析：(1)蛋白胨富含蛋白質(zhì)，主要為微生物提供氮源，淀粉作為微生物的碳源。(2)微生物的培養(yǎng)在恒溫培養(yǎng)箱中進行。要使該實驗所得結(jié)果可靠，還應(yīng)設(shè)置對照實驗，即同時在另一平板上接種無菌水作為對照，以判斷培養(yǎng)基制作是否合格。(3)培養(yǎng)20h后，不同微生物在平板培養(yǎng)基上會形成形態(tài)和顏色不同的菌落。菌落總數(shù)越多，說明湖水中的微生物數(shù)量越多，湖水遭受細菌污染的程度越高。(4)根據(jù)圖中菌落的分布可以判斷接種方法。圖A中菌落均勻分布，則獲得圖A效果的接種方法是稀釋涂布平板法。圖B中菌落分布在不同區(qū)域的平行線上，則獲得圖B效果的接種方法是平板劃線法。培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高或培養(yǎng)過程被雜菌污染，可以通過增大稀釋倍數(shù)或嚴格無菌操作的方法解決。(5)加入青霉素的培養(yǎng)基可作為篩選真菌的選擇培養(yǎng)基。答案：(1)氮源碳源(2)恒溫培養(yǎng)箱無菌水(3)菌落高(4)稀釋涂布平板法平板劃線法菌液濃度過高(或培養(yǎng)過程被雜菌污染)增大稀釋倍數(shù)(或嚴格無菌操作，原因與操作要對應(yīng))(5)青霉素選擇培養(yǎng)基12.如圖是某細菌純化培養(yǎng)過程中劃線接種的培養(yǎng)結(jié)果?；卮饐栴}：(1)在________(填圖中編號)區(qū)域出現(xiàn)了單個菌落，產(chǎn)生每個菌落的最初細菌數(shù)目是________個。據(jù)圖分析，在培養(yǎng)基上劃線接種時，劃線的順序依次是________(用編號表示)。(2)下表是某微生物培養(yǎng)基成分：編號成分含量編號成分含量①粉狀硫10g②(NH4)2SO40.4g③K2HPO44g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O100mL———①若培養(yǎng)從土壤中分離出來的自生固氮菌，該培養(yǎng)基應(yīng)添加________，去除________。②若要鑒別纖維素分解菌，可用________________法，若要鑒別尿素分解菌，可在培養(yǎng)液中加入___________________________________________________________________。解析：(1)從圖中可知，②號區(qū)域出現(xiàn)了單個菌落；1個菌落由1個細菌繁殖形成；根據(jù)①③②區(qū)域菌落數(shù)越來越少，所以劃線的順序依次是①→③→②。(2)①自生固氮菌是異養(yǎng)生物，需加入有機碳，不需要氮源，它可固定大氣中的N2，因而培養(yǎng)基中應(yīng)添加碳源去掉氮源。②鑒別纖維素分解菌可用剛果紅染色法，要鑒別尿素分解菌，可在培養(yǎng)液中加入酚紅指示劑。答案：(1)②1①→③→②(2)①碳源氮源②剛果紅染色酚紅指示劑13．下圖為果酒、果醋工廠化生產(chǎn)流程。請據(jù)圖回答問題：(1)家庭自制葡萄酒所用菌種常來自______________，圖中的候選菌A、B經(jīng)篩選和純化分別獲取________和________菌種。(2)圖中所用的培養(yǎng)基都需要在接種前用____________法進行滅菌。(3)在純化菌種A時接種了5個平板，每個平板均接種0.1mL樣品并培養(yǎng)。其中乙平板的菌落分布如圖，純化菌種A的接種方法是______________，推測出現(xiàn)平板乙可能的操作失誤是________________。其余的甲、丙、丁、戊平板操作正常，其菌落數(shù)分別是210、230、470、190，則樣品中菌種A的數(shù)量為________個·mL－1。(4)果酒發(fā)酵罐與果醋發(fā)酵罐需要控制的溫度條件差異是________________________。解析：(1)家庭自制葡萄酒所用菌種常來自葡萄皮表面的酵母菌。候選菌A、B篩選和純化后可以分別用于制作果酒和果醋，所以分別獲取的是酵母菌和醋酸菌。(2)培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。(3)分析圖乙中培養(yǎng)基培養(yǎng)結(jié)果，可推知采用的純化菌種的接種方法是稀釋涂布平板法。出現(xiàn)平板乙可能的操作失誤是涂布不均勻。平板上菌落數(shù)量在30～300之間可以用于計算，所以有效的菌落數(shù)是210、230、190，平均值為210。因為接種了0.1mL，所以菌種A的數(shù)量為2100個·mL－1。(4)果酒發(fā)酵的適宜溫度是18～25℃，果醋發(fā)酵的適宜溫度是30～35℃。答案：(1)葡萄皮表面的酵母菌酵母菌醋酸菌(2)高壓蒸汽滅菌(3)稀釋涂布平板法涂布不均勻2100(4)前者18～25℃，后者30～35℃14．生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用十分廣泛，如果酒、果醋制作是常見的例子。請回答下列有關(guān)果酒、果醋制作的問題：(1)果酒、果醋制作中，都需要大量純種發(fā)酵微生物，所以首先要對發(fā)酵微生物進行培養(yǎng)，在微生物培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、________、滲透壓等條件；為防止雜菌污染，還需要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行________(填“消毒”或“滅菌”)；操作者的雙手需要進行清洗和__________；空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是________________________。(2)如圖是果酒、果醋的發(fā)酵裝置。醋酸發(fā)酵在________瓶中進行，發(fā)酵所需的微生物是____________。若乙瓶中流出液明顯呈酸性，則說明流出液中有________生成。向乙瓶中通入空氣的主要原因是________(填選項)。A．果酒生成醋酸時需要氧氣B．通入空氣可使乙瓶中的鋸末呈松散狀C．使乙瓶中流出的液體緩慢滴入丙瓶中D．使甲瓶中流出的液體緩慢滴入乙瓶中(3)如果將該裝置改為酒精的發(fā)酵裝置，需要修改的地方是__________________。解析：(1)微生物培養(yǎng)需要同時考慮溫度、pH、滲透壓等外界條件，培養(yǎng)涉及的器材和培養(yǎng)基等都需要進行滅菌，而對操作者的雙手則要進行消毒處理，紫外線通過使蛋白質(zhì)變性可以殺滅空氣中的微生物。(2)圖中的乙瓶為醋酸發(fā)酵瓶，內(nèi)有醋酸菌，若該瓶流出的液體呈酸性，說明流出液中有醋酸生成。在乙瓶中進行的過程需要氧氣，醋酸菌進行的是有氧呼吸。(3)酒精發(fā)酵在無氧條件下才能進行，所以不需要通入空氣。答案：(1)pH滅菌消毒紫外線能使蛋白質(zhì)變性(2)乙醋酸菌醋酸A(3)去掉通氣裝置eq\a\vs4\al(,,酶的應(yīng)用和DNA的粗提取與鑒定)1．DNA粗提取與鑒定(填圖)2．圖解酶的應(yīng)用與固定化(填圖)[考什么———————考點·考法探究]考點(一)酶的應(yīng)用1．(2017·江蘇高考)為了探究一種新型堿性纖維素酶的去污效能，研究性學(xué)習(xí)小組進行了相關(guān)實驗，結(jié)果如圖。由圖中實驗結(jié)果能直接得出的結(jié)論是()A．堿性纖維素酶對污布類型2的去污力最強B．不同類型洗衣粉影響堿性纖維素酶的去污力C．堿性纖維素酶對污布類型2、3的去污力不同D．加大酶用量可以顯著提高洗衣粉的去污力解析：選C對污布類型2、3處理，洗衣粉類型、酶用量均相同，二者比較可以直接說明堿性纖維素酶對污布類型2、3的去污力不同。由圖中實驗結(jié)果不能直接得出A、B、D三項所述的結(jié)論，原因是它們都沒有單一變量的對照實驗來支持。2．(2017·江蘇高考)下列關(guān)于“酵母細胞的固定化技術(shù)”實驗的敘述，正確的是()A．活化酵母時，將適量干酵母與蒸餾水混合并攪拌成糊狀B．配制CaCl2溶液時，需要邊小火加熱邊攪拌C．將海藻酸鈉溶液滴加到CaCl2溶液時，凝膠珠成形后應(yīng)即刻取出D．海藻酸鈉溶液濃度過高時凝膠珠呈白色，過低時凝膠珠易呈蝌蚪狀解析：選A將適量干酵母與蒸餾水混合并攪拌成糊狀，可以活化酵母；配制海藻酸鈉溶液時需用小火加熱，配制CaCl2溶液時不需加熱；凝膠珠成形后應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡30min左右，以便形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)；海藻酸鈉溶液濃度過低時固定的酵母細胞數(shù)目少，凝膠珠呈白色，過高時凝膠珠易呈蝌蚪狀。eq\a\vs4\al([聯(lián)知識])eq\a\vs4\al(固定化酶與固定化細胞的比較)項目固定化酶固定化細胞固定酶的種類一種一系列適用方法化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法包埋法特點優(yōu)點酶既可與反應(yīng)物結(jié)合，又可與產(chǎn)物分離，固定在載體上的酶可反復(fù)利用成本低，操作容易缺點一種酶只能催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)可能導(dǎo)致反應(yīng)效率下降實例固定化葡萄糖異構(gòu)酶固定化酵母細胞考點(二)DNA的粗提取與鑒定3．某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動，具體步驟如下：材料處理：稱取新鮮的菜花、辣椒和蒜黃各2份，每份10g。剪碎后分成兩組，一組置于20℃、另一組置于－20℃條件下保存24h。DNA粗提?。旱谝徊剑簩⑸鲜霾牧戏謩e放入研缽中，各加入15mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾，取濾液備用。第二步：先向6只小燒杯中分別注入10mL濾液，再加入20mL體積分數(shù)為95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。第三步：取6支試管，分別加入等量的2mol/LNaCl溶液溶解上述絮狀物。DNA檢測：在上述試管中各加入4mL二苯胺試劑，混合均勻后，置于沸水浴中加熱5min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結(jié)果如下表：材料保存溫度菜花辣椒蒜黃20℃＋＋＋＋＋＋－20℃＋＋＋＋＋＋＋＋＋注：“＋”越多表示藍色越深。分析上述實驗過程，回答下列問題：(1)該探究性實驗的課題名稱是______________________________________________________________________________________________________________________。(2)第二步中“緩緩地”攪拌，這是為了減少________。(3)根據(jù)實驗結(jié)果，得出結(jié)論并分析。①結(jié)論1：與20℃相比，相同實驗材料在－20°C條件下保存，DNA的提取量較多。結(jié)論2：__________________________________________________________。②針對結(jié)論1，請?zhí)岢龊侠淼慕忉專篲__________________________________________________________________________________________________________________。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對DNA影響極小。為了進一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是：______________________________，然后用體積分數(shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出。解析：如果DNA斷裂，就不容易被提取出來；溫度主要是通過影響酶的活性來影響生理過程。粗提取得到的DNA中含有少量的蛋白質(zhì)，可以通過氯仿的特殊功能來去除蛋白質(zhì)，提高DNA純度。答案：(1)探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響(2)DNA斷裂(3)①等質(zhì)量的三種實驗材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃中提取的DNA量最多②低溫抑制了相關(guān)酶的活性，DNA降解速度慢(4)將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時間，吸取上清液eq\a\vs4\al([聯(lián)知識])eq\a\vs4\al(DNA的粗提取與鑒定實驗中的“2、3、4”)(1)加蒸餾水2次：操作方法操作目的第一次加到雞血細胞液中使血細胞吸水漲破第二次加到含DNA的2mol/L的NaCl溶液中使NaCl溶液的濃度下降到0.14mol/L，使DNA析出(2)用紗布過濾3次：操作方法操作目的第一次過濾血細胞破裂液得到含細胞核物質(zhì)的濾液第二次濾取0.14mol/L的NaCl溶液析出DNA(黏稠物)第三次過濾溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液獲取含DNA的濾液(3)用NaCl溶液4次：操作方法操作目的第一次加2mol/L的NaCl溶液溶解提取的細胞核物質(zhì)第二次用0.14mol/L的NaCl溶液使DNA析出第三次用2mol/L的NaCl溶液溶解濾取的DNA黏稠物第四次用2mol/L的NaCl溶液溶解絲狀物用于鑒定DNA[怎樣考———————考題·考情分析]1．(2017·江蘇高考)固定化單寧酶應(yīng)用于茶飲料加工，可消除其中的苦澀味。下列有關(guān)敘述正確的是()A．在單寧酶純化時可采用透析法去除雜蛋白B．化學(xué)結(jié)合法比吸附法對單寧酶活性影響更小C．溫度、pH和重金屬離子都可能影響固定化單寧酶活性D．酶的高效性決定固定化單寧酶不會降解茶飲料中的有益成分解析：選C單寧酶和雜蛋白都是大分子，不能用透析法進行分離，可用凝膠色譜法進行分離；化學(xué)結(jié)合法可能影響酶的活性部位進而影響反應(yīng)效果，而吸附法不影響酶的分子結(jié)構(gòu)；影響酶活性的因素有溫度、pH和重金屬離子等；固定化單寧酶不會降解茶飲料中的有益成分取決于酶的專一性。2．(2014·江蘇高考)下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述，錯誤的是()A．酵母和菜花均可作為提取DNA的材料B．DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水C．向雞血細胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?，可見玻棒上有白色絮狀物D．DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后變藍解析：選C原則上含DNA的生物材料都可用來提取DNA，只是選用DNA含量高的生物組織，成功的可能性更大；DNA在2mol/LNaCl溶液和蒸餾水中溶解度都較大；向雞血細胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?，雞血細胞會吸水破裂，但在蒸餾水中不會析出DNA；DNA溶液加入二苯胺試劑后需沸水浴加熱，待冷卻后溶液變藍。3．(2014·江蘇高考)下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述，正確的是()A．高溫易使酶失活，因此冷水洗滌去污效果應(yīng)該比溫水好B．洗衣粉中表面活性劑對堿性蛋白酶活性有一定的促進作用C．在pH低于7.0的自來水中，堿性蛋白酶依然能起作用D．洗衣粉中酶主要是通過快速分解溶在水里的污漬發(fā)揮作用解析：選C酶有最適溫度，加酶洗衣粉中的酶在溫水中更能充分發(fā)揮洗滌效果；洗衣粉中的表面活性劑能影響堿性蛋白酶的活性，會使酶失活；加酶洗衣粉中的酶是經(jīng)過特殊處理的，能耐酸、耐堿；加酶洗衣粉中的酶主要是通過分解衣物上的污漬發(fā)揮作用。4．(2015·江蘇高考)下列關(guān)于固定化酶和固定化細胞的敘述，錯誤的是()A．固定化酶的主要目的是實現(xiàn)酶的重復(fù)利用B．溶解氧交換受阻是固定化酶應(yīng)用的重要限制因素C．固定化細胞用于生產(chǎn)能分泌到細胞外的產(chǎn)物D．凝膠與被包埋細胞之間不是通過共價鍵結(jié)合解析：選B固定化酶技術(shù)是指將酶固定在不溶于水的載體上，使酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離，可實現(xiàn)重復(fù)利用。固定化酶發(fā)揮作用不需要供氧，溶解氧交換受阻不會成為其應(yīng)用的限制因素。固定化細胞只能用于生產(chǎn)分泌到細胞外的產(chǎn)物，否則無法獲得需要的產(chǎn)物。用凝膠包埋細胞利用的是物理方法。5．(2016·江蘇高考)為了探索海藻酸鈉固定化對綠球藻生長的影響，以及固定化藻對含Zn2＋污水的凈化作用，科研人員用篩選到的一株綠球藻進行實驗，流程及結(jié)果如下。請回答下列問題：圖1圖2(1)實驗中的海藻酸鈉作用是______________，CaCl2的作用是________________________。(2)為洗去凝膠球上殘余的CaCl2和其他污染物，并保持綠球藻活性，宜采用________洗滌。圖1中1.0%海藻酸鈉組培養(yǎng)24h后，移動凝膠球，溶液呈綠色，原因是___________。(3)為探索固定化藻對含Zn2＋污水的凈化作用，應(yīng)選用濃度為________海藻酸鈉制備凝膠球。(4)圖2中空白凝膠球組Zn2＋濃度下降的原因是_______________。結(jié)合圖1和圖2分析，固定化藻的實驗組24～48h間Zn2＋濃度下降速度較快的主要原因是__________________；72～96h間Zn2＋濃度下降速度較慢的原因有______________________________________。解析：(1)綠球藻為單細胞生物，可用包埋法固定化，實驗中海藻酸鈉的作用是包埋綠球藻。配制好的海藻酸鈉和綠球藻混合溶液需要滴入CaCl2溶液中，與CaCl2反應(yīng)形成凝膠球，剛形成的凝膠球應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡一段時間，有利于形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。(2)將固定好的凝膠球用綠球藻的培養(yǎng)液(生理鹽水)清洗2～3次，能夠洗去凝膠球上殘余的CaCl2和其他污染物，并保持綠球藻的活性。如果包埋綠球藻用的海藻酸鈉濃度過低，或形成的凝膠球孔徑過大，在培養(yǎng)過程中會有綠球藻從包埋材料中漏出來，使溶液呈綠色。(3)分析圖1中綠球藻數(shù)量變化曲線可知，濃度為2.0%的海藻酸鈉對綠球藻的包埋效果最好，凝膠球中包埋的綠球藻數(shù)量最多，故應(yīng)選用該濃度的海藻酸鈉制備凝膠球。(4)由Zn2＋濃度變化曲線可知，空白凝膠球組Zn2＋濃度下降的原因是凝膠對Zn2＋有一定的吸附作用。培養(yǎng)初期，綠球藻生長(增殖)速度較快，導(dǎo)致Zn2＋濃度下降速度較快；培養(yǎng)后期，由于綠球藻生長(增殖)速度減慢、溶液中Zn2＋濃度較低等，Zn2＋濃度下降速度較慢。答案：(1)包埋綠球藻(包埋劑)與海藻酸鈉反應(yīng)形成凝膠球(凝固劑)(2)培養(yǎng)液(生理鹽水)海藻酸鈉濃度過低(凝膠球孔徑過大)(3)2.0%(4)凝膠吸附Zn2＋綠球藻生長(增殖)速度快綠球藻生長(增殖)速度減慢，溶液中Zn2＋濃度較低本節(jié)內(nèi)容在近三年的高考中，考查細胞的固定化和DNA的粗提取與鑒定的頻率較高。常以選擇題的形式考查探究加酶洗衣粉的洗滌效果和DNA的粗提取與鑒定，試題中等偏易，以選擇題或非選擇題的形式考查固定化酶或固定化細胞的知識，若以非選擇題的形式出現(xiàn)，則主要考查固定化細胞在生產(chǎn)上的應(yīng)用，試題靈活。復(fù)習(xí)時抓住固定化酶或固定化細胞的系列技術(shù)要領(lǐng)，順利實現(xiàn)知識和能力的遷移?！弧⑦x擇題1．下列有關(guān)固定化酶和固定化細胞的敘述，正確的是()A．反應(yīng)產(chǎn)物對固定化酶的活性沒有影響B(tài)．實驗室常用吸附法制備固定化酵母細胞C．若發(fā)酵底物是大分子，則固定化細胞優(yōu)于固定化酶D．固定化細胞技術(shù)在多步連續(xù)催化反應(yīng)方面優(yōu)勢明顯解析：選D某些產(chǎn)物可以與酶結(jié)合，使酶的結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，從而影響酶的活性；固定化技術(shù)包括包埋法、物理吸附法和化學(xué)結(jié)合法(交聯(lián)法)，由于細胞較大，故多采用包埋法；由于大分子難以通過細胞膜，無法與細胞內(nèi)的酶接觸，所以底物是大分子時，用固定化酶優(yōu)于固定化細胞；固定化細胞固定的是一系列酶，所以在多步連續(xù)催化反應(yīng)方面優(yōu)勢明顯。2．(2017·南通二模)在探究某品牌加酶洗衣粉適宜的洗滌溫度時，不必考慮()A．實驗設(shè)計的溫度范圍是否符合生活實際B．洗滌衣物的大小、質(zhì)地、污漬類型和污染程度C．洗衣粉用量、洗滌方式及時間、洗滌后漂洗方式D．使用普通洗衣粉和不加洗衣粉進行同樣方式的洗滌解析：選D探究加酶洗衣粉適宜的洗滌溫度實驗中，自變量是溫度，實驗設(shè)計的溫度范圍要符合生活實際；洗滌衣物的大小、質(zhì)地、污漬類型和污染程度、洗衣粉用量、洗滌方式及時間、洗滌后漂洗方式都屬于無關(guān)變量，必須要考慮，否則會影響實驗結(jié)果；由于探究溫度對加酶洗衣粉的影響，所以不需要設(shè)置其他洗衣粉的對照。3．下列關(guān)于固定化酶技術(shù)的說法正確的是()A．固定化酶技術(shù)就是固定反應(yīng)物，讓酶依附著載體圍繞反應(yīng)物旋轉(zhuǎn)的技術(shù)B．固定化酶的優(yōu)勢在于能催化一系列的酶促反應(yīng)C．固定化酶中的酶無法重復(fù)利用D．固定化酶是將酶固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)解析：選D固定化酶是指通過物理或化學(xué)的方法，將水溶性的酶與不溶性的載體結(jié)合，使酶固定在載體上，并在一定的空間范圍內(nèi)進行反應(yīng)的酶，所以固定化酶技術(shù)固定的不是反應(yīng)物而是酶。因為被固定的只是一種酶，所以不能催化一系列的酶促反應(yīng)，但固定的酶可以重復(fù)利用。4．在DNA粗提取與鑒定實驗中，將獲得的含有DNA的黏稠物分別按下表處理三次，則DNA主要集中在()操作黏稠物濾液2mol·L－1的NaCl溶液攪拌過濾①②0.14mol·L－1的NaCl溶液攪拌過濾③④95%的冷酒精攪拌過濾⑤⑥A．①③⑤ B．②③⑤C．①④⑥ D．②④⑥解析：選BDNA在2mol·L－1的NaCl溶液中溶解度較大，過濾后DNA存在于濾液中；在0.14mol·L－1的NaCl溶液中DNA的溶解度最低，攪拌過濾后存在于黏稠物中；DNA不溶于95%的冷酒精，攪拌過濾后存在于黏稠物中。5．(2017·蘇州一模)某興趣小組為了探究不同金屬離子對加酶洗衣粉中的堿性蛋白酶活性的影響，進行了系列實驗，結(jié)果如下表。下列有關(guān)敘述錯誤的是()金屬離子對酶活力的影響金屬離子(%)濃度(mmol·L－1)剩余活力(%)對照0100CaCl210119.56ZnSO41039.08MgSO410132.56HgCl21017.10MnSO410189.25CuSO41076.36FeSO41031.23FeCl3109.36A．堿性蛋白酶不能將反應(yīng)液中各種蛋白質(zhì)徹底水解B．Mn2＋、Mg2＋、Ca2＋能激活堿性蛋白酶的活性C．Cu2＋、Zn2＋、Fe2＋、Hg2＋等能抑制堿性蛋白酶的活性D．反應(yīng)液中離子濃度與其抑制或激活堿性蛋白酶活性作用呈正相關(guān)解析：選D堿性蛋白酶可以將蛋白質(zhì)水解成肽，但不能將肽水解為氨基酸；根據(jù)與對照組結(jié)果的比較，可以得出Mn2＋、Mg2＋、Ca2＋等能激活堿性蛋白酶的活性，Cu2＋、Zn2＋、Fe2＋、Hg2＋等能抑制堿性蛋白酶的活性；反應(yīng)液中各金屬離子濃度一樣，抑制或激活堿性蛋白酶活性作用與離子濃度無直接關(guān)系。6．(2017·南通一模)下圖是“DNA粗提取與鑒定”實驗中的兩個操作步驟示意圖，下列相關(guān)敘述正確的是()A．圖1中溶液a是0.14mol·L－1的NaCl溶液B．圖1所示操作的原理是DNA能溶于酒精，而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不溶C．圖2所示實驗操作中有一處明顯錯誤，可能導(dǎo)致試管2中藍色變化不明顯D．圖2試管1的作用是證明2mol·L－1NaCl溶液遇二苯胺出現(xiàn)藍色解析：選C圖1中是將絲狀物溶解，溶液a是2mol·L－1的NaCl溶液；加入冷卻的酒精的目的是除雜，原理是DNA不溶于冷酒精，而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)溶于酒精；圖2操作中的錯誤是試管2中的液面高于水浴的液面，導(dǎo)致試管受熱不均勻；圖2試管1的作用是對照。7.小球藻可用于污水凈化，其繁殖能力(生長量)在一定程度上可以反映藻細胞消耗N、P等的能力。科研人員比較游離小球藻和用海藻酸鈉固定化后的小球藻生長量變化，結(jié)果見右圖。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A．本研究中固定化小球藻采用的方法是包埋法B．實驗中可用CaCl2溶液浸泡凝膠珠使其形成穩(wěn)定結(jié)構(gòu)C．結(jié)果表明固定化小球藻的生長期較短、生長速率低D．使用固定化小球藻有利于重復(fù)使用且可避免水體二次污染解析：選C據(jù)曲線可知，固定化小球藻生長速率低、生長期較長。8．下列有關(guān)生物技術(shù)實踐的敘述，錯誤的是()A．制備凝膠珠時，CaCl2溶液的作用是使膠體聚沉B．固定化酵母細胞分解葡萄糖速度要比游離酵母細胞快C．制作腐乳時，加鹽腌制可使豆腐塊變硬且能抑制雜菌生長D．微生物平板培養(yǎng)需倒置平板，目的是防止冷凝水珠污染培養(yǎng)基解析：選B制備凝膠珠時，Ca2＋與海藻酸根離子形成沉淀，從而使膠體聚沉；葡萄糖更容易進入游離酵母細胞，分解速度比固定化酵母細胞快；制作腐乳時，加鹽腌制可以析出水分，使豆腐塊變硬，且能抑制雜菌生長；微生物平板培養(yǎng)需倒置平板，防止冷凝水珠污染培養(yǎng)基或雜菌污染。9．(多選)下列有關(guān)酶的敘述，正確的是()A．在腐乳制作過程中必須有能產(chǎn)生蛋白酶的微生物參與B．洗衣粉中表面活性劑對堿性蛋白酶的活性有一定的促進作用C．固定化酶的主要目的是實現(xiàn)酶的重復(fù)利用，也有利于產(chǎn)物的純化D．原代培養(yǎng)的動物細胞出現(xiàn)接觸抑制后可用胃蛋白酶處理轉(zhuǎn)入新瓶繼續(xù)培養(yǎng)解析：選AC蛋白酶可將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為小分子的肽和氨基酸，在腐乳制作過程中必須有能產(chǎn)生蛋白酶的微生物參與；洗衣粉中的表面活性劑可以產(chǎn)生泡沫，將油脂分子分散開，但對堿性蛋白酶活性沒有促進作用；固定化酶是將酶固定在水不溶性載體上，可以實現(xiàn)酶的重復(fù)利用，也可避免酶進入產(chǎn)物，有利于產(chǎn)物的純化；原代培養(yǎng)的動物細胞出現(xiàn)接觸抑制后可用胰蛋白酶處理后轉(zhuǎn)入新瓶繼續(xù)培養(yǎng)，不能用胃蛋白酶。10．(多選)在蛋白質(zhì)和DNA的混合液中，要想得到較純的DNA，可采用的方法有()A．向混合液中加入足量的蒸餾水B．向混合液中加入DNA水解酶C．向混合液中加入冷的95%的酒精D．向混合液中加入蛋白酶解析：選CDDNA分子在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，在冷的酒精中可析出，據(jù)此可將DNA和蛋白質(zhì)分離；DNA水解酶能將DNA水解成脫氧核苷酸，會破壞DNA分子，而蛋白酶則將蛋白質(zhì)水解成可溶性的多肽，從而將蛋白質(zhì)與DNA分離。二、非選擇題11．利用固定化藻處理生活污水是近幾年發(fā)展起來的新技術(shù)。原綠球藻是海洋中的一種光合自養(yǎng)型原核生物，科研人員進行了固定化原綠球藻的生長情況及除氮效果的實驗，實驗中的人工污水是在無氮培養(yǎng)基中添加NH4Cl配制而成，結(jié)果如下。請分析回答：(1)原綠球藻固定化的方法是________，固定形成的凝膠珠顏色為________。若實驗中海藻酸鈉的濃度過高，則________________。(2)分析圖1,7d內(nèi)懸浮藻的種群數(shù)量變化為________；與懸浮藻相比，13d內(nèi)固定化藻生長、增殖速率較慢，原因是______________________________________________________________________________________________________________________________。(3)分析圖2，對人工污水除氮效率較高的是__________；從環(huán)境保護看，固定化原綠球藻的優(yōu)勢表現(xiàn)在______________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：(1)原綠球藻固定化的方法是包埋法。因為包埋的是原綠球藻，所以固定形成的凝膠珠顏色應(yīng)為綠色。若實驗中海藻酸鈉的濃度過高，則凝膠珠不易成形，過低則包埋的球藻數(shù)量較少。(2)根據(jù)圖1,7d內(nèi)懸浮藻的增長速率始終是正值，所以種群數(shù)量變化為增長。由于固定化載體遮光，固定化形成的藻球內(nèi)原綠球藻生長空間小，藻球內(nèi)外物質(zhì)交換速率受限制等原因，固定化藻生長、增殖速率較慢。(3)從環(huán)境保護看，懸浮原綠球藻易于與污水分離，有利于減少二次污染等。答案：(1)包埋法綠色凝膠珠不易成形(2)增長固定化載體遮光，固定化形成的藻球內(nèi)原綠球藻生長空間小，藻球內(nèi)外物質(zhì)交換速率受限制(合理即可)(3)懸浮原綠球藻藻球易于與污水分離，有利于減少二次污染12．如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實驗過程中的一些重要操作示意圖，請分析回答有關(guān)問題：(1)正確的操作順序是____________________(用字母和箭頭表示)。(2)如圖C、E步驟都加入蒸餾水，但其目的不同，分別是__________________和________________________。(3)如圖A步驟中所用酒精必須是經(jīng)過______________才能使用，該步驟的目的是_______________________________________________________。(4)為鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA，可滴加__________試劑后沸水浴，如果出現(xiàn)____________，則證明該絲狀物的主要成分為DNA。解析：(1)DNA的粗提取和鑒定步驟是：加入蒸餾水，破碎細胞→過濾，獲取含DNA的濾液→去除濾液中雜質(zhì)→DNA的析出→鑒定。所以正確的操作順序是C→B→E→D→A。(2)C加蒸餾水是使血細胞吸水破裂，E加蒸餾水是使NaCl溶液的濃度降低，析出DNA。(3)DNA不溶于酒精，95%的冷酒精凝集效果最佳，所以A步驟中所用酒精必須是經(jīng)過充分預(yù)冷的，以便除去溶于酒精的雜質(zhì)，提取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA。(4)DNA鑒定用二苯胺沸水浴加熱，呈藍色。答案：(1)C→B→E→D→A(2)加速細胞的破裂降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出(3)充分預(yù)冷提取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA(4)二苯胺藍色13．(2017·南通三模)生物興趣小組以蘋果為材料開展細胞中DNA含量測定研究，主要實驗流程如下圖，其中SDS(十二烷基硫酸鈉)具有破壞細胞膜和核膜、使蛋白質(zhì)變性等作用，苯酚和氯仿不溶或微溶于水。它們的密度均大于水。請分析回答：(1)步驟①中蘋果組織研磨前先經(jīng)液氮冷凍處理的主要優(yōu)點是________________。在常溫條件下，也可向切碎的組織材料中加入一定量的____________，再進行充分攪拌和研磨。(2)根據(jù)實驗流程可推知，步驟③④所依據(jù)的原理是_____________________________。(3)步驟⑤加入2～3倍體積分數(shù)95%乙醇的目的是_________________________。(4)下面是某同學(xué)設(shè)計的DNA鑒定實驗的主要步驟：①取1支20mL試管，向其中先后加入2mol·L－1的NaCl溶液5mL和少量絮狀DNA沉淀，用玻棒攪拌使其溶解。②向試管中加入4mL二苯胺試劑，混勻后將試管置于50～60℃水浴中加熱5min，待試管冷卻后，觀察溶液是否變藍。請指出上面實驗步驟中的兩個錯誤：________________、________________。(5)興趣小組成員還以同種蘋果的不同組織器官為材料，測定不同組織細胞中DNA的含量，結(jié)果如下表(表中數(shù)值為每克生物材料干重中DNA含量)：組織器官韌皮部形成層冬芽秋梢嫩葉成熟葉片含量(μg/g)80.00150.00160.00120.0070.00試從細胞分裂的角度，解釋不同生物材料中DNA含量差異明顯的原因___________________。解析：(1)組織經(jīng)液氮處理后再研磨，更容易破碎，從而可以提高DNA的提取量。在常溫條件下，用洗滌劑瓦解植物細胞的細胞膜，使DNA釋放，食鹽用于溶解DNA。(2)根據(jù)過程③④，最終DNA都在上清液中，說明蛋白質(zhì)等雜質(zhì)在下層。根據(jù)“苯酚和氯仿的密度均大于水”，說明DNA不溶于苯酚和氯仿，蛋白質(zhì)等雜質(zhì)能溶。(3)DNA不溶于95%的乙醇，加入2～3倍體積分數(shù)95%的乙醇會使DNA析出，同時能除去溶解于乙醇中的蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。(4)DNA鑒定中，應(yīng)設(shè)置對照組，便于顏色比較；同時運用二苯胺鑒定DNA時必須沸水浴加熱。(5)細胞在分裂過程中會進行DNA的復(fù)制，導(dǎo)致細胞中DNA含量加倍。形成層、冬芽、嫩葉等部位的細胞分裂旺盛，所以DNA含量較高。答案：(1)充分破碎植物細胞洗滌劑和食鹽(2)DNA不溶于苯酚、氯仿，而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)能溶(3)使DNA析出，同時去除部分蛋白質(zhì)等雜質(zhì)(提取雜質(zhì)較少的DNA)(4)水浴溫度應(yīng)為“沸水浴”缺少對照組(5)形成層、冬芽、嫩葉等部位的細胞分裂旺盛，DNA復(fù)制使得細胞中DNA含量較高eq\a\vs4\al([專題專項檢測卷七])A卷——基礎(chǔ)保分練一、選擇題1．下列關(guān)于果酒和果醋的制作原理、發(fā)酵過程的敘述，錯誤的是()A．果酒和果醋的發(fā)酵菌種不同，但代謝類型相同B．制作果酒和果醋時都應(yīng)用體積分數(shù)為70%的酒精對發(fā)酵瓶消毒C．在變酸果酒表面所觀察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落D．果酒和果醋的制作可用同一裝置，但需控制不同發(fā)酵條件解析：選A用于果酒發(fā)酵的菌種是酵母菌，其代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型；用于果醋發(fā)酵的菌種是醋酸菌，其代謝類型是異養(yǎng)需氧型，兩者的代謝類型不同。2．利用葡萄汁發(fā)酵生產(chǎn)葡萄酒，當(dāng)酒精含量達到12%～16%時，發(fā)酵就停止了。下列有關(guān)解釋錯誤的是()A．酒精對酵母菌有毒害作用B．葡萄汁中的營養(yǎng)物質(zhì)不足C．發(fā)酵液中pH逐漸降低影響酶的活性D．氧氣過少導(dǎo)致酵母菌無法進行細胞呼吸解析：選D酒精是發(fā)酵的產(chǎn)物，但酒精對細胞有一定的毒害作用；隨著發(fā)酵進行，發(fā)酵液中的營養(yǎng)物質(zhì)減少，pH逐漸降低，酵母菌會大量死亡，發(fā)酵停止；酵母菌是兼性厭氧菌，不會因氧氣過少而無法進行細胞呼吸。3．下列關(guān)于“腐乳的制作”敘述錯誤的是()A．制作腐乳時毛霉等多種微生物共同發(fā)揮作用B．毛霉生長的最適溫度為30～35℃C．后期發(fā)酵時間長短與鹽用量、鹵湯成分等有關(guān)D．封瓶時最好將瓶口通過酒精燈的火焰解析：選B腐乳的制作是毛霉等多種微生物共同作用的結(jié)果；毛霉生長的最適溫度為15～18℃。4．下列有關(guān)常見無菌操作的敘述，錯誤的是()A．用酒精擦拭雙手B．用氯氣對水源消毒C．實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行D．玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)可用酒精擦拭解析：選D用酒精擦拭雙手屬于使用化學(xué)藥劑消毒；用氯氣消毒水源也屬于使用化學(xué)藥劑消毒；實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行，因為高溫可防止雜菌污染；玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)等應(yīng)用干熱滅菌法滅菌，利用酒精擦拭不能將所有微生物殺滅。5．下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述，錯誤的是()A．培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌B．各種微生物培養(yǎng)基的配方中必須包含碳源、氮源、水、無機鹽及瓊脂等成分C．純化培養(yǎng)微生物常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法D．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可以選擇培養(yǎng)分解尿素的微生物解析：選B各種微生物培養(yǎng)基的配方中一般都包含碳源、氮源、水、無機鹽等，但不一定有瓊脂。6．下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的敘述，錯誤的是()A．應(yīng)根據(jù)微生物代謝類型選擇合適培養(yǎng)基并控制好培養(yǎng)基pHB．實驗操作時應(yīng)避免已滅菌處理的材料用具與周圍物品接觸C．待培養(yǎng)基冷卻至室溫后，在酒精燈火焰附近倒平板D．使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進行高壓蒸汽滅菌處理后再丟棄解析：選C培養(yǎng)基冷卻到50℃左右即可倒平板。7．關(guān)于酶的應(yīng)用，下列敘述錯誤的是()A．用熱水溶解洗衣粉后再將水溫調(diào)到適宜溫度B．物理吸附法比化學(xué)結(jié)合法對酶活性影響小C．酶的固定化有利于實現(xiàn)酶的重復(fù)利用D．口服多酶片中的胰蛋白酶位于片劑的核心層解析：選A熱水會使洗衣粉中的酶失活，所以要先將水溫調(diào)到適宜溫度再溶解洗衣粉；化學(xué)結(jié)合法可能破壞酶的結(jié)構(gòu)從而影響酶活性；固定化酶可以重復(fù)利用；口服多酶片中的胰蛋白酶在小腸中發(fā)揮作用，位于片劑的核心層。8．與普通洗衣粉相比，加酶洗衣粉能更有效地清除污漬，下列有關(guān)敘述錯誤的是()A．水質(zhì)、水量、水溫都會影響加酶洗衣粉的洗滌效果B．加酶洗衣粉主要添加了酸性蛋白酶和酸性纖維素酶C．探究加酶洗衣粉的洗滌效果，應(yīng)選擇同一品牌的普通洗衣粉作對照D．加酶洗衣粉的使用，減少了磷的排放，降低了環(huán)境污染解析：選B加酶洗衣粉中添加了淀粉酶、纖維素酶、堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。9．下列有關(guān)制備固定化酵母細胞的敘述，正確的是()A．利用5%的海藻酸鈉溶液比蒸餾水活化酵母細胞效果更好B．采用酒精燈小火間斷加熱使海藻酸鈉溶化后還需要注意定容處理C．將溶化后的海藻酸鈉立即與活化的酵母細胞等量混合并充分混勻D．以恒定的速度將注射器中的膠液滴加到適宜的CaCl2溶液中即可獲得規(guī)則的凝膠珠解析：選B酵母細胞用蒸餾水活化；用酒精燈小火間斷加熱使海藻酸鈉溶化后還需進行定容處理，防止海藻酸鈉濃度變高；溶化后的海藻酸鈉冷卻后與活化的酵母細胞混合，防止高溫殺死酵母菌；實驗得到的凝膠珠的形狀不規(guī)則，有的是橢圓形，有的是圓形。10．(2017·無錫一模)下列關(guān)于DNA粗提取和鑒定實驗的敘述，正確的是()A．加入預(yù)冷的體積分數(shù)為95%的酒精后要用玻璃棒輕緩攪拌B．調(diào)節(jié)NaCl溶液物質(zhì)的量濃度至0.14mol·L－1，過濾后取濾液進行后續(xù)步驟的操作C．在剪碎的植物中加入洗滌劑后即可進行研磨D．向溶有DNA的NaCl溶液中加入適量二苯胺試劑后溶液即呈藍色解析：選ADNA在物質(zhì)的量濃度為0.14mol·L－1的NaCl溶液中溶解度最低，過濾后取紗布上的黏稠物進行后續(xù)步驟的操作；用植物材料提取DNA時要加入食鹽和洗滌劑，前者是溶解DNA，后者是破壞細胞膜；向溶有DNA的NaCl溶液中加入適量二苯胺試劑后要沸水浴加熱后，才可觀察到溶液呈藍色。11．某同學(xué)用洋蔥進行DNA粗提取和鑒定實驗，操作錯誤的是()A．加入食鹽和洗滌劑后用力進行快速、充分地研磨B．用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNAC．加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌D．加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱解析：選A加入洗滌劑后研磨動