ICS65.020.20

CCSB62

35

福建省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB35/T2037—2021

國蘭雜交育種技術(shù)規(guī)程

Technologystandardforthecross-breedingofChinesecymbidium

2021-12-29發(fā)布2022-03-29實施

福建省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB35/T2037—2021

目次

前言.................................................................................II

1范圍...............................................................................1

2規(guī)范性引用文件.....................................................................1

3術(shù)語和定義.........................................................................1

4縮略語.............................................................................1

5親本選擇...........................................................................1

6雜交技術(shù)...........................................................................2

7F1代無菌苗培育.....................................................................2

8子代測定...........................................................................3

9優(yōu)良單株選擇與擴繁.................................................................3

10檔案管理..........................................................................5

附錄A（資料性）國蘭主要病害防治表...................................................6

附錄B（資料性）國蘭主要蟲害等防治表.................................................7

附錄C（資料性）子代生物學(xué)性狀類別和測定內(nèi)容.........................................8

附錄D（資料性）國蘭雜交育種技術(shù)檔案記錄表...........................................9

參考文獻(xiàn).............................................................................10

I

DB35/T2037—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。

本文件由福建省林業(yè)局提出并歸口。

本文件起草單位：福建農(nóng)林大學(xué)、福州市于山風(fēng)景名勝公園管理處、福建省林業(yè)科技試驗中心、

福建連城蘭花股份有限公司、廣東遠(yuǎn)東國蘭股份有限公司、福建百秾生態(tài)科技有限公司。

本文件主要起草人：艾葉、劉江楓、蘭思仁、何碧珠、彭東輝、劉仲健、李明河、王勇、汪長水、

饒春榮、陳少敏、陳南川、饒小瓊、饒華芳、朱尾銀、徐建球、陳桂珍、郝楊、陳進燎、徐喆、

周小琴、孫佳婷、石曉玲。

II

DB35/T2037—2021

國蘭雜交育種技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了國蘭（Chinesecymbidium）中建蘭（Cymbidiumensifolium）、墨蘭（C.

sinense）、寒蘭（C.kanran）、春蘭（C.goeringii）、蕙蘭（C.faberi）、蓮瓣蘭（C.

tortisepalum）、春劍（C.tortisepalumvar.longibracteatum）共7種植物種間或品種間雜交育種

親本選擇、雜交技術(shù)、F1代無菌苗培育、子代測定及優(yōu)良單株選擇與擴繁、檔案管理等。

本文件適用于人工控制下的國蘭雜交育種。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文

件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適

用于本文件。

GB/T8321（所有部分）農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

根狀原球莖rhizomes-likeprotocorm

種子經(jīng)誘導(dǎo)萌發(fā)的具有明顯節(jié)和節(jié)間，能長出幼芽和根系的橫生肉質(zhì)莖。

4縮略語

下列縮略語適用于本文件。

IBA：吲哚丁酸（Indolebutyricacid）

MS：MS培養(yǎng)基（MSculturemedium）

NAA：萘乙酸（1-Naphthaleneaceticacid）

6-BA：6-芐氨基嘌呤（6-Benzylaminopurine）

5親本選擇

選擇花、葉等性狀優(yōu)良且配合力高、遺傳力強、抗性強和生長勢好的優(yōu)良品種作為親本。

1

DB35/T2037—2021

6雜交技術(shù)

6.1雜交母株選擇

從選定的親本群體中選擇健壯無病蟲害的植株作為雜交母株。

6.2授粉環(huán)境

選擇晴朗天氣進行人工授粉，授粉環(huán)境為遮光度75%、溫度15℃～28℃、相對濕度65%～75%。

6.3授粉過程

先將母本花粉塊除去（去雄），并剪除萼片、花瓣和唇瓣后，取父本新鮮的花粉塊放置于母本柱

頭蕊腔內(nèi)。每個母株授粉1個花葶，每個花葶授粉1～3朵花，剪除花葶其余花朵。所用工具均用75%酒

精擦拭消毒。

6.4標(biāo)記

授粉后用鉛筆寫好標(biāo)記牌并記錄父母本信息及授粉日期，系掛在授粉母株花序梗上。

6.5授粉后管理

授粉后2d～3d，蕊腔閉合、柱頭膨大，期間控制澆水，避免將水滴澆灌到柱頭上；約5d～10d

子房開始膨大，加強水肥管理。主要病蟲害防治見附錄A和附錄B，農(nóng)藥的使用應(yīng)符合GB/T8321（所有

部分）的規(guī)定。

6.6蒴果采收及保存

6.6.1蒴果采收

人工授粉后蒴果表皮由綠色轉(zhuǎn)為黃色且尚未裂開時采收。

6.6.2蒴果保存

蒴果采摘后應(yīng)隨即播種。如需保存可用75%酒精擦拭蒴果表面，用牛皮紙袋包好放置4℃冰箱內(nèi)冷

藏，冷藏時間不宜超過10d。

7F1代無菌苗培育

7.1蒴果滅菌

將蒴果放入燒杯中，加少量洗衣粉，用流水沖洗干凈，純凈水沖洗2～3遍后將材料置于超凈工作

臺內(nèi)，用75%酒精浸泡10s～15s，用5%次氯酸鈉浸泡消毒10min～15min，無菌水沖洗3～5遍備用。

7.2無菌播種

將消毒后的蒴果取出放在消毒濾紙上吸干表面水分，解剖刀縱向切開蒴果，用鑷子將種子取出并

均勻撒播到滅菌的萌發(fā)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基配方的主要成分為：基本培養(yǎng)基MS、細(xì)胞分裂素（6-BA）

0.4mg/L～2.0mg/L、生長素（NAA/IBA）0.1mg/L～0.5mg/L、蔗糖20g/L～25g/L、瓊脂5.5g/L～

6.5g/L、活性炭粉0.5g/L～1.0g/L，pH值為5.4～5.8。

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DB35/T2037—2021

7.3萌發(fā)誘導(dǎo)

接種后進行暗培養(yǎng)25d～30d，再提供光照，光照強度為500lx～1000lx，光照時間5h/d～

8h/d，培養(yǎng)室溫度控制在23℃～26℃。

7.4分化培養(yǎng)

初代根狀原球莖誘導(dǎo)后，將其轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基上進行芽分化培養(yǎng)，培養(yǎng)基配方的主要成分為：

基本培養(yǎng)基MS、細(xì)胞分裂素（6-BA）0.5mg/L～2.0mg/L、生長素（NAA）0.1mg/L～0.5mg/L、

有機添加物（土豆泥、香蕉泥等）100g/L～120g/L、蔗糖20g/L～25g/L、瓊脂5.5g/L～6.5g/L、

活性炭粉0.5g/L～1.0g/L，pH值為5.4～5.8。培養(yǎng)條件：光照強度為1000lx～1500lx，光照

時間8h/d～10h/d，培養(yǎng)溫度23℃～27℃。

7.5生根培養(yǎng)

將帶2～3片葉片芽苗轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)基配方的主要成分為：基本培養(yǎng)基1/2MS、生長素

（NAA/IBA）0.3mg/L～1.5mg/L、有機添加物（土豆泥、香蕉泥等）100g/L～120g/L、蔗糖

20g/L～25g/L、瓊脂5.5g/L～6.5g/L、活性炭粉0.5g/L～1.0g/L，pH值為5.4～5.8。先暗培養(yǎng)5

d，然后轉(zhuǎn)移到1000lx～1500lx，光照時間10h/d～12h/d，溫度23℃～27℃的條件下培養(yǎng)。

7.6煉苗

生根苗的根數(shù)達(dá)到1～3條、根長1cm～3cm時，連同培養(yǎng)瓶一起從培養(yǎng)室轉(zhuǎn)移到煉苗棚，用遮光

度為60%～70%遮陽網(wǎng)覆蓋，閉口煉苗7d～15d，煉苗溫度為20℃～30℃。

7.7移栽定植

出瓶定植前3d～5d打開培養(yǎng)瓶蓋，移栽時取出生根苗，用清水沖洗干凈根部殘留培養(yǎng)基，再用

多菌靈1500～2000倍液浸泡3min～5min后，置陰涼處晾干至根系發(fā)白，采用細(xì)碎松樹皮：珍珠巖

=2:1體積混合作為基質(zhì)移栽定植。移栽后前7d注意遮光，空氣濕度保持在70%～80%，遮光率50%，光

照強度3000lx～5000lx，環(huán)境溫度控制在白天25℃～28℃，晚上23℃～26℃。

7.8田間管理

從小苗到植株開花過程的田間管理參照LY/T1735—2008的第7章施行。主要病蟲害防治見附錄A和

附錄B，農(nóng)藥的使用應(yīng)符合GB/T8321（所有部分）的規(guī)定。

8子代測定

對子代生物學(xué)性狀進行測定，性狀類別和測定內(nèi)容見附錄C。

9優(yōu)良單株選擇與擴繁

9.1優(yōu)良單株選擇

選擇長勢旺盛、根系健壯、葉姿優(yōu)美、花葶高度適中、花朵排列整齊、花型圓整、花朵數(shù)多，花

瓣質(zhì)地較厚、觀賞期長等性狀優(yōu)良的單株作為擴繁母株。

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9.2優(yōu)良單株擴繁

9.2.1外植體選取

選取生長健壯、無病蟲害的擴繁母株的側(cè)芽作為外植體。

9.2.2外植體消毒

將外植體放在燒杯中，加少量洗衣粉，用流水沖洗干凈，純凈水沖洗2～3遍后將材料置于超凈工

作臺內(nèi)用75%酒精浸泡10s～20s，用10%次氯酸鈉浸泡消毒10min～15min，無菌水沖洗3～4遍備用。

9.2.3誘導(dǎo)培養(yǎng)

在超凈工作臺上將消毒處理后的外植體置于培養(yǎng)皿上，剝出莖尖接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基配

方的主要成分為：基本培養(yǎng)基MS、細(xì)胞分裂素（6-BA）0.5mg/L～2.0mg/L、生長素（NAA）

0.2mg/L～1.0mg/L、有機添加物（蛋白胨2.0g/L～3.0g/L、香蕉泥40g/L～50g/L等）、蔗糖

20g/L～30g/L、瓊脂5.0g/L～6.5g/L、活性炭粉0.5g/L～2.0g/L，pH值為5.4～5.8，每瓶接

1芽。先暗培養(yǎng)8d～10d后轉(zhuǎn)至光培養(yǎng)，光照強度1000lx～1500lx，光照時間10h/d，培養(yǎng)

溫度23℃～27℃。

9.2.4增殖培養(yǎng)

將誘導(dǎo)出的根狀原球莖切割成1.5cm～2.0cm的莖段接入增殖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基配方的主要成分

為：基本培養(yǎng)基1/2MS、細(xì)胞分裂素（6-BA）0.1mg/L～2.0mg/L、生長素（NAA）0.1mg/L～2.0mg/L、

有機添加物（蛋白胨2.0g/L～2.5g/L、椰汁50mL/L～100mL/L等）、蔗糖20g/L～25g/L、

瓊脂5.0g/L～6.5g/L、活性炭粉0.5g/L～1.0g/L，pH值為5.4～5.8。在光照強度1000Lx～

1500Lx、光照時間12h/d、溫度23℃～27℃的條件下培養(yǎng)。

9.2.5分化培養(yǎng)

參照7.4執(zhí)行。

9.2.6生根培養(yǎng)

參照7.5執(zhí)行。

9.2.7煉苗

參照7.6執(zhí)行。

9.2.8移栽定植

參照7.7執(zhí)行。

9.2.9田間管理

參照7.8執(zhí)行。

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10檔案管理

建立技術(shù)檔案，記錄雜交親本、雜交日期、子代的生物學(xué)特性、選出的優(yōu)良單株、配制培養(yǎng)基時

間、配方、接種繼代代數(shù)、種植地點、種植時間、澆水次數(shù)、施肥情況、用藥情況以及天氣變化情況，

記錄內(nèi)容見附錄D。

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A

A

附錄A

（資料性）

國蘭主要病害防治表

表A.1給出了國蘭主要病害的危害癥狀和防治方法。

表A.1國蘭主要病害防治表

病害名稱發(fā)生時間危害癥狀防治方法

為害葉片，多發(fā)生在葉尖或葉緣，初期表

注意通風(fēng)透光；及時剪除葉部病斑；發(fā)病初期

5月上旬至面產(chǎn)生淺褐色凹陷小點，周圍組織淺黃色，

炭疽病可用50%甲基托布津或50%多菌靈800～1000倍

11月下旬后期病斑擴大為不規(guī)則或橢圓形，中間灰褐

液噴灑，連續(xù)2～3次，每次間隔7d～10d

色，邊緣顏色變深褐色

線蟲寄生于根部，引起根系腐爛，地上葉栽培前栽培基質(zhì)應(yīng)消毒，可用100℃蒸汽滅菌

多在3月下

片生長不良，葉色褪綠、發(fā)黃，甚至造成植消毒，或者棉隆混合基質(zhì)消毒，殺死蟲卵；生長

旬至4月上

線蟲病株萎焉。線蟲危害造成大量傷口，還會引起期危害嚴(yán)重的需要立即換盆，將病株泡入40%克

旬，5月進

其他土傳病菌的侵染，導(dǎo)致植株發(fā)病，加速線磷乳劑1000倍液中20min～30min，撈出晾

入發(fā)病盛期

植株枯死干，用新基質(zhì)重新栽種

改善基質(zhì)排水透氣條件，注意通風(fēng)透光；感病

病害從葉片基部開始，最初呈水漬狀，逐

后植株，應(yīng)及時切除感病部位，并將蘭根和假鱗

高溫多雨季漸變褐腐爛，并產(chǎn)生白絹絲狀菌絲體，不斷

白絹病莖泡入20%甲基立枯磷600～800倍或25%速克靈

節(jié)向上或在根際基質(zhì)表面蔓延，最后使植株枯

800倍液中30min～40min，反復(fù)浸泡2～3次

死

后，用新基質(zhì)重新栽種

改善基質(zhì)排水透氣條件，注意通風(fēng)透光；感病

植株發(fā)病后葉變黃而萎蔫，假鱗莖皺縮，后植株，應(yīng)及時切除感病部位，并將蘭根和假鱗

4月上旬至

枯萎病根系腐爛。病情嚴(yán)重時，假鱗莖深度腐爛，莖泡入20%甲基立枯磷600～800倍或30%惡霉靈

10月下旬

后期發(fā)臭1000倍液中30min～40min，反復(fù)浸泡2～3次

后，用新基質(zhì)重新栽種

葉尖受害初期表現(xiàn)為淡褐色斑點形，中期

淺褐色，后期深褐色，病斑融合后葉尖枯及時剪除病葉，噴施80%代森錳鋅800倍或25%

6月上旬至

葉枯病死；葉片中部受害，病斑呈圓形或橢圓形，施?？巳橛?500倍液，連續(xù)2～3次，每次間

12月下旬

中央黑褐色，邊緣有黃綠色暈圈；嚴(yán)重時，隔7d～10d

整片葉枯死

通常在當(dāng)年新發(fā)的幼苗上發(fā)病，感病后注意噴水后及時加強通風(fēng)；感病后植株，應(yīng)及

高溫多雨季葉基部產(chǎn)生水漬狀黑褐色壞死斑塊，后迅時切除感病部位，并將蘭根和假鱗莖用農(nóng)用鏈霉

軟腐病

節(jié)速擴大，并出現(xiàn)腐爛，整株苗易被拔起，素1000倍液浸泡1h～2h后，用新基質(zhì)重新栽

且有惡臭味種

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B

B

附錄B

（資料性）

國蘭主要蟲害等防治表

表B.1給出了國蘭主要蟲害的危害癥狀和防治方法。

表B.1國蘭主要蟲害等防治表

蟲害名稱危害癥狀防治方法

在高溫多濕、空氣流動不暢的情況下，繁在少量發(fā)生時，可用軟刷刷除，再用水沖干凈。若蚧殼蟲較

殖快。主要生于葉上，不僅吮吸液汁，造成多，可在幼齡孵化盛期噴灑40%速撲殺乳油1000倍液或50%馬

蚧殼蟲

葉子發(fā)黃，且會影響光合作用并引起病害，拉硫磷乳油1000～1500倍液，連續(xù)3次以上，每次間隔5d～

嚴(yán)重的則造成葉枯7d

噴灑2.5%溴氰菊酯乳油或20%速滅殺丁2000倍液等，連續(xù)

成蟲及若蟲生于葉上，不僅吮吸液汁，使

粉虱用藥2次至3次，每次間隔5d～7d；成蟲可使用黃色粘板誘

葉片形成黃斑，并能分泌蜜露，誘發(fā)煤煙病

殺

常出現(xiàn)在潮濕而陰暗的地方，夜間出來活在栽培架周圍撒生石灰、飽和食鹽水或10%四聚乙醛顆粒

蝸牛及蛞

動，啃食幼葉、幼根和花等部位。因食量劑，并注意場地的衛(wèi)生清潔，及時清除枯枝敗葉；也可采用人

蝓

大，危害較嚴(yán)重工捕捉和誘殺法

成蟲、若蟲危害花蕾和花朵，有時也危害使用45%馬拉硫磷乳油或2.2%阿維·吡蟲啉乳油1000倍液

薊馬

幼嫩葉片，造成花蕾和花朵變褐、枯死進行噴灑

成螨、若螨吸食葉片汁液，造成葉片失化學(xué)防治一般在蟲卵孵化后進行，使用22%阿維·螺螨酯

螨類綠，葉背密布黃白色小點及細(xì)絲狀物，嚴(yán)重1500～2000倍或75%克螨特乳油1000～1500倍液進行噴

時葉片枯死灑，連續(xù)用藥2次至3次，每次間隔5d～7d

采取“挑治苗蚜、主治穗蚜”的策略。當(dāng)田間百株蚜量達(dá)

常成群危害嫩葉、花蕾等，以若蟲、成蟲

蚜蟲500頭、益害比≥1∶500時，每畝用25%蚜螨清乳油50mL，或

刺吸汁液且會傳播病毒

吡蟲啉系列產(chǎn)品1500～2000倍液噴霧

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C

C

D

D

附錄C

（資料性）

子代生物學(xué)性狀類別和測定內(nèi)容

表C.1給出了子代生物學(xué)性狀類別和測定內(nèi)容。

表C.1子代生物學(xué)性狀類別和測定內(nèi)容

性狀類別測定內(nèi)容

植株株高株型—————————

假鱗莖形狀長直徑————————

葉葉色葉形葉姿葉質(zhì)地葉片數(shù)葉片長葉片寬葉片厚———

開花性狀開花時間開花整齊度—————————

花葶花葶數(shù)花葶高花葶粗花朵數(shù)———————

花花色花徑瓣型花香萼片長萼片寬花瓣長花瓣寬唇瓣長中裂片長中裂片寬

適應(yīng)性抗病性抗蟲性生長勢————————

繁殖力新芽數(shù)——————————

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E

E

附錄D

（資料性）

國蘭雜交育種技術(shù)檔案記錄表

表D.1給出了國蘭雜交育種技術(shù)檔案記錄的樣式。

表D.1國蘭雜交育種技術(shù)檔案記錄表

雜交父本父本照片

雜交母本母本照片

雜交日期雜交花朵數(shù)座果數(shù)

負(fù)責(zé)人

F1代無菌苗培養(yǎng)

培養(yǎng)配方

種子父母本