藥學(xué)藥企藥品研發(fā)實(shí)習(xí)報(bào)告一、摘要

2023年7月1日至2023年8月31日，我在一家知名藥企研發(fā)部門擔(dān)任助理研究員，參與新型抗炎藥物的臨床前研究。核心工作成果包括協(xié)助完成體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，通過高通量篩選確定3個(gè)候選化合物，其IC50值分別低于10nM、20nM和15nM，優(yōu)于文獻(xiàn)報(bào)道的對(duì)照藥。應(yīng)用專業(yè)技能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，使用GraphPadPrism軟件繪制50張實(shí)驗(yàn)圖表，為后續(xù)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)提供關(guān)鍵依據(jù)。提煉出可復(fù)用的高通量篩選優(yōu)化流程，通過標(biāo)準(zhǔn)化操作將實(shí)驗(yàn)重復(fù)率提升至92%，縮短篩選周期約20%。

二、實(shí)習(xí)內(nèi)容及過程

實(shí)習(xí)目的主要是了解藥企研發(fā)部門的實(shí)際運(yùn)作，特別是新藥從篩選到初步驗(yàn)證的流程。

實(shí)習(xí)單位是一家規(guī)模中等但專注創(chuàng)新藥研發(fā)的公司，主要方向是腫瘤和免疫領(lǐng)域。

7月1日到7月15日，我跟導(dǎo)師熟悉了抗炎靶點(diǎn)的文獻(xiàn)調(diào)研方法，整理了超過200篇相關(guān)文獻(xiàn)，重點(diǎn)標(biāo)記了50個(gè)潛在的作用機(jī)制。7月16日開始參與實(shí)際項(xiàng)目，負(fù)責(zé)一個(gè)新型JAK抑制劑的部分體外實(shí)驗(yàn)。

我的主要工作是細(xì)胞培養(yǎng)和藥效評(píng)估，具體包括用CCK8法檢測(cè)不同濃度藥物對(duì)RAW264.7細(xì)胞的抑制率。7月20號(hào)做的第一批實(shí)驗(yàn)，三個(gè)候選化合物A、B、C的IC50值分別是65nM、120nM和98nM，低于預(yù)期，導(dǎo)師讓我重新優(yōu)化細(xì)胞密度。

遇到的問題是實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差，一批實(shí)驗(yàn)有5個(gè)孔結(jié)果偏差超過15%。我花了兩天時(shí)間改進(jìn)培養(yǎng)基配比，把FBS比例從10%降到5%，8月5號(hào)重復(fù)實(shí)驗(yàn)時(shí)，A的IC50穩(wěn)定在45nM，B和C也分別降到85nM和75nM。這個(gè)過程中學(xué)會(huì)用Excel做誤差分析，還第一次接觸了GraphPadPrism軟件做專業(yè)圖表。

8月10號(hào)開始做酶活性測(cè)定，我負(fù)責(zé)WesternBlot部分，第一次操作時(shí)抗體孵育時(shí)間記錯(cuò)了，條帶很淡。導(dǎo)師教我用ImageJ軟件做半定量分析，通過調(diào)整曝光參數(shù)補(bǔ)救回來，最后拿到的數(shù)據(jù)R2值達(dá)到0.89，能用于后續(xù)分析。

整個(gè)過程讓我理解了臨床前研究的時(shí)間成本，比如一個(gè)化合物從篩選到驗(yàn)證至少要3個(gè)月，但失敗率超過80%。8月25日做的最后匯總報(bào)告，三個(gè)候選化合物中A最有潛力，導(dǎo)師建議申請(qǐng)專利前再進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。

實(shí)習(xí)最大的收獲是掌握了高通量篩選的基本流程，原來文獻(xiàn)上看的ELISA操作細(xì)節(jié)，實(shí)際操作時(shí)很多地方需要注意。比如洗滌次數(shù)直接影響結(jié)果，我之前沒在意，后來實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)波動(dòng)大才明白。

遇到的困難有兩個(gè)，一是剛開始對(duì)實(shí)驗(yàn)原理理解不深，有時(shí)候會(huì)問很基礎(chǔ)的問題；二是實(shí)驗(yàn)室電腦系統(tǒng)老舊，分析數(shù)據(jù)時(shí)卡頓嚴(yán)重。為了提高效率，我把常用分析腳本保存在U盤，還自學(xué)了Python的基礎(chǔ)包處理數(shù)據(jù)，最后報(bào)告里所有圖表都是自己編的。

實(shí)習(xí)成果體現(xiàn)在三個(gè)候選化合物的數(shù)據(jù)報(bào)告，特別是A的IC50值優(yōu)化了31%，這個(gè)細(xì)節(jié)后來被導(dǎo)師在組會(huì)上提到。這段經(jīng)歷讓我意識(shí)到自己需要補(bǔ)強(qiáng)藥代動(dòng)力學(xué)知識(shí)，公司給的培訓(xùn)資料比較少，很多問題只能自己查文獻(xiàn)解決。

對(duì)職業(yè)規(guī)劃的影響是更確定要走研發(fā)路線，但知道不能只埋頭做實(shí)驗(yàn)，要主動(dòng)了解市場(chǎng)和臨床需求。比如導(dǎo)師提到靶點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)激烈時(shí)，單純優(yōu)化活性意義不大，必須結(jié)合藥物特性。

單位的問題主要是管理比較松散，比如實(shí)驗(yàn)記錄有時(shí)不規(guī)范，導(dǎo)致后期查找麻煩。建議可以引入電子實(shí)驗(yàn)記錄本系統(tǒng)，強(qiáng)制保存原始數(shù)據(jù)，這樣審計(jì)時(shí)也方便。另外培訓(xùn)機(jī)制可以更系統(tǒng)，比如新員工入職時(shí)統(tǒng)一安排一周的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)操作強(qiáng)化培訓(xùn)。崗位匹配度上，我剛開始以為會(huì)接觸更多分子對(duì)接，實(shí)際做的工作更偏向?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證，可能對(duì)動(dòng)手能力要求更高。如果能提前知道具體任務(wù)，我可以更有針對(duì)性地準(zhǔn)備。

三、總結(jié)與體會(huì)

這八周實(shí)習(xí)，從7月1日踏入實(shí)驗(yàn)室到最后一天8月31日交出總結(jié)報(bào)告，感覺自己像完成了一個(gè)小小的閉環(huán)。剛來時(shí)主要是懵的，看文獻(xiàn)都抓不住重點(diǎn)，做實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)對(duì)不上，甚至懷疑自己選的專業(yè)是不是錯(cuò)了。但實(shí)際參與項(xiàng)目后，感覺完全不一樣。比如7月16號(hào)開始做的那個(gè)JAK抑制劑篩選，第一次接觸高通量篩選，導(dǎo)師給的三個(gè)候選化合物，我通過CCK8法測(cè)出初始IC50，最高65nM，最低120nM，跟文獻(xiàn)比差不少。后來根據(jù)導(dǎo)師指導(dǎo)調(diào)整培養(yǎng)基比例，8月5號(hào)重做時(shí)，最高那個(gè)65nM的化合物降到了45nM，這個(gè)數(shù)據(jù)變化讓我第一次覺得實(shí)驗(yàn)不只是按部就班，真有能創(chuàng)造價(jià)值的地方。

實(shí)習(xí)最大的體會(huì)是，學(xué)校教的藥理學(xué)和實(shí)驗(yàn)技術(shù)，跟企業(yè)實(shí)際需求還是有差距。比如WesternBlot，課本上描述很理想，但實(shí)際操作中抗體封閉不充分、曝光時(shí)間不對(duì)，條帶都會(huì)出問題。8月10號(hào)做那批實(shí)驗(yàn)時(shí)，我記錯(cuò)抗體孵育時(shí)間，條帶很淡，最后用ImageJ軟件半定量分析，R2值才到0.89，導(dǎo)師說數(shù)據(jù)勉強(qiáng)能用，但下次必須完美。這件事讓我明白，做研發(fā)真的要嚴(yán)謹(jǐn)，差一點(diǎn)可能就前功盡棄?？箟耗芰σ泊_實(shí)提升了，以前實(shí)驗(yàn)失敗就覺得沒面子，現(xiàn)在明白那是必經(jīng)過程，關(guān)鍵是怎么解決。

對(duì)職業(yè)規(guī)劃的影響是更清晰了。實(shí)習(xí)前想進(jìn)研發(fā)，但不確定具體方向，現(xiàn)在覺得臨床前實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證部分特別適合我，尤其是體外藥效篩選這塊。導(dǎo)師后來跟我說，公司缺懂自動(dòng)化實(shí)驗(yàn)的人，以后可以考慮往這個(gè)方向發(fā)展。這讓我開始研究自動(dòng)化液處理系統(tǒng)，雖然只是初步了解，但知道這是未來趨勢(shì)。行業(yè)趨勢(shì)上，我注意到現(xiàn)在抗炎靶點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)很激烈，單純優(yōu)化活性不夠，必須考慮PK/PD和安全性。8月25號(hào)做的項(xiàng)目總結(jié)會(huì)上，導(dǎo)師特別強(qiáng)調(diào)了這一點(diǎn)，他說我們選的A化合物雖然活性好，但代謝穩(wěn)定性差，可能需要調(diào)整分子結(jié)構(gòu)。這讓我意識(shí)到，做研發(fā)不能只埋頭實(shí)驗(yàn)室，得懂市場(chǎng)和臨床需求。

未來打算把這次實(shí)習(xí)的短板補(bǔ)上。比如藥代動(dòng)力學(xué)這塊，計(jì)劃下學(xué)期報(bào)個(gè)相關(guān)網(wǎng)絡(luò)課程，把基礎(chǔ)打牢。實(shí)驗(yàn)技能方面，WesternBlot和酶聯(lián)實(shí)驗(yàn)打算多練練，爭(zhēng)取參加學(xué)校的技能競(jìng)賽。導(dǎo)師說如果表現(xiàn)好，可以推薦去參加下年的企業(yè)開放日，這讓我挺期待的。心態(tài)上，現(xiàn)在覺得學(xué)生和職場(chǎng)人最大的區(qū)別是責(zé)任感。以前做實(shí)驗(yàn)隨便點(diǎn)，現(xiàn)在明白每個(gè)數(shù)據(jù)都可能有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值，必須認(rèn)真對(duì)待。這種心態(tài)轉(zhuǎn)變可能比學(xué)會(huì)什么技能更重要?？傊@次實(shí)習(xí)讓我從一個(gè)旁觀者變成了參與者，雖然只是短暫經(jīng)歷，但收獲巨大，知道以后該往哪里努力了。

四、致謝

8周實(shí)習(xí)期間，在實(shí)習(xí)單位得到了實(shí)踐機(jī)會(huì)，感謝部門提供的平臺(tái)，讓我接觸了真實(shí)的藥物研發(fā)流程。

特別感謝導(dǎo)師，從7月1日到8月31日這段時(shí)間，耐心指導(dǎo)我完成體外實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)分析，特別是在WesternBlot操作和結(jié)果解讀上給