醫(yī)用基因測序儀輔助運維技師（中級）考試試卷及答案一、填空題（每題1分，共10分）1.基因測序儀核心光學檢測模塊通常包含______和CCD相機。2.測序儀日常校準中，熒光強度校準的標準物質(zhì)是______。3.測序儀耗材中，用于捕獲目標核酸的是______。4.測序儀光學鏡頭清潔一般每______個月進行一次。5.測序數(shù)據(jù)Q30表示堿基識別準確率達到______%以上。6.測序儀開機自檢需確認______模塊溫度是否在25±2℃。7.去除核酸雜質(zhì)的常用試劑是______。8.測序儀廢液收集瓶需每______小時檢查一次液位。9.二代測序文庫制備中，末端修復的目的是______。10.測序儀報錯“激光功率不足”時，首先檢查______。答案：1.激光光源2.熒光校準微球3.磁珠4.35.99.96.溫控7.蛋白酶K8.49.補平片段化DNA末端10.激光模塊電源二、單項選擇題（每題2分，共20分）1.基因測序儀中激光的主要作用是（）A.激發(fā)熒光標記B.分離核酸片段C.檢測堿基長度D.控制溫控2.不屬于測序儀日常消耗品的是（）A.熒光微球B.測序芯片C.計算機內(nèi)存條D.清洗緩沖液3.光學鏡頭清潔應使用（）A.無水乙醇B.75%酒精C.蒸餾水D.丙酮4.測序數(shù)據(jù)大量N堿基的最可能原因是（）A.樣本濃度過高B.激光功率異常C.芯片污染D.溫控故障5.二代測序文庫制備最后一步是（）A.片段化B.接頭連接C.擴增富集D.質(zhì)量檢測6.含核酸廢液處理應（）A.直接倒下水道B.滅活后處理C.交醫(yī)療廢物公司D.稀釋排放7.溫控模塊校準周期是（）A.每月B.每季度C.每半年D.每年8.屬于硬件故障的是（）A.數(shù)據(jù)格式錯誤B.激光溫度過高報警C.堿基識別率低D.文庫濃度不足9.芯片加載應避免（）A.輕拿輕放B.指紋污染C.快速插入D.確認方向10.測序儀不用于（）A.遺傳病診斷B.腫瘤檢測C.微生物鑒定D.藥物合成答案：1.A2.C3.A4.B5.C6.B7.C8.B9.C10.D三、多項選擇題（每題2分，共20分）1.測序儀日常維護包括（）A.光學鏡頭清潔B.溫控校準C.激光功率檢測D.廢液處理E.計算機殺毒2.測序數(shù)據(jù)質(zhì)量指標有（）A.Q20B.Q30C.測序深度D.覆蓋度E.樣本濃度3.常見報錯類型包括（）A.溫控異常B.激光功率不足C.芯片加載失敗D.數(shù)據(jù)存儲滿E.網(wǎng)絡中斷4.二代測序核心技術(shù)（）A.邊合成邊測序B.熒光標記C.激光激發(fā)D.毛細管電泳E.納米孔測序5.耗材存儲要求（）A.避光B.-20℃低溫C.密封D.遠離熱源E.常溫保存6.樣本制備注意事項（）A.避免核酸降解B.防交叉污染C.控制濃度D.去雜質(zhì)E.高溫滅菌7.定期更換的部件（）A.激光模塊B.廢液濾芯C.熒光微球D.芯片E.溫控傳感器8.需重新校準的情況（）A.換激光模塊后B.清潔光學系統(tǒng)后C.數(shù)據(jù)質(zhì)量下降D.換芯片后E.重啟儀器后9.測序工作流程（）A.樣本制備B.文庫構(gòu)建C.測序反應D.數(shù)據(jù)輸出E.報告生成10.安全操作要求（）A.戴防護手套B.防激光直射C.廢液滅活D.查電源E.高溫戴護目鏡答案：1.ABCD2.ABCD3.ABCDE4.ABC5.ACD6.ABCD7.AB8.ABC9.ABCDE10.ABCD四、判斷題（每題2分，共20分）1.激光模塊無需定期校準。（）2.Q30越高，數(shù)據(jù)質(zhì)量越好。（）3.測序芯片可重復使用。（）4.含核酸廢液可倒普通垃圾桶。（）5.溫控異常會降低測序質(zhì)量。（）6.用普通紙巾清潔光學鏡頭。（）7.接頭連接是文庫制備關(guān)鍵步驟。（）8.自檢通過即可直接測序。（）9.測序深度越高，靈敏度越高。（）10.納米孔測序儀屬于三代測序。（）答案：1.×2.√3.×4.×5.√6.×7.√8.×9.√10.√五、簡答題（每題5分，共20分）1.簡述測序儀光學系統(tǒng)日常維護要點。答案：①每周檢查鏡頭灰塵/指紋，用無水乙醇+無塵棉簽輕擦；②每月檢測激光功率，低于閾值則校準；③每季度清潔光學通道灰塵；④避免光學系統(tǒng)接觸液體/高濕度；⑤維護后校準熒光強度，確保數(shù)據(jù)準確。2.測序數(shù)據(jù)大量低質(zhì)量堿基（Q<20）的原因及排查步驟？答案：原因：激光功率不足、鏡頭污染、芯片污染、樣本濃度異常、溫控故障。排查：①查激光功率；②清潔鏡頭；③換芯片測試；④復測樣本濃度；⑤校準溫控，異常則聯(lián)系廠家。3.測序儀廢液處理規(guī)范流程？答案：①每日查液位（不超2/3）；②加次氯酸鈉滅活30分鐘；③倒入專用醫(yī)療廢液桶（標注“含核酸廢液”）；④密封后交資質(zhì)公司處理；⑤清潔收集瓶及接口，換濾芯。4.溫控模塊校準方法？答案：①關(guān)電源，打開模塊艙門；②放精度±0.1℃標準溫度計；③開機進校準模式，設(shè)25℃；④穩(wěn)定30分鐘，對比溫度計與儀器溫度；⑤偏差>±0.5℃則調(diào)校準參數(shù)，重復至符合要求。六、討論題（每題5分，共20分）1.如何有效預防測序儀芯片污染？答案：①操作前洗手戴無粉手套，避免指紋；②用專用工具加載芯片，不直接接觸表面；③樣本制備防氣溶膠污染（密閉離心管）；④工作區(qū)定期75%酒精消毒；⑤芯片存干燥避光密封盒。若污染，立即換芯片并清潔加載模塊，防交叉污染。2.測序儀長