1、實驗七 水體氨態(tài)氮、亞硝態(tài)氮和硝態(tài)氮的測定,一、氨態(tài)氮的測定納氏試劑法 Nesslers reagent Spectrophotometric,實驗目的 實驗原理 實驗儀器和試劑,主要操作步驟 結果與計算 結果分析,（一）實驗目的,復習分光光度計的使用 學習其中一種比色法測定水中氨氮含量的原理和操作方法,（二）實驗原理,納氏試劑是碘化汞鉀（K2HgI4）的強堿性溶液，它能與氨氮反應生成棕色的難溶絡合物，濃度很小時，在水中以膠態(tài)形式存在，呈現(xiàn)為橙黃色。反應如下式所示：,（三）主要操作步驟,樣品預處理（凝聚法）,棄去最初濾出的25 mL濾液,混勻,標準曲線及樣品的制作與測定 取6支50 mL具塞比

2、色管，分別按下表的量加入氨氮標準使用液（Vs ），加無氨純水至標線，混勻,加入1.0mL酒石酸鉀鈉溶液,加入1.0 mL納氏試劑,混勻,顯色10 min,溶液呈黃色,420 nm處比色,實驗注意事項,本方法只能用于較清潔的水樣，污水需采用蒸餾發(fā)將氨分離收集后再加納氏試劑比色 魚池水常有色且渾濁，多數(shù)是由于水中生物或泥沙所造成，經(jīng)Zn(OH)2 吸附處理后，一般可用此法測定,（五）結果計算與分析,二、亞硝酸態(tài)氮的測定 Spectrophotometric method with sulphanilamide and coupling with N-(1-naphthyl)-ethylenedia

3、mine,（一）實驗目的,掌握水樣預處理方法、亞硝酸氮的測定方法以及同一養(yǎng)殖水體中亞硝酸氮與氨氮和硝酸氮之間含量大小的關系。,（二）實驗原理,在酸性介質中亞硝酸鹽與磺胺進行重氮化反應，其產物再與鹽酸萘乙二胺偶合生成紅色偶氮染料，該染料在波長543 nm附近有最大吸收。,（三）儀器與試材,儀器 分光光度計及配套比色皿 50mL具塞比色管 容量瓶 移液管,試劑 磺胺溶液 鹽酸萘乙二胺溶液 亞硝酸鹽氮貯備溶液 亞硝酸鹽氮使用溶液 氫氧化鋁懸浮液,2 mL氫氧化鋁懸浮液,（四）主要操作步驟,樣品預處理（凝聚法）,200 mL水樣,中性濾紙過濾,于250 mL錐形瓶,棄去最初濾出的25 mL濾液,制作標

4、準曲線及樣品測定 取6支50 mL具塞比色管，分別按下表的量加入亞硝酸態(tài)氮標準使用液（Vs ），加無氨純水至標線，混勻,（五）結果分析與計算,三、硝酸氮的測定-酚二磺酸比色法 Determination of nitrate nitrogen -Spectrophotometric method with phenol disulfonic acid,（一）實驗目的,了解養(yǎng)殖水體硝酸鹽的垂直分布特點 掌握硝酸鹽測定的方法酚二磺酸法,（二）實驗原理,硝酸鹽在無水情況下與酚二磺酸反應，生成黃色的硝基二磺酸酚，溶解后溶液在410nm處吸光度與硝酸氮的含量呈線性關系。,（三）儀器與試材,儀器 瓷蒸發(fā)皿

5、 水浴鍋 玻璃漏斗 50 mL具塞比色管 分光光度計 比色皿等,試劑 酚二磺酸 氫氧化鈉溶液 硝酸鹽氮貯備標準溶液 硫酸銀溶液 EDTA二鈉溶液 氫氧化鋁混懸液等,2 mL氫氧化鋁懸浮液,（四）主要操作步驟,樣品預處理（凝聚法）,200 mL水樣,中性濾紙過濾,于250 mL錐形瓶,棄去最初濾出的25 mL濾液,制作標準曲線制作（由老師負責完成） 在 6個清潔、干燥的蒸發(fā)皿內分別移入硝酸鹽氮標準使用液0、0.50、1.00、2.00、3.00 、5.00 mL，以氫氧化鈉溶液調節(jié)pH至微堿性（pH8），置水浴上蒸發(fā)至干。,玻棒研磨,冷卻后加入 酚二磺酸試劑1.0 mL,再研磨一次 放置10 min,轉移至比色管,410 nm處比色,溶液呈黃色,放置片刻,加10ml純水,加34mL 氫氧化鈉,定容至標線,樣品