ICS65.020.20

CCSB05

4414

梅州市地方標準

DB4414/T44—2025

蝴蝶蘭組培育苗技術規(guī)程

Technicalspecificationonseedlingproductionofphalaenopsisbytissueculture

2025-04-29發(fā)布2025-08-01實施

梅州市市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB4414/T44—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由梅州市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局提出并歸口。

本文件起草單位：梅州市農(nóng)林科學院花卉研究所。

本文件主要起草人：陳瑞珍、宋勇強、李艷梅、林新蓮、鐘琦雯、李翠玲、李安琪、李愛娜、黃菊

新、廖國英、張相平、黃靜蘭、張燕珊。

I

DB4414/T44—2025

蝴蝶蘭組培育苗技術規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了蝴蝶蘭組培育苗的術語和定語、培養(yǎng)基配制、外植體處理、外植體接種、組培苗分級、

煉苗和檔案管理。

本文件適用于梅州地區(qū)蝴蝶蘭組培苗的生產(chǎn)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

NY/T2306-2013花卉種苗組培快繁技術規(guī)程

3術語和定義

下列術語和定義適用于本文件。

3.1

組培TissueCulture

在人工控制條件下培養(yǎng)植物離體器官或組織，使其發(fā)育成完整植株的技術。

3.2

組培苗TissueCulturePlantlet

采用植物組織培養(yǎng)技術獲得的種苗。

3.3

外植體Explant

組培中作為離體培養(yǎng)材料的器官或組織。

3.4

培養(yǎng)基CultureMedium

供植物外植體存活和生長所必需的介質(zhì)，通常由水、大量元素、鈣鹽、微量元素、鐵鹽、有機成分、

激素以及凝固劑等組成。

3.5

煉苗Acclimatization

在保護設施中，通過逐步調(diào)整溫度、光照強度、濕度等，使瓶苗出瓶后得以正常生長的過程。

4培養(yǎng)基配制

4.1水質(zhì)要求

水質(zhì)應符合NY/T2306-2013表B.1的要求。

1

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4.2配制

按照附錄A的方法配制相應培養(yǎng)基，定容后攪拌均勻，以0.1mol/L的NaOH或HCl溶液調(diào)整pH值5.2～

5.8。

4.3分裝

培養(yǎng)基煮沸后分裝至培養(yǎng)瓶中，誘導、增殖、復壯培養(yǎng)基每瓶30mL～50mL，生根培養(yǎng)基每瓶50mL～

70mL。標明編號、配制日期等信息。

4.4滅菌

高溫高壓滅菌壓力9.8×104Pa～10.8×104Pa，溫度121℃±2℃，滅菌時間20min。

4.5儲存

滅菌后的培養(yǎng)基按編號歸類層疊堆放，平置冷卻，存儲溫度不高于25℃，避光避粉塵，存儲時間

不超過30d。

5外植體處理

5.1外植體采集

在溫室大棚采集生長健壯、無病蟲害、觀賞性狀好的蝴蝶蘭花梗作為外植體材料?？厮?d～7d，適

當增強光照，選擇晴朗天氣進行采集。

5.2預處理

用消毒過的剪刀選取帶有腋芽的花梗，切取帶有腋芽的節(jié)段，腋芽上下保留的1cm～2cm，放入裝

有洗衣粉溶液的瓶子中浸泡3min～5min后，用自來水沖洗至無泡沫出現(xiàn)，然后用蒸餾水沖洗2次。

5.3消毒

在接種室的超凈工作臺操作，將沖洗干凈的花梗小段轉至無菌燒杯中，先用75%酒精處理30s，無

菌水沖洗1次后，再用0.1%氯化汞消毒8min～15min，最后用無菌水清洗4次～6次。

6外植體接種

6.1接種前準備

開啟超凈工作臺的紫外燈和風機30min，開啟鑷子和解剖刀消毒器，超凈工作臺、器具和雙手用75%

酒精消毒。

6.2誘導培養(yǎng)

6.2.1接種

將消毒好的小段頂端平切，底端斜切至長度1cm～1.5cm，垂直均勻接種于誘導培養(yǎng)基中，每瓶接

種3個～5個。

6.2.2培養(yǎng)條件

2

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接種完成后轉入培養(yǎng)室先進行暗培養(yǎng)7d～10d，培養(yǎng)溫度22℃±2℃，待芽萌發(fā)后進行光照培養(yǎng)，

光照強度1500Lx～2000Lx，光照時間8h/d～10h/d，培養(yǎng)溫度25℃±2℃，濕度60%～70%。

6.3增殖培養(yǎng)

6.3.1轉接

采用增殖培養(yǎng)基，在誘導培養(yǎng)基培養(yǎng)30d～60d后，篩選出高度1.5cm～3cm、葉片開始展開的叢

生芽進行增殖培養(yǎng)，切除葉片和接觸培養(yǎng)基部分，根據(jù)叢生芽的長勢分切，轉接到增殖培養(yǎng)基。

6.3.2培養(yǎng)條件

轉接完成后轉入培養(yǎng)室光照培養(yǎng)，光照強度1500Lx～2000Lx，光照時間10h/d～12h/d，培養(yǎng)溫

度25℃±2℃，濕度60%～70%。

6.4壯苗培養(yǎng)

6.4.1轉接

采用壯苗培養(yǎng)基，將瓶內(nèi)增殖代數(shù)小于20代、培養(yǎng)時間大于2個月、芽體長勢較差、高度小于2.5cm

的芽體進行壯苗培養(yǎng)，按芽體大小分級轉接到壯苗培養(yǎng)基。

6.4.2培養(yǎng)條件

壯苗培養(yǎng)在光照強度2000Lx～3000Lx，光照時間10h/d～12h/d，培養(yǎng)溫度25℃以下，濕度60%～

70%，培養(yǎng)時間為35d～45d。

6.5生根培養(yǎng)

6.5.1轉接

采用生根培養(yǎng)基，切除褐化組織、黃葉，注意不要弄傷健壯葉片，篩選生長健壯、長勢均勻、高度

大于2.5cm、葉片數(shù)量2片～3片的芽體進行生根培養(yǎng)。

6.5.2培養(yǎng)條件

轉接完成后轉入培養(yǎng)室光照培養(yǎng)，光照強度1500Lx～2000Lx，光照時間8h/d，培養(yǎng)溫度25℃±

2℃，濕度60%～70%。

7組培苗分級

根據(jù)葉片顏色深淺、葉片張開幅度、苗高等，將蝴蝶蘭組培苗分為小苗、中苗、大苗。小苗苗高2.5

cm～3cm，中苗苗高3cm～4cm，大苗苗高4cm以上。根據(jù)不同品種不同等級分類整齊擺放。

8煉苗

8.1大棚消毒

煉苗前7d～10d，對溫室大棚內(nèi)環(huán)境噴施50%多菌靈可濕性粉劑800倍液消毒。

8.2煉苗

3

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當組培苗高2.5cm～4cm，具有3片～4片葉時，可進行煉苗。

8.3煉苗條件

在溫室大棚內(nèi)進行，光照強度5000Lx～8000Lx，光照時間8h/d～10h/d，溫度25℃～28℃，

濕度70%～80%。

8.4種植

煉苗15d～20d天可出瓶種植。

9檔案管理

記錄外植體采集時間，培養(yǎng)基配制信息，誘導培養(yǎng)至煉苗移栽各個環(huán)節(jié)的相關信息，應覆蓋整個生

產(chǎn)管理周期，所有記錄真實、準確、規(guī)范。

4

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A

A

附錄A

（規(guī)范性）

蝴蝶蘭組織培養(yǎng)配方表

A.1蝴蝶蘭組織培養(yǎng)配方表見表A.1。

表A.1蝴蝶蘭組織培養(yǎng)配方表

單位：毫克每升

類別名稱誘導培養(yǎng)基增殖培養(yǎng)基生根培養(yǎng)基壯苗培養(yǎng)基

硝酸鉀190019009501900

硝酸銨165016508251650

大量元素

磷酸二氫/p>

七水合硫酸鎂370370185370

鈣鹽無水氯化鈣440440220440

碘化鉀0.830.830.830.83

硼酸6.26.26.26.2

一水合硫酸錳22.322.322.322.3

微量元素七水合硫酸鋅8.68.68.68.6

二水合鉬酸鈉0.250.250.250.25

五水合硫酸銅0.0250.0250.0250.025

六水合氯化鈷0.0250.0250.0250.025

乙二胺四乙酸二鈉37.337.337.337.3

鐵鹽

七水合硫酸亞鐵27.827.827.827.8

肌醇100100100100

甘氨酸2222

有機成分鹽酸硫胺素0.50.50.50.5

鹽酸吡哆醇0.50.50.50.5

煙酸0.50.50.50.5

6-BA1～31～30