ICS65.020.20

CCSB05

15

內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標準

DB15/T3532—2024

甜菜單胚雄性不育系及保持系鑒定規(guī)程

Codeofpracticeforidentifyingofmonogermmalesterilelineand

maintainerlineinsugarbeet

2024-06-28發(fā)布2024-07-28實施

內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB15/T3532—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧廳提出。

本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)業(yè)標準化技術(shù)委員會(SAM/TC20)歸口。

本文件起草單位：內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院、托克托縣古城鎮(zhèn)綜合保障和技術(shù)推廣中心。

本文件主要起草人：付增娟、張自強、鄂圓圓、趙尚敏、王良、張惠忠、張輝、韓平安、張必周、

李曉東、鄭文哲、張立華、呂艷霞、肖強、周曉華、孫夢媛、索寧寧、張國雄。

I

DB15/T3532—2024

甜菜單胚雄性不育系及保持系表型鑒定規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了甜菜單胚雄性不育系及保持系鑒定的鑒定圃要求、鑒定要求、鑒定方法與評價指標等

技術(shù)要點。

本文件適用于二倍體甜菜單胚雄性不育系及保持系花期育性、胚數(shù)性、表型的鑒定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB19176糖用甜菜種子

DB15/T2895糖用甜菜單胚雄性不育雜交種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語和定義

DB15/T2895界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。

單胚種geneticmonogermseed

通過遺傳獲得的種球內(nèi)只含有一個種胚的種子。

[來源:DB15/T2895-2023，3.1]

雄性不育系malesterileline

雌雄同株植物中，雄蕊發(fā)育不正常，不能產(chǎn)生或者釋放遺傳上可育的花粉，但它的雌蕊發(fā)育正常，

能接受正常花粉而授精結(jié)實，并能將雄性不育性遺傳給后代的植物品系。

保持系Otypeline

當作為父本與不育系雜交時，能使其F1保持雄性不育性的甜菜品系。

甜菜二倍體diploidsugarbeet

甜菜細胞核內(nèi)有兩組染色體稱為二倍體或雙倍體（2n=2X=18）。

1

DB15/T3532—2024

開花期durationofflowering

鑒定群體開花種株數(shù)達到75%的日期。

花粉敗育pollenabortion

植株花藥中無花粉或產(chǎn)生的花粉不能正常發(fā)育而失去活力的現(xiàn)象。

花粉敗育率pollenabortionrate

不育花粉數(shù)占總花粉數(shù)的百分比。

鏡檢microscopicexamination

通過顯微鏡觀察花粉待檢標本育性的檢查方式。

4縮略語

下列縮略語適用于本文件。

TTC：2，3，5－三苯基氯化四氮唑，一種脂溶性光敏感復(fù)合物，可作為一種氧化還原指示劑，可

用來檢測花粉、種子等活力(2,3,5-TriphenylTetrazoliumChloride)

5鑒定圃要求

栽植環(huán)境

鑒定現(xiàn)場生態(tài)環(huán)境和栽培條件應(yīng)與生產(chǎn)條件相近，周圍環(huán)境10km不能有其它甜菜花粉污染源。

栽植時間

甜菜母根栽植適宜條件是土壤表土解凍25cm或5cm土層處平均地溫達4℃～5℃為宜。在內(nèi)蒙古

中西部地區(qū)甜菜母根栽植時間一般在3月底或4月上中旬，寒冷地區(qū)栽植時間可延遲至4月底。

栽植株數(shù)

5.3.1不育系

除未抽薹無效株外，待鑒定不育系株數(shù)不少于60株。

5.3.2保持系

除未抽薹無效株外，待鑒定保持系株數(shù)不少于60株。

6鑒定要求

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DB15/T3532—2024

鑒定人員

從事作物遺傳育種、分子育種、種子管理、種子檢驗等專業(yè)人員3名以上。

鑒定時期

6.2.1花期

在甜菜種株生長60d左右，甜菜種株剛要開花前進行育性、胚數(shù)性觀察鑒定，盛花期進行花粉量和

種株株型鑒定。

6.2.2種子成熟期

進行不育率、可育率、單胚率、發(fā)芽率鑒定。種子質(zhì)量滿足GB19176要求。

7鑒定方法與評價指標

種株表型一致性鑒定

7.1.1現(xiàn)場鑒定

以鑒定種株群體為觀測對象，鑒定性狀包括株高、株型、葉色、結(jié)實密度等，根據(jù)主枝和側(cè)枝的多

少確定種株株型。

單莖型：種株僅有一個明顯的主枝，側(cè)枝不發(fā)達，在主枝上生有第一次分枝，第一次分枝再生第二

次分枝。且要求單莖型種株占總抽薹種株70%以上。

多莖型：種株具有多數(shù)健壯的側(cè)枝，主枝不明顯或沒有主枝，總分枝數(shù)量多。且要求多莖型種株占

總抽薹種株70%以上。

混合型：種株具有發(fā)育健壯的主枝和相當數(shù)量的側(cè)枝，并有密集的第一次和第二次分枝。且要求單

莖型種株占總抽薹種株70%以下或多莖型種株占總抽薹種株70%以下。

7.1.2公式結(jié)果計算

表型一致性計算按公式（1）。

ZT?Z

C=100………………(1)

ZT

式中：

C——表型一致性，單位為百分比（%）；

ZT——觀察樣本總數(shù)，單位為株；

Z——雜株數(shù)，單位為株。

計算結(jié)果精確到小數(shù)點后一位

7.1.3評價指標

種株表型一致性≥90.0%。

花粉活力鑒定

7.2.1田間取樣

在花期的晴天8:00～10:00進行花粉取樣。

3

DB15/T3532—2024

7.2.2鏡檢

染色制片：每株取2～3個花朵分別制片，把適量的成熟花粉放在載玻片之上，每個樣品添加1～2滴

0.%TTC溶液，蓋上蓋玻片，在37℃黑暗條件下培養(yǎng)15min。

紅色越深表明活性越強，不能染色的花粉為不育花粉。

鏡檢：制片在低倍鏡下觀察，每片取5個視野，共統(tǒng)計100粒，計算花粉的活力百分率。

7.2.3評價指標

雄性不育系的花粉活力≤10.0%。

同型保持系的花粉活力≥90.0%。

花粉量鑒定

7.3.1鑒定內(nèi)容

在甜菜種株進入花期后，以整個鑒定群體種株為觀測鑒定對象，采用目測的方法觀察甜菜種株開花

期間雄蕊的發(fā)育情況以及當日開放的花藥縱裂、花粉散落的程度。

7.3.2評價指標

4級花粉量評價指標見表1。

表1甜菜花粉量級別與花粉量評價表

花粉量級別花粉量多少花藥顏色花藥狀態(tài)

0級無白色或翠綠色花藥干癟不開裂，無花粉散落

1級少淡黃色花藥開后有很少花粉散落

2級中黃色花藥裂開后有相當一部分花粉散落

3級多黃色花藥裂開后有大量成熟的花粉散落

花粉育性鑒定

7.4.1育性表型鑒定

甜菜雄性不育系，雄蕊花藥色淺、空癟、花粉沒有生活力，而雌蕊發(fā)育正常；保持系的花藥大而飽

滿，顏色發(fā)黃，花粉生活力強。

甜菜花粉育性鑒定一般按完全不育型(W)、半不育Ⅰ型(G)、半不育II型(Ys)、可育型（Yn)等四種

類型進行鑒別。

完全不育型(W)：花藥色澤為白色或綠色；花藥不開裂；花粉敗育，花粉敗育率為100%。

半不育Ⅰ型(G)：花藥色澤為淡黃色；花藥不開裂；花粉無生活力。

半不育II型(Ys)：花藥色澤為橙色；花藥基本不開裂；花粉粒有花粉膜，可以看見花粉孔，雖然花

粉粒存在較多但其直徑僅為正常的2/3，無授精能力；花粉無生活力。

可育型（Yn)：花藥色澤為黃色；花藥開裂；花粉粒正常；花粉生活力強。

7.4.2公式結(jié)果計算

不育率計算按公式（2）。

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DB15/T3532—2024

KT?K

B=100……………(2)

KT

式中：

B——不育率，單位為百分比（%）；

KT——鑒定樣本總數(shù)，單位為株；

K——可育株數(shù)，單位為株。

計算結(jié)果精確到小數(shù)點后一位

7.4.3評價指標

雄性不育系的不育率≥90.0%。

同型保持系的不育率=0。

胚數(shù)性鑒定

7.5.1鑒定內(nèi)容

以種株成熟收獲的所有種子為鑒定對象，種子不應(yīng)經(jīng)過任何機械或藥物處理，鑒定種子量要控制在

500g以上，觀測甜菜種球內(nèi)種胚的數(shù)量。

單胚種：種球內(nèi)只含有1