固相萃取技術(shù)一、固相萃取(SPE)概念SPE：SolidPhaseExtraction是一種液相色譜分離，利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物與干擾化合物分離，達(dá)到分離和富集目標(biāo)化合物的目的。慢中等快淋洗液二、固相萃取的模式及原理反相固相萃取正相固相萃取離子交換固相萃取①陰離子交換②陽離子交換（一）、反相固相萃取流動相：極性（水溶液）或中等極性固定相：非極性。分離對象：中等到非極性物質(zhì)。分析物中的CH鍵+矽膠表面官能團(tuán)→吸附→極性溶液中的有機(jī)分析物→保留在SPE。用非極性溶劑解吸吸附在固定相中的目標(biāo)物質(zhì)。1、反相固相萃取原理2、常用反相固相萃取柱LC-18、LC-8：標(biāo)準(zhǔn)的單鍵合矽膠ENVI-18、ENVI-8：聚合鍵合類填料ENVI-ChromP：苯乙烯：疏水

ENVI-Carb：含碳

（二）、正相固相萃取流動相：非極性、中等極性固定相：極性。分析物質(zhì)：極性、中等極性、非極性1、正相固相萃取原理

保留取決於分析物的極性官能團(tuán)與吸附劑表面的極性官能團(tuán)之間的相互作用。用比樣品本身更極性的溶劑洗脫吸附的分析物質(zhì)。①極性官能團(tuán)鍵合矽膠

LC-CN，LC-NH2，

LC-Diol②極性吸附物質(zhì)

LC-Si，LC-Florisil，

ENVI-Florisil，LC-Alumina2、常用正相固相萃取柱知識窗流動相①②（三）、離子交換固相萃取適用於帶有電荷的化合物（水溶液、有機(jī)溶液）。原理：靜電吸引，化合物上的帶電荷基團(tuán)與鍵合矽膠上的帶電荷基團(tuán)之間的吸引。分為：陰離子交換和陽離子交換。1、陰離子（負(fù)電荷）交換LC-SAX、LC-NH2：脂肪族季銨類鹽+矽膠2、陽離子交換LC-SCX：磺酸基；LC-WCX：羧酸基團(tuán)（四）溶劑極性的影響①目標(biāo)化合物在極性/非極性溶劑中的溶解度，這主要涉及淋洗液的選擇。②目標(biāo)化合物有無可能離子化（可用調(diào)節(jié)pH值實(shí)現(xiàn)離子化）。（四）溶劑極性的影響③目標(biāo)化合物有無可能與吸附劑形成共價鍵。④在吸附劑上吸附點(diǎn)的競爭程度，關(guān)係到能否很好分離。三、固相萃取的裝置及操作程式固相萃取的裝置篩板篩板篩板1、固相萃取的裝置1、固相萃取的裝置2、操作程式（1）、活化吸附劑

萃取之前要用適當(dāng)?shù)娜軇┝芟葱≈?，以使吸附劑保持濕潤，可以吸附目?biāo)化合物或干擾化合物。2、操作程式（2）、上樣（吸附）樣品倒入活化後的固相萃取小柱，然後利用抽真空，加壓或離心的方法使樣品進(jìn)入吸附劑。2、操作程式3、洗滌（去除雜質(zhì)）在樣品進(jìn)入吸附劑，目標(biāo)化合物被吸附後，可先用較弱的溶劑將弱保留干擾化合物洗掉。2、操作程式4、洗脫和收集再用較強(qiáng)的溶劑將目標(biāo)化合物洗脫下來，加以收集?；罨絼┻M(jìn)

樣洗滌洗脫我來說！四、SPE分離機(jī)制與溶劑的選擇分離機(jī)制典型的弱溶劑（保留條件）典型的強(qiáng)溶劑（洗脫條件）反相SPE緩衝液或低濃度的甲醇或乙腈乙腈、甲醇或溶劑與水的混合物正相SPE正己烷、甲苯等二氯甲烷、甲醇等陽離子交換SPE低離子強(qiáng)度緩衝液(<0.1mol/L)高離子強(qiáng)度緩衝液（＞0.1mol/L)低反離子強(qiáng)度高反離子強(qiáng)度陰性離子交換SPE低離子強(qiáng)度緩衝液（<0.1mol/L)高離子強(qiáng)度緩衝液(>0.1mol/L)五、HPLC與SPE的比較HPLCSPE硬體（柱子）不銹鋼柱塑膠柱顆粒度(um)540顆粒形狀球型(均勻）球型（不均勻）塔板數(shù)20～25，000＜1001、柱子的比較

柱接頭

螺帽柱管

過濾片型號：C18柱管篩板固定相尖端？N=L/H2、塔板數(shù)的比較六、固相微萃取

SPME不是將待測物質(zhì)全部分離出來，通過在樣品與固相塗層間的平衡來達(dá)到分離。方法：玻璃纖維浸入樣品中→殘留農(nóng)藥→擴(kuò)散→吸附→平衡→取出玻璃纖維→洗脫→分析。

固相微萃取裝置

固相微萃取裝置關(guān)鍵：石英纖維上塗吸附劑原則：目標(biāo)化合物是非極性時選擇非極性塗層；目標(biāo)化合物是極性時選擇極性塗層。

使用方法七、氣體萃?。斂占夹g(shù)）七、氣體萃?。斂占夹g(shù)）七、氣體萃取（頂空技術(shù)）取樣品基質(zhì)（液體和固體）上方的氣相部分進(jìn)行色譜分析。用途：痕量高揮發(fā)性物質(zhì)的分析測定，氣體是揮發(fā)性物質(zhì)的最理想的溶劑。1、特點(diǎn)①操作簡單②可自動化③可變因素多④靈敏度高：檢出限可達(dá)10-12水準(zhǔn)。2、分類靜態(tài)頂空：在一個密閉的容器中，樣品與樣品上方氣體（1/2）達(dá)到平衡。動態(tài)頂空：“連續(xù)氣體萃取”方法，不必兩相達(dá)到平衡。經(jīng)捕集濃縮後進(jìn)行測定。3、靜態(tài)頂空過程4、動態(tài)頂空過程捕集阱中捕集濃縮?！?/p>