高能X射線FLASH照射臨

床前研究專家共識匯報(bào)人：)2025

年

12月23日05X-FLASH加速器束

06實(shí)驗(yàn)前劑量標(biāo)定

流和劑量參數(shù)監(jiān)測07生物學(xué)實(shí)驗(yàn)——細(xì)胞實(shí)驗(yàn)08生物學(xué)實(shí)驗(yàn)——小鼠實(shí)驗(yàn)01

前

言

0203

實(shí)驗(yàn)前劑量標(biāo)定

04X-FLASH加速器束

流和劑量參數(shù)監(jiān)測前言目錄CONTENTS01

前言研究重點(diǎn)：減小放療不良反應(yīng)如何在維持腫瘤殺傷效果的同時(shí)減輕正

常組織損傷，是放療領(lǐng)域長期探索的核

心問題，為新型放療技術(shù)研發(fā)提供重要

方向

。常規(guī)放療的不良反應(yīng)問題常規(guī)放療(劑量率0.03~0.1Gy/s)雖

能有效殺滅腫瘤，但正常組織損傷不可

低估，如放射性腦損傷、肺損傷、腸損

傷等，限制治療增益比。放射治療的核心地位放射治療是惡性腫瘤主要治療手段之一，

70%的腫瘤患者在病程不同階段需接受

放療，在腫瘤局部控制與綜合治療中發(fā)

揮關(guān)鍵作用。惡性腫瘤放療現(xiàn)狀與挑戰(zhàn)FLASH效應(yīng)的發(fā)現(xiàn)與意義FLASH效應(yīng)的首次報(bào)道2014年，

Favaudon

團(tuán)隊(duì)在《Science

Translational

Medicine》發(fā)表

研究，首次證實(shí)超高劑量率(≥40Gy/s)電子束可產(chǎn)生FLASH效應(yīng)。FLASH效應(yīng)的核心特征該效應(yīng)突破劑量率依賴性，在維持腫瘤殺滅效果的同時(shí)，顯著減輕正

常組織損傷，為放療領(lǐng)域帶來全新的時(shí)間生物學(xué)特性視角。對輻射防護(hù)理論的挑戰(zhàn)FLASH效應(yīng)顛覆傳統(tǒng)輻射防護(hù)認(rèn)知，其獨(dú)特的時(shí)間生物學(xué)特性要求重

新審視現(xiàn)有輻射損傷機(jī)制與防護(hù)策略。X-FLASH技術(shù)的發(fā)展與挑戰(zhàn)全球首臺X-FLASH研究平臺基于成都太赫茲自由電子激光裝置

(CTFEL),研發(fā)團(tuán)隊(duì)搭建全球首臺

高能X射線FLASH照射平臺

(PARTER),

國際首次證實(shí)X-FLASH可產(chǎn)生FLASH效

應(yīng)。技術(shù)突破：治療時(shí)間的革命性壓縮與常規(guī)放療數(shù)十分鐘的治療過程相比，

X-FLASH放療將時(shí)間壓縮至亞秒級，大幅提升治療效率，展現(xiàn)出巨大臨床

應(yīng)用潛力。亟待解決的關(guān)鍵科學(xué)問題當(dāng)前X-FLASH效應(yīng)的分子機(jī)制、劑量

響應(yīng)規(guī)律及臨床轉(zhuǎn)化路徑尚未明確，

需系統(tǒng)研究以推動技術(shù)從基礎(chǔ)研究向

臨床應(yīng)用轉(zhuǎn)化。X-FLASH技術(shù)的發(fā)展與挑戰(zhàn)共識的目的與意義臨床前研究的規(guī)范化需求目前FLASH照射臨床前研究數(shù)量

快速增長，但缺乏統(tǒng)一規(guī)范的流

程或共識，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果可比性與重復(fù)性不足，制約研究進(jìn)展。為多維度研究提供支撐為解析FLASH效應(yīng)機(jī)制、驗(yàn)證設(shè)備物理性能、設(shè)計(jì)基于生物效應(yīng)

的臨床前研究提供可復(fù)制的實(shí)驗(yàn)

平臺，助力技術(shù)瓶頸突破與臨床

轉(zhuǎn)

化

。共識的核心目標(biāo)構(gòu)建一套規(guī)范化、操作性強(qiáng)的X-

FLASH臨床前研究操作體系，整

合劑量學(xué)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、動物模型等關(guān)鍵環(huán)節(jié)的標(biāo)準(zhǔn)化流程。02X-FLASH加速器束流和劑量參數(shù)監(jiān)測束流監(jiān)視器核心目標(biāo)實(shí)時(shí)驗(yàn)證射線束的能量、劑量率、均

勻性、對稱性等參數(shù)是否符合治療計(jì)

劃要求，并在束流輸出達(dá)到預(yù)設(shè)值時(shí)

關(guān)停束流，保障照射準(zhǔn)確性和安全性。束流監(jiān)視器類型及性能要求分為束內(nèi)和束外監(jiān)視器：束內(nèi)用于小

動物精準(zhǔn)劑量控制，需配備專用探測

器(

如X-FLASH專用穿透電離室等),

具備響應(yīng)時(shí)間匹配加速器脈沖結(jié)構(gòu)、

劑量線性R2>0.999

、

重復(fù)性變異系數(shù)<1%等性能；束外用于環(huán)境劑量控制，為間接測量，易受散射干擾，更換樣

品時(shí)需評估影響。劑量學(xué)設(shè)備分類主要包括相對劑量監(jiān)測設(shè)備(束流監(jiān)

視)和絕對劑量測定設(shè)備(吸收劑量

測量),分別用于實(shí)時(shí)驗(yàn)證射線束參

數(shù)和精確測定吸收劑量。劑量學(xué)設(shè)備的選擇、維護(hù)和檢測定期檢查維護(hù)要求需定期開展檢查和維護(hù)，交付時(shí)檢測測量重復(fù)性、劑量線性、劑

量率線性、射野平坦度、對稱性

及安全聯(lián)鎖功能，每月進(jìn)行相關(guān)

參數(shù)月檢。實(shí)驗(yàn)前測試要求每次實(shí)驗(yàn)前對劑量監(jiān)測設(shè)備進(jìn)行

測試，確定其工況正常，以確保

實(shí)驗(yàn)過程中設(shè)備處于穩(wěn)定可靠狀

態(tài)。關(guān)鍵性能參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)重復(fù)性要求在±1%以內(nèi)，劑量線

性在±2%以內(nèi)，劑量率線性在

±5%以內(nèi)，具體測量計(jì)算方法可

參考GB15213-2016。劑量監(jiān)測設(shè)備維護(hù)與檢測劑量測量核心目的確保小動物接受的照射劑量準(zhǔn)確符合治療計(jì)劃，是放射治療質(zhì)量保證

的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。EBT系列膠片使用注意事項(xiàng)保存需注意濕度、溫度，使用、校準(zhǔn)、數(shù)據(jù)讀出采納AAPM

TG-235號報(bào)

告推薦；裁剪成矩形以減少誤差；掃描前需校準(zhǔn)掃描位置、波段等，固定膠片放置角度和位置，避免影響輸出值；輻照后顏色隨時(shí)間變深，

EBT4系列膠片輻照后等待5

min

灰度變化率<1%,可獲得3%~5%測量不確定

度

。劑量測量設(shè)備選擇分為離線和在線劑量計(jì)：離線劑量計(jì)(如輻射變色膠片、丙氨酸、熱

釋光等)對劑量率不敏感，EBT系列膠片精度高、體積小且可獲取劑量

分布，是常用離線劑量計(jì)；在線劑量計(jì)需注意其劑量率響應(yīng)特征。劑量測量流程將劑量計(jì)探頭放置在模擬樣品或標(biāo)準(zhǔn)水模目標(biāo)位置，進(jìn)行輻照并離線/

在線讀取信號，與標(biāo)準(zhǔn)輻射場標(biāo)定值比對，得到可追溯的絕對劑量值。X-FLASH劑

量

測

量02040

103其他相關(guān)流程實(shí)驗(yàn)劑量計(jì)劃設(shè)計(jì)參考01實(shí)驗(yàn)劑量的計(jì)劃設(shè)計(jì)、照射對象的定位與驗(yàn)證及劑量計(jì)算、記錄、跟蹤等流程參考常規(guī)放療流程。小動物實(shí)驗(yàn)劑量計(jì)算特殊性02目前無商用小動物照射計(jì)劃系統(tǒng)，

一般使用物理師自行開發(fā)的蒙特卡羅計(jì)算軟件完成個(gè)體化劑量計(jì)算，為保證重復(fù)性，通常使用統(tǒng)一模體對參考點(diǎn)劑量進(jìn)行計(jì)算和驗(yàn)證。劑量可追溯性實(shí)現(xiàn)方法03在條件允許情況下，實(shí)驗(yàn)中在每個(gè)照射對象后端放置膠片，及時(shí)掃描存檔，實(shí)現(xiàn)每次實(shí)驗(yàn)中劑量的可追溯性。03實(shí)驗(yàn)前劑量標(biāo)定04前言惡性腫瘤放療現(xiàn)狀與挑戰(zhàn)放射治療的重要地位放射治療是惡性腫瘤的主要治療手段之一，70%的腫瘤患者在不同階

段需要接受放療，在腫瘤綜合治療中具有不可替代的作用。放療不良反應(yīng)的問題常規(guī)放療雖能有效殺傷腫瘤，但不良反應(yīng)不可低估，正常組織損傷限

制了治療劑量提升，如何減小放療不良反應(yīng)成為研究重點(diǎn)。FLASH效應(yīng)的首次發(fā)現(xiàn)2014年，F(xiàn)avaudon團(tuán)隊(duì)在《ScienceTranslationalMedicine》

首次報(bào)道：超高劑量率(平均劑量率≥40Gy/s)電子束可維持

腫瘤殺滅效果，同時(shí)顯著減輕正常組織損傷。FLASH效應(yīng)的核心特征該效應(yīng)突破劑量率依賴性，在超高劑量率下實(shí)現(xiàn)正常組織保護(hù)與

腫瘤殺傷的分離，對傳統(tǒng)輻射防護(hù)理論提出全新挑戰(zhàn)。效應(yīng)的學(xué)術(shù)命名與意義學(xué)界將這種突破劑量率依賴性的保護(hù)效應(yīng)命名為

“FLASH效應(yīng)”,

為放療技術(shù)革新提供了全新方向，有望解決常規(guī)放療不良反應(yīng)難

題。FLASH效應(yīng)的發(fā)現(xiàn)與意義X-FLASH研究平臺的突破基于成都太赫茲自由電子激光裝置

(CTFEL),FLASH放療聯(lián)合研發(fā)團(tuán)隊(duì)搭建全球首臺高能X射線FLASH照射研究

平臺

(PARTER),國際首次證實(shí)X-FLASH可產(chǎn)生FLASH效應(yīng)。技術(shù)的時(shí)間生物學(xué)特性與常規(guī)放療(0.03~0.1Gy/s)相比，X-FLASH將治療時(shí)間從數(shù)十分鐘壓縮至亞秒級，其獨(dú)特時(shí)間生物學(xué)特性顛覆傳統(tǒng)放療模式。當(dāng)前面臨的核心挑戰(zhàn)X-FLASH效應(yīng)的分子機(jī)制、劑量響應(yīng)規(guī)律及臨床轉(zhuǎn)化路徑仍亟待系統(tǒng)闡明，限制了技術(shù)從基礎(chǔ)研究向臨床應(yīng)用

的跨越。X-FLASH技術(shù)的發(fā)展與挑戰(zhàn)共識的實(shí)踐意義為解析FLASH效應(yīng)機(jī)制、驗(yàn)證設(shè)備性能、設(shè)計(jì)臨床前研究提供可復(fù)制的實(shí)驗(yàn)平臺，助力突破技術(shù)瓶頸，為X-FLASH臨床轉(zhuǎn)化提供堅(jiān)實(shí)依據(jù)。共識的核心目標(biāo)構(gòu)建規(guī)范化、操作性強(qiáng)的X-FLASH臨床前研究操作體系，整合電離輻射劑量學(xué)、體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、動物模型輻照等關(guān)鍵環(huán)節(jié)的標(biāo)準(zhǔn)化流程。目前FLASH照射臨床前研究數(shù)量快速增長，但缺乏統(tǒng)一規(guī)范的研究流程或共識，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果可比性差、重復(fù)性不足。共識的目的與意義臨床前研究的現(xiàn)狀問題05X-FLASH加速器束流和劑量參數(shù)監(jiān)測劑量學(xué)設(shè)備組成主要包括相對劑量監(jiān)測(束流監(jiān)視)和絕

對劑量測定(吸收劑量測量)設(shè)備，二者

共同保障X-FLASH照射劑量準(zhǔn)確性與安全

性。束流監(jiān)視器類型及特點(diǎn)分為束內(nèi)和束外監(jiān)視器：束內(nèi)用于小動物

精準(zhǔn)劑量控制，需專用探測器(如X-FLASH專用穿透電離室等);束外用于環(huán)

境劑量監(jiān)測，易受樣品散射干擾，更換樣

品時(shí)需謹(jǐn)慎評估影響。束流監(jiān)視器核心目標(biāo)實(shí)時(shí)驗(yàn)證射線束能量、劑量率、均勻性、

對稱性等參數(shù)是否符合治療計(jì)劃要求，在

束流輸出達(dá)預(yù)設(shè)值時(shí)關(guān)停束流。束流監(jiān)視器性能要求探測器響應(yīng)時(shí)間需匹配加速器脈沖結(jié)構(gòu)，

劑量線性R2>0.999,重復(fù)性變異系數(shù)<1%,

透射型探測器建議具備不少于兩個(gè)獨(dú)立通

道以監(jiān)視劑量分布變化。劑量學(xué)設(shè)備的選擇、維護(hù)和檢測定期維護(hù)檢測要求交付時(shí)需檢測測量重復(fù)性、劑量

線性、劑量率線性、射野平坦度、

對稱性及安全聯(lián)鎖功能，每月進(jìn)

行相關(guān)參數(shù)月檢以確保設(shè)備穩(wěn)定。實(shí)驗(yàn)前設(shè)備狀態(tài)確認(rèn)每次實(shí)驗(yàn)前需對劑量監(jiān)測設(shè)備進(jìn)

行測試，確保其工況正常，結(jié)合當(dāng)前X-FLASH設(shè)備現(xiàn)狀，為相關(guān)

參數(shù)提供參考性建議。關(guān)鍵性能參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)重復(fù)性要求在±1%以內(nèi)，劑量線

性在±2%以內(nèi)，劑量率線性在±5%以內(nèi)，具體測量計(jì)算方法可

參考GB15213-2016。劑量監(jiān)測設(shè)備維護(hù)與檢測劑量測量核心目的確保小動物接受的照射劑量準(zhǔn)確符合治療

計(jì)劃，是放射治療質(zhì)量保證的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。EBT系列膠片使用注意事項(xiàng)保存需控制濕度、溫度，使用前掃描本底

灰度值，裁剪推薦矩形以減少誤差；掃描

時(shí)固定角度和位置，避免影響輸出值(最

大影響可能超過10%);輻照后顏色隨時(shí)間

變

深

，EBT4膠片需等待24h達(dá)穩(wěn)定值，5min等待可獲3%-5%測量不確定度。劑量測量設(shè)備分類及特點(diǎn)分為離線和在線劑量計(jì)：離線劑量計(jì)(如

EBT系列膠片、丙氨酸、熱釋光等)對劑量

率不敏感，F(xiàn)LASH和常規(guī)工況下劑量響應(yīng)曲線基本一致；在線劑量計(jì)需關(guān)注劑量率響

應(yīng)特征。劑量測量基本流程將劑量計(jì)探頭置于模擬樣品或標(biāo)準(zhǔn)水模目

標(biāo)位置，輻照后離線/在線讀取信號，與標(biāo)

準(zhǔn)輻射場標(biāo)定值比對，得到可追溯的絕對

劑量值。X-FLASH劑

量

測

量實(shí)驗(yàn)劑量計(jì)劃設(shè)計(jì)參考小動物實(shí)驗(yàn)劑量計(jì)算特殊性劑量可追溯性實(shí)現(xiàn)方法實(shí)驗(yàn)劑量的計(jì)劃設(shè)計(jì)、照射對象的

定位與驗(yàn)證及劑量計(jì)算、記錄、跟

蹤等流程參考常規(guī)放療流程。目前無商用小動物照射計(jì)劃系統(tǒng)，劑量計(jì)算一般依賴物理師開發(fā)的蒙

特卡羅計(jì)算軟件，為保證重復(fù)性，

通常使用統(tǒng)一模體對參考點(diǎn)劑量進(jìn)

行計(jì)算和驗(yàn)證。在條件允許情況下，實(shí)驗(yàn)中每個(gè)照

射對象后端放置膠片，照射后及時(shí)

掃描存檔，實(shí)現(xiàn)每次實(shí)驗(yàn)劑量的可

追溯性，為實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性提供保

障。其他相關(guān)流程06實(shí)驗(yàn)前劑量標(biāo)定鞭憑貌的床燃的蘑村瀣稻重箭橘窺奢退力的糟看的魑菌，童胸腐俺楨

梢

康

舸

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色

種限案種窒納皮的體槍播磁格酒色稽的著侮的錠臾帥杭腹將著一

的韂伸景潮與懂勁的縢陪。整得譯的

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椰管

有

雹現(xiàn)知負(fù)管上

的師看的花途附放批前

密椎

水

市

席

通

罐

制橢蓄評估方法在無樣品條件下連續(xù)出束10次，通

過穿透電離室反饋跳數(shù)

(MU)

變異程度進(jìn)行評估。合格標(biāo)準(zhǔn)若跳數(shù)變異程度<±1%,表明裝置

狀態(tài)穩(wěn)定，可進(jìn)行后續(xù)劑量標(biāo)定。裝置狀態(tài)評估小鼠放射性損傷模型照射野全腦照射：1.2cm

(頭腳方向)×2cm

(左右方向),射野頭側(cè)界

為雙耳緣連線；全胸腔照射：2cm(頭尾方向)×4cm

(左右方向),射野頭側(cè)界為雙耳緣連線；全腹腔照射：4cm

(頭尾方向)

×4cm

(左右方向),射野尾側(cè)界為肛門；皮膚照射：2cm

(頭腳

方向)×3cm

(左右方向),下界為膝關(guān)節(jié)；全身照射：8cm

(

頭腳方向)×5cm

(左右方向),覆蓋小鼠全身。荷瘤小鼠模型照射野皮下移植瘤模型推薦2cm

(頭腳方向)×3cm

(左右方向);原位

腫瘤模型根據(jù)目標(biāo)區(qū)域范圍確定。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)照射野根據(jù)細(xì)胞照射目標(biāo)區(qū)域范圍確定，照射野需大于目標(biāo)區(qū)域且保證區(qū)域內(nèi)劑量分布均勻。照射野確定小鼠放射性損傷模型劑量放射性腦損傷模型：10~30Gy;

放

射性肺損傷模型：17~30Gy;放

射

性腸損傷模型：12~16Gy;放射性

皮膚損傷模型：25~35Gy;放射性造血系統(tǒng)損傷模型：6~8Gy(均為EBT-XD標(biāo)定劑量，且膠片事先校準(zhǔn)“劑量-灰度相關(guān)性”)。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)劑量目標(biāo)劑量設(shè)定為6~10Gy(EBT4膠片劑量線性范圍1~10Gy),

且EBT4膠片均經(jīng)醫(yī)用直線加速器與金剛石電離室校準(zhǔn)“劑量-灰度相關(guān)性”。荷瘤小鼠模型劑量依據(jù)腫瘤模型放射敏感性選擇，避免劑量過低導(dǎo)致腫瘤不退縮或過高導(dǎo)致腫瘤快速消失，以有效監(jiān)測腫瘤體積變化。照射劑量設(shè)定膠片擺放要求細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：基于源靶距調(diào)節(jié)SSD,

選

擇與培養(yǎng)瓶/皿細(xì)胞貼壁面厚度一致的固體水模置于射野中心，EBT4膠片

固定于水模之上，背面為射線入射方

向，中心與射野中心重合；小鼠模型：

調(diào)節(jié)SSD,

選擇與輻照區(qū)域厚度一致

的固體水模，EBT-XD膠片置于水模厚

度中心位置，入射方向覆蓋超過DBR

厚度的生物補(bǔ)償膜，中心與射野中心

重

合

。照射及膠片劑量檢測照射同時(shí)計(jì)時(shí)并記錄跳數(shù)與脈沖數(shù)，照射后5分鐘掃描膠片灰度，依據(jù)“劑量-灰度相關(guān)性”讀出照射野80%

范圍內(nèi)及中心5mm×5mm范圍內(nèi)紅、綠、

藍(lán)三通道劑量，三通道劑量差異應(yīng)<

3%,細(xì)胞照射目標(biāo)范圍內(nèi)劑量波動應(yīng)

<5%;合格后計(jì)算射野平均劑量/膠片跳數(shù)及射野中心劑量/膠片跳數(shù)。輻照劑量標(biāo)定流程掃描膠片本底將膠片裁剪成適當(dāng)大小，正面朝上

(右上角做標(biāo)記)置于掃描儀中心，

按規(guī)范掃描膠片本底灰度值。07生物學(xué)實(shí)驗(yàn)——細(xì)胞實(shí)驗(yàn)隨機(jī)性原則的核心要求樣品照射順序需嚴(yán)格遵循隨機(jī)性原則，通過隨機(jī)化分組或隨機(jī)排序確定

照射先后，消除操作流程、環(huán)境因素(如溫度、濕度變化)及時(shí)間依賴

性(如細(xì)胞代謝周期、小鼠生理節(jié)律)可能引發(fā)的系統(tǒng)性偏差。非隨機(jī)化的潛在風(fēng)險(xiǎn)若未采用隨機(jī)順序，可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)組與對照組在照射時(shí)間、操作人員熟

練度等非干預(yù)因素上產(chǎn)生差異，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果無法準(zhǔn)確歸因于X-FLASH照射

本身，降低數(shù)據(jù)可靠性與結(jié)論說服力。樣品照射順序原則細(xì)胞準(zhǔn)備規(guī)范培養(yǎng)瓶貼壁細(xì)胞需注滿培養(yǎng)基并

排盡氣泡，培養(yǎng)皿貼壁細(xì)胞需棄

去培養(yǎng)基，離心管懸浮細(xì)胞需低

速離心使細(xì)胞沉降至管底，均用封口膜封口防污染；厚度<1mm

的細(xì)胞/類器官可忽略劑量衰減

影

響

。照射操作步驟培養(yǎng)瓶/皿貼壁細(xì)胞置于射野中央，細(xì)胞貼壁面朝向射線入射方

向，底面外側(cè)貼EBT4膠片監(jiān)測劑量；離心管置于2cm厚亞克力板孔道中，沉降區(qū)對準(zhǔn)射野中心；按標(biāo)定參數(shù)給予目標(biāo)脈沖數(shù)照射。對照組設(shè)置要求對照組細(xì)胞除不進(jìn)行出束照射外，其余處理(放置位置、等待時(shí)間、

培養(yǎng)條件等)與實(shí)驗(yàn)組保持完全

一致，以排除非照射因素對實(shí)驗(yàn)

結(jié)果的干擾。水平束X-FLASH照射平臺操作照射定位與補(bǔ)償措施培養(yǎng)瓶/皿置于射野中央，若實(shí)

際厚度<2cm,需覆蓋生物補(bǔ)償膜使劑量建成區(qū)總厚度達(dá)2cm;底面外側(cè)貼EBT4膠片用于實(shí)時(shí)劑量監(jiān)測，確保照射劑量精準(zhǔn)可控。細(xì)胞準(zhǔn)備要點(diǎn)照射前在超凈臺內(nèi)將培養(yǎng)瓶/皿

注滿培養(yǎng)基并盡量排盡氣泡，采

用封口膜密封防止污染；對于厚

度

<

1mm的細(xì)胞/類器官，可忽略

其對射線劑量的衰減作用。照射實(shí)施與對照設(shè)計(jì)根據(jù)劑量標(biāo)定參數(shù)給予目標(biāo)脈沖

數(shù)的X-FLASH或常規(guī)劑量率照射；

對照組除不啟動束流外，放置位

置、培養(yǎng)條件及處理流程與實(shí)驗(yàn)

組嚴(yán)格一致，保證實(shí)驗(yàn)的可比性與科學(xué)性。垂直束X-FLASH光子照射平臺操作08生物學(xué)實(shí)驗(yàn)——小鼠實(shí)驗(yàn)擇和動物鼠輻射純麻醉，苦少且麻醉藥物選擇原則優(yōu)先選擇對心肺功能影響小、代謝快、安全性高的藥物，如丙泊酚等，需注意劑量依賴的呼吸抑制風(fēng)險(xiǎn)，可參考

相關(guān)文獻(xiàn)根據(jù)造模目的選擇。麻醉注意事項(xiàng)加速器機(jī)房溫度低，

小鼠麻醉后失溫死亡

結(jié)束后用加熱墊保溫

復(fù)，密切觀察麻醉恢實(shí)驗(yàn)小鼠基本要求選用6~8周齡、體質(zhì)量18~20g的標(biāo)準(zhǔn)化小鼠，需人

工飼養(yǎng)繁育，微生物及寄生

蟲受控，遺傳背景明確或來

源清楚。麻醉重要性與方式選麻醉是保證實(shí)驗(yàn)順利

福利的關(guān)鍵，健康小損傷建模推薦全身單

因其即時(shí)損傷小、痛

便于固定。實(shí)驗(yàn)動物選擇與麻醉需避免

;實(shí)驗(yàn)

助其恢

復(fù)情況。不同照射類型固定要點(diǎn)①全腦照射：頭部與中心十字線延長線對齊，頭側(cè)

界為雙眼后眥連線，用彈性束縛帶牽引上門齒防下

垂；②全胸腔照射：脊柱與中心十字線對齊，頭側(cè)

界為雙耳緣連線；③全腹腔照射：脊柱與中心十字

線對齊，尾側(cè)界為肛門；④皮膚照射：一側(cè)股骨與

中心十字線對齊，腳側(cè)界為膝關(guān)節(jié)，輻照側(cè)后腿外

展；⑤全身照射：脊柱與中心十字線對齊，中心與

射野中心重疊，可定制專用固定裝置。小鼠放射性損傷模型構(gòu)建——固定固定目的與材料固定目的是保證靶器官、靶組織位于射野內(nèi)，所需

材料包括2mm厚透明亞克力固定板(標(biāo)示射野中心

和范圍)、醫(yī)用壓敏膠帶、彈性束縛帶(直徑約

5cm)

及生物補(bǔ)償物膜(厚度超過DBR)。通用固定步驟將麻醉小鼠俯臥位置于亞克力固定板，調(diào)整為水平

位，確保脊柱與固定板縱軸平行、身體伸展，按解

剖標(biāo)志使射野覆蓋靶區(qū)，入射方向覆蓋生物補(bǔ)償膜。固定后檢驗(yàn)方法評估麻醉深度，觀察是否過淺或射野內(nèi)組織移位；檢查體位穩(wěn)定性，確認(rèn)膠帶是否粘緊、有無脫落風(fēng)險(xiǎn)(水平束照射重點(diǎn)關(guān)注)。小鼠放射性損傷模型構(gòu)建——固定對照組處理方式除不出束照射外，其余處理方式(包括放置位置、等待時(shí)間等)均與照射組嚴(yán)格一致，以排除非照射因素干擾。固定板放置方法將固定好小鼠的亞克力固定板置于準(zhǔn)直器后方相應(yīng)源靶距(SSD)處，確保射野中心與固定板中心重合。照射組處理方式根據(jù)劑量標(biāo)定參數(shù)，給予目標(biāo)脈沖數(shù)的X-FLASH照射或常規(guī)劑量率照射。小鼠放射性損傷模型構(gòu)建——照射原位瘤模型按腫瘤類型確定荷瘤部位，常見模型包括細(xì)胞系來源異種移植、轉(zhuǎn)移、化學(xué)誘導(dǎo)、基因工程和人源腫瘤異種移植模型等；腦原位瘤模型注射點(diǎn)為前鹵中心旁開中線2mm、前后軸向尾側(cè)1mm、顱骨表面以下腹背軸2mm

(

進(jìn)

3mm退1mm),

以確保腫瘤位于射野中

心

。皮下移植瘤模型首選接種部位為小鼠后腿外側(cè)，因其易于定位、固定和照射，腫瘤生長及放射反應(yīng)便于觀察量化，且能避免照射損傷重要臟器；照射前固定時(shí)，

一側(cè)股骨與中心十字線對齊，腳側(cè)界為膝關(guān)節(jié)，輻照側(cè)后腿外展使腹腔遠(yuǎn)離射野。荷瘤小鼠固定與照射方