ICS67.040

CCSC23

T/GAIA

廣東省分析測(cè)試協(xié)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)

T/GAIAxxx—xxxx

新會(huì)陳皮陳化年份鑒定方法高效液相色譜-

高分辨質(zhì)譜法

IdentifyingtheagingyearofXinhuiPericarpiumCitriReticulataeby

HPLC-HRMS

征求意見稿

在提交反饋意見時(shí)，請(qǐng)將您知道的相關(guān)專利連同支持性文件一并附上。

xxxx-xx-xx發(fā)布xxxx-xx-xx實(shí)施

廣東省分析測(cè)試協(xié)會(huì)發(fā)布

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新會(huì)陳皮陳化年份鑒定方法高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜法

1范圍

本文件規(guī)定了新會(huì)陳皮陳化年份鑒定的液相色譜-高分辨質(zhì)譜方法。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

《中華人民共和國(guó)藥典》（2020年版）

GB/Z35959-2018液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析方法通則

DB4407/T70地理標(biāo)志產(chǎn)品新會(huì)陳皮

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1陳皮Citrireticulataepericarpium

本品為蕓香科植物橘CitrusreticulataBlanco及其栽培變種的干燥成熟果皮。釆摘成熟果實(shí)，剝?nèi)?/p>

果皮，曬干或低溫干燥。

3.2新會(huì)陳皮Xinhuicitrireticulataepericarpium

新會(huì)陳皮為地理標(biāo)志產(chǎn)品保護(hù)范圍內(nèi)栽培的茶枝柑（Citrusreticulata‘Chachi’）的果皮經(jīng)曬干或烘

干，并在保護(hù)區(qū)域范圍內(nèi)貯存陳化三年以上稱為新會(huì)陳皮。按采收加工時(shí)間可分為：柑青皮（青皮）、

微紅皮（二紅皮）和大紅皮（紅皮）。新會(huì)陳皮的地理標(biāo)志產(chǎn)品保護(hù)范圍為廣東省江門市新會(huì)區(qū)會(huì)城街

道辦、大澤鎮(zhèn)、司前鎮(zhèn)、羅坑鎮(zhèn)、雙水鎮(zhèn)、崖門鎮(zhèn)、沙堆鎮(zhèn)、古井鎮(zhèn)、三江鎮(zhèn)、睦洲鎮(zhèn)、大鰲鎮(zhèn)和江門

市濱海新區(qū)管委會(huì)（原圍墾指揮部）現(xiàn)轄行政區(qū)域。

3.3陳皮陳化年份Agingyearofcitrireticulataepericarpium

指以年份表示的陳皮陳化度，說(shuō)明產(chǎn)品達(dá)到相應(yīng)等級(jí)的陳化水平。

3.4陳皮生產(chǎn)年份Productiveyearofcitrireticulataepericarpium

指采收果實(shí)并加工成果皮的年份，說(shuō)明產(chǎn)品什么年份生產(chǎn)。

4方法提要

隨著陳皮陳化年份的增加，其中的化學(xué)成分發(fā)生規(guī)律性變化，分子式為C20H22O7的6個(gè)同分異構(gòu)體

中，前三個(gè)化合物含量隨年份的增加而降低，后三個(gè)化合物含量隨年份的增加而升高，其比值與陳化年

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份具有顯著的線性關(guān)系，利用該6個(gè)特征性成分的轉(zhuǎn)化因子（S），建立了陳皮陳化年份計(jì)算模型。樣

品經(jīng)有機(jī)溶劑提取后，高效液相色譜分離，電噴霧質(zhì)譜正離子模式電離，高分辨質(zhì)譜全掃描方式測(cè)定，

數(shù)學(xué)模型計(jì)算得到陳皮陳化年份，結(jié)合檢測(cè)時(shí)的具體年份，計(jì)算陳皮生產(chǎn)年份。

5試劑和材料

除另有說(shuō)明外，所用試劑均為分析純，水為二次蒸餾水。

5.1甲醇：色譜純。

5.2乙腈：色譜純。

5.3甲酸：色譜純。

5.4不同年份陳皮對(duì)照藥材由廣東省科學(xué)院測(cè)試分析研究所（中國(guó)廣州分析測(cè)試中心）提供。

6儀器設(shè)備

6.1高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜。

6.2超聲波發(fā)生器。

6.3分析天平：感量0.1mg。

7測(cè)定步驟

7.1樣品前處理

陳皮經(jīng)粉碎過(guò)篩后，準(zhǔn)確稱取0.5g于錐形瓶中，加入70%（v/v）甲醇20mL，稱重，超聲提取30min，

70%甲醇補(bǔ)重，濾膜過(guò)濾，裝瓶。

7.2儀器參考條件

7.2.1液相色譜條件

7.2.1.1色譜柱：AgilentRRHDC18（150×2.1mm，1.8μm）色譜柱或性能相當(dāng)?shù)纳V柱；

7.2.1.2流動(dòng)相：A相：0.1%甲酸水溶液，B相：乙腈，梯度洗脫（表1）。

表1梯度洗脫程序

時(shí)間（min）流動(dòng)相A（%）流動(dòng)相B（%）

0.09010

1.09010

10.02080

15.0595

17.0595

17.19010

20.09010

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7.2.1.3流速：0.3mL/min；

7.2.1.4柱溫：35℃；

7.2.1.5進(jìn)樣量：1.0μL。

7.2.2質(zhì)譜參數(shù)

質(zhì)譜工作條件如下：

a）離子源：電噴霧離子源（ESI）；

b）掃描模式：正離子模式；

c）掃描方式：全掃描；

d）噴霧電壓：3500V；

e）鞘氣（N2）溫度：350℃；

f）鞘氣（N2）流量：11L/min；

g）干燥氣（N2）溫度：300℃；

h）干燥氣流速：8L/min；

i）離子傳輸管溫度：325℃；

j）質(zhì)譜掃描范圍：m/z100~1000。

7.3液相色譜-高分辨質(zhì)譜測(cè)定

將7.1得到的樣品溶液按照7.2進(jìn)行分析，得到陳皮樣品的總離子流色譜圖，從總離子流圖中提取

m/z375.1438（分子式：C20H22O7）的提取離子色譜圖（見附錄A），并對(duì)圖中6個(gè)色譜峰進(jìn)行積分，記

錄其峰面積。

8結(jié)果計(jì)算與表述

8.1陳皮陳化年份的計(jì)算

將1-10年陳皮對(duì)照藥材按7.1與7.2的方法進(jìn)行分析，得到目標(biāo)物峰面積。按公式（1）計(jì)算轉(zhuǎn)化

因子。利用Origin軟件以Log2P2的對(duì)數(shù)模型建立轉(zhuǎn)化因子與年份相關(guān)關(guān)系（如附錄B）。將樣品轉(zhuǎn)化

因子帶入得到的相關(guān)關(guān)系公式計(jì)算對(duì)應(yīng)的年份，以四舍五入的方法得到整數(shù)年份。

S=222…………（1）

?4+?5+?6

222

式中：?1+?2+?3

S轉(zhuǎn)化因子

Ai提取離子色譜圖中1-6號(hào)峰的峰面積（i=1~6）

8.2陳皮生產(chǎn)年份的計(jì)算

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根據(jù)公式（2）計(jì)算陳皮生產(chǎn)年份。如，樣品在2024年檢測(cè)，計(jì)算結(jié)果為5年陳皮，則樣品生產(chǎn)年份

為2024-5+1=2020年。

Y1=Y2-Y3+1..................................................................…………（2）

Y1樣品生產(chǎn)年份

Y2檢測(cè)時(shí)公元紀(jì)年

Y3通過(guò)轉(zhuǎn)化因子計(jì)算得到的年份。若年份計(jì)算結(jié)果小于1年，則以1年計(jì)。

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附錄A

（資料性）

特征化合物的提取離子色譜圖

圖A1新會(huì)陳皮中精確質(zhì)量數(shù)375.1438、分子式C20H22O7的6個(gè)化合物提取離子色譜圖

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