廈門市中醫(yī)院病理科技師上崗資格認證一、單選題（共20題，每題1分）1.廈門市中醫(yī)院病理科常用的HE染色方法中，蘇木精的pH值通?？刂圃诙嗌俜秶鷥?nèi)？A.2.0-3.0B.4.0-6.0C.6.5-7.5D.8.0-9.02.在廈門市中醫(yī)院病理科，處理石蠟包埋組織時，二甲苯的純度應(yīng)至少達到多少？A.95%B.99%C.99.5%D.100%3.廈門市中醫(yī)院病理科進行免疫組化（IHC）檢測時，常用磷酸鹽緩沖液（PBS）的pH值是多少？A.6.0-6.5B.7.2-7.4C.8.0-8.5D.9.0-9.54.以下哪種方法最適合廈門市中醫(yī)院病理科進行快速細胞學(xué)診斷？A.免疫熒光技術(shù)B.電子顯微鏡觀察C.移液器細胞計數(shù)D.石蠟切片HE染色5.廈門市中醫(yī)院病理科處理急診病理樣本時，一般要求在多長時間內(nèi)完成固定？A.2小時內(nèi)B.4小時內(nèi)C.6小時內(nèi)D.8小時內(nèi)6.在廈門市中醫(yī)院病理科，蘇木精染色的最佳加熱方式是？A.水浴鍋加熱B.直接火焰加熱C.電磁爐加熱D.熱風干燥箱加熱7.廈門市中醫(yī)院病理科進行TUNEL檢測時，常用的核酸酶是？A.DNaseIB.RNaseAC.ProteinaseKD.EndonucleaseIII8.以下哪種試劑常用于廈門市中醫(yī)院病理科的石蠟切片脫蠟？A.乙醇B.丙酮C.二甲苯D.乙醚9.廈門市中醫(yī)院病理科進行組織化學(xué)染色時，常用的磷酸鹽緩沖液（PBS）滲透壓應(yīng)是多少？A.0.9%NaClB.1.5%NaClC.2.0%NaClD.3.0%NaCl10.廈門市中醫(yī)院病理科進行免疫組化（IHC）時，常用的封閉液是？A.蛋白質(zhì)A溶液B.5%BSA溶液C.0.1MPBS溶液D.0.01MTBS溶液11.廈門市中醫(yī)院病理科進行熒光原位雜交（FISH）時，常用的熒光染料是？A.DAPIB.FITCC.TRITCD.Cy312.在廈門市中醫(yī)院病理科，以下哪種方法最適合檢測腫瘤細胞的Ki-67表達？A.免疫熒光技術(shù)B.免疫組化（IHC）C.原位雜交（ISH）D.電子顯微鏡觀察13.廈門市中醫(yī)院病理科進行快速冰凍切片時，常用的低溫冷凍劑是？A.丙酮B.乙醇C.異丙醇D.干冰14.以下哪種方法常用于廈門市中醫(yī)院病理科進行DNA定量分析？A.磷酸化法B.堿變性法C.紫外分光光度法D.流式細胞術(shù)15.廈門市中醫(yī)院病理科進行細胞培養(yǎng)時，常用的培養(yǎng)基是？A.RPMI-1640B.DMEMC.F12D.以上都是16.在廈門市中醫(yī)院病理科，以下哪種方法最適合檢測微小浸潤性腫瘤？A.HE染色B.免疫組化（IHC）C.電子顯微鏡觀察D.熒光原位雜交（FISH）17.廈門市中醫(yī)院病理科進行石蠟切片時，常用的包埋劑是？A.石蠟B.蠟燭油C.乳膠D.聚乙烯醇18.在廈門市中醫(yī)院病理科，以下哪種試劑常用于組織切片的脫水？A.乙醇B.甲醇C.丙酮D.以上都是19.廈門市中醫(yī)院病理科進行分子病理檢測時，常用的PCR反應(yīng)體系應(yīng)包含哪些成分？（多選）A.引物B.dNTPsC.DNA聚合酶D.以上都是20.廈門市中醫(yī)院病理科進行細胞學(xué)診斷時，常用的染色方法包括？A.巴氏染色B.HE染色C.免疫細胞化學(xué)D.以上都是二、多選題（共10題，每題2分）1.廈門市中醫(yī)院病理科進行免疫組化（IHC）時，常用的封閉方法包括？A.蛋白質(zhì)A封閉B.5%BSA封閉C.0.1MPBS封閉D.甲醇固定2.在廈門市中醫(yī)院病理科，以下哪些方法可用于檢測腫瘤細胞的凋亡？A.TUNEL檢測B.免疫組化（IHC）C.電子顯微鏡觀察D.流式細胞術(shù)3.廈門市中醫(yī)院病理科進行石蠟切片時，常用的脫蠟方法包括？A.二甲苯脫蠟B.乙醇梯度脫蠟C.丙酮脫蠟D.蠟燭油脫蠟4.在廈門市中醫(yī)院病理科，以下哪些試劑常用于組織切片的固定？A.10%甲醛B.4%多聚甲醛C.95%乙醇D.甲醇5.廈門市中醫(yī)院病理科進行熒光原位雜交（FISH）時，常用的熒光標記探針包括？A.DAPIB.FITCC.TRITCD.Cy36.在廈門市中醫(yī)院病理科，以下哪些方法可用于檢測腫瘤細胞的增殖？A.Ki-67免疫組化B.MIB-1免疫組化C.TUNEL檢測D.流式細胞術(shù)7.廈門市中醫(yī)院病理科進行細胞培養(yǎng)時，常用的細胞培養(yǎng)基添加劑包括？A.胰島素B.絲裂原C.血清D.氨基酸8.在廈門市中醫(yī)院病理科，以下哪些方法可用于檢測腫瘤的分子分型？A.PCRB.基因測序C.熒光原位雜交（FISH）D.數(shù)字PCR9.廈門市中醫(yī)院病理科進行組織化學(xué)染色時，常用的染色方法包括？A.免疫組化（IHC）B.原位雜交（ISH）C.磷酸酶染色D.酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）10.在廈門市中醫(yī)院病理科，以下哪些因素會影響石蠟切片的質(zhì)量？A.固定時間B.脫蠟效果C.浸蠟時間D.切片厚度三、判斷題（共10題，每題1分）1.廈門市中醫(yī)院病理科進行免疫組化（IHC）時，封閉液應(yīng)與抗體來源的物種一致。（√）2.在廈門市中醫(yī)院病理科，石蠟切片的厚度一般控制在4-5μm。（√）3.廈門市中醫(yī)院病理科進行TUNEL檢測時，需要使用DNaseI處理組織。（×）4.在廈門市中醫(yī)院病理科，快速冰凍切片適用于所有類型的組織樣本。（×）5.廈門市中醫(yī)院病理科進行熒光原位雜交（FISH）時，常用的熒光染料是DAPI。（×）6.在廈門市中醫(yī)院病理科，石蠟切片的包埋劑應(yīng)與組織的硬度相匹配。（√）7.廈門市中醫(yī)院病理科進行細胞培養(yǎng)時，常用的培養(yǎng)基是RPMI-1640。（√）8.在廈門市中醫(yī)院病理科，免疫組化（IHC）檢測的陽性對照應(yīng)使用已知的陽性樣本。（√）9.廈門市中醫(yī)院病理科進行分子病理檢測時，PCR反應(yīng)體系應(yīng)避免RNA污染。（√）10.在廈門市中醫(yī)院病理科，細胞學(xué)診斷的陽性率通常低于組織學(xué)診斷。（√）四、簡答題（共5題，每題5分）1.簡述廈門市中醫(yī)院病理科進行HE染色的基本步驟。答：HE染色的基本步驟包括：固定（甲醛固定）、脫水（乙醇梯度脫水）、透明（二甲苯透明）、包埋（石蠟包埋）、切片（切片機切片）、染色（蘇木精染色→分化→伊紅復(fù)染）、脫水（乙醇梯度脫水）、透明（二甲苯透明）、封片（中性樹膠封片）。2.簡述廈門市中醫(yī)院病理科進行免疫組化（IHC）的原理及步驟。答：免疫組化（IHC）原理是利用抗體與目標抗原的特異性結(jié)合，通過顯色反應(yīng)在組織切片上顯示抗原分布。步驟包括：脫蠟水化→抗原修復(fù)→封閉→孵育一抗→孵育二抗→顯色（如DAB顯色）→復(fù)染→封片。3.簡述廈門市中醫(yī)院病理科進行TUNEL檢測的原理及用途。答：TUNEL檢測原理是利用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）將熒光標記的dUTP添加到凋亡細胞3'-OH末端，通過熒光顯微鏡觀察凋亡細胞。用途包括檢測腫瘤組織的凋亡情況。4.簡述廈門市中醫(yī)院病理科進行石蠟切片時，如何保證切片質(zhì)量的均勻性？答：保證切片質(zhì)量均勻性的方法包括：固定時間適宜、脫蠟徹底、浸蠟充分、切片厚度一致（4-5μm）、切片刀鋒鋒利、載玻片清潔等。5.簡述廈門市中醫(yī)院病理科進行分子病理檢測時，PCR反應(yīng)體系應(yīng)包含哪些關(guān)鍵成分？答：PCR反應(yīng)體系應(yīng)包含：模板DNA、引物、dNTPs、DNA聚合酶、緩沖液（含Mg2?）、水。五、論述題（共2題，每題10分）1.論述廈門市中醫(yī)院病理科進行免疫組化（IHC）時，如何避免假陽性或假陰性結(jié)果？答：避免假陽性或假陰性的方法包括：①優(yōu)化抗原修復(fù)條件；②選擇合適的封閉液（如5%BSA）；③使用已知陽性對照和陰性對照；④控制孵育時間和溫度；⑤避免交叉反應(yīng)（如使用單克隆抗體）；⑥嚴格清洗步驟；⑦使用已知抗原的陽性樣本進行驗證。2.論述廈門市中醫(yī)院病理科進行急診病理樣本處理時，如何提高診斷效率？答：提高急診病理診斷效率的方法包括：①優(yōu)先處理固定好的新鮮樣本；②采用快速染色技術(shù)（如冰凍切片）；③優(yōu)化染色流程（如預(yù)制切片）；④使用自動化設(shè)備（如切片機）；⑤加強團隊協(xié)作（如病理醫(yī)生與技師分工明確）；⑥建立標準化操作流程（SOP）。答案與解析一、單選題答案與解析1.C解析：蘇木精的pH值控制在6.5-7.5時染色效果最佳，過高或過低會影響染色強度。2.C解析：二甲苯純度至少達到99.5%才能保證脫蠟效果，避免雜質(zhì)干擾。3.B解析：PBS的pH值7.2-7.4最接近生理環(huán)境，適合免疫組化等實驗。4.C解析：移液器細胞計數(shù)適用于快速細胞學(xué)診斷，操作簡便快捷。5.B解析：急診病理樣本需在4小時內(nèi)完成固定，避免細胞結(jié)構(gòu)破壞。6.A解析：水浴鍋加熱均勻，避免局部過熱導(dǎo)致染色不均。7.C解析：ProteinaseK是常用的核酸酶，用于消化蛋白質(zhì)暴露DNA。8.C解析：二甲苯是常用的石蠟切片脫蠟劑，能有效去除石蠟。9.A解析：PBS滲透壓0.9%NaCl與生理鹽水一致，適合細胞培養(yǎng)和染色。10.B解析：5%BSA封閉能有效避免非特異性結(jié)合。11.A解析：DAPI是常用的熒光染料，用于DNA染色。12.B解析：免疫組化（IHC）適用于檢測腫瘤細胞的Ki-67表達。13.D解析：干冰可用于快速冷凍，避免組織結(jié)構(gòu)損傷。14.C解析：紫外分光光度法適用于DNA定量分析，操作簡便。15.D解析：RPMI-1640、DMEM、F12都是常用的細胞培養(yǎng)基。16.D解析：熒光原位雜交（FISH）可檢測微小浸潤性腫瘤的基因異常。17.A解析：石蠟是常用的包埋劑，適合長期保存組織樣本。18.D解析：乙醇、甲醇、丙酮均可用于組織切片的脫水。19.D解析：PCR反應(yīng)體系包含引物、dNTPs、DNA聚合酶等關(guān)鍵成分。20.D解析：細胞學(xué)診斷可使用巴氏染色、HE染色、免疫細胞化學(xué)等方法。二、多選題答案與解析1.B,D解析：封閉方法包括5%BSA封閉和甲醇固定。2.A,B,C,D解析：TUNEL檢測、免疫組化、電子顯微鏡觀察、流式細胞術(shù)均可檢測凋亡。3.A,B,C解析：脫蠟方法包括二甲苯脫蠟、乙醇梯度脫蠟、丙酮脫蠟。4.A,B,C解析：固定劑包括10%甲醛、4%多聚甲醛、95%乙醇。5.A,B,C,D解析：熒光標記探針包括DAPI、FITC、TRITC、Cy3。6.A,B,D解析：Ki-67免疫組化、MIB-1免疫組化、流式細胞術(shù)可檢測腫瘤增殖。7.A,B,C,D解析：細胞培養(yǎng)基添加劑包括胰島素、絲裂原、血清、氨基酸。8.A,B,C,D解析：PCR、基因測序、FISH、數(shù)字PCR均可用于分子分型。9.A,B,C解析：組織化學(xué)染色方法包括免疫組化、原位雜交、磷酸酶染色。10.A,B,C,D解析：影響切片質(zhì)量的因素包括固定時間、脫蠟效果、浸蠟時間、切片厚度。三、判斷題答案與解析1.√解析：封閉液應(yīng)與抗體來源的物種一致，避免交叉反應(yīng)。2.√解析：石蠟切片厚度一般控制在4-5μm，保證觀察效果。3.×解析：TUNEL檢測使用TdT酶，無需DNaseI。4.×解析：快速冰凍切片適用于新鮮樣本，不適用于所有類型組織。5.×解析：FISH常用熒光染料是Cy3、FITC等，DAPI用于DNA染色。6.√解析：包埋劑應(yīng)與組織硬度匹配，避免切片裂開。7.√解析：RPMI-1640是常用的細胞培養(yǎng)基。8.√解析：陽性對照應(yīng)使用已知陽性樣本，驗證染色效果。9.√解析：PCR反應(yīng)體系應(yīng)避免RNA污染，影響擴增效率。10.√解析：細胞學(xué)診斷陽性率通常低于組織學(xué)診斷。四、簡答題答案與解析1.HE染色步驟解析解析：HE染色是病理科的基礎(chǔ)染色方法，步驟包括固定、脫水、透明、包埋、切片、染色（蘇木精→分化→伊紅）、脫水、透明、封片。每一步操作需嚴格控制條件，保證染色效果。2.IHC原理及步驟解析解析：IHC利用抗體與抗原結(jié)合，通過顯色反應(yīng)顯示抗原分布。步驟包括脫蠟水化、抗原修復(fù)、封閉、孵育一抗、二抗、顯色（如DAB）、復(fù)染、封片。關(guān)鍵在于優(yōu)化每一步操作，避免假陽性或假陰性。3.TUNEL檢測原理及用途解析解析：TUNEL檢測利用TdT酶在凋亡細胞3'-OH末端添加熒光標記，通過熒光顯微鏡觀察。主要用于檢測腫瘤組織的凋亡情況，幫助判斷腫瘤的惡性程度。4.保證切片質(zhì)量均勻性解析解析：切片質(zhì)量受固定時間、脫蠟效果、浸蠟時間、切片厚度、切片刀鋒、載玻片清潔等因素影響。嚴格控制這些因素，可保證切片質(zhì)量均勻。5.PCR反應(yīng)體系關(guān)鍵成分解析解析：PCR反應(yīng)體系包含模板DNA、引物、dNTPs、DN