備案號：60725-2018實驗動物病理學(xué)診斷規(guī)范第4部分：實驗用猴L(fēng)aboratoryanimalSpecificationof2019-01-01實施2019-01-01實施北京市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I 1范圍 1 13術(shù)語和定義 1 25檢查規(guī)則 25.1檢查頻率 25.2抽樣要求 26檢查程序 37臨床病理學(xué)檢查 37.1外觀檢查 37.2血液學(xué)檢查 47.3血液生物化學(xué)檢查 58解剖病理學(xué)檢查 58.1獸醫(yī)影像學(xué)檢查 58.2安樂死 58.3大體解剖 5 59檢查報告 69.1檢查報告書寫要求 69.2檢查報告內(nèi)容 69.3檢查報告確認 6附錄A(資料性附錄)實驗用減猴血常規(guī)指標正常值參考范圍 7附錄B(資料性附錄)實驗用猴血清生物化學(xué)指標正常值參考范圍 8附錄C(資料性附錄)實驗用猴組織病理學(xué)標本取材規(guī)范 9附錄D(資料性附錄)實驗用狨猴主要臟器解剖學(xué)特點 DB11/T1462《實驗動物病理學(xué)診斷規(guī)范》擬分為以下部分：——第1部分：實驗用豬；——第2部分：實驗用牛；——第3部分：實驗用羊；——第4部分：實驗用猴；本部分為DB11/T1462的第4部分。本部分按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本部分由北京市科學(xué)技術(shù)委員會提出并歸口。本部分由北京市科學(xué)技術(shù)委員會組織實施。本部分起草單位：中國人民解放軍總醫(yī)院。本部分主要起草人：賈云曉、陳華。11范圍本部分規(guī)定了實驗用猴病理學(xué)檢查的內(nèi)容和方法，包括檢查規(guī)則、檢查程序、臨床病理學(xué)檢查、本部分適用于實驗用猴的病理學(xué)診斷。件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。DB11/T828.4—2011實驗用小型豬第4部分：病理學(xué)診斷規(guī)范DB11/T1462.1—2017實驗動物病理學(xué)診斷規(guī)范第1部分：實驗用豬普通級實驗用猴conventional(CV)experimentalmarmoset除普通級實驗用猴應(yīng)排除的病原外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科學(xué)實驗干擾大的病原的實驗用猴。獸醫(yī)臨床病理學(xué)veterinaryclinicalpat2TP:總蛋白(totalprotein)3選擇6月齡以上的實驗用狨猴用于檢測，隨機抽樣。根據(jù)實驗用狨猴群體大小，抽樣數(shù)量見表1。6檢查程序?qū)嶒炗媒q猴病理學(xué)檢查程序見圖1。必要時圖1檢查程序7臨床病理學(xué)檢查7.1外觀檢查7.1.1精神狀態(tài)4DB11/T1462精神狀態(tài)異常表現(xiàn)為：精神興奮、精神抑制、精神沉郁、觀察實驗用猴被毛是否整潔、平滑而有光澤。檢查實驗用狨猴的皮膚顏色是否正常，皮膚及皮下組織是否正常，是否有皮膚顏色異常表現(xiàn)為：無毛部位可見蒼白、黃染、潮皮膚及皮下異常表現(xiàn)為：皮膚松弛無彈性，有包塊或腫物(隆起物、腫塊、膿腫、囊腫等),有潰瘍或者皮炎，皮下組織出現(xiàn)皮下氣腫或液體潴留(水腫)等。檢查實驗用猴耳朵、眼睛、鼻子、嘴巴色澤、形態(tài)等是否正常，是否有異常分泌物。異常表現(xiàn)為：顏色異常：耳朵出現(xiàn)腫脹、耳軟骨病、潰爛、出角膜混濁，凸眼或凹眼，結(jié)膜潮紅，有分泌物等；流鼻涕(鼻涕顏色為紅色、黃色、白色等)、打噴嚏觀察實驗用狨猴運動姿勢是否正常，肢體動作是否協(xié)調(diào)、靈活自然，是否運動異常姿勢表現(xiàn)為：癱瘓、跛行、蹣跚不協(xié)調(diào)、異常行為表現(xiàn)為：顫抖、旋轉(zhuǎn)、強直或扭轉(zhuǎn)、癲癇、頭部傾斜、剃毛、咀嚼毛發(fā)、過度理毛等。標本儲存條件：室溫條件下不超過8h。7.2.3正常參考值57.3血液生物化學(xué)檢查7.3.1采樣要求動物準備：禁食12h以上。標本處理：室溫放置30min～60min,3000rpm離心5min,取血清用于檢測。標本儲存條件：血清標本密封、避光保存，室溫條件下不超過12h,4℃條件下不超過24h。7.3.2檢測項目7.3.3正常參考值實驗用狨猴血液生物化學(xué)指標正常值參考范圍參見附錄B。8解剖病理學(xué)檢查8.1獸醫(yī)影像學(xué)檢查根據(jù)血液學(xué)和血生化檢測結(jié)果，判定可能發(fā)生病理變化的臟器，進行獸醫(yī)影像學(xué)檢查。8.2安樂死實驗動物常規(guī)麻醉后，放血處死。8.3大體解剖8.3.1解剖程序應(yīng)按DB11/T828.4—2011中7.1.1的要求進行。8.3.2檢查內(nèi)容體表：皮膚、天然孔、營養(yǎng)狀況。皮下：脂肪、乳腺、皮下淋巴結(jié)、睪丸、附睪。腹腔：腹腔液、脾臟、肝臟、膽囊、肝門部位的血管、膽管和淋巴結(jié)、胰腺、腎臟、腎上腺、胃、腸道、腸系膜淋巴結(jié)。胸腔：胸腔液、胸腺、肺和肺門淋巴結(jié)、心包、心包液和心臟、主動脈、氣管等。盆腔：膀胱、前列腺、卵巢、輸卵管、子宮。頭頸部：口腔、鼻腔、大腦、小腦、腦干、垂體、甲狀腺及甲狀旁腺。8.4組織病理學(xué)檢查8.4.1組織標本取材規(guī)范按照常規(guī)病理學(xué)組織取材規(guī)范進行。實驗用狨猴常規(guī)組織病理學(xué)標本取材規(guī)范參見附錄C。8.4.2檢查內(nèi)容6實驗用猴主要臟器解剖學(xué)特點參見附錄D。9檢查報告病理檢查報告內(nèi)容的表述和書寫應(yīng)準確和完整，用中文或國際通b)附臨床病理學(xué)檢查結(jié)果、影像學(xué)檢查典型照片、解剖病理學(xué)檢查結(jié)果；d)解剖病理學(xué)檢查結(jié)果包括：大體解剖的描述、鏡下描述和診斷結(jié)果；e)動物病理學(xué)專業(yè)資質(zhì)人員簽字、報告時間；f)解剖病理學(xué)檢查結(jié)果與臨床病理說明。7(資料性附錄)表A.1為確定的實驗用狨猴血常規(guī)指標正常值參考范圍。數(shù)據(jù)來自成年的實驗用猴，早、8動物%%8(資料性附錄)表B.1為確定的實驗用狨猴血清生物化學(xué)指標正常值參考范圍。數(shù)據(jù)來自成年的實驗用猴，早、8表B.1實驗用猴血清生物化學(xué)指標正常值參考范圍9(資料性附錄)實驗用狨猴組織病理學(xué)標本取材規(guī)范C.1.1病理標本應(yīng)及時取材、及時固定，明確針對大腦等中樞神經(jīng)系統(tǒng)的病理組織學(xué)檢查，應(yīng)在處死動物的同時進行固定液灌注后再取材；明確針對胃腸道組織的取材和固定應(yīng)控制在動物死后20min以內(nèi)。C.1.2取材部位宜選擇正常與病灶交界處、病變特別明顯處以及眼觀變化特殊處。適量包括與病變區(qū)域毗鄰的“正?！苯Y(jié)構(gòu)和壞死組織等。C.1.3采取的病理組織材料，要包括各器官的主要結(jié)構(gòu)，保持完整性。C.1.4取材時不得牽拉、擠壓、刮抹和沖洗(胃腸內(nèi)容除外)。C.1.5組織塊放入固定液內(nèi)后切忌卷曲、互相粘貼或貼靠瓶壁，食管、胃、腸、膽囊及膀胱等空腔臟器應(yīng)剪開，以漿膜面平貼在硬紙上再放入固定液內(nèi)固定。C.1.6固定液量要充足，固定液的量應(yīng)為被固定標本體積的5～10倍。常規(guī)固定液為4%中性甲醛(10%中性福爾馬林)。C.1.7在病變組織取材之前，登記組織器官大小，質(zhì)地性質(zhì)及硬度，包膜的厚度和完整性以及與周圍其他臟器之間的位置關(guān)系，必要時稱其重量。C.2皮膚和皮下組織C.2.1皮膚取肩背部皮膚組織和其他有病變皮膚，取材時皮下脂肪面朝上。C.2.2淋巴結(jié)將淋巴結(jié)垂直于長軸切開，取1塊~2塊組織。記述淋巴結(jié)的大小，與周圍組織的粘連情況，剖面病理狀況，必要時稱其重量。C.2.3乳腺沿乳頭周圍連同皮膚剪取乳腺組織，皮膚面朝下放在取材板上，在乳頭中心處切開組織取1～2塊。C.2.4睪丸與附睪用鋒利的刀將睪丸作矢狀切面剖開，取組織1塊。沿附睪長軸縱向剖開附睪，取組織1塊。C.2.5肌肉和神經(jīng)后肢外側(cè)基部T形切口，剝離皮膚。股骨后側(cè)縱形切口，查找坐骨神經(jīng)。股二頭肌連同坐骨神經(jīng)取材2塊。C.3腹腔臟器沿脾長軸以0.5cm～1.0cm間距對脾作多個平行橫切面，檢查每塊脾臟薄片的局部形態(tài)，并取材1在肝臟上緣1/3處與肝表面垂直作矢狀切(包括包膜)取組織塊；發(fā)現(xiàn)病灶的肝葉應(yīng)沿標本長軸作垂直肝包膜的橫切面，切面經(jīng)過病變中心，取病變組織2塊：門脈做剖開檢查。至少取三葉肝組織。沿胃底長軸作矢狀切，剪開胃壁(病變位于大彎時沿小彎剪開),觀察胃內(nèi)容物的性狀，用水輕輕洗凈胃內(nèi)容。取消化道全層結(jié)構(gòu)組織1塊，包括前胃和胃腺。有病變時(腫瘤、潰瘍或胃炎),另取病C.4胸腔臟器在主動脈根部行矢狀切，將心臟全部剖開，左右心各取1塊，每塊組織應(yīng)包括心房、心耳、瓣膜、C.5.3唾液腺、淚腺和頜下淋巴結(jié)C.6盆腔器官將前列腺剝離做多個矢狀切面，間隔約1.0cm,仔細檢查各切面。取材1塊，精囊腺每葉取1塊。C.6.4子宮C.7頭部器官個額狀斷面，并將每片大腦斷面順序地平放于解剖板上進行檢查，取材2塊。經(jīng)小腦蚓部做水平切面或矢狀切面，檢查小腦實質(zhì)和第四腦室。分別沿中腦、腦橋、延髓作橫切面，取材2C.8骨與骨髓、脊髓剝離胸骨周圍肌肉組織，剪斷兩側(cè)肋軟骨，取下胸骨。將胸骨截成3段，取中間段放入固定液中固DB11/T1462(資料性附錄)大腦皮質(zhì)：呈層狀分布，由表及里包括分子層(水平細胞和星形細胞)、外顆粒層(大量星形細胞和少量椎體細胞)、外錐體細胞層(厚，大量中椎體細胞)、內(nèi)顆粒層(大量星形細胞)、內(nèi)錐體細胞層(大、中型椎體細胞，軸突組成投射纖維)、多形細胞層(菱形細胞為主)。分子層(較厚，有大量神經(jīng)纖維，神經(jīng)元較少，主要為為星形細胞和藍狀細胞)、普肯野細胞層(細胞體大，呈梨形)、顆粒層(密集顆粒細胞和少量高爾基細胞)。延長軸可見髓鞘和神經(jīng)膜內(nèi)陷，稱為郎飛氏結(jié)，此處無髓鞘，兩個郎飛氏結(jié)中間為一個雪旺細D.2循環(huán)系統(tǒng)心內(nèi)膜下層。心內(nèi)膜下層為薄層結(jié)締組織，較疏松，內(nèi)含普肯野纖維(束細胞),浦肯野纖維較一般肌相連，內(nèi)膜一般無血管分布。心肌膜主要由心肌纖維(心肌細胞)組成，很厚，大致可分為內(nèi)縱、中環(huán)、D.3D.3被皮系統(tǒng)皮膚分為表皮層和真皮層。真皮層位于表皮層下方，分為乳頭層和網(wǎng)織層，二者之內(nèi)有大汗腺(頂泌汗腺),為單管曲腺，分泌部粗大，管腔大，為單層立方或柱狀上皮。D.4免疫系統(tǒng)DB11/T1462胸腺：在幼齡時較大，進入性成熟期后逐漸退化縮小。胸腺大體分左右2葉，表面為薄層結(jié)締組織被摸，結(jié)締組織成片狀深入胸腺實質(zhì)將其分成許多不完整的胸腺小葉。每個小葉實質(zhì)都分為皮質(zhì)部和髓質(zhì)部。皮質(zhì)位于小葉周邊，由胸腺上皮細胞構(gòu)成實質(zhì)框架，內(nèi)胸腺細胞密集，著色深；髓質(zhì)位于中央，含較多上皮細胞，著色淺，內(nèi)有胸腺小體分在分布，由同心圓排列的上皮細胞構(gòu)成。骨髓：位于骨髓腔中，分紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓分布于骨骺端的松質(zhì)骨中，內(nèi)含網(wǎng)狀造血組織和脾臟：外周為較厚的被膜，富含彈性纖維及平滑肌纖維的致密結(jié)締組織，被膜結(jié)締組織伸入脾臟內(nèi)形成小梁，構(gòu)成脾臟的粗支架。脾實質(zhì)分為白髓、紅髓和邊緣區(qū)。脾白髓成條索狀，由動脈周圍淋巴鞘、淋巴小結(jié)和邊緣區(qū)構(gòu)成，動脈周圍淋巴鞘內(nèi)主要含大量的T淋巴細胞，無毛細血管后微靜脈；淋巴小結(jié)與淋巴結(jié)內(nèi)的結(jié)構(gòu)相同。紅髓彌漫分布于白髓之間，內(nèi)有脾血竇，血竇之間為脾索。脾索是富含各類血細胞的淋巴索，相互連接成網(wǎng)，其間分布有各類血細胞、淋巴細胞、巨噬細胞等。脾血竇腔大小不一，其內(nèi)皮細胞呈長桿狀。邊緣區(qū)含有T細胞、B細胞及巨噬細胞。淋巴結(jié)：表面是由薄層致密結(jié)締組織構(gòu)成的被膜，淋巴結(jié)的一側(cè)凹陷為門部，有血管和淋巴管通過。淋巴結(jié)實質(zhì)分實質(zhì)和髓質(zhì)，兩者無明顯分界。皮質(zhì)位于被膜下方，由淺層皮質(zhì)、深層皮質(zhì)及皮質(zhì)淋巴竇構(gòu)成；髓質(zhì)由條索狀的髓索及髓竇構(gòu)成。D.5內(nèi)分泌系統(tǒng)腎上腺：外覆一層結(jié)締組織被膜，實質(zhì)分為周邊的皮質(zhì)和中央的髓質(zhì)。腎上腺皮質(zhì)由皮質(zhì)細胞、血竇和結(jié)締組織構(gòu)成，皮質(zhì)可分為三層同心圓狀排列的結(jié)構(gòu)：最外層的球狀帶、中間的束狀帶和最深層的網(wǎng)狀帶。在皮質(zhì)部有骨髓造血作用，其造血程度與血液采樣頻率有關(guān)。在皮質(zhì)部有異位骨骼，皮質(zhì)細胞空泡化。腎上腺髓質(zhì)細胞呈團索狀分布，其間為血竇，髓質(zhì)中央為粗大的中央靜脈。甲狀腺：外覆結(jié)締組織被膜，腺實質(zhì)由大量甲狀腺濾泡和濾泡旁細胞組成，濾泡間結(jié)締組織較少。甲狀腺濾泡較大，形狀規(guī)則，腔內(nèi)充滿豐富的膠質(zhì)，上皮細胞呈立方或扁平狀。濾泡旁細胞分布于濾泡上皮和濾泡之間，細胞較大，胞質(zhì)內(nèi)有大量分泌顆粒。甲狀腺深部可見甲狀旁腺，由團索狀排列的細胞構(gòu)成腺實質(zhì)，還可見散在的脂肪細胞，其實質(zhì)由主細胞和嗜酸性細胞構(gòu)成。腦垂體：外覆結(jié)締組織被膜，由腺垂體和神經(jīng)垂體組成。腺垂體最大的部分為遠側(cè)部；神經(jīng)垂體分為神經(jīng)部和漏斗，漏斗與下丘腦相連，遠側(cè)部構(gòu)成垂體的前葉，中間部和神經(jīng)部構(gòu)成垂體的后葉，漏斗和結(jié)節(jié)部構(gòu)成垂體柄。遠側(cè)部由大量腺細胞構(gòu)成，細胞呈團索狀排列，可分為嗜酸性細胞、嗜堿性細胞和嫌色細胞三種類型，細胞團之間有竇狀毛細血管；神經(jīng)部由大量無髓神經(jīng)纖維和神經(jīng)膠質(zhì)細胞組成，含豐富的毛細血管和少量網(wǎng)狀纖維。神經(jīng)部還可見赫令體，大小不等，呈嗜酸性團塊狀。松果體：呈扁圓錐形，連接第三腦室。松果體表面包有軟膜，軟膜結(jié)締組織深入實質(zhì)，將實質(zhì)分為許多小葉，小葉主要由松果體細胞、神經(jīng)膠質(zhì)細胞和無髓神經(jīng)纖維組成。松果體細胞胞體不規(guī)則、核大胞質(zhì)少，嗜堿性。D.6消化系統(tǒng)胃：包括胃體、胃底、胃幽門部、胃腺。胃底部分為粘膜層、粘膜下層和肌層。粘膜固有層有緊密排列的胃底腺，呈管狀，由主細胞、壁細胞、頸粘液細胞及內(nèi)分泌細胞組成；粘膜肌層由內(nèi)環(huán)外縱兩層平滑肌構(gòu)成；粘膜下層為疏松結(jié)締組織；肌層為較厚的平滑肌。胃體部結(jié)構(gòu)與胃底部相似，其粘膜上皮為單層柱狀上皮，上皮內(nèi)陷形成胃小凹。胃幽門部結(jié)構(gòu)與胃底部相似，其固有層富含幽門腺，為管狀彎曲的粘液腺。DB11/T14窄不一。竇壁由扁平內(nèi)皮細胞組成，竇腔內(nèi)有體積較大、形態(tài)不規(guī)則的星形細胞(枯否氏細胞)。匯管D.7呼吸系統(tǒng)假復(fù)層纖毛柱狀上皮，固有層為富含彈性纖維的結(jié)締組織。黏膜下層相對較厚，由疏松結(jié)締組織組成。D.8泌尿系統(tǒng)和幾何小管，髓質(zhì)內(nèi)呈放射線狀的條紋深入皮質(zhì)構(gòu)成髓放線，被分開的皮質(zhì)部分稱肪組織。形，細胞著色淺；肌層很厚，由內(nèi)縱、中環(huán)、外縱3層組成D.9雄性生殖系統(tǒng)DB11/T1462睪丸：睪丸外側(cè)覆有一層鞘膜，鞘膜下方為致密結(jié)締組織構(gòu)成的白膜，白膜為睪丸的被膜，其深入睪丸內(nèi)部形成結(jié)締組織的睪丸縱隔，睪丸縱隔呈放射狀排列將睪丸分割成不同小葉。每個小葉內(nèi)含數(shù)條生精小管，生精小管間散在間質(zhì)細胞和血管。生精小管由生精上皮和精子細胞構(gòu)成，其中生精上皮為一組具有生精能力的細胞和支持細胞構(gòu)成的復(fù)層上皮，由外至內(nèi)依次為肌樣細胞、薄層基膜，緊貼基膜的為精原細胞、初級精母細胞、次級精母細胞、早期精子細胞和晚期精子細胞，依次向內(nèi)排列。生精小管呈圓形或橢圓形相鄰排列，生精小管間散布大量間質(zhì)細胞、血管、淋巴管和結(jié)締組織。前列腺：呈栗子形，環(huán)繞尿道始部。外覆結(jié)締組織及平滑肌組成的被膜，向內(nèi)延伸構(gòu)成支架，腺體為復(fù)管泡狀，有兩層上皮組成。腺上皮為單層、立方或者假復(fù)層柱狀上皮，表面有不規(guī)則的微絨毛。囊腔內(nèi)可見分泌物濃縮形成的圓形或橢圓形的均質(zhì)嗜酸性磷酸酶。精囊腺：腺管被覆單層柱狀上皮，不規(guī)則，固有膜為含有彈力纖維的薄層致密結(jié)締組織，肌層很薄，以喚醒平滑肌為主，外膜為疏松結(jié)締組織。由一層結(jié)締組織包膜和平滑肌組成，內(nèi)部的腺上皮向內(nèi)凸起形成皺襞。腔內(nèi)常常充滿大量淡粉染的蛋白樣分泌物。D.10雌性生殖系統(tǒng)卵巢：表面被覆表皮上皮和結(jié)締組織。實質(zhì)分為皮質(zhì)和髓質(zhì)兩部分。皮質(zhì)占卵巢的大部分，內(nèi)含許多不同發(fā)育階段的卵泡與黃體；中央為髓質(zhì)，范圍較小，含豐富的血管和疏松結(jié)締組織。輸卵管：分為漏斗部、壺腹