1、摘 要存放過(guò)程中，由于膠塞中的水分有可能會(huì)轉(zhuǎn)移到冷凍干燥制品中，從而膠塞的水分會(huì)對(duì)冷凍干燥制品的水分含量造成影響。膠塞中釋放的水分可能會(huì)對(duì)冷凍干燥制品的質(zhì)量造成不良影響。本研究的目的是評(píng)估處理過(guò)程和存放條件對(duì)膠塞水分含量的影響。膠塞在使用前，會(huì)進(jìn)行清洗和滅菌。這些處理過(guò)程，尤其是滅菌處理會(huì)增加膠塞的水分含量，增加的幅度與膠塞的材質(zhì)有密切關(guān)系。對(duì)于易吸潮類冷凍干燥制品而言，在存放過(guò)程中，這些被吸收的水分會(huì)從膠塞中釋放出來(lái)然后轉(zhuǎn)移至產(chǎn)品中。因此，需要一個(gè)合適的干燥過(guò)程來(lái)將膠塞的水分干燥至可以接受的水平。膠塞水分研究的內(nèi)容包括膠塞的材質(zhì)，滅菌溫度和時(shí)間，干燥溫度和時(shí)間，存放的包裝和條件，冷凍干燥對(duì)膠

2、塞水分含量的影響以及水分從膠塞中轉(zhuǎn)移至乳糖模型冷凍干燥品。結(jié)果證明膠塞在滅菌過(guò)程中會(huì)吸收大量的水分。為了得到水分較低的膠塞，需要在105C條件下干燥至少4小時(shí)。干燥結(jié)束后，在室溫存放條件下，膠塞的水分會(huì)迅速重新平衡。膠塞中的水分在冷凍干燥過(guò)程不會(huì)解吸附出來(lái)。在進(jìn)行水分含量對(duì)冷凍干燥制品穩(wěn)定性影響的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估時(shí)，制品性質(zhì)和灌裝量都是很重要的因素。對(duì)于易吸潮的制品，尤其是低灌裝量或小規(guī)格的制品，膠塞水分含量的控制尤其重要。最后，膠塞中的水分轉(zhuǎn)移至冷凍干燥制品的多少取決于初始膠塞的水分含量。為了減少水分帶來(lái)的穩(wěn)定性問(wèn)題，有必要選擇合適的膠塞以及對(duì)膠塞進(jìn)行合適的處理和保存。關(guān)鍵詞：膠塞，處理過(guò)程，冷凍干

3、燥制品，乳糖，水分含量The Conditions of Stopper Processing Can Implicate the Water Content of Hygroscopic Lyophilized Products: A study with Lactose Stopper moisture content can have a significant impact on the water content of lyophilized drug products due to the potential of moisture transfer from stopper to

4、 product during storage. Moisture released from rubber stoppers may adversely affect the quality of lyophilized product during storage.The purpose of this study was to evaluate the effect of processing and storage condition on the moisture content of rubber stopper. Prior to its application, a rubbe

5、r stopper is washed and steam sterilized. These processes, especially the process of steam sterilization, increase the moisture content of the rubber stopper and the moisture uptake can vary greatly depending on the rubber formulation. A sufficient drying cycle is needed to dry stoppers to an accept

6、able moisture level.The stopper moisture studies included the effect of rubber formulation，steam sterilization time, drying time and temperature, storage method and conditions, lyophilization and moisture transfer from stopper to a modellyophile of lactose. Results indicated that stoppers absorbed s

7、ignificant amount of moisture during sterilization. To achieve final moisture content at a lower level，stoppers required at least 4 h of drying at 105. After drying, stopper moisture levels equilibrated rapidly to ambient storage conditions. There was no moisture desorption of the rubber stopper dur

8、ing the lyophilisation process. Both lyophilized formulation and product fill mass are important factors in assessing the overall risk of elevated moisture content on product stability. Stopper moisturecontrol will be of greater importance when dealing with hygroscopic products, especially in low fi

9、ll mass dosage presentations. Finally, moisture transfer from stopper to lyophilized product is dependent on the initial stopper water content. To minimize the risk of moisture- related stability problems, the choice of an appropriatestopper, processing parameters, and storage conditions prior to us

10、e are essential.Key words: stopper, processing, lyophilized products,lactose, moisture content目 錄摘 要I目 錄IV第1章緒論11引言12研究方案22.1模型藥物的選擇22.2膠塞的處理過(guò)程對(duì)膠塞殘留水分的影響22.3膠塞中的水分對(duì)凍干乳糖水分的影響3第2章膠塞處理過(guò)程對(duì)膠塞殘留水分的影響51物料與儀器51.1物料51.2儀器62膠塞水分含量測(cè)定方法63清洗和蒸汽滅菌對(duì)膠塞的殘留水分影響84干燥過(guò)程對(duì)膠塞的殘留水分影響95存放包裝條件對(duì)膠塞的殘留水分影響126冷凍干燥對(duì)膠塞水分的影響14第3章膠塞中

11、的水分對(duì)凍干乳糖水分的影響171物料與儀器171.1物料171.2包裝材料171.3儀器172乳糖水分含量測(cè)定方法183容器密封完整性184膠塞的干燥方式對(duì)乳糖水分含量的影響185對(duì)不同裝量的乳糖凍干品水分的影響206不同尺寸的膠塞對(duì)乳糖凍干品水分含量的影響227針對(duì)注射用拉氧頭孢鈉制定合適的膠塞處理方式25討論28結(jié)論31參考文獻(xiàn)32致 謝34第1章 緒論1 引言由于一些藥物在水溶液中不穩(wěn)定，所以會(huì)將其進(jìn)行冷凍干燥處理，以保證其在更長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)穩(wěn)定。凍干制品通常存放于小瓶里，使用前用合適的溶劑將其溶解。凍干制品通常都很容易吸濕，因此需要進(jìn)行一定的保護(hù)，以避免其水分含量的增長(zhǎng)。膠塞被廣泛的用于冷

12、凍干燥制品，因?yàn)樗梢蕴峁┮粋€(gè)有效的屏障，以避免水分和氧含量的增加。然而，膠塞在進(jìn)行蒸汽滅菌時(shí)會(huì)吸收水分，這些水分也能轉(zhuǎn)移至凍干品，導(dǎo)致凍干品穩(wěn)定性的問(wèn)題1。我們?cè)谶M(jìn)行注射用拉氧頭孢鈉的研究中就遇到了這樣的問(wèn)題。根據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 J藥物引濕性實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)原則的要求，拉氧頭孢鈉在溫度為251，相對(duì)濕度為80%2%的條件下存放24小時(shí)后，由于吸收的足量的水分而形成液體，發(fā)生潮解。當(dāng)拉氧頭孢鈉的水分含量超過(guò)1.0%（w/w）后，會(huì)導(dǎo)致其穩(wěn)定性下降，雜質(zhì)含量明顯增加。所以，在制備該品種時(shí)采用了冷凍干燥的工藝，以控制其初始水分含量不超過(guò)0.5%。為了研究其在穩(wěn)定性留樣期間的水分含量的情況，我

13、們制備了規(guī)格為0.25g的樣品，并在溫度為402C，相對(duì)濕度為755%的條件下存放，分別在第0個(gè)月，第1個(gè)月，第2個(gè)月，第3個(gè)月和第6個(gè)月取樣檢測(cè)樣品的水分含量，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的樣品均取3個(gè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，以其平均值作為報(bào)告值，結(jié)果見(jiàn)下圖1:圖1注射用拉氧頭孢鈉在402C-755%條件下存放過(guò)程中水分含量測(cè)定由上圖可知，樣品的水分含量隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。在前兩個(gè)月里水分迅速增加，然后趨于平緩，達(dá)到一個(gè)平臺(tái)。樣品在上述條件下存放3個(gè)月過(guò)后，水分含量超過(guò)要求的1.0%。樣品的顏色由白色變?yōu)槲ⅫS色，澄清度大于1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液，不符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求。在第6個(gè)月時(shí)取樣測(cè)得樣品總的雜質(zhì)含量與0月相比增加了約2倍

14、，不符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求。因此，由于水分含量的增加，導(dǎo)致樣品質(zhì)量下降，不能保證本品的安全性和有效性。為了解決這個(gè)問(wèn)題，很有必要去研究樣品水分增加的原因是否是因?yàn)槟z塞，膠塞對(duì)樣品的水分影響程度是怎樣的，應(yīng)怎樣將其影響降低到最小的程度。2 研究方案膠塞的處理過(guò)程對(duì)易吸潮類凍干品水分的影響，實(shí)則是膠塞的處理過(guò)程會(huì)使膠塞中殘留水分含量的不同，膠塞中的水分越多，遷移至凍干品的水分也就可能越多。所以，在我們的研究中綜合研究了膠塞處理過(guò)程對(duì)本公司常用的3個(gè)廠家生產(chǎn)的膠塞的水分的影響，并選用了模型藥物以分析膠塞中的殘留水分對(duì)凍干品水分含量的影響的程度。2.1 模型藥物的選擇乳糖常用于冷凍干燥制品。乳糖包括-乳糖

15、和-乳糖，其最穩(wěn)定的形式為-乳糖一水合物，其在空氣中穩(wěn)定，吸水性在室溫不受濕氣的影響。但將其冷凍干燥后，可能會(huì)形成-乳糖無(wú)水物或-乳糖無(wú)水物，它們?nèi)菀资艿綕駳獾挠绊懚D(zhuǎn)變?yōu)?乳糖一水合物。所以，經(jīng)過(guò)冷凍干燥后的乳糖易吸潮。可將其作為易吸潮類模型藥物來(lái)考察膠塞的處理過(guò)程對(duì)凍干品水分的影響。Dr. Heike Kofler2和P.D. Donovan3等人在其研究中也均使用了乳糖作為模型藥物。由于拉氧頭孢鈉原料藥昂貴，所以并未直接將其用于研究，而選用了乳糖。2.2 膠塞的處理過(guò)程對(duì)膠塞殘留水分的影響為了了解膠塞對(duì)水分的吸附作用，Allen C. Templeton等人進(jìn)行了膠塞吸水性研究4。實(shí)驗(yàn)的

16、結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)用溴化丁基橡膠塞的水分在濕度越高的環(huán)境下吸水越多，膠塞具有吸水性，這可能和膠塞的成分中含有親水性物質(zhì)有關(guān)。膠塞在使用前通常會(huì)進(jìn)行硅油、清洗、蒸汽滅菌，干燥和存放等過(guò)程。正因?yàn)槟z塞具有吸水性，所以這些過(guò)程中的很多因素可能會(huì)影響到膠塞的水分含量。由于使用者進(jìn)行硅化處理時(shí)并不易保證硅化的均勻性。而且經(jīng)膠塞生產(chǎn)廠家硅化后的膠塞在運(yùn)輸過(guò)程中可減少相互之間的磨擦，避免形成較多的顆粒物。所以使用者一般都會(huì)選擇購(gòu)買膠塞生產(chǎn)廠家已經(jīng)進(jìn)行硅化的膠塞。因此，在進(jìn)行膠塞的處理時(shí)，使用者不再進(jìn)行硅化，進(jìn)而我們也為對(duì)其進(jìn)行相應(yīng)的研究。研究中，我們選用了本公司常用的3個(gè)廠家生產(chǎn)的凍干膠塞（膠塞的生產(chǎn)廠家已經(jīng)進(jìn)行

17、了硅化處理）來(lái)進(jìn)行研究。清洗和蒸汽滅菌均會(huì)導(dǎo)致膠塞水分含量的增加。清洗的參數(shù)相對(duì)固定，且清洗過(guò)程中水分只是和膠塞的表面進(jìn)行了接觸，與蒸汽滅菌比，其對(duì)膠塞水分含量的影響相對(duì)較小。另外膠塞清洗后一定會(huì)經(jīng)歷滅菌，所以我們?cè)谘芯繒r(shí)未單獨(dú)研究清洗對(duì)膠塞水分含量的影響，而將清洗和蒸汽滅菌作為一個(gè)過(guò)程，并研究這個(gè)過(guò)程對(duì)膠塞水分含量的影響。研究中，所有的膠塞均經(jīng)過(guò)了常規(guī)的清洗，并分別在121C條件下進(jìn)行了30分鐘和60分鐘的蒸汽滅菌。然后選擇對(duì)膠塞水分影響較小的滅菌條件作為后續(xù)研究的蒸汽滅菌條件。在對(duì)干燥過(guò)程的研究中，取清洗滅菌后的膠塞分別在105C（Dr. Heike Kofler2和P.D. Donova

18、n3等人在其研究中均使用了這樣的干燥溫度），進(jìn)行真空干燥和熱空氣干燥，干燥的時(shí)間分別為1h，2h，4h和8h。另外，還對(duì)上海欣麗實(shí)業(yè)推薦的一種干燥的方式進(jìn)行了研究，這種干燥的方式是使用膠塞清洗機(jī)清洗膠塞并滅菌后，利用蒸汽滅菌后的余熱進(jìn)行真空干燥。由于膠塞具有吸水性，所以膠塞在使用前，為了保證膠塞的水分含量符合預(yù)期使用的要求，通常會(huì)選用合適的包裝將滅菌并干燥后的膠塞密封保存。由于膠塞的吸水性越大，其在存放過(guò)程中吸水的風(fēng)險(xiǎn)就越大。所以我們將研究3個(gè)廠家生產(chǎn)的膠塞中吸水性最強(qiáng)的膠塞在一定的包裝形式下存放于25C-65%RH的條件下30天的水分含量的情況。這些包裝形式為無(wú)包裝，一層聚乙烯膜包裝和兩層聚

19、乙烯（PE）膜包裝。最后，由于膠塞也經(jīng)歷了冷凍干燥的過(guò)程，其水分含量有可能會(huì)因此降低。所以我們將對(duì)吸水性最強(qiáng)的膠塞在較高和較低的水分含量前提下，在經(jīng)過(guò)冷凍干燥后，對(duì)其水分含量進(jìn)行研究。2.3 膠塞中的水分對(duì)凍干乳糖水分的影響為了評(píng)估膠塞中的水分對(duì)乳糖凍干品水分含量的影響，我們將使用吸水性最強(qiáng)的膠塞（分別經(jīng)過(guò)105C熱空氣干燥（常用干燥方式）1h，2h，8h）來(lái)制備乳糖（濃度：5%，灌裝量：1ml/瓶）的凍干品。將制得的樣品存放于402C-755%RH的條件下6個(gè)月，分別于第0個(gè)月，第1個(gè)月，第2個(gè)月，第3個(gè)月和第6個(gè)月取樣檢測(cè)乳糖的水分含量。另外，樣品的規(guī)格不同（乳糖的灌裝量不同），膠塞中的水

20、分對(duì)其影響的程度應(yīng)不一樣，所以我們也選擇了經(jīng)過(guò)處理后水分含量仍然較高的膠塞來(lái)制備灌裝量為1ml/瓶和2ml/瓶的乳糖凍干品，并按上述方式留樣，檢測(cè)乳糖的水分含量。最后，凍干制品通常會(huì)使用直徑為13mm和20mm的膠塞，在具有同樣的水分含量的前提下，含水的總量卻不同。因此，我們選擇了同一廠家（海華），同一材質(zhì)，直徑分別為13mm和20mm的膠塞，分別考察其在經(jīng)過(guò)處理后仍然含有較高水分含量的情況下，用其制備灌裝量為1ml/瓶的乳糖凍干品，并按上述方式留樣，檢測(cè)乳糖的水分含量。第2章 膠塞處理過(guò)程對(duì)膠塞殘留水分的影響1 物料與儀器1.1 物料1.1.1 一般物料表1膠塞水分含量測(cè)定所用一般物料名稱規(guī)

21、格生產(chǎn)廠家卡爾費(fèi)休試劑KFR-T04（A液）天津四友精細(xì)化學(xué)品有限公司甲醇色譜純Burdick&Jackson藥用包裝用聚乙烯無(wú)菌膜0.05mm（厚度）石家莊育才藥用包裝材料有限公司1.1.2 膠塞和管制瓶表2膠塞水分含量測(cè)定所用膠塞和管制瓶名稱規(guī)格聚合物類型生產(chǎn)廠家注射用冷凍干燥無(wú)菌粉末用溴化丁基橡膠塞EPP RS sil 1/4A(直徑：20mm)溴化丁基西氏醫(yī)藥服務(wù)新加坡公司注射用冷凍干燥用鹵化丁基橡膠塞20-D2(直徑：20mm)溴化丁基石家莊第一橡膠股份有限公司注射用冷凍干燥無(wú)菌粉末用鹵化丁基橡膠塞20-D2(直徑：20mm)溴化丁基江陰市海華橡塑有限公司低硼硅管制瓶7ml-重慶正川

22、玻璃有限公司備注：為了便于敘述，研究中所用到的膠塞的名稱均采用其生產(chǎn)廠家的簡(jiǎn)稱（下劃線部分）。1.2 儀器表 3 膠塞水分含量測(cè)定所用儀器設(shè)備名稱型號(hào)生產(chǎn)廠家天平BS224SSartorius（賽多利斯）蒸汽滅菌柜TMQ.R SHINVA山東新華醫(yī)療器械股份有限公司旋片真空泵2XZ-4B上海真空泵廠真空干燥箱BZF-6020鞏義市英峪予華儀器廠電熱鼓風(fēng)干燥箱CS101-3ABN重慶市永生實(shí)驗(yàn)儀器廠卡爾費(fèi)休水分測(cè)定儀860 KF Thermoprep 萬(wàn)通卡氏爐832萬(wàn)通冷凍干燥機(jī)EPSILON 2-4LSCMarin Christ膠塞清洗機(jī)CDDA-12T上海欣麗實(shí)業(yè)2 膠塞水分含量測(cè)定方法干

23、燥失重系指被測(cè)物料在規(guī)定的條件下，經(jīng)干燥至恒重后，所減失的重量，通常以百分率表示。膠塞的成分中含有一些揮發(fā)性的物質(zhì)（如硫化劑），在較高的溫度下，這些揮發(fā)性的物質(zhì)揮發(fā)出來(lái)，導(dǎo)致膠塞的重量減少，減失的重量增加，因此不能準(zhǔn)確測(cè)定膠塞中水分的含量 5。所以使用卡爾費(fèi)休-卡氏爐法比專屬性不強(qiáng)的干燥失重法更適合于膠塞水分含量的測(cè)定。卡爾費(fèi)休法是測(cè)定物質(zhì)水分的各類化學(xué)方法中，對(duì)水最為專一、最為準(zhǔn)確的方法。卡爾費(fèi)休法（Karl Fischer method）屬于碘量法，是德國(guó)人Karl Fischer在1935年發(fā)明的。此法可以測(cè)量氣體、液體、固體物料的水分。這種方法的原理是利用水與Karl Fischer試

24、劑的化學(xué)反應(yīng)，根據(jù)容量分析方法來(lái)確定含水的量。Karl Fischer試劑是由碘（I2）、二氧化硫（SO2）、吡啶（C5H5N5）以及甲醇（CH3OH）組成。此試劑中的碘起定量試劑作用；吡啶用來(lái)中和反應(yīng)中產(chǎn)生的酸性物；二氧化硫是與碘結(jié)合，起到防止試劑蒸發(fā)的功能；甲醇既參與反應(yīng)又作為反應(yīng)生成物的溶劑。用卡氏滴定法測(cè)量時(shí)，所需的樣品量可以比質(zhì)量法要少2-4倍。用卡氏滴定法來(lái)測(cè)量?jī)龈善返乃趾繒r(shí)，先將稱重后樣品溶于甲醇溶液中，用Karl Fischer試劑進(jìn)行滴定，直到溶液由棕色變成黃色為止。如果用電流代替視覺(jué)觀測(cè)，則測(cè)定結(jié)束時(shí)電流有一個(gè)明顯的上升，用下式計(jì)算含水量：物料中的含水量（g水/g干物料

25、）=af/m式中：a為滴定所需的Karl Fischer試劑，mL；f為Karl Fischer試劑的滴定度，mg/ml；m為物料的質(zhì)量，mg。由于膠塞不溶于甲醇，其中的水分不能溶解到甲醇中并參與反應(yīng)。所以不能直接將膠塞切塊后加入卡氏水分測(cè)定儀的滴定杯中進(jìn)行水分含量的測(cè)定。因此在測(cè)定膠塞水分含量時(shí)，可使用卡氏加熱爐和卡爾費(fèi)休水分滴定儀連接使用的方法。該方法可測(cè)量固體的水分含量?？ㄊ蠣t可在一定的溫度下將樣品中的水分蒸發(fā)后，通過(guò)干燥氮?dú)饣蚩諝獾容d氣導(dǎo)引至滴定池內(nèi)，實(shí)施水分含量分析。國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織（ISO）推薦使用卡爾費(fèi)休-卡氏爐法進(jìn)行膠塞水分含量的測(cè)定。其方法為將膠塞置于卡氏爐中，設(shè)定其溫度為14

26、0C，以將膠塞中的水分蒸發(fā)出來(lái)并導(dǎo)入Karl Fischer試劑中進(jìn)行測(cè)量6。某卡爾費(fèi)休測(cè)定儀生產(chǎn)商推薦測(cè)定膠塞水分含量時(shí)將卡氏爐的溫度設(shè)置為150C7。另外，也有使用更高的溫度的報(bào)告。Zeren Wang8等人在其研究中證明了因?yàn)橐徊糠炙直荒z塞中親水性的成分束縛，隨著卡氏爐溫度的升高，更多被束縛的水分會(huì)釋放出來(lái)，所以將卡氏爐設(shè)定為不同的溫度，將測(cè)得不同的水分含量。最終為了保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度和精密度，可將卡氏爐的溫度設(shè)置為250C。Sam Corveleyn9等人在測(cè)定膠塞水分含量的過(guò)程中，也將卡氏爐的溫度設(shè)置為250C。所以我們亦選擇將卡氏爐的溫度設(shè)置為250C。Allen C. Tem

27、pleton等人在其研究中證明在卡氏爐溫度為250C的條件下，測(cè)得完整的一個(gè)膠塞，被平均切成8塊的膠塞和被平均切成16塊的膠塞的水分含量結(jié)果一致，只是測(cè)定樣品所需時(shí)間不一樣。膠塞被切得越小，測(cè)定所需的時(shí)間越短。因此在卡氏爐溫度為250 C的條件下，膠塞的處理方式對(duì)水分測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度并沒(méi)有太大的影響4。所以我們參照了西氏醫(yī)藥服務(wù)新加坡公司在其藥用溴化丁基橡膠塞的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)10中所使用的樣品處理方式，制定了卡爾費(fèi)休-卡氏爐具體的測(cè)定方法如下：1） 取膠塞10個(gè)，每個(gè)膠塞沿頂面的垂直方向切取冠部部分一塊，切塊的長(zhǎng)度約7mm；2） 將樣品加入卡氏爐的樣品瓶中并密封，設(shè)定卡氏爐溫度為250 C，以300

28、ml/min的流速通入干燥的氮?dú)猓?） 將樣品中蒸發(fā)出來(lái)的水分導(dǎo)引至卡爾費(fèi)休滴定池內(nèi)，測(cè)定其水分。4） 當(dāng)卡爾費(fèi)休滴定速度小于0.1g/sec時(shí)，即判斷滴定結(jié)束。注意：所有樣品的處理均在環(huán)境受控（252C-655%RH）的條件下進(jìn)行。3 清洗和蒸汽滅菌對(duì)膠塞的殘留水分影響膠塞經(jīng)清洗后，為了保證其無(wú)菌，一般會(huì)進(jìn)行蒸汽滅菌。一些文獻(xiàn)的研究的結(jié)果表明蒸汽滅菌會(huì)增加膠塞中水分的含量 68911。膠塞總的吸水量取決于膠塞的材質(zhì)和滅菌的時(shí)間。Corveleyn等人研究了蒸汽滅菌過(guò)程，膠塞的材質(zhì)與其吸收的總的水分量之間的關(guān)系，結(jié)果表明氯化丁基橡膠塞吸收的水分是溴化丁基橡膠塞的2倍9。此外，Thomas等人證

29、明了膠塞中所含的較少量的親水性物質(zhì)與膠塞吸收水分的量有關(guān)12。西氏公司推薦的滅菌條件為121C滅菌30min，且一般不應(yīng)超過(guò)60min。以避免因?yàn)闇缇鷷r(shí)間過(guò)長(zhǎng)而導(dǎo)致膠塞的一些物理性質(zhì)的改變（如密封性），不利于膠塞的正常使用。在我們的研究中，分別取3個(gè)不同廠家（西氏、石家莊、海華）生產(chǎn)的膠塞各200個(gè)，用25C的純化水漂洗30分鐘，再用7080C的注射用水漂洗30分鐘，最后將清洗后的膠塞置于蒸汽滅菌柜中，分別于121C恒溫滅菌30min和60min，取滅菌前后的膠塞測(cè)定其水分含量，結(jié)果見(jiàn)下圖2：圖2 三個(gè)廠家膠塞滅菌前后的水分含量測(cè)定結(jié)果由上圖可知，清洗和滅菌會(huì)導(dǎo)致膠塞的水分含量顯著增加。滅菌6

30、0min的膠塞的水分含量略高于滅菌30min的膠塞。與清洗滅菌前的膠塞的水分含量比較，三個(gè)廠家膠塞水分含量增加的量不一致，西氏膠塞增加的量最少，滅菌30min和60min水分含量的增加值分別為0.28%和0.34%。海華膠塞增加的量最多，滅菌30min和60min水分含量的增加值分別為0.53%和0.64%。4 干燥過(guò)程對(duì)膠塞的殘留水分影響本研究所用的（西氏、石家莊、海華）膠塞在經(jīng)過(guò)清洗和滅菌后，其水分含量會(huì)顯著增加，可能會(huì)導(dǎo)致膠塞的水分含量水平不符合產(chǎn)品使用時(shí)的要求。為了避免膠塞中過(guò)多的水分轉(zhuǎn)移至凍干品，最對(duì)其造成不良的影響，在保證無(wú)菌的前提下，可選擇影響相對(duì)較小的滅菌方式，即121C恒溫滅

31、菌30min。然后再選擇合適的干燥方式除去膠塞中過(guò)多的水分。在凍干制品存放的貨架期內(nèi)，膠塞中的水分會(huì)轉(zhuǎn)移至凍干制品，進(jìn)而導(dǎo)致凍干制品水分含量高于要求的值，給凍干制品的穩(wěn)定性帶來(lái)不良影響。對(duì)膠塞進(jìn)行干燥處理的目的就是在于減少膠塞中的這些水分。文獻(xiàn)中廣泛地研究了多種膠塞的干燥處理方式。Earle等人所使用的干燥方式為143C熱空氣干燥4小時(shí)11， Wang 等人使用的干燥方式為100C熱空氣干燥24小時(shí)8。Dr. Heike Kofler2和P.D. Donovan3等人則在其研究中均使用了105C的干燥溫度。另外西氏膠塞公司也推薦使用105C的干燥溫度，常用的干燥方式為真空干燥和熱空氣干燥。在進(jìn)

32、行干燥處理時(shí)，一個(gè)很重要的原則是這種干燥處理應(yīng)不會(huì)改變膠塞的性能和質(zhì)量。當(dāng)膠塞暴露在較高的溫度下過(guò)長(zhǎng)時(shí)間后會(huì)產(chǎn)生許多問(wèn)題。最常見(jiàn)的問(wèn)題就是膠塞相互粘在一起，這是由于膠塞在先前制備中加入了硫化劑。另外還有一些潛在的問(wèn)題，如機(jī)械性能的改變；顏色的改變；析出物/萃取物析出的方式和量的改變；膠塞使用時(shí)密封性能的改變2。在我們的研究中，取三個(gè)廠家（西氏、石家莊、海華）的膠塞各200個(gè)，分別經(jīng)過(guò)清洗，121C蒸汽滅菌30min。將處理的膠塞單層平鋪在不銹鋼容器中，分別在干燥箱中進(jìn)行真空干燥（壓力為-0.8MPa）和熱空氣干燥，干燥溫度為105C，干燥時(shí)間分別為1h，2h，4h和8h。為了避免存放過(guò)程可能對(duì)

33、水分造成的影響，我們?nèi)「稍锖蟮哪z塞立即進(jìn)行水分含量檢測(cè)，測(cè)定結(jié)果如下圖3和圖4：圖3 膠塞經(jīng)真空干燥后水分含量的測(cè)定結(jié)果圖4 膠塞經(jīng)熱空氣干燥后水分含量的測(cè)定結(jié)果由圖3和圖4的結(jié)果可知：1)兩種干燥方式下，干燥1小時(shí)后，膠塞的水分含量明顯下降，且3個(gè)廠家（西氏、石家莊、海華）的膠塞的水分含量均小于未經(jīng)處理（從供應(yīng)商購(gòu)得膠塞后）的膠塞。2)105C干燥能夠除去由于清洗和滅菌過(guò)程中膠塞所吸收的水分，與干燥前的膠塞水分含量相比，所有膠塞中水分含量最大差值為1.22%（海華，105C真空干燥8小時(shí)）；3)隨著干燥時(shí)間的延長(zhǎng)，膠塞中水分減少的速度減慢，大多數(shù)的水分主要是在起初的1小時(shí)內(nèi)被除去。這樣的結(jié)果

34、表明了因滅菌而增加的水分主要集中在膠塞的表面，這些水分能夠很快的在干燥初期被除去。結(jié)論與Corveleyn9等人的研究一致；4)干燥4小時(shí)后的膠塞的水分含量要明顯低于干燥1小時(shí)和干燥2小時(shí)后的膠塞。干燥4小時(shí)后的膠塞與干燥2小時(shí)后的膠塞相比較，所有膠塞水分含量最大差值為0.05%(海華，105C真空干燥)；5)干燥8小時(shí)后的膠塞與干燥4小時(shí)后的膠塞相比較，水分差值較小。所有膠塞中最大差值為0.02%（石家莊，105C真空干燥）；6)在同樣的溫度下，經(jīng)同樣的干燥時(shí)間后，真空干燥后膠塞的殘留水分含量更低，真空干燥的效果優(yōu)于熱空氣干燥；7)終上所述，為了有效除去清洗和滅菌過(guò)程中增加的水分，如果對(duì)膠塞

35、的水分含量要求較高，在105C條件下干燥1小時(shí)是不夠的，干燥時(shí)間至少需要4個(gè)小時(shí)。另外可考慮采用真空干燥的方式。除了熱空氣干燥，在使用上海欣麗實(shí)業(yè)生產(chǎn)的膠塞清洗機(jī)清洗三個(gè)廠家（西氏，石家莊，海華）生產(chǎn)的膠塞并滅菌后，可以利用蒸汽滅菌后的余熱進(jìn)行真空（-0.08MPa）干燥，使膠塞表面水分迅速揮發(fā)，以達(dá)到干燥目的。為了考察這種干燥方式能否將膠塞的水分含量控制到比較低的值。我們?nèi)?個(gè)廠家的膠塞，使用上海欣麗實(shí)業(yè)生產(chǎn)的膠塞清洗機(jī)，用25C的純化水漂洗30分鐘，再用7080C的注射用水漂洗30分鐘，最后經(jīng)121C蒸汽滅菌30min后，抽真空至清洗機(jī)箱體壓力至-0.08MPa，利用余熱進(jìn)行真空干燥。為了

36、避免存放過(guò)程可能對(duì)水分造成的影響，我們?nèi)「稍锖蟮哪z塞立即進(jìn)行水分含量檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)下表4：表4利用余熱進(jìn)行真空干燥后的膠塞水分含量膠塞名稱干燥方式水分含量（%）西氏利用滅菌后的余熱進(jìn)行真空干燥1小時(shí)0.180.03石家莊0.240.04海華0.290.02西氏105C熱空氣干燥1小時(shí)0.190.04石家莊0.230.02海華0.280.04由以上結(jié)果可知，三個(gè)廠家生產(chǎn)的膠塞利用滅菌后的余熱進(jìn)行真空干燥的膠塞的水分含量與105C熱空氣干燥1小時(shí)后的膠塞的水分含量相當(dāng)。雖然使用滅菌后的余熱進(jìn)行真空干燥可以節(jié)約能源，但實(shí)際除去膠塞水分的能力有限。滅菌結(jié)束后，進(jìn)行抽真空處理，大量的水分蒸發(fā)時(shí)會(huì)帶走大量的

37、熱量，導(dǎo)致膠塞自身的溫度迅速下降，水分蒸發(fā)得越多，溫度下降得越多。從箱內(nèi)溫度探頭測(cè)得的溫度來(lái)看，膠塞在整個(gè)約1小時(shí)的干燥過(guò)程中，只能保證干燥溫度高于65C，而在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)干燥的溫度低于90C。因此，使用該膠塞清洗機(jī)時(shí)，如果需要除去膠塞中更多的水分，應(yīng)考慮增加輔助加熱裝置，進(jìn)行105C熱空氣干燥或105C真空干燥。由于真空干燥會(huì)消耗更多的能量，增加使用成本，所以在可以滿足對(duì)膠塞水分含量要求的前提下，較好的干燥方式可以是105C熱空氣干燥4小時(shí)或8小時(shí)。由于過(guò)高的干燥溫度或是過(guò)長(zhǎng)的干燥時(shí)間可能會(huì)導(dǎo)致膠塞一些物理性質(zhì)的改變，所以一般不推薦使用更高的干燥溫度和更長(zhǎng)的干燥時(shí)間。由于在整個(gè)膠塞的處理過(guò)程中

38、，只有干燥這一步的處理能減少膠塞中的水分，所以膠塞的干燥過(guò)程尤為重要，為膠塞水分含量主要的控制過(guò)程。5 存放包裝條件對(duì)膠塞的殘留水分影響通過(guò)清洗和滅菌，干燥過(guò)程對(duì)膠塞水分含量影響的研究。三個(gè)廠家（西氏，石家莊和海華）生產(chǎn)的膠塞中，海華膠塞在清洗和滅菌后水分增加得最多，在經(jīng)過(guò)同樣的干燥處理后，殘留的水分最多。表明海華膠塞吸水性最強(qiáng)，在處理和使用過(guò)程中的風(fēng)險(xiǎn)最大，所以在存放條件和凍干過(guò)程對(duì)膠塞的水分研究中只選用了海華膠塞作為研究的對(duì)象。膠塞在經(jīng)干燥處理后，在最終使用前，通常會(huì)存放一定的時(shí)間。Allen C.Templeton等人在其研究中證明了膠塞具有吸水性，所以在膠塞的存放過(guò)程中，在一定空氣的濕

39、度條件下水分會(huì)重新平衡4。Sam Corveleyn等人將七種不同的凍干膠塞存放于40C-95% RH的恒濕器中195天，存放過(guò)程中在不同的時(shí)間分別取樣檢測(cè)膠塞的水分含量，結(jié)果表明在膠塞的存放過(guò)程中，膠塞的水分含量會(huì)增加9。因此，需要選擇一種合適的方式（條件和時(shí)間）來(lái)保證膠塞在使用時(shí)的水分含量低于預(yù)期的要求。膠塞在處理后，為了保證膠塞的無(wú)菌性，并保證膠塞的水分含量符合預(yù)期使用的要求，通常會(huì)選用合適的容器將滅菌并干燥后的膠塞密封保存。因?yàn)榫垡蚁≒E）薄膜具有防潮性好，透濕性小，易于密封的特點(diǎn)，所以可將其用于膠塞的包裝。在我們的研究中，取經(jīng)過(guò)清洗，121C滅菌30min，105C熱空氣干燥8小時(shí)

40、后的海華膠塞（膠塞的水份含量越小，在同樣條件下吸水性就體現(xiàn)得更明顯）。將其按20個(gè)每包密封包裝于聚乙烯塑料薄膜袋（厚度：0.05mm）中。其中樣品一包一層聚乙烯塑料薄膜袋，樣品二包兩層聚乙烯塑料薄膜袋，樣品三直接平鋪于不銹鋼容器中。將上述三種包裝的樣品分別存放于25C-65%RH的條件下30天，從放樣開(kāi)始，每隔5天分別取樣進(jìn)行水分含量的測(cè)定，每次取樣均重新打開(kāi)一包未開(kāi)封過(guò)的樣品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)下圖5：圖5 膠塞采用不同的包裝后在25C- 65% RH條件下存放時(shí)水分含量的測(cè)定由上圖可知，1) 在25C-65%RH的條件下，未包裝的膠塞的水分含量迅速增加；存放5天后的膠塞水分含量為0.330.0

41、4%；存放20天后，水分增加的趨勢(shì)開(kāi)始變緩；存放30天后的水分含量為0.970.05%，大于膠塞處理前（從供應(yīng)商購(gòu)得膠塞后）的水分含量0.810.03%。2)在25C-65%RH的條件下，采用一層包裝的膠塞的水分含量略有增長(zhǎng)，存放30天后的水分含量為0.200.02%，與0天相比增加了0.04%。3)在25C-65%RH的條件下，30天內(nèi)，采用兩層包裝的膠塞的水分含量沒(méi)有變化。4)綜上所述，存放過(guò)程中膠塞的會(huì)重新吸水而導(dǎo)致水分含量增加，存放包裝條件的不同，對(duì)膠塞水分含量影響的程度也不同。為了避免處理后的膠塞的水分含量增加，應(yīng)選擇合適的包裝方式和存放時(shí)間。采用兩層聚乙烯膜包裝，在25C-65%R

42、H的條件下存放30天可以保證處理后的海華膠塞的水分不增長(zhǎng)。6 冷凍干燥對(duì)膠塞水分的影響6.1 冷凍干燥過(guò)程簡(jiǎn)介冷凍干燥制品的生產(chǎn)過(guò)程通常為灌裝，加塞，冷凍干燥，壓塞，賦壓和扎蓋。其中，加塞應(yīng)是半加塞，即將膠塞頸部的一部分插入管制瓶中，這要便可留有水分升華的通路。冷凍干燥結(jié)束后，在壓塞密封前，可以事先充入干燥的氮?dú)獾絻龈上鋬?nèi)和瓶?jī)?nèi)，也可直接在真空狀態(tài)下利用可運(yùn)動(dòng)的壓板或靠液壓驅(qū)動(dòng)的擱板將膠塞頸部全部壓入瓶?jī)?nèi)，以完成壓塞。直接在真空狀態(tài)下壓塞的方式會(huì)導(dǎo)致瓶?jī)?nèi)外壓力差更大，對(duì)于容器密封性的要求更高。壓塞結(jié)束后，由于凍干箱內(nèi)的壓力仍然小于箱外的壓力，所以需要通入干燥的壓縮空氣或其它氣體，以去除真空的狀

43、態(tài)，然后方能打開(kāi)凍干機(jī)箱門(mén)。這個(gè)過(guò)程一般被稱為賦壓。取出凍干品后，應(yīng)進(jìn)行扎蓋，使膠塞產(chǎn)生形變，并維持由膠塞形變產(chǎn)生的反作用力而保證整個(gè)系統(tǒng)密封的完整性。6.2 冷凍干燥過(guò)程對(duì)膠塞水分影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果凍干制品半加塞后，會(huì)放入凍干機(jī)進(jìn)行冷凍干燥。因此膠塞也同樣經(jīng)歷了冷凍干燥的過(guò)程，其水分含量有可能會(huì)因此降低。所以，在我們的研究中，分別取經(jīng)過(guò)清洗，121C滅菌30min，105C熱空氣干燥2小時(shí)和4小時(shí)后的海華膠塞，將其半加塞到7ml管制瓶，管制瓶中灌裝濃度為5%的乳糖溶液1ml，按照一定的程序進(jìn)行冷凍干燥，冷凍干燥程序（程序1）如下：1) 預(yù)凍：-40C 2.5小時(shí)2) 一次干燥（升華干燥）：-15

44、C 8小時(shí) 0.50mbar3) 二次干燥（解析干燥）：30C 2小時(shí) 0.50mbar冷凍干燥過(guò)程中，分別在乳糖溶液中和膠塞上固定一個(gè)溫度探頭（鉑電阻），記錄整個(gè)過(guò)程中乳糖樣品和膠塞的溫度。冷凍干燥完成后，在真空的狀態(tài)下直接壓塞，賦壓，出箱并軋蓋密封。取經(jīng)過(guò)上述冷凍干燥后的膠塞，測(cè)定其水分含量，并與冷凍干燥前的水分含量進(jìn)行比較，結(jié)果見(jiàn)下表5：表5 海華膠塞冷凍干燥前后水分含量膠塞干燥方式樣品簡(jiǎn)述水分含量（%）105C熱空氣干燥2小時(shí)冷凍干燥前0.200.03冷凍干燥后0.200.04105C熱空氣干燥4小時(shí)冷凍干燥前0.160.02冷凍干燥后0.170.03由上表的結(jié)果可知，膠塞在經(jīng)過(guò)冷凍干

45、燥后，其水分含量與冷凍干燥前膠塞的水分含量無(wú)差異。即通過(guò)冷凍干燥后，半加塞到管制瓶上的膠塞的水分含量不會(huì)減少。下面由溫度探頭記錄的溫度曲線（圖）可以解釋這個(gè)問(wèn)題。圖6凍干過(guò)程中乳糖樣品和膠塞的溫度的記錄備注：圖中除了膠塞溫度曲線和凍干品溫度曲線外，另外的一條溫度曲線記錄了隔板的溫度。由上圖可知，處于預(yù)凍和一次干燥（升華干燥）階段時(shí)，膠塞的溫度均高于-10C。這是由于膠塞和凍干機(jī)的擱板未直接接觸，不能直接進(jìn)行熱傳遞。膠塞的溫度較高，其中的水分不會(huì)凍結(jié)（凍干品在經(jīng)過(guò)過(guò)冷后，凍結(jié)時(shí)由于晶體析出而迅速放熱，會(huì)出現(xiàn)上圖中凍干品溫度由-10C回升至-1C左右的放熱峰，而記錄的膠塞的溫度曲線則沒(méi)有這個(gè)放熱峰

46、），因此，在一次干燥階段亦不會(huì)出現(xiàn)水分的升華。當(dāng)處于二次干燥（解析干燥）階段時(shí)，膠塞的溫度約為25C，由于溫度較低，膠塞中的水分不易游離和擴(kuò)撒。另外，與凍干塊相比，膠塞不具有多孔性的性質(zhì)，所以膠塞不可能存在凍干塊那樣的干燥過(guò)程。綜上所述，在冷凍干燥的一次干燥過(guò)程中，由于水分未凍結(jié)，膠塞中的水分不會(huì)升華。而在二次干燥過(guò)程中，由于膠塞溫度較低，其水分也不易釋放出來(lái)。所以冷凍干燥的過(guò)程并不能減少膠塞中的水分含量。第3章 膠塞中的水分對(duì)凍干乳糖水分的影響 1 物料與儀器1.1 物料表6 乳糖水分含量測(cè)定所用一般物料名稱規(guī)格生產(chǎn)廠家卡爾費(fèi)休試劑KFR-T04（A液）天津四友精細(xì)化學(xué)品有限公司甲醇色譜純B

47、urdick&Jackson一水乳糖藥用DMV1.2 包裝材料表7 乳糖水分含量測(cè)定所用包裝材料名稱規(guī)格聚合物類型生產(chǎn)廠家注射用冷凍干燥無(wú)菌粉末用鹵化丁基橡膠塞20-D2(直徑：20mm)溴化丁基江陰市海華橡塑有限公司注射用冷凍干燥無(wú)菌粉末用鹵化丁基橡膠塞13-D2(直徑：13mm)溴化丁基江陰市海華橡塑有限公司低硼硅管制瓶7ml-重慶正川玻璃有限公司低硼硅管制瓶5ml重慶正川玻璃有限公司鋁塑復(fù)合鋁蓋20mm-河北金環(huán)包裝鋁塑復(fù)合鋁蓋13mm-河北金環(huán)包裝備注：為了便于敘述，研究中所用到的包裝材料的名稱均采用其生產(chǎn)廠家的簡(jiǎn)稱。（下劃線部分）。1.3 儀器表 8 乳糖水分含量測(cè)定所用儀器設(shè)備名稱

48、型號(hào)生產(chǎn)廠家天平BS224SSartorius（賽多利斯）卡爾費(fèi)休水分測(cè)定儀860 KF Thermoprep 萬(wàn)通冷凍干燥機(jī)EPSILON 2-4LSCMarin Christ2 乳糖水分含量測(cè)定方法實(shí)驗(yàn)中，我們使用了萬(wàn)通的容量法卡氏水分測(cè)定儀。該儀器通過(guò)了相關(guān)的周期性驗(yàn)證，能夠保證測(cè)得數(shù)據(jù)的重復(fù)性和準(zhǔn)確性。測(cè)定乳糖的水分方法如下：1） 在滴定杯中裝入一定量的甲醇；2） 直接將稱重后的乳糖通過(guò)稱樣舟加入到滴定杯中，攪拌；3） 進(jìn)行滴定并自動(dòng)判斷終點(diǎn)，每份樣品消耗的碘滴定液應(yīng)不少于0.5ml；4） 所有的樣品均取3份樣進(jìn)行測(cè)定，報(bào)告值為平均值S.D.(n=3)。3 容器密封完整性為了準(zhǔn)確的評(píng)估

49、膠塞中水分對(duì)乳糖水分含量的影響，其水分增加的原因應(yīng)是來(lái)源于膠塞，而不是來(lái)源于不良的密封條件導(dǎo)致水分的滲漏。所以必要保證扎蓋后容器的密封完整性。因此我們對(duì)研究所用的膠塞、管制瓶和鋁蓋進(jìn)行了容器密封性的驗(yàn)證。方法如下：1） 取實(shí)驗(yàn)用膠塞10個(gè)（處理后），進(jìn)行既定的清洗，滅菌和干燥處理；2） 取管制瓶10個(gè)，每個(gè)加水2ml，加處理后的膠塞和鋁蓋，用軋蓋機(jī)軋蓋密封；3） 將膠塞放進(jìn)裝有10g/L亞甲基藍(lán)溶液的容器中，使其完全浸沒(méi)；4） 將容器放入真空箱中，抽真空至真空度為75kPa，維持30min，真空箱恢復(fù)至常壓，再維持30min；5） 取出，用水沖洗瓶外，以目力觀察，亞甲基藍(lán)溶液不得浸入瓶?jī)?nèi)。結(jié)果

50、表明，實(shí)驗(yàn)所用的包裝系統(tǒng)（1.海華膠塞20mm、正川低硼硅管制瓶7ml、金環(huán)鋁塑復(fù)合鋁蓋20mm；2.海華膠塞13mm、正川低硼硅管制瓶5ml、金環(huán)鋁塑復(fù)合鋁蓋13mm；），在既定的制備工藝下，無(wú)亞甲基藍(lán)溶液浸入，可以保證密封的完整性。4 膠塞的干燥方式對(duì)乳糖水分含量的影響試驗(yàn)已經(jīng)證明膠塞的處理方式對(duì)其水分含量有影響，在良好的包裝的前提下，因?yàn)橹挥懈稍锾幚砟軌驕p少膠塞中的水分，所以起決定作用的步驟為干燥處理。為了研究膠塞的干燥方式對(duì)易吸潮的乳糖凍干品的水分含量的影響。我們將5%的乳糖溶液按1ml/瓶的灌裝量灌裝于7ml的低硼硅管制瓶（重慶正川），分別半加塞（海華膠塞20mm，清洗，121C滅菌

51、30min，105C熱空氣干燥1小時(shí)、2小時(shí)和8小時(shí)）。將樣品置于凍干機(jī)（christ）進(jìn)行冷凍干燥，按如下的冷凍干燥程序（程序2）進(jìn)行冷凍干燥。1) 預(yù)凍：-40C 2小時(shí)2) 一次干燥：-25C 20小時(shí) 0.20mbar3) 二次干燥：30C 10小時(shí) 0.10mbar冷凍干燥完成后，在真空的狀態(tài)下直接壓塞，賦壓，出箱并軋蓋密封。將制得的樣品分別存放于402C-755%RH的條件下。分別于第0個(gè)月，第1個(gè)月，第2個(gè)月，第3個(gè)月和第6個(gè)月取樣檢測(cè)樣品的水分含量，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的樣品均取3個(gè)進(jìn)行檢測(cè)，以其平均值作為報(bào)告值，結(jié)果見(jiàn)下圖7：圖7使用經(jīng)過(guò)不同干燥時(shí)間的膠塞，乳糖凍干品水分含量測(cè)定由上圖

52、可知：1) 留樣過(guò)程中，乳糖凍干品的水分含量均明顯增加，使用105C熱空氣干燥1小時(shí)的膠塞制備的樣品在402C-755%RH的條件下存放2個(gè)月后，乳糖的水分含量超過(guò)3.0%，乳糖凍干塊的顏色由初始的白色變成了淡黃色。因此，對(duì)于凍干的乳糖而言，為了保證其質(zhì)量不發(fā)生改變，其水分至少應(yīng)不超過(guò)3.0%；2) 留樣1個(gè)月后，使用3種膠塞的乳糖凍干品的水分含量均迅速上升，隨后增長(zhǎng)趨勢(shì)開(kāi)始放緩，最終到達(dá)一個(gè)平臺(tái)。這樣的結(jié)果表明了在較短的時(shí)間里，膠塞和乳糖凍干品之間的水分即可達(dá)到平衡；3) 使用3種膠塞的乳糖凍干品的水分含量增長(zhǎng)趨勢(shì)一致。但隨著所使用的膠塞的干燥時(shí)間的延長(zhǎng)，乳糖凍干品的水分含量增長(zhǎng)速率變慢，最

53、終達(dá)到平臺(tái)的水分含量也更小。乳糖凍干品最終的平衡水分值與膠塞的干燥方式密切相關(guān)，為了保證其質(zhì)量（水分含量應(yīng)不超過(guò)3.0%），所使用的膠塞在經(jīng)過(guò)清洗和滅菌處理后，至少應(yīng)在105C熱空氣干燥2小時(shí)。膠塞的干燥時(shí)間越短，膠塞中殘留的水分越多，進(jìn)而會(huì)釋放更多的水分到乳糖凍干品中，導(dǎo)致凍干品水分含量增加越多。為了評(píng)估膠塞中到底有多少水分被乳糖吸收，我們進(jìn)行了相關(guān)的計(jì)算，結(jié)果如下表9：表9 乳糖水分增加的重量占膠塞中水分的重量的比例膠塞干燥時(shí)間加速6月時(shí)乳糖水分增加重量（mg）膠塞中水分重量（mg）增加重量占膠塞水分重量的比例（%）1h1.655.8728.12h1.144.3526.28h0.853.4

54、824.5由以上結(jié)果可知，經(jīng)過(guò)不同時(shí)間干燥后的膠塞，其所含水分的量不同，遷移至乳糖凍干品的水分的量亦不同。但是從膠塞中遷移到凍干品的水的重量占膠塞中水分總重量的比例則類似。因此可以據(jù)此比例來(lái)評(píng)估海華膠塞中的水分可能對(duì)乳糖凍干制品的水分含量的影響，為制定膠塞水分含量限度和合適的膠塞的處理方式提供依據(jù)。5 對(duì)不同裝量的乳糖凍干品水分的影響進(jìn)行同一種類不同規(guī)格產(chǎn)品的冷凍干燥時(shí)，通常會(huì)將同樣濃度的溶液按照不同體積灌裝于一定大小的管制瓶中。因此，膠塞中的水分可能對(duì)不同規(guī)格樣品的水分的影響不同。為了考察上述影響，我們將5%的乳糖溶液分別按1ml/瓶和2ml/瓶灌裝于7ml管制瓶（正川）中，半加塞（海華膠塞

55、20mm，清洗，121C滅菌30min，105C熱空氣干燥2小時(shí)）。規(guī)格為1ml/瓶的樣品按冷凍干燥程序2進(jìn)行冷凍干燥，規(guī)格為2ml/瓶的樣品按如下的冷凍干燥程序（程序3）進(jìn)行冷凍干燥。1) 預(yù)凍：-40C 3小時(shí)2) 一次干燥：-25C 30小時(shí) 0.20mbar3) 二次干燥：30C 15小時(shí) 0.10mbar冷凍干燥結(jié)束后，在真空的狀態(tài)下直接壓塞，賦壓，出箱并軋蓋密封。將制得的樣品分別存放于402C-755%RH的條件下。分別于第0個(gè)月，第1個(gè)月，第2個(gè)月，第3個(gè)月，第6個(gè)月取樣檢測(cè)樣品的水分含量，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的樣品均取3個(gè)進(jìn)行檢測(cè)，以其平均值作為報(bào)告值，結(jié)果見(jiàn)下圖8：圖8 兩個(gè)規(guī)格乳糖凍干品在402C-755%RH的條件下存放水分含量測(cè)定由上圖可知：1) 留樣過(guò)程中，兩種灌裝規(guī)格的乳糖凍干品的水分含量均明顯增加；2) 留樣1個(gè)月后，2ml/瓶的樣品的水分含量迅速由0.430.04%增長(zhǎng)至1.040.04%。隨后增長(zhǎng)趨勢(shì)開(kāi)始放緩。最終到達(dá)一個(gè)平臺(tái)，其水分含量為1.440.04%。2ml/瓶的樣品的水分的含量增長(zhǎng)趨勢(shì)與1ml/瓶的樣品的趨勢(shì)一致，但水分含量要明顯小于后者。 為了更加明顯的看到兩個(gè)不同灌裝規(guī)格樣品的水分增加情況，我們計(jì)算了留樣過(guò)程中，樣品中水分的重量，結(jié)果見(jiàn)下表10：表10兩