(2025年)空氣、物表培養(yǎng)采集方法及注意事項(xiàng)測(cè)試題附答案一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共30分）1.采用自然沉降法進(jìn)行空氣微生物采樣時(shí)，II類環(huán)境（如普通手術(shù)室）的采樣高度應(yīng)控制在A.0.8-1.0米B.1.0-1.2米C.1.2-1.5米D.1.5-1.8米2.對(duì)面積為20㎡的新生兒病房進(jìn)行物表采樣時(shí)，若采用5cm×5cm模板，需至少選擇幾個(gè)采樣點(diǎn)？A.2個(gè)B.3個(gè)C.4個(gè)D.5個(gè)3.浮游菌采樣法中，采樣流量為100L/min的采樣器對(duì)III類環(huán)境（如普通門急診）采樣時(shí)，單次采樣時(shí)間應(yīng)不低于A.5分鐘B.10分鐘C.15分鐘D.20分鐘4.進(jìn)行物表采樣時(shí)，若被采表面曾使用含氯消毒劑消毒，棉拭子需浸潤的中和劑應(yīng)為A.0.1%蛋白胨水B.0.3%吐溫-80生理鹽水C.硫代硫酸鈉溶液D.卵磷脂吐溫-80中和液5.空氣采樣前，若環(huán)境為有人狀態(tài)，需關(guān)閉門窗的時(shí)間是A.10分鐘B.20分鐘C.30分鐘D.60分鐘6.物表采樣時(shí)，棉拭子涂抹的順序應(yīng)為A.由外到內(nèi)，單向涂抹B.由內(nèi)到外，環(huán)形涂抹C.隨機(jī)區(qū)域，重點(diǎn)覆蓋D.上下垂直，交叉涂抹7.采用沉降法采樣空氣時(shí)，培養(yǎng)皿暴露時(shí)間應(yīng)為A.5分鐘B.10分鐘C.15分鐘D.30分鐘8.對(duì)醫(yī)療設(shè)備表面（如監(jiān)護(hù)儀按鈕）采樣時(shí)，若表面不規(guī)則，應(yīng)優(yōu)先選擇的采樣方法是A.棉拭子直接涂抹法B.接觸碟壓印法C.沖洗液收集法D.擦拭洗脫法9.空氣采樣后，培養(yǎng)皿需在多長時(shí)間內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室？A.0.5小時(shí)B.1小時(shí)C.2小時(shí)D.4小時(shí)10.物表采樣時(shí)，若采樣面積為25cm2（5cm×5cm），棉拭子應(yīng)浸潤的液體量為A.0.5mlB.1mlC.2mlD.3ml11.判定II類環(huán)境空氣菌落總數(shù)合格的標(biāo)準(zhǔn)（沉降法）是A.≤2CFU/皿B.≤4CFU/皿C.≤6CFU/皿D.≤8CFU/皿12.浮游菌采樣法中，采樣器的采樣頭應(yīng)距離墻面的最小距離是A.0.1米B.0.2米C.0.3米D.0.5米13.物表采樣時(shí)，若被采表面有明顯污漬，正確的處理方式是A.直接采樣，記錄污漬情況B.用生理鹽水擦拭后采樣C.用75%酒精消毒后采樣D.更換采樣區(qū)域14.空氣采樣時(shí)，若環(huán)境溫度為28℃，相對(duì)濕度為75%，對(duì)結(jié)果的影響是A.無影響B(tài).可能導(dǎo)致菌落數(shù)偏低C.可能導(dǎo)致菌落數(shù)偏高D.需重新調(diào)整溫濕度后采樣15.物表采樣后，棉拭子需剪去手接觸部分，放入含中和液的試管中，試管需標(biāo)注的信息不包括A.采樣時(shí)間B.采樣者姓名C.被采物體名稱D.中和液濃度二、填空題（每空1分，共20分）1.空氣微生物采樣的兩種主要方法為__________和__________，其中__________更適用于潔凈度要求高的環(huán)境。2.物表采樣時(shí)，若被采表面≤100cm2，應(yīng)__________采樣；若＞100cm2，取__________的代表性區(qū)域采樣。3.自然沉降法布點(diǎn)原則：室內(nèi)面積≤30㎡時(shí)，設(shè)__________個(gè)采樣點(diǎn)（對(duì)角線內(nèi)中外三點(diǎn)）；＞30㎡時(shí)，設(shè)__________個(gè)采樣點(diǎn)（東、南、西、北、中五點(diǎn)）。4.浮游菌采樣法中，采樣器的高度應(yīng)與__________高度一致，通常為__________米。5.物表采樣使用的棉拭子需經(jīng)__________處理，采樣后需在__________小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)，若延遲需冷藏保存（__________℃），但不超過__________小時(shí)。6.空氣采樣前，環(huán)境若為無人狀態(tài)，需關(guān)閉門窗__________分鐘；若為有人狀態(tài)，需在__________操作30分鐘后采樣。7.判定物表菌落總數(shù)合格的標(biāo)準(zhǔn)：I類環(huán)境（如層流手術(shù)室）≤__________CFU/cm2，II類環(huán)境≤__________CFU/cm2，III類環(huán)境≤__________CFU/cm2。8.采樣過程中，操作人員需穿戴__________、__________和__________，避免自身微生物污染樣本。三、簡答題（每題8分，共40分）1.簡述自然沉降法空氣采樣的具體操作步驟。2.物表采樣時(shí)，如何選擇中和劑？請(qǐng)列舉3種常見消毒劑對(duì)應(yīng)的中和劑。3.空氣采樣后，若培養(yǎng)結(jié)果出現(xiàn)大量真菌菌落，可能的原因有哪些？4.簡述浮游菌采樣法與自然沉降法的主要區(qū)別及適用場(chǎng)景。5.物表采樣中，如何避免交叉污染？需采取哪些措施？四、案例分析題（每題15分，共30分）案例1：某醫(yī)院ICU病房采用自然沉降法進(jìn)行空氣采樣，共設(shè)置5個(gè)采樣點(diǎn)（面積40㎡），培養(yǎng)48小時(shí)后，其中2個(gè)培養(yǎng)皿菌落數(shù)分別為6CFU和7CFU，其余3個(gè)為2-3CFU。已知ICU屬于II類環(huán)境，判定該次采樣是否合格？并分析可能的操作失誤。案例2：某實(shí)驗(yàn)室對(duì)手術(shù)器械表面進(jìn)行采樣，使用棉拭子浸潤生理鹽水后涂抹25cm2區(qū)域，剪去手接觸部分放入含生理鹽水的試管中，震蕩洗脫后取1ml接種平皿，培養(yǎng)48小時(shí)后菌落數(shù)為15CFU。但根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)，手術(shù)器械屬于I類環(huán)境，合格標(biāo)準(zhǔn)為≤0.5CFU/cm2。請(qǐng)指出操作中的錯(cuò)誤，并計(jì)算實(shí)際菌落數(shù)是否合格。答案一、單項(xiàng)選擇題1.C2.B3.A4.C5.C6.B7.D8.B9.C10.B11.B12.C13.A14.C15.D二、填空題1.自然沉降法（沉降法）、浮游菌采樣法、浮游菌采樣法2.全部、100cm23.3、54.呼吸帶、1.2-1.55.高壓滅菌、2、2-8、246.10、人員7.0.25、5、108.無菌手套、口罩、帽子三、簡答題1.操作步驟：①采樣前關(guān)閉門窗30分鐘（無人狀態(tài)）或人員停止活動(dòng)30分鐘（有人狀態(tài)）；②根據(jù)房間面積布點(diǎn)（≤30㎡設(shè)3點(diǎn)，＞30㎡設(shè)5點(diǎn)），高度1.2-1.5米；③打開普通營養(yǎng)瓊脂平皿（直徑9cm），蓋扣于旁，暴露30分鐘；④蓋好平皿，及時(shí)送檢；⑤36±1℃培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。2.中和劑選擇依據(jù)：根據(jù)被采表面使用的消毒劑種類。常見對(duì)應(yīng)關(guān)系：①含氯/過氧化物消毒劑→硫代硫酸鈉溶液；②季銨鹽類消毒劑→吐溫-80+卵磷脂；③醛類消毒劑→甘氨酸溶液；④醇類消毒劑→吐溫-80。3.可能原因：①采樣環(huán)境濕度＞70%，利于真菌生長；②培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基被真菌污染（如未徹底滅菌）；③采樣后運(yùn)輸時(shí)間過長（＞2小時(shí)）且未冷藏，真菌大量繁殖；④環(huán)境中有發(fā)霉物品（如地毯、織物）未及時(shí)清理。4.主要區(qū)別：①原理：沉降法利用微生物自然沉降至平皿，浮游菌法通過采樣器主動(dòng)吸入空氣過濾；②準(zhǔn)確性：浮游菌法更精準(zhǔn)（可定量），沉降法受氣流影響大；③適用場(chǎng)景：浮游菌法用于潔凈手術(shù)室、層流病房等高精度環(huán)境；沉降法用于普通病房、門急診等常規(guī)監(jiān)測(cè)。5.避免交叉污染措施：①采樣前用75%酒精消毒采樣工具（如模板、鑷子）；②每采一個(gè)物體后更換棉拭子；③采樣順序從清潔區(qū)到污染區(qū)（如先采桌面，后采地面）；④操作人員避免手接觸棉拭子頭部；⑤采樣時(shí)平皿蓋避免長時(shí)間暴露，減少環(huán)境微生物落入。四、案例分析題案例1：判定：不合格（II類環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)≤4CFU/皿，2個(gè)培養(yǎng)皿分別為6和7CFU，超出標(biāo)準(zhǔn)）。可能操作失誤：①采樣前未關(guān)閉門窗30分鐘（人員活動(dòng)未停止）；②培養(yǎng)皿暴露時(shí)間不足（應(yīng)30分鐘，可能提前收回）；③采樣高度不符合（低于1.2米或高于1.5米，導(dǎo)致微生物沉降量異常）；④培養(yǎng)基配制錯(cuò)誤（營養(yǎng)不足或pH偏差）；⑤培養(yǎng)條件未達(dá)標(biāo)（溫度＜35℃或時(shí)間＜48小時(shí)）。案例2：操作錯(cuò)誤：①手術(shù)器械屬于I類環(huán)境，應(yīng)使用含中和劑的洗脫液（生理鹽水無法中和可能殘留的消毒劑，導(dǎo)致部分細(xì)菌被抑制，結(jié)