1、.各系細胞正?？乖只?guī)律和散布圖“正常細胞分化規(guī)律”之一：中性粒細胞多能干細胞和粒單一祖先細胞均高表達CD34，但隨著分化迅速下降，與HLA-DR一起進入早期幼球階段后消失。CD117比CD34表達稍慢，從較晚期的原始粒細胞到早期粒細胞都表達，完全消失到中粒階段。 正常早幼粒細胞的表型CD34 hladrcd 117殘留于急性早幼粒細胞白血病中，是這種白血病的特征之一。CD33、CD13的表達從原始粒細胞開始，CD13、CD33的表達強度逐漸提高，到早幼粒階段，CD33變得最強，CD33的強度逐漸降低，但仍為陽性，CD13一直變高，因此CD33/CD13散布圖是CD15 (最早出現(xiàn)在早幼粒末

2、期)，CD11b主要從幼粒階段出現(xiàn)。 CD16、CD10晚幼粒、棒開始逐步表達。因此，成熟的中性粒細胞表型為CD45、CD13、CD33、CD11b、CD15、CD16CD64出現(xiàn)在早幼粒期末期，在中幼粒期末期消失，但膿毒血癥時，成熟好中球被活化再次表達CD64，強度高。 中性粒細胞是外周血中最常見的細胞，也是固有免疫系統(tǒng)最主要的組成部分，是抵抗急性炎癥(如細菌感染)、損傷、某些癌癥的一線衛(wèi)士。 下圖是中性粒細胞的表面標記，所有標記的詳細情況可以在本站的CD分子數(shù)據(jù)庫中檢索。如果不能馬上記住以上抗原的表現(xiàn)，就記住下圖，很容易理解。粒系抗原分化正常規(guī)則，原始粒細胞早期粒細胞中粒細胞晚粒細胞棒狀粒

3、細胞分葉粒細胞。粒系各階段的抗原表達軌跡，必須記住這些軌跡，有助于用MDS判斷粒細胞分化異?！罢＜毎只?guī)律”之三：嗜酸性球和嗜堿性球嗜酸性粒細胞盡管嗜酸性粒細胞在正常骨髓中所占的比例很低，但是他們的比例越高，就需要注意不要把它們的錯誤看作異常的嗜酸性粒細胞。嗜酸性粒細胞是一個小小的粒細胞群，對抗寄生蟲和病毒的固有免疫反應(yīng)起作用，也與過敏和哮喘的發(fā)生有關(guān)。 和其他粒細胞一樣，通過脫顆粒釋放炎癥介質(zhì)(活性氧、脂質(zhì)介質(zhì)、細胞因子、生長因子等)。下圖是嗜酸性粒細胞的表面標記，所有標記的詳細情況可以在本站的CD分子數(shù)據(jù)庫中檢索。嗜酸性粒細胞增多的情況主要如下1、腫瘤性疾病，主要有慢性骨髓白血病(CM

4、L )等。2、反應(yīng)性，主要有過敏、炎癥、血管炎等。在FSC/SSC散點圖中，嗜酸性粒細胞因顆粒多而SSC高，但FSC比嗜酸性粒細胞稍小，CD45比嗜酸性粒細胞稍高，表達CD13、CD11b、CD66和CD16dim。請參照下圖嗜堿性球嗜堿性細胞是粒細胞中非常稀釋的一組，細胞內(nèi)有含有組織胺、蛋白質(zhì)組學(xué)、脂質(zhì)介質(zhì)和細胞因子的大顆粒。 這些粒子一受到IgE和其他刺激就會釋放出內(nèi)容物，參與殺傷寄生蟲和過敏的反應(yīng)。嗜堿性球也在正常骨髓中所占的比例較低，但在CML和一些AML中變高。 下圖為嗜堿性細胞的表面和細胞內(nèi)、核內(nèi)標記，所有標記的詳細內(nèi)容都可以通過本站的CD分子數(shù)據(jù)庫進行檢索。嗜堿性球的SSC比其他

5、球低，因此在CD45/SSC散布圖中位于淋巴球和單球之下，容易與淋巴球和單球混淆。嗜堿性細胞表達CD45mod、CD13、CD33、CD38，特別是表達CD123、CD25dim、CD9、CD22，但不表達其他b細胞相關(guān)標記。 嗜堿性細胞白血病時，表現(xiàn)出異常的表型。以下是CML患者的一個例子，紅色是CML的嗜中性粒細胞，綠色是嗜堿性細胞“正常細胞分化規(guī)律”之四：單核細胞單核細胞剛開始分化，雖然不能與非常早期的原始單核細胞CD34 CD117、正常的原始細胞區(qū)分開來，但隨著原始單核細胞向幼稚單核細胞階段分化，CD34和CD117就消失了。HLA-DR在單核細胞分化的各個階段表達，這一點與粒細胞分

6、化不同。單核細胞從幼稚單核細胞階段開始表達CD4，到正常單核細胞為止不表達CD64的CD64、CD33、CD13也在幼稚單核細胞階段開始表達，其中CD33幼稚單核早期就高表達。CD14在成熟的單核細胞中表現(xiàn)高表達。因此，通過與CD4、CD64、CD14結(jié)合，能夠有效地區(qū)分成熟的單核細胞。 CD14雖然是單核細胞特異性標志，但CD4、CD64也能在其他細胞中表達(如CD4在t細胞中表達，CD64能在原始粒細胞、樹突狀細胞、活化嗜中性粒細胞中表達)。CD15既能在中性粒細胞中表達，也能在單核細胞中表達。在正常骨髓中，單核細胞一般占18%，大多數(shù)情況下，單核細胞會引起反應(yīng)性增殖和腫瘤性增殖。單核細胞

7、各階段的抗原分化規(guī)律總結(jié)如下圖單核系各抗原正常分化規(guī)律，原始單核細胞幼稚單核細胞成熟單核細胞：單核細胞各階段抗原表達軌跡有助于判斷幼稚單核細胞是否異?！罢＜毎只?guī)律”的7:t細胞的分化t細胞的分化過程主要在胸腺。 與b細胞相似，t細胞的不同分化階段也與不同分化階段的t細胞相對應(yīng)。圖中，t細胞來源于骨髓中的共同淋巴前體細胞，其后分化的主要過程在胸腺中進行(約3周左右的時間): 最初的前體t細胞為三陰性(CD3、CD4、CD8共陰性)，但表達CD34、核TdT，高表達CD7。皮質(zhì)胸腺細胞的CD34丟失，開始表達CD1a，成為雙陽性(CD4，CD8 )T細胞，開始表達表面CD3。t細胞的最終階段

8、以胸腺髓質(zhì)進行，主要進行CD4和CD8的選擇，分化成CD4單陽性的輔助t細胞和CD8單陽性的細胞毒/抑制性t細胞。95%的t細胞表達TCR alpha/beta，剩馀的t細胞表達TCR gamma/delta，這兩種細胞從胸腺中發(fā)育初期開始區(qū)分來源，最后在組織分布、功能及免疫功能上的作用不同。 這兩者發(fā)生限制性表達，提示t細胞可能顯示腫瘤性增殖。最后介紹Treg，這種細胞表達轉(zhuǎn)錄因子FoxP3，表達CD4、CD25，對調(diào)節(jié)機體免疫反應(yīng)非常重要。t細胞抗原分化規(guī)律，前4階段位于胸腺，最后階段位于骨髓和外周血t細胞各階段抗原分化軌跡：正常細胞分化規(guī)律的5:b淋巴細胞的分化規(guī)律早期b細胞由骨髓生成，

9、開始4階段分化，最終分化成熟后進入淋巴系統(tǒng)。 這里只是暫時談?wù)勊麄冊诠撬柚械姆只?。最初的b細胞表型不表達CD34、TdT、CD10 bright、CD19 dim、CD22 dim、CD79b、CD20-，細胞內(nèi)和細胞膜的免疫球蛋白。 此后，隨著分化成熟，CD22、CD20逐漸增強，原始和幼稚標記CD34、TdT、CD10逐漸消失，表面免疫球蛋白(包括重鏈和輕鏈)的表達開始。骨髓中各成熟階段細胞比例的變異很大。 在正常兒童中，b前體細胞占所有單核細胞的40%。 化療后骨髓恢復(fù)后，會出現(xiàn)大量的b前體細胞，甚至最初的b細胞。 與孩子相反，隨著年齡的增長，老年人的b前體細胞減少。如何判斷正常的早期b

10、細胞還是異常的原始幼稚b細胞？ 重要的概念是，正常的b細胞分化出現(xiàn)幾個成熟抗原的階段性上升和原始標記的階段性下降，是規(guī)律的曲線，而異常的原始幼稚的b細胞脫離該曲線，發(fā)生突然的抗原喪失或獲得，還可能發(fā)生交叉抗原的表達。下圖為b細胞在骨髓中分化成熟過程，可供參考。b細胞中常見的標記是什么？ 正常表達的細胞是什么？b細胞疾病診斷中常用的標記有以下幾種。 以下是這些標記的正常表達階段和細胞的種類在CD19前體細胞成熟b細胞階段表達，在全過程中表達。CD20 :前b細胞成熟b細胞的階段。在CD79b前體細胞成熟b細胞階段表達，在全過程中表達。在CD22前體細胞成熟b細胞階段表達，在全過程中表達。激活CD

11、38細胞、漿細胞、t和NK細胞。cd23 :表達IgM或IgD的活化成熟b細胞。CD5 :少量正常b細胞，t細胞。FMC7:成熟b細胞。CD10 :前b淋巴細胞和生發(fā)中心b細胞。HLA-DR :正常b細胞，活化t細胞。Kappa :正常成熟的b細胞在多克隆中表達。Lambda :正常成熟的b細胞在多克隆中表達。CD11c :粒細胞、巨噬細胞、NK細胞、樹突狀細胞。CD103 :上皮內(nèi)t細胞。激活CD25和t細胞、巨噬細胞。CD123 :漿樣單核細胞。b為正?？乖只?guī)律，前三階段位于骨髓，最后四階段位于淋巴結(jié)b是骨髓中三個階段(早期b、中期b、晚期b )在散點圖上的分化軌跡正常細胞分化規(guī)律的6

12、:b細胞分化和淋巴瘤這張圖非常重要。 有助于理解這十幾個b細胞淋巴瘤。 這張圖有四個意思，并且根據(jù)這張圖來說明兩個問題。級別1的意思：幼稚的b細胞最初在骨髓中，最初是干細胞，接著分化成b細胞，是前驅(qū)性的b細胞，這個細胞有中等大小的核。如果這個細胞分化成熟，如淋巴結(jié)和扁桃體等，以淋巴結(jié)為例，如果這個大的橢圓形是淋巴結(jié)的話，正好成熟的淋巴細胞就是B1細胞，我們也稱為“童貞”細胞，是不受到抗原刺激的細胞，那是最小的淋巴細胞，淋巴結(jié)皮質(zhì)但是被外來抗原刺激后，B1細胞開始分化，有兩種方法一種以上，很快變成大細胞，變成活化的淋巴樣母細胞和免疫母細胞，免疫母細胞也是實際上活化的淋巴樣母細胞，但形態(tài)比較獨特，

13、有中位的核，細胞質(zhì)比較豐富。 另外，被激活的淋巴樣母細胞也是一個大細胞，有多個核，在細胞核旁，該細胞在分裂狀態(tài)下很活躍，如果這些細胞進一步分化，如漿母細胞，再分化成漿樣細胞、漿細胞，最后變成漿細胞，漿母細胞、漿樣細胞處于b細胞分化的最后階段。 最后的細胞，執(zhí)行功能的細胞，產(chǎn)生抗體的細胞。 因此，漿細胞是b細胞的最后階段。 這是最初分化的過程。B1細胞受到抗原刺激，第二個分化途徑是細胞變大成濾胞母細胞，再分化，很快！ 濾胞母細胞在短時間內(nèi)，很快分化成中心母細胞，中心母細胞進一步分化成熟成為中心細胞，從中心母細胞的大細胞變成中等大小的細胞、核不規(guī)則細胞。 因為這個細胞相當(dāng)于大細胞像能脫水、萎縮、皺

14、紋縮小，所以那個核不規(guī)則我們看到了中等大小，不規(guī)則的細胞是中心細胞。 如果有中心母細胞和中心細胞，原來的一次濾胞就有生發(fā)中心，生發(fā)中心的濾胞被稱為二次濾胞。 如果中心細胞與抗原信息一致(通過樹突細胞向中心細胞傳遞抗原信息)，中心細胞就會進一步分化、成熟，如果中心細胞與抗原不一致，中心細胞就會凋亡。 所以，在生發(fā)中心可以看到很多組織細胞吞噬很多核碎片，這些核碎片是凋亡的中心細胞。 如果中心細胞成熟，離開的話，它就會變成邊緣帶細胞，進一步成熟后，變成B2細胞。B2細胞是我們所說的記憶細胞，受到抗原刺激后，最后免疫反應(yīng)會留下一部分細胞，作為記憶細胞，在第二次受到抗原刺激時，能夠迅速反應(yīng)的B2細胞。

15、B2細胞和邊緣帶細胞進一步分化成熟成為漿細胞。 此時的漿細胞也和剛才一樣，產(chǎn)生抗體。 但是，在這兩種途徑分化的漿細胞所產(chǎn)生的抗體是從不同的上面的途徑分化的漿細胞所產(chǎn)生的非特異性抗體，是從下面的途徑通過生發(fā)中心產(chǎn)生的特異性抗體。 所以，如果我們假設(shè)，在上分化過程中漿細胞產(chǎn)生的是子彈，通過下生發(fā)中心產(chǎn)生的抗體是導(dǎo)彈，對抗原專門反應(yīng)，生發(fā)過程中實際上是導(dǎo)彈的加工廠。 現(xiàn)在，為什么生發(fā)中心能制造導(dǎo)彈，是因為生發(fā)中心的細胞經(jīng)過基因重組，經(jīng)過自己的突變，經(jīng)過自然選擇，自然選擇的中心細胞符合抗原，所以才離開，沒有選擇的中心細胞，自己凋亡。 因此，選擇的這些是能應(yīng)對抗原的細胞，它產(chǎn)生的抗體是特異性抗體。 這是

16、第一層的意思。 是這張圖的直接意思。第2層的意思：我們現(xiàn)在知道淋巴瘤的發(fā)生和其他腫瘤的發(fā)生不同。 因為其他腫瘤的發(fā)生多是從干細胞開始的，所以一種方法是“因為不知道它來自哪里，所以是從干細胞來的，但是淋巴瘤不是這樣，淋巴瘤的發(fā)生是在正常淋巴細胞分化的某個階段發(fā)生問題，那就是淋巴瘤。 例如，骨髓中的這些細胞：干細胞、前b細胞、前體b細胞，如果這些細胞出現(xiàn)問題而形成淋巴瘤的話，就被稱為急性淋巴細胞性白血病和前體淋巴母細胞淋巴瘤。如果B1細胞有問題，一種是細胞淋巴瘤，二種是小淋巴細胞淋巴瘤/慢性淋巴細胞白血病。處于生發(fā)中心的這些細胞出現(xiàn)問題時，有四個成為淋巴瘤。 一種是濾泡性淋巴瘤，該細胞成分由中心母細胞和中心細胞組成，形態(tài)學(xué)上像濾泡一樣，結(jié)節(jié)、結(jié)節(jié)、原濾泡形態(tài)殘留的第二種是濾泡母細胞產(chǎn)生的淋巴瘤，第三種是中心母細胞產(chǎn)生的淋巴瘤-彌漫性大b細胞淋巴瘤； 另一個淋巴瘤，被認為是來自生發(fā)中心的霍奇金淋巴瘤，被認為是來自生發(fā)中心細胞的淋巴瘤，或被認為是來自生發(fā)中心細胞的淋巴瘤，現(xiàn)在從遺傳學(xué)上看，有基因的重新排列，經(jīng)過了自身突變我們認為生發(fā)中心的細胞能形成四個淋巴瘤。中心細胞出來后，成為邊緣帶的是邊緣帶的淋巴瘤，分類