第十六課維生素類藥物分析三演示文稿第1頁，共72頁。優(yōu)選第十六課維生素類藥物分析三第2頁，共72頁。維生素D3（膽骨化醇）第3頁，共72頁。1.溶解性脂溶性2.不穩(wěn)定性含多個(gè)雙健易被氧化，對(duì)酸不穩(wěn)定3.旋光性性狀項(xiàng)下比旋度一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)4.顯色反應(yīng)5.紫外吸收特征性狀項(xiàng)下吸收系數(shù)第4頁，共72頁。二、鑒別試驗(yàn)（一）顯色反應(yīng)1.與醋酐-濃硫酸反應(yīng)Ch.P（2005）第5頁，共72頁。維生素D2Ch.P（2005）【鑒別】（1）取本品約0.5mg，加三氯甲烷5ml溶解后，加醋酐0.3ml與硫酸0.1ml，振搖，初顯黃色，漸變紅色，迅即變?yōu)樽仙?，最后成綠色。第6頁，共72頁。維生素D3Ch.P（2005）【鑒別】（1）取本品約0.5mg，加三氯甲烷5ml溶解后，加醋酐0.3ml與硫酸0.1ml振搖，初顯黃色，漸變紅色，迅即變?yōu)樽仙?、藍(lán)綠色，最后變?yōu)榫G色。第7頁，共72頁。2.與三氯化銻反應(yīng)BP3.其他顯色反應(yīng)維生素D+三氯化銻→橙紅色→粉紅色第8頁，共72頁。（二）IRCh.P（2005）維生素D2Ch.P（2005）【鑒別】（2）本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集452圖）一致。第9頁，共72頁。（三）維生素D2、D3的區(qū)別反應(yīng)維生素D與乙醇+硫酸反應(yīng)維生素 D2顯紅色，

max在570nm維生素 D3顯黃色，

max在495nm第10頁，共72頁。三、雜質(zhì)檢查維生素D2中麥角甾醇的檢查靈敏度法維生素D2Ch.P（2005）【檢查】麥角甾醇

取本品10mg，加90%乙醇2ml溶解后，加洋地黃皂苷溶液（取洋地黃皂苷20mg，加90%乙醇2ml，加熱溶解制成）2ml，混合，放置18小時(shí)，不得發(fā)生渾濁或沉淀。第11頁，共72頁。四、含量測(cè)定HPLC藥典附錄維生素D測(cè)定法共有三法第12頁，共72頁。第一法適用于無維生素A醇及其它雜質(zhì)干擾時(shí)

正相色譜、內(nèi)標(biāo)法1.色譜條件色譜柱硅膠流動(dòng)相正己烷–正戊醇（997:3）內(nèi)標(biāo)鄰苯二甲酸二甲酯第13頁，共72頁。2.系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)維生素D3對(duì)照品維生素D3前維生素D3反式維生素D3速甾醇D3光照△目的

獲得待測(cè)成分及各種干擾成分色譜峰，檢查分離度是否符合規(guī)定第14頁，共72頁。3.計(jì)算校正因子（對(duì)照品為維生素D3）（1）維生素D校正因子（f1）第15頁，共72頁。（2）前維生素D折算成維生素D的校正因子（f2）第16頁，共72頁。4.計(jì)算含量維生素D及前維生素D折算成維生素D的總量（mi）單位=0.025μg第17頁，共72頁。第二法適用于有維生素A醇及其它雜質(zhì)干擾時(shí)按第一法第18頁，共72頁。第三法適用于按第二法處理后前維生素D仍被干擾的樣品第二法凈化后樣品維生素D外標(biāo)法計(jì)算維生素D含量第19頁，共72頁。維生素D2Ch.P（2005）【含量測(cè)定】

精密稱取本品25mg，置100ml棕色量瓶中，加三甲基戊烷80ml，避免加熱，用超聲處理1分鐘使溶解，加三甲基戊烷至刻度，搖勻；精密量取上述溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各5ml，置50ml棕色量瓶中，加正己烷至刻度，搖勻，作為供試品溶液。照維生素D測(cè)定法（附錄ⅦK第一法）測(cè)定，即得。第20頁，共72頁。苯并－二氫吡喃醇第五節(jié)維生素E

第21頁，共72頁。名稱R1R2相對(duì)活性α-生育酚β-生育酚γ-生育酚δ-生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.00.50.20.1***第22頁，共72頁。生物效價(jià)右旋體：消旋體=1.4：10（天然品）（合成品）dl－α－生育酚醋酸酯第23頁，共72頁。結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、苯環(huán)+二氫吡喃環(huán)+飽和烴鏈1、易溶于有機(jī)溶劑，不溶于水2、UV3、酯鍵易水解△第24頁，共72頁。75℃15′（一）硝酸反應(yīng)橙紅色鑒別二、第25頁，共72頁。（橙紅色）生育紅生育酚HNO3強(qiáng)氧化劑第26頁，共72頁。

取本品約30mg，加無水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，搖勻，在75℃加熱15分鐘，溶液應(yīng)顯橙紅色。第27頁，共72頁。三氯化鐵－聯(lián)吡啶反應(yīng)△[O]（二）第28頁，共72頁。生育酚對(duì)-生育醌[O]弱氧化劑第29頁，共72頁。紅色第30頁，共72頁。

=41.0～45.5λmax=284nmλmin=254nm0.01%無水乙醇中UV法（三）第31頁，共72頁。維生素EUV圖第32頁，共72頁。薄層板硅膠G展開劑環(huán)己烷-乙醚（4：1）顯色劑硫酸（105℃5′）VitERf

=0.7TLC法（四）第33頁，共72頁。三、特殊雜質(zhì)1.酸度檢查制備過程中引入的游離羧酸，酸堿滴定法2.

游離生育酚的檢查

第34頁，共72頁。硫酸鈰滴定液（0.01mol/L）二苯胺（亮黃→灰紫）利用游離生育酚的還原性，將硫酸鈰還原成硫酸亞鈰原理（一）試劑（二）第35頁，共72頁。（M生育酚=430.8）例

取本品0.10g，加無水乙醇5ml溶解后，加二苯胺試液1滴，用硫酸鈰液（0.01mol/L）滴定，消耗硫酸鈰液（0.01mol/L）不得過1.0ml。第36頁，共72頁?！?.15％限量（三）第37頁，共72頁。藥典規(guī)定消耗硫酸鈰液（0.01mol/L）≤1.0ml設(shè)：應(yīng)消耗硫酸鈰液≤Vml 0.01×1.0＝實(shí)際濃度×V若硫酸鈰液濃度不是0.01000mol/L，應(yīng)重新計(jì)算硫酸鈰的消耗量第38頁，共72頁。例

Ce(SO4)2=0.01020mol/L第39頁，共72頁。四、含量測(cè)定GC法（一）GC特點(diǎn)1、選擇性好靈敏度高速度快分離效能好揮發(fā)性低、不穩(wěn)定、極性強(qiáng)→衍生化易受樣品蒸氣壓限制第40頁，共72頁。載氣→N2固定液→硅酮（OV-17）擔(dān)體→硅藻土或高分子多孔小球柱溫→265℃檢測(cè)器→氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)內(nèi)標(biāo)→正三十二烷

n≥500R≥2VitE測(cè)定的色譜條件2、內(nèi)標(biāo)法加校正因子第41頁，共72頁。第42頁，共72頁。內(nèi)標(biāo)法供試液（樣品+內(nèi)標(biāo)）內(nèi)標(biāo)物對(duì)照液（對(duì)照+內(nèi)標(biāo)）是樣品中不存在的物質(zhì)與被測(cè)組分峰靠近能與各組分完全分離與被測(cè)組分的量接近第43頁，共72頁。校正因子：第44頁，共72頁。實(shí)際工作中的計(jì)算方法第45頁，共72頁。例內(nèi)標(biāo)液

取正三十二烷加正己烷溶解并稀釋成1.0mg/ml溶液對(duì)照液

精密稱取VitE對(duì)照品0.2011g

置棕色具塞錐形瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)液10ml，密塞，振搖使溶解，取

1~3ul注入GC儀，測(cè)定，計(jì)算供試液

精密稱取供試品0.1998g置棕色具塞錐形瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)液

10ml，密塞，振搖使溶解，取1~3ul

注入GC儀，測(cè)定，計(jì)算第46頁，共72頁。對(duì)照液供試液0.3730.368本品含C31H52O3應(yīng)為96.0~102.0%第47頁，共72頁。BPGC

內(nèi)標(biāo)正三十二烷

R≥1.4USPGC

內(nèi)標(biāo)十六酸十六醇酯

R≥1.0JPHPLC

外標(biāo)dl－α－生育酚R≥1.4第48頁，共72頁。利用生育酚的易氧化性還原型氧化型二苯胺（亮黃→灰紫）△原理1、鈰量法（二）指示劑2、第49頁，共72頁。防止Ce(SO4)2的水解減慢生育酚被O2氧化速度C、酸性條件Ce(SO4)2易溶于水生育酚易溶于醇B、溶劑分子量較大，反應(yīng)慢易被O2氧化A、反應(yīng)速度H2SO4討論3、第50頁，共72頁。含量計(jì)算4、MVitE=472第51頁，共72頁。樣品→dl－α－生育酚固定相→十八烷基硅烷鍵合硅膠流動(dòng)相→甲醇-水（49：1）檢測(cè)波長(zhǎng)→292nmR＞2.6RSD≤0.8%JP-RP-HPLC法（外標(biāo)法）（三）第52頁，共72頁。測(cè)定對(duì)象→血清中VitA和VitE固定相→十八烷基硅烷鍵合硅膠流動(dòng)相→甲醇-水（96：4）檢測(cè)波長(zhǎng)→8′前330nm8′后292nmRP-HPLC法（外標(biāo)法）（四）第53頁，共72頁。108．在三氯醋酸或鹽酸存在下，經(jīng)水解、脫羧、失水后，加入吡咯即產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物的藥物應(yīng)是

A.氯氮卓

B.維生素AC.普魯卡因

D.鹽酸嗎啡

E.維生素C第54頁，共72頁。99：88．中國(guó)藥典（2000年版）采用以下何法測(cè)定維生素E含量

A.酸堿滴定法

B.氧化還原法

C.紫外分光光度法

D.氣相色譜法

E.非水滴定法第55頁，共72頁。98：79．中國(guó)藥典（2000年版）采用氣相色譜法測(cè)定維生素E含量，內(nèi)標(biāo)物質(zhì)為

A.正二十二烷

B.正二十六烷

C.正三十烷

D.正三十二烷

E.正三十六烷第56頁，共72頁。99：77.下列藥物的堿性溶液，加入鐵氰化鉀后，再加正丁醇，顯藍(lán)色熒光的是

A.維生素AB.維生素B1

C.維生素CD.維生素DE.維生素E第57頁，共72頁。97：77．既具有酸性又具有還原性的藥物是

A.維生素AB.咖啡因

C.苯巴比妥

D.氯丙嗪

E.維生素C第58頁，共72頁。99m：132.維生素C的鑒別反應(yīng)，常采用的試劑有

A.堿性酒石酸銅

B.硝酸銀

C.碘化鉍鉀

D.乙酰丙酮

E.三氯醋酸和吡咯第59頁，共72頁。99m：84.測(cè)定維生素C注射液的含量時(shí)，在操作過程中要加入丙酮，這是為了

A.保持維生素C的穩(wěn)定

B.增加維生素C的溶解度

C.使反應(yīng)完全

D.加快反應(yīng)速度

E.消除注射液中抗氧劑的干擾第60頁，共72頁。98：85.能發(fā)生硫色素特征反應(yīng)的藥物是

A.維生素AB.維生素B1

C.維生素CD.維生素EE.煙酸第61頁，共72頁。97：81．使用碘量法測(cè)定維生素C的含量,已知維生素C的分子量為176.13，每1ml碘滴定液

(0.1mol/L)相當(dāng)于維生素C

的量為

A.17.61mgB.8.806mgC.176.1mgD.88.06mgE.1.761mg第62頁，共72頁。97：[121—125]（99：[121—125]）可發(fā)生以下反應(yīng)或現(xiàn)象的藥物為

A.維生素B1B.維生素CC.兩者均能D.兩者均不能

121.與碘化汞鉀生成黃色沉淀

122.麥芽酚反應(yīng)

123.在乙醚中不溶

124.與2,6-二氯靛酚反應(yīng)使顏色消失

125.硫色素反應(yīng)ADCBA第63頁，共72頁。115．維生素A的鑒別試驗(yàn)為

A.三氯化鐵反應(yīng)

B.硫酸銻反應(yīng)

C.2,6-二氯靛酚反應(yīng)

D.三氯化銻反應(yīng)

E.間二硝基苯的堿性乙醇液反應(yīng)第64頁，共72頁。77．中國(guó)藥典（2000年版）規(guī)定維生素A的測(cè)定采用紫外分光光度法（三點(diǎn)校正法），此法又分為

A．等波長(zhǎng)差法

B．等吸收度法

C．6/7A法

D．差示分光法

E．雙波長(zhǎng)法第65頁，共72頁。78．維生素E的鑒別試驗(yàn)有

A．硫色素反應(yīng)

B．硝酸氧化呈色反應(yīng)

C．硫酸-乙醇呈色反應(yīng)

D．堿性水解后加三氯化鐵乙醇液與2,2-聯(lián)吡啶乙醇液呈色反應(yīng)

E．Marquis反應(yīng)第66頁，共72頁。80.下面哪些描述適用于維生素AA.分子具有長(zhǎng)二烯醇側(cè)鏈，易被氧化

B.