衢州市中醫(yī)院核酸提取技術考核一、單選題（每題2分，共20題）1.衢州市中醫(yī)院核酸提取過程中，常用的提取試劑是？A.乙醇溶液B.異丙醇溶液C.氯仿溶液D.乙腈溶液2.核酸提取時，樣本處理的第一步通常是什么？A.加入裂解液B.高溫滅菌C.離心沉淀D.磁珠吸附3.衢州地區(qū)冬季核酸檢測時，樣本保存的最佳溫度是多少？A.4℃B.-20℃C.25℃D.37℃4.核酸提取儀的日常維護中，以下哪項是不必要的？A.定期清潔采樣頭B.檢查管路是否漏氣C.更換移液器吸頭D.清洗紫外燈管5.衢州中醫(yī)院使用的核酸提取試劑盒，其有效期為多少？A.1個月B.3個月C.6個月D.1年6.核酸提取過程中，哪個步驟最容易導致假陰性結果？A.樣本裂解B.磁珠洗滌C.水浴加熱D.乙醇沉淀7.衢州地區(qū)流感高發(fā)期，核酸檢測樣本中常見的病毒是？A.SARS-CoV-2B.H1N1C.H7N9D.以上都是8.核酸提取時，磁珠的吸附能力受什么因素影響最大？A.pH值B.溫度C.裂解時間D.以上都是9.衢州中醫(yī)院使用的核酸提取儀，其檢測靈敏度通常是多少？A.10copies/μLB.100copies/μLC.1000copies/μLD.10000copies/μL10.核酸提取過程中，哪個環(huán)節(jié)需要嚴格避免交叉污染？A.樣本混勻B.移液操作C.磁珠離心D.液體轉移二、多選題（每題3分，共10題）1.衢州中醫(yī)院核酸提取過程中，常用的樣本類型包括哪些？A.口咽拭子B.鼻咽拭子C.血液樣本D.糞便樣本2.核酸提取時，裂解液的成分通常包括哪些？A.蛋白酶KB.高濃度鹽溶液C.脫氧核糖核酸（DNA）酶D.終端脫氧核糖核酸轉移酶（TdT）3.衢州地區(qū)夏季核酸檢測時，需要注意哪些樣本保存問題？A.避免高溫B.防止霉變C.保持干燥D.盡快檢測4.核酸提取儀的日常維護中，以下哪些屬于關鍵步驟？A.校準移液器B.檢查管路堵塞C.清潔光學系統(tǒng)D.更換廢液桶5.核酸提取試劑盒的儲存條件通常包括哪些？A.避光保存B.2-8℃冷藏C.防止凍結D.嚴格密封6.核酸提取過程中，可能導致假陽性的因素有哪些？A.試劑污染B.樣本處理不當C.設備故障D.操作人員手部接觸7.衢州中醫(yī)院使用的核酸提取儀，其常見的故障包括哪些？A.提取失敗B.噪音過大C.顯示異常D.管路漏氣8.核酸提取時，磁珠洗滌的目的是什么？A.去除蛋白質殘留B.提高核酸純度C.防止雜質干擾D.增強吸附效果9.核酸提取過程中，樣本裂解不徹底可能導致哪些問題？A.核酸損失B.檢測靈敏度下降C.假陰性結果D.試劑浪費10.衢州地區(qū)新冠疫情常態(tài)化防控中，核酸檢測樣本處理需要注意哪些事項？A.一次性耗材使用B.樣本分類存放C.消毒處理D.快速轉運三、判斷題（每題2分，共20題）1.核酸提取時，樣本保存時間越長越好。（×）2.衢州中醫(yī)院使用的核酸提取試劑盒，有效期通常為6個月。（√）3.核酸提取過程中，磁珠的吸附能力與pH值無關。（×）4.核酸提取時，樣本混勻不充分會導致假陰性結果。（√）5.衢州地區(qū)冬季核酸檢測時，樣本保存溫度應保持在4℃。（√）6.核酸提取儀的日常維護中，無需校準移液器。（×）7.核酸提取試劑盒開封后，應立即使用完畢。（×）8.核酸提取過程中，假陽性結果通常由試劑污染導致。（√）9.衢州中醫(yī)院使用的核酸提取儀，檢測靈敏度通常為1000copies/μL。（√）10.核酸提取時，樣本處理步驟可以省略。（×）11.核酸提取過程中，乙醇沉淀的目的是去除蛋白質。（√）12.核酸提取時，樣本保存不當會導致核酸降解。（√）13.核酸提取儀的故障通常由操作不當引起。（×）14.衢州地區(qū)夏季核酸檢測時，樣本保存無需避光。（×）15.核酸提取試劑盒的儲存溫度越高越好。（×）16.核酸提取過程中，磁珠洗滌不徹底會導致假陰性結果。（√）17.核酸提取時，樣本裂解時間越長越好。（×）18.衢州中醫(yī)院使用的核酸提取儀，無需定期校準。（×）19.核酸提取過程中，樣本分類存放可以避免交叉污染。（√）20.核酸提取時，樣本保存時間越長，檢測靈敏度越高。（×）四、簡答題（每題5分，共5題）1.簡述衢州中醫(yī)院核酸提取過程中，樣本處理的主要步驟及其目的。2.衢州地區(qū)夏季核酸檢測時，如何避免樣本降解？3.核酸提取儀的日常維護中，需要注意哪些關鍵環(huán)節(jié)？4.核酸提取過程中，哪些因素可能導致假陰性或假陽性結果？5.衢州中醫(yī)院使用的核酸提取試劑盒，其儲存條件有哪些要求？五、論述題（每題10分，共2題）1.結合衢州地區(qū)的實際情況，論述核酸檢測樣本處理的優(yōu)化措施。2.分析核酸提取過程中常見的問題及解決方法，并針對衢州中醫(yī)院提出改進建議。答案與解析一、單選題答案1.B2.A3.B4.D5.C6.B7.D8.D9.A10.B二、多選題答案1.A,B,D2.A,B3.A,B,C,D4.A,B,C,D5.A,B,C,D6.A,B,C,D7.A,B,C,D8.A,B,C,D9.A,B,C,D10.A,B,C,D三、判斷題答案1.×2.√3.×4.√5.√6.×7.×8.√9.√10.×11.√12.√13.×14.×15.×16.√17.×18.×19.√20.×四、簡答題答案1.樣本處理步驟及其目的：-樣本裂解：使用裂解液破壞細胞壁，釋放核酸。-磁珠吸附：利用磁珠富集核酸，提高提取效率。-洗滌：去除雜質，如蛋白質、鹽分等。-乙醇沉淀：使核酸沉淀，進一步純化。-溶解：用無酶水溶解核酸，用于檢測。2.夏季避免樣本降解的措施：-低溫保存（4℃或-20℃）。-避光存放，防止紫外線照射。-盡快檢測，減少保存時間。-使用密封容器，防止水分蒸發(fā)。3.核酸提取儀的日常維護關鍵環(huán)節(jié)：-定期清潔采樣頭和管路。-校準移液器，確保精度。-檢查紫外線燈管，確保消毒效果。-監(jiān)測廢液桶容量，及時更換。4.導致假陰性或假陽性因素的解析：-假陰性：樣本裂解不充分、核酸降解、試劑污染、操作不當等。-假陽性：試劑污染、樣本處理不當、設備故障等。5.試劑盒儲存條件要求：-避光保存，防止光線分解試劑。-2-8℃冷藏，防止高溫影響活性。-防止凍結，避免凍融破壞。-嚴格密封，減少濕氣進入。五、論述題答案1.衢州地區(qū)核酸檢測樣本處理優(yōu)化措施：-樣本分類管理：根據樣本類型（如口咽拭子、鼻咽拭子）設置不同保存條件。-縮短保存時間：夏季高溫時，優(yōu)先檢測樣本，減少保存時間。-改進保存容器：使用真空密封袋，降低水分蒸發(fā)風險。-加強人員培訓：提高操作規(guī)范性，減少人為誤差。2.核酸提取問題及改進建議：-常見問題：樣本裂解不徹底、試劑污染