1、。生物化學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)一、臨床實(shí)驗(yàn)室生化檢測(cè)的組成：生化試驗(yàn)主要包括生化試驗(yàn)、離子生化試驗(yàn)和血?dú)庠囼?yàn)。1.整個(gè)生化測(cè)試在生化分析儀上進(jìn)行，這將在下一部分介紹。2.離子生化檢測(cè)：主要是鉀、鈉、氯、二氧化碳等。檢測(cè)方法如下：(1)火焰光度計(jì)：根據(jù)色譜理論測(cè)試，也用于基層醫(yī)院。(2)離子分析儀：即電解質(zhì)分析儀。(3)離子選擇電極：附在全自動(dòng)生化儀上的裝置可以同時(shí)檢測(cè)離子，相對(duì)獨(dú)立于其他生化項(xiàng)目，互不影響，速度快。例如，貝克曼、日立7170和奧林巴斯2700都有離子分析設(shè)備。(4)酶檢測(cè)：用酶試劑盒在生化儀上進(jìn)行檢測(cè)。3.血?dú)鈾z測(cè)：醫(yī)院為搶救危重病人而購(gòu)買的檢測(cè)設(shè)備并不總是放在實(shí)驗(yàn)室里。儀器包括康寧、AV

2、L、阿布勒、新星等。二。生化分析儀概述(一)、生化檢驗(yàn)程序主要步驟有：樣品處理(稀釋)、試劑添加、反應(yīng)樣品添加(加熱顯色)、反應(yīng)產(chǎn)物檢測(cè)(比色法、濁度法)、數(shù)據(jù)處理(報(bào)告)等。在自動(dòng)生化分析儀出現(xiàn)之前，所有這些任務(wù)都是手工完成的。(2)、臨床生化檢測(cè)儀器的發(fā)展臨床生化檢測(cè)儀器的發(fā)展經(jīng)歷了三個(gè)階段：分光光度計(jì)(手動(dòng)比色法)、半自動(dòng)生化儀和全自動(dòng)生化儀。1.分光光度計(jì)：原則：光源單色儀吸收池探測(cè)器班長(zhǎng)反應(yīng)杯記錄器在特定的波長(zhǎng)和一定的濃度范圍內(nèi)，待測(cè)溶液的吸光度與待測(cè)溶液的濃度和液體層的厚度成：的比例A=bc :摩爾消光系數(shù)(常數(shù))b:液體層厚度(比色杯厚度)C:待測(cè)液體的濃度定量方法：將標(biāo)準(zhǔn)溶液的

3、吸光度與待測(cè)溶液的吸光度進(jìn)行比較，并計(jì)算含量。標(biāo)準(zhǔn)比較法：c標(biāo)準(zhǔn)c待測(cè)試=a待測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)C多點(diǎn)校準(zhǔn)A手動(dòng)顏色比較功能：(1)、優(yōu)點(diǎn)：對(duì)試劑質(zhì)量要求低；分析成本低。(2)缺點(diǎn)：分析速度慢，不適合大規(guī)模臨床試驗(yàn)；人工勞動(dòng)強(qiáng)度大，效率低，偶然誤差大；運(yùn)輸成本高，不利于試劑生產(chǎn)的規(guī)?；蜆?biāo)準(zhǔn)化。2.半自動(dòng)生化儀；半自動(dòng)生化儀以分光光度計(jì)為基礎(chǔ)，自動(dòng)控制試劑添加、樣品添加和比色過(guò)程，并自動(dòng)計(jì)算和打印反應(yīng)結(jié)果。長(zhǎng)期以來(lái)，半衰期儀器是各級(jí)醫(yī)院生化檢測(cè)的主要設(shè)備。目前，全自動(dòng)生化儀用于二級(jí)、一級(jí)以上醫(yī)院的大規(guī)模檢測(cè)，半衰期儀用于少數(shù)單項(xiàng)檢測(cè)或夜間急救。許多品牌已經(jīng)本地化。特點(diǎn)：A.對(duì)試劑的更高要求B.一些試劑的

4、分析成本相對(duì)較高C.分析速度相對(duì)較快D.減少人為錯(cuò)誤3.自動(dòng)生化分析儀：在半自動(dòng)生化分析儀的基礎(chǔ)上，結(jié)合計(jì)算機(jī)技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了采樣、試劑吸收和添加、樣品預(yù)處理、樣品分析和結(jié)果處理、設(shè)備清洗等步驟的自動(dòng)化，克服了以往人工操作勞動(dòng)強(qiáng)度大、效率低、意外誤差大的缺點(diǎn)，大大加快了分析速度，提高了工作質(zhì)量，滿足了大規(guī)模臨床檢驗(yàn)的需要。優(yōu)勢(shì)：一、分析速度快，自動(dòng)化程度高，精度高，準(zhǔn)確度好分析成本相對(duì)較低易于實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化管理減少人為錯(cuò)誤缺點(diǎn)：一、儀器成本高，一次性投資相對(duì)較高試劑的質(zhì)量要求也很高三、自動(dòng)生化分析儀的原理、組成和用途(一)、自動(dòng)生化分析儀的功能和特點(diǎn)全自動(dòng)生化分析儀模擬人工操作完成生化分析中的取樣、加

5、試劑、混合、保溫、比色、計(jì)算結(jié)果和寫報(bào)告等步驟。它可用于分析和確定各種反應(yīng)類型，如計(jì)時(shí)法和連續(xù)監(jiān)測(cè)法。除一般生化項(xiàng)目外，其中一些還可用于測(cè)定激素、免疫球蛋白、血藥濃度等特殊化合物，以及測(cè)定酶免疫、熒光免疫等分析方法。它具有快速、簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確、標(biāo)準(zhǔn)化和可追溯性。(2)自動(dòng)生化分析儀的分類自動(dòng)生化分析儀有許多分類方法，其中最常見(jiàn)的是根據(jù)其反應(yīng)裝置的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分類。根據(jù)這種方法，自動(dòng)生化分析儀可分為兩類：移動(dòng)式和離散式。所謂流動(dòng)式自動(dòng)生化分析儀，是指在同一管道中流動(dòng)的過(guò)程中，同一測(cè)量項(xiàng)目的樣品和試劑混合后的化學(xué)反應(yīng)。這是第一代自動(dòng)生化分析儀。過(guò)去，有許多通道的生化分析儀都指這一類。缺點(diǎn)是存在嚴(yán)重的

6、交叉污染，并且結(jié)果不準(zhǔn)確，這已經(jīng)被消除了。分離式自動(dòng)生化分析儀與流動(dòng)式自動(dòng)生化分析儀的主要區(qū)別在于，待測(cè)樣品與試劑混合后的化學(xué)反應(yīng)在各自的反應(yīng)盤中完成，不易交叉污染，結(jié)果可靠。(3)、自動(dòng)生化分析儀的組成由于自動(dòng)生化分析儀模仿人工操作的過(guò)程，無(wú)論哪種自動(dòng)生化分析儀，其結(jié)構(gòu)都類似于一些人工操作的儀器和設(shè)備，一般可以由以下幾部分組成：1.樣品裝置：放置待測(cè)樣品、標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控溶液、空白溶液和質(zhì)控溶液等。2.取樣裝置：包括稀釋器、取樣探頭、輸送樣品和試劑的管道等。3.反應(yīng)池或反應(yīng)管道：通常，它充當(dāng)比色杯(試管)。4.絕緣體：為化學(xué)反應(yīng)提供恒溫。5.檢測(cè)器：如比色計(jì)、分光光度計(jì)、熒光分光光度計(jì)、火焰光度

7、計(jì)、電化學(xué)測(cè)試儀等。不同的儀器有不同的配置。6.微處理器：它是分析儀的計(jì)算機(jī)部分。儀器的所有動(dòng)作和功能都受到控制，用戶可以通過(guò)鍵盤與儀器“交談”。同時(shí)，計(jì)算機(jī)還可以接收來(lái)自各個(gè)部件的反饋信號(hào)，做出相應(yīng)的響應(yīng)，并針對(duì)異常情況發(fā)出特定的指示信號(hào)。分析軟件和分析結(jié)果通常存儲(chǔ)在磁盤中，可以一起查詢。7.打印機(jī)：可打印動(dòng)態(tài)響應(yīng)曲線和檢驗(yàn)報(bào)告。8.功能監(jiān)視器：顯示屏，可檢查反應(yīng)狀態(tài)、人機(jī)“對(duì)話”、當(dāng)前儀器工作狀態(tài)、分析結(jié)果等。(4)、移動(dòng)式自動(dòng)生化分析儀移動(dòng)式自動(dòng)生化分析儀可分為空氣分段系統(tǒng)和非分段系統(tǒng)。前者是最典型的流量分析儀之一。1.空氣分割系統(tǒng)該分析儀的特征在于，彈性樣品管、空氣管和試劑管(通常稱為

8、“泵管”)被定量泵擠壓，并且樣品依次沿樣品管連續(xù)抽吸和輸送。另一方面，由空氣管吸入的氣泡將由相同原理吸入并在試劑管中連續(xù)流動(dòng)的試劑分成均勻的段，并且樣品流和試劑流在連續(xù)向前流動(dòng)的過(guò)程中相遇、混合、滲透(如果需要的話)、保溫、反應(yīng)和被測(cè)量。整個(gè)分析過(guò)程是在液體在管道中連續(xù)流動(dòng)的過(guò)程中完成的。2.非分段系統(tǒng)非分段系統(tǒng)通過(guò)試劑空白或緩沖溶液分離每個(gè)樣品的反應(yīng)溶液，因此在管道中連續(xù)流動(dòng)的液體不會(huì)被分段。非分段系統(tǒng)可細(xì)分為流動(dòng)注射系統(tǒng)和間隙系統(tǒng)。(5)、離散自動(dòng)生化分析儀1.分立型是第二代自動(dòng)生化分析儀。離散型和流動(dòng)型的主要區(qū)別在于，待測(cè)樣品與試劑混合后的化學(xué)反應(yīng)在各自的反應(yīng)盤中完成。2.離心式自動(dòng)生化

9、分析儀，稱為第三代自動(dòng)生化分析儀，也應(yīng)該屬于離散型。因?yàn)樵陔x心分析儀中，每個(gè)待測(cè)樣品在離心力的作用下，在各自的反應(yīng)罐中與試劑混合，完成化學(xué)反應(yīng)，然后進(jìn)行測(cè)量。離心分析儀屬于“同步分析”。在離心力的作用下，每個(gè)待測(cè)樣品幾乎同時(shí)與試劑混合，反應(yīng)并測(cè)量，然后生成報(bào)告；而其他分析儀是“順序分析”，即每個(gè)待測(cè)樣品依次與試劑混合，然后在反應(yīng)后進(jìn)行測(cè)量。3.袋式自動(dòng)生化分析儀也應(yīng)屬于離散型，其中使用試劑袋而不是比色皿，并且在測(cè)定過(guò)程中，每個(gè)待測(cè)樣品在其自身的試劑袋中進(jìn)行反應(yīng)和檢測(cè)。4.“干式自動(dòng)生化分析儀”也是一種分立型。其主要特點(diǎn)是采用固相化學(xué)技術(shù)，即試劑在薄膜或?yàn)V紙等載體上呈固相。在測(cè)定過(guò)程中，將一定量

10、的待測(cè)樣品分布在測(cè)試條上，并在一定時(shí)間后通過(guò)反射光度計(jì)進(jìn)行測(cè)定。離散自動(dòng)生化分析儀是目前實(shí)驗(yàn)室廣泛使用的全自動(dòng)生化分析儀，一般可以選擇任何測(cè)量項(xiàng)目，因此被稱為可選自動(dòng)生化分析儀。以下重點(diǎn)介紹可選的自動(dòng)生化分析儀。(6)可選自動(dòng)生化分析儀的主要部件1.樣品添加系統(tǒng)(1)樣品轉(zhuǎn)盤或樣品條：可放置幾十個(gè)小樣品杯。一些分析儀可以直接使用含有樣本的試管，而其他分析儀還配備有條形碼讀取裝置，該裝置可以識(shí)別樣本試管上的條形碼信息，并且可以打印出患者的檢測(cè)報(bào)告，而無(wú)需對(duì)樣本進(jìn)行編號(hào)或輸入患者數(shù)據(jù)。(2)試劑倉(cāng)：不同的分析儀試劑倉(cāng)可容納不同數(shù)量的試劑盒，一般可容納20多種試劑。一些試劑倉(cāng)庫(kù)有制冷裝置，帶有條形碼

11、識(shí)別裝置的試劑倉(cāng)庫(kù)可以在任何位置放置試劑盒。如果采用多試劑分析方法，將占據(jù)試劑盒在試劑倉(cāng)中的位置，減少測(cè)定項(xiàng)目的數(shù)量。(3)取樣裝置：一些分析儀共用相同的取樣針進(jìn)行取樣和取試劑，內(nèi)部分流閥控制取樣和取試劑；有些儀器有兩套取樣裝置，分別采集樣品和試劑。取樣針前端設(shè)有液位傳感器，防止空氣吸入或液體掛在取樣針外壁，取樣臂內(nèi)設(shè)有預(yù)熱裝置。2.比色系統(tǒng)(1)光源：大多數(shù)分析儀使用工作波長(zhǎng)為325 800納米的鹵鎢燈。一些分析儀使用工作波長(zhǎng)為285 750 nm的氙燈。(2)比色杯：有分立比色皿、分立旋轉(zhuǎn)比色皿和離心比色皿。干式生化分析儀不需要比色杯，而袋式生化分析儀通過(guò)擠壓試劑袋自動(dòng)形成比色杯。比色杯的

12、光徑為6-7毫米，少數(shù)為10毫米。反應(yīng)杯中的反應(yīng)溶液需要恒溫，可以從37、30和25三個(gè)水平中選擇，有些固定在37。它們大多采用吹入恒溫空氣的方式，也使用恒溫水浴或半導(dǎo)體溫控裝置來(lái)保暖。為了保證比色杯中反應(yīng)液的準(zhǔn)確度為0.1，分析儀的環(huán)境溫度必須保持在18 30，室溫波動(dòng)不得超過(guò)2。(3)、單色儀：(1)干涉濾光片(2)光柵(4)探測(cè)器：(1)光電倍增管(很少使用)。(2)陣列固態(tài)光電二極管。3.給排水系統(tǒng)自動(dòng)生化分析儀中有許多供水管和電磁閥。只讀存儲(chǔ)器中的軟件參數(shù)控制電磁閥和輸液泵，為每個(gè)部件提供沖洗和抽吸，并最終將其排出機(jī)器。隨機(jī)存取存儲(chǔ)器中的分析參數(shù)控制電磁閥和注射器的步進(jìn)電機(jī)，并提供樣

13、品、試劑和稀釋水。一些生物化學(xué)家也可以自動(dòng)清洗試管，以便重復(fù)使用。4.數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)每個(gè)項(xiàng)目的測(cè)試結(jié)果暫時(shí)存儲(chǔ)在隨機(jī)存取存儲(chǔ)器中。在對(duì)樣品所需的所有項(xiàng)目進(jìn)行測(cè)試后，microcomp可以通過(guò)選擇試劑室中預(yù)設(shè)試劑盒的一個(gè)或所有項(xiàng)目來(lái)測(cè)試每個(gè)樣品。根據(jù)輸入的指令，微機(jī)安排項(xiàng)目檢測(cè)的順序。一般情況下，先進(jìn)行長(zhǎng)孵育時(shí)間的終點(diǎn)法，再進(jìn)行短監(jiān)測(cè)時(shí)間的速率法，這樣就可以恒速打印綜合報(bào)告。當(dāng)指定的樣本進(jìn)入待測(cè)位置時(shí)，微型計(jì)算機(jī)指示試劑盒進(jìn)入試劑取樣位置，取樣系統(tǒng)根據(jù)被測(cè)項(xiàng)目的參數(shù)定量取樣。同時(shí)，比色杯根據(jù)微型計(jì)算機(jī)的指令到達(dá)指定的取樣位置。生化分析儀的分析速度與采樣周期的時(shí)間有關(guān)。采樣周期越短，分析儀越快。雙試

14、劑法占用兩個(gè)采樣周期，分析速度減半。(8)可選自動(dòng)生化分析儀的主要分析參數(shù)1.測(cè)試代碼14。連續(xù)監(jiān)控時(shí)間2.測(cè)試名稱15。標(biāo)準(zhǔn)溶液的量3.測(cè)試方法16。標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度4.測(cè)試類型17。重復(fù)校準(zhǔn)次數(shù)5.溫度18。計(jì)算系數(shù)(F值)6.波長(zhǎng)：你可以選擇主波長(zhǎng)和次波長(zhǎng)。19.測(cè)量單位7.反應(yīng)類型20。小數(shù)8.終點(diǎn)法21的零讀數(shù)。襯底耗盡9.樣本大小和稀釋水量22。線性10.試劑劑量和稀釋水量23。試劑吸光度的上限和下限11.樣本空白24。線性范圍12.孵化時(shí)間25。參考距離13、延遲時(shí)間26等等(9)可選自動(dòng)生化分析儀分析參數(shù)的使用1.儀器制造商提供的測(cè)量項(xiàng)目(1)一些儀器公司自行生產(chǎn)常用項(xiàng)目試劑盒、

15、校準(zhǔn)溶液(固定血清型標(biāo)準(zhǔn)溶液)和固定質(zhì)控血清，并提供各種常用項(xiàng)目的分析參數(shù)供用戶直接使用。此外，還有幾十個(gè)空白項(xiàng)目參數(shù)表供用戶自行開(kāi)發(fā)新項(xiàng)目。(2)一些儀器公司不自行提供試劑盒，但有提供分析參數(shù)的合作試劑公司。因此，在購(gòu)買儀器時(shí)，必須從指定的試劑公司購(gòu)買一定數(shù)量的試劑盒(包括校準(zhǔn)溶液和固定質(zhì)控血清)。(3)有些儀器公司既不生產(chǎn)試劑盒也不與試劑公司合作，分析參數(shù)表為空，用戶需要自行設(shè)計(jì)分析參數(shù)。但是，國(guó)內(nèi)的代理商或試劑公司一般都提供他們的設(shè)計(jì)參數(shù)，有些參數(shù)往往是不合適的，所以用戶應(yīng)該逐一驗(yàn)證。2.自行設(shè)計(jì)和分析參數(shù)的原則如果儀器公司不提供分析參數(shù)或測(cè)定項(xiàng)目的方法不同，您可以自己設(shè)置分析參數(shù)。主要設(shè)計(jì)以下參數(shù)。1、樣品試劑比例。6.計(jì)算因子(f值)。2.孵化時(shí)間。7.襯底耗盡的極限。3.延遲時(shí)間。8.線性度。4.監(jiān)控時(shí)間。9.線性范圍。5、試劑吸光度的上限和下限。通常會(huì)提供這些參數(shù)套件說(shuō)明，可用于填寫分析參數(shù)表。校準(zhǔn)后，可以通過(guò)質(zhì)量控制進(jìn)行日常工作，一些參數(shù)將在以后的工作中逐步修改。四、幾種主要品牌的自動(dòng)生化分析儀1.日立自動(dòng)生化分析儀由日本日立公司生產(chǎn)