1、.,生物安全柜 biological safety cabinets （BSC）,湛江市疾病預防控制中心 艾滋病確證實驗室,.,工作臺的分類,超凈工作臺 生物安全柜 生物安全柜的基本防護功能 保護操作人員 保護樣品 保護環(huán)境,.,生物安全柜的定義,Class II 生物安全柜,防止操作處理過程中，含有危險性或未知性生物微粒氣溶膠散逸的箱形空氣凈化負壓安全裝置,.,生物安全柜的分類,根據(jù)處理樣品的危害不同，分為三個等級: 級, 級, 級 BSC-(級生物安全柜) BSC-( 級生物安全柜) BSC- ( 級生物安全柜),.,級生物安全柜的分類,1.級A1型生物安全柜 柜內(nèi)空氣70%循環(huán)，30%排

2、出，窗口流速0.4/s 2.級A2型生物安全柜 柜內(nèi)空氣70%循環(huán)，30%排出，窗口流速0.5/s 3.級B1型生物安全柜 柜內(nèi)空氣30%循環(huán)，70%排出,窗口流速0.5/s 級B2型生物安全柜 柜內(nèi)空氣100%排出,窗口流速0.5/s,.,級生物安全柜,1.美國對級生物安全柜有新的分 類方法 2.歐洲產(chǎn)品無B2型級生物安全柜,.,級生物安全柜(BSC ),主要功能： 用于低度危險性的微生物和病原體 作業(yè)空間并未到達無菌潔凈的條件 保護操作人員及環(huán)境 但不保護樣品,.,級生物安全柜(BSC ),主要結(jié)構(gòu): 帶有抽氣裝置的操作箱 氣體向操作箱內(nèi)流動,保護操作者 排出氣體經(jīng)HEPA過濾 氣流速度在

3、0.4/s以上(排氣量/進氣面積),.,級生物安全柜,可開啟前窗在負壓下操作 表面風速75-100fpm 排出的氣體經(jīng)HEPA 過濾 保護操作人員和環(huán)境,HEPA,適用于樣品不需保護的實驗工作,.,級生物安全柜（BSC ）,主要功能： 用于操作低、中度危險的微生物，病原體 操作空間到達無菌的潔凈條件,.,級生物安全柜（BSC ）,主要結(jié)構(gòu)： 具有前吸風口和排氣口 可防止內(nèi)部污染氣體流出 避免外部氣體進入箱內(nèi)污染樣品 氣體經(jīng)HEPA過濾排出,.,級生物安全柜的分類,B1,Type B,B2,Class II,Type A,A1,A2,廢氣經(jīng)煙罩排入實驗室或室外,廢氣必須經(jīng)排風系統(tǒng)排至室外，并帶報

4、警裝置,.,安全柜的選擇,選用A類還是B類生物安全柜? 不是生物因素 而是是否使用揮發(fā)性的有害物質(zhì)或放射性物質(zhì),Type B,Type A,.,級生物安全柜,滿足生物安全等級1、2、3的要求,不涉及放射性物質(zhì),不涉及揮發(fā)性有害化學品,建議不應有明火,.,.,級生物安全柜,最小流速 75 fpm,Type A1有排風管路,Type A1無排風管路,.,.,級A2型生物安全柜（B3型）,前窗進風氣流平均流速0.5m/s 經(jīng)HEPA的下送氣流與操作口向內(nèi)氣流混合 循環(huán)氣流比例：70% 經(jīng)HEPA過濾器的空氣，可以排回實驗室或通過排風罩排入環(huán)境,.,無排風管,級A2型生物安全柜,最小表面風速0.5m/

5、s,有排風管,.,級A2生物安全柜(無排風管),滿足生物安全等級1、2、3的要求,不涉及放射性物質(zhì),不涉及揮發(fā)性有害化學品,建議不應有明火,.,級A2型生物安全柜(有排風管),滿足生物安全等級1、2、3的要求,適用于含痕量放射性物質(zhì)的工作,適用于含少量揮發(fā)性有害化學品的工作,建議不應有明火,.,BSC-A2型,正壓污染區(qū)被負壓區(qū)域包圍,無外接風道,有外接風道,.,.,級B1型生物安全柜,前窗進風氣流平均流速0.5m/s 經(jīng)HEPA過濾器的下送氣流，大部分是未被污染的循環(huán)吸入氣流 循環(huán)氣流比例為30% 污染的下送氣流經(jīng)HEPA過濾后，大多數(shù)經(jīng)過專門的排風管排入大氣,.,級B1型生物安全柜,經(jīng)HE

6、PA過濾的下送氣流，大部分未被污染,污染的下送氣流經(jīng)HEPA過濾后，大部分經(jīng)排風管排入大氣,.,級B1型生物安全柜,滿足生物安全等級1、2、3的要求,工作區(qū)域的后部可使用少量的放射性物質(zhì),工作區(qū)域的后部可使用少量的揮發(fā)性有害化學品,建議不應有明火,.,BSC-B1型,正壓污染區(qū)被負壓區(qū)域包圍,.,級B2型生物安全柜（全排型）,前窗進風氣流平均流速0.5m/s 循環(huán)氣流比例為0，即柜中排出的氣體不再循環(huán) 所有污染的風道和壓力排風系統(tǒng)均保持負壓,.,級B2型生物安全柜（全排型）,.,級B2型生物安全柜（全排型）,滿足生物安全等級,適用于放射性物質(zhì)*,適用于揮發(fā)性有害化學品,建議不應有明火,.,BS

7、C-II-B2型,正壓污染區(qū)被負壓區(qū)域包圍,.,BSC-型,保護實驗人員、實驗對象和環(huán)境 密閉結(jié)構(gòu) 通過手套操作 柜內(nèi)負壓不小于120Pa 排風兩道高效過濾器,.,.,一般無定型產(chǎn)品，需特殊定貨 若干級生物安全柜連在一起使用，全部操作流程均在柜內(nèi)完成，以確保安全,級生物安全柜,.,級生物安全柜,.,生物安全柜的操作理論,顆粒經(jīng)HEPA過濾去除 氣流為層流 氣流有方向,生物安全柜的要求:,.,生物安全柜的操作理論,HEPA濾膜 馬達/風扇強制氣體流動 馬達轉(zhuǎn)速的控制部分 氣體的吸入、平衡控制及管路系統(tǒng),生物安全柜的主要部件:,.,操作理論-層流,層流氣流向下掃過工作區(qū)域，捕獲氣溶膠，經(jīng)安全柜的內(nèi)

8、層至HEPA濾膜 為實現(xiàn)真正的層流，各點的氣流速率必須在平均流速的+/- 20%以內(nèi),.,操作理論-有方向的氣流,空氣從柜前和周圍吸入，使工作區(qū)域的氣溶膠更難逃逸 此氣流通常以向內(nèi)吸入的體積或平均流速計算、表示,.,操作理論-煙氣分束,在工作區(qū)域的一個垂直平面內(nèi)煙氣被分束，向前方和后方的氣孔移動 為最有效的防止煙氣逃逸，物品應放在煙氣分束以后的區(qū)域，操作也應在此進行,.,生物安全柜的使用,1.正確安裝，確保安全柜與外部 排風系統(tǒng)壓力平衡，保證安全柜處于正常工作狀態(tài) 2.定期維護和檢測，確保安全性,.,生物安全柜的使用,工作前認真理解操作步驟和所需設備 盡量減少擾動 準備好消毒劑,制定計劃,.,

9、生物安全柜的使用,關紫外燈，前窗開至適當高度，打開安全柜的燈和風扇 檢查出風口是否有障礙物，等待5min 用消毒液徹底洗凈手和手臂；穿長袖工作服和手套；帶防護眼鏡,開始,清潔,用70%的乙醇或適當?shù)南緞┎潦霉ぷ鲄^(qū)域內(nèi)壁,.,生物安全柜的使用,只放入所需物品 不能超載 出風口不要有障礙物 大物體間要保持一定距離 前窗降至適當高度 2-3min以吹掃污染物,上樣,.,生物安全柜的使用,工作結(jié)束，繼續(xù)開機10-15min,最后的吹掃,下樣,與污染物接觸的物品，取出之前必須經(jīng)表面去污處理 所有托盤或容器取出前必須加蓋,.,生物安全柜的使用,用消毒劑清潔內(nèi)壁，待其干燥 定期抬起工作面清潔下面的區(qū)域,清

10、潔,.,生物安全柜的使用,關閉燈、風機、關閉前窗 開紫外燈,關機,.,生物安全柜的使用,所有物品離前窗至少2英寸，所有污染性的操作盡量遠離工作區(qū)域的后部 干凈的與污染的物品分開放置；污染物品盡量放置在工作區(qū)域后部 操作時物品和手臂不要穿過前窗,技巧,.,生物安全柜的使用,避免使用明火，用適當?shù)臏缇胧?避免使用干擾安全柜內(nèi)層流的實驗手段 安全柜處于操作狀態(tài)時，徹底消毒內(nèi)壁,技巧,.,生物安全柜的使用,干凈物品,理想的工作臺擺放,污染 區(qū)域,廢棄物 托盤,垃圾袋,.,.,.,.,.,.,.,生物安全柜內(nèi)感染性材料溢灑的處理,發(fā)生少量溢灑，用吸收紙巾立即處理，并浸滿消毒液的毛巾或紗布對生物安全柜及

11、其內(nèi)部的所有物品擦洗。消毒后更換手套，不論是摘下手套還是更換手套都要洗手。 若發(fā)生大量溢灑，液體通過柜前面或后面的格柵流到下面，柜內(nèi)所有物品都應進行表面消毒，并從柜中取出，關閉排水閥，將消毒液倒在工作臺面上，使液體通過格柵流到排水盤上。所有接觸溢出物品的材料都要進行消毒和/或高壓滅菌處理。,.,調(diào)整椅子高度，讓肩膀放松雙肘自然放于兩側(cè),人體工程學方面的考慮,肘和肩膀,.,常見說法和錯誤認識,噴燈火焰將嚴重影響安全柜內(nèi)的層流，可能造成氣溶膠的擴散 若噴燈的火苗很大，可能融化HEPA濾膜的粘結(jié)劑或燒濾膜 若無人看守，噴燈可能熄滅，在A類或A/B3類安全柜內(nèi)，泄露的氣體可能達到爆炸極限,“可以在安全

12、柜中使用噴燈.,替代方法：如電熱套或可拋的加熱環(huán)。,.,排風柜用于排出有害有毒的煙和氣溶膠，應該用對多種化學試劑惰性的材料構(gòu)成,“可以把生物安全柜當排風柜使用”,不能,常見說法和錯誤認識,.,常見說法和錯誤認識,錯! 只有在正確使用的情況下，才能保護操作人員、樣品和環(huán)境。在生物安全柜中工作，什么時候都需無菌操作,如果在生物安全柜中工作， 就不必很小心的操作,.,常見說法和錯誤認識,錯! 使用紫外燈可以減少安全柜不用時工作區(qū)域的污染。紫外線穿透力差，不能殺滅被灰塵或有機物保護的微生物,生物安全柜有紫外燈， 就不必消毒清潔工作區(qū)域,.,常見說法和錯誤認識,不能！ 工作區(qū)域放置大物體將影響氣流，降低

13、安全柜的效率 離心機、攪拌機等電器的風扇，可能破壞安全柜內(nèi)的氣流 離心機內(nèi)最好使用密封的安全杯，在安全柜內(nèi)裝樣和下樣,“離心機可以放在生物安全柜內(nèi)使用?,.,常見說法和錯誤認識,不一定。 對于遠離揮發(fā)性有害化學品的侵害， 對于遠離生物有害氣溶膠的侵害，則不是 根據(jù)實際工作的要求和研究內(nèi)容，確定使用B類或A類的生物安全柜,“B類安全柜和A類相比能提供更好的保護.”,.,常見說法和錯誤認識,某些應用，如研究生物毒素藥物的工作，為防止有害物質(zhì)逃逸，建議連續(xù)使用 連續(xù)使用將降低HEPA濾膜的壽命,”所有的生物安全柜應連續(xù)工作.”,.,常見說法和錯誤認識,假若房間密閉，沒有通風系統(tǒng)，沒有什么活動，循環(huán)式

14、的A類安全柜可能會把空氣凈度降至100級。不幸的是，一旦人員進入，將再次被污染。這樣做將降低HEPA濾膜的壽命,”如果讓安全柜連續(xù)工作，室內(nèi)空氣潔凈度將達到100級.”,.,常見說法和錯誤認識,不一定！ HEPA濾膜應在壓力差過大時更換（濾膜沾滿顆粒） 決定濾膜壽命的兩大因素： 房間內(nèi)空氣污染的程度 安全柜工作的時間 按時間表更換濾膜，而不考慮濾膜被污染的程度,可能造成不必要的浪費,” 應每年更換HEPA濾膜？.”,.,常見說法和錯誤認識,錯! I級安全柜適用于一級、二級和三級安全實驗室 級和級安全柜則適用于所有級別安全實驗室,I級安全柜只適用于一級安全實驗室 級安全柜只適用于二級安全實驗室 級安全柜只適用于三級安全實驗室,.,生物安全柜的選用,1.凡進行有害微生物和轉(zhuǎn)基因操作，均應使用生物安全柜，不可用凈化工作臺代替 2.根據(jù)工作性質(zhì)和防