1、2014年度工作總結(jié)，呼吸道病毒檢測的臨床應(yīng)用，枝江生物學(xué)，主要內(nèi)容，5，6，中國居民死亡原因，(姚建一等，中國實(shí)用醫(yī)學(xué)，2010)，流行病學(xué)，下呼吸道感染一直是威脅人類健康的主要疾病之一，發(fā)病率和死亡率都很高。20世紀(jì)90年代，傳染病占全球死亡人數(shù)的三分之一，其中呼吸道感染在各種感染中居首位(何立先等，2001)。在美國，每年仍有560萬人患有肺炎，110萬人需要住院治療。住院病人的死亡率高達(dá)12%，占死亡的第四位原因(Bandyopadhyaytet等人，2000年)；在英國，每年約有250，000名成年人被診斷患有社區(qū)獲得性肺炎，85，000名患者需要住院治療，死亡率為6%-15%。20

2、03年)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，中國每年至少有250萬肺炎患者。肺炎是最常見的下呼吸道感染之一，也是下呼吸道感染患者死亡的主要原因。據(jù)統(tǒng)計(jì)(CorderoE。艾拉。2002年)，約40%的住院患者死于肺炎，60%的住院患者直接或間接死于肺炎。社區(qū)獲得性肺炎的死亡率為5%-10%。2002)，而醫(yī)院獲得性肺炎的死亡率高達(dá)20%-50%(據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，世界上每年約有200萬5歲以下兒童死于社區(qū)獲得性肺炎，占5歲以下兒童死亡的19%。數(shù)據(jù)來源于美國疾病預(yù)防控制中心和中國疾病預(yù)防控制中心1985年至2008年的社區(qū)獲得性肺炎HAP醫(yī)院獲得性肺炎非典型病原體肺炎支原體、肺炎衣原體、軍團(tuán)菌肺炎病毒流感病毒、呼吸道

3、合胞病毒、副流感病毒、鼻病毒、腺病毒、人偏肺病毒和其他真菌性細(xì)菌肺炎鏈球菌等理化因素(由X線判斷，臨床價值小)小葉間質(zhì)、病因?qū)W、解剖學(xué)、疾病環(huán)境、肺炎、社區(qū)獲得性肺炎(CAP)-呼吸道病毒感染。幾項(xiàng)多中心研究的結(jié)果顯示，中國成人CAP患者的病毒檢出率為15%-34.9%，其中流感病毒居首位。其他病毒包括副流感病毒、鼻病毒、腺病毒、人偏肺病毒和呼吸道合胞病毒。5.8%的病毒檢測陽性患者可感染細(xì)菌或非典型病原體。1，1中國成人社區(qū)獲得性肺炎診斷和治療指南(2016年版)2RuuskanenO，LahtiE，JenningsLC，eta1ViralpneumoniaLancet，2011，377:

4、1264-12753 Garcia-Garcia ML，CalvoC，PozoF，Eta 1 spectrumofrespirator yuse in children with Community-acquired dneumoniabediatriinfectdisj，2012，3l: 808-8134陳謙等.病因?qū)W分析中國現(xiàn)代兒科雜志。2010 .病毒是嬰兒CAP的常見病原體，也是區(qū)分兒童和成人CAP病原學(xué)的一個重要特征。病毒病原體的重要性隨著年齡的增長而降低。呼吸道合胞病毒是引起CAP的第一種病毒病原體，其次是副流感病毒(1型、1型、2型)和流感病毒(1型、2型)。2-3其他包括腺病毒

5、、巨細(xì)胞病毒、鼻病毒、人偏肺病毒、EB病毒等。根據(jù)南京市的調(diào)查，1592份標(biāo)本中呼吸道病毒的總陽性率為40.9%，其中RSV最常見，占陽性病毒株的61.3%，其次是PIV-3和hMPV，分別為6.7和4.9。病原體混合感染率為6.7%。4CAP-呼吸道病毒-流行病學(xué)，不同年齡兒童社區(qū)獲得性肺炎病原體，2013年兒童社區(qū)獲得性肺炎管理指南修訂，臨床癥狀，中國成人社區(qū)獲得性肺炎診療指南(2016年版)，CAP病原學(xué)檢查，中國成人社區(qū)獲得性肺炎診療指南(2016年版)，2013年修訂的兒童社區(qū)獲得性肺炎管理指南，呼吸道病毒病原體診斷，中國成人社區(qū)獲得性肺炎診療指南(2016年版)， 臨床常見的診斷方

6、法有CAP-病毒、培養(yǎng)方法：基于見到“全病原體”的方法：分離培養(yǎng)免疫學(xué)方法：基于直接或間接見到“病原體成分蛋白”、膠體金、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、免疫熒光、化學(xué)發(fā)光等的方法。 分子生物學(xué)：基于“病原體成分核酸”的聚合酶鏈反應(yīng)、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)、實(shí)時熒光定量分析和核酸等溫?cái)U(kuò)增?，F(xiàn)有的方法不適于早期診斷。分離和培養(yǎng)：病毒很難分離和培養(yǎng)，常規(guī)培養(yǎng)需要1014天，這對早期臨床診斷意義不大。免疫抗原檢測結(jié)果受采樣時間、樣品來源和質(zhì)量的影響很大，微量病原體的早期檢測容易被遺漏。免疫抗體檢測血清特異性抗體的抗體滴度在急性期和恢復(fù)期變化4倍以上。-窗口期；不能產(chǎn)生抗體或延遲產(chǎn)生特定抗體將導(dǎo)致假陰性。病毒特異性基因

7、片段的分子檢測具有靈敏度高、特異性強(qiáng)和早期診斷價值。近年來，實(shí)時聚合酶鏈反應(yīng)等技術(shù)的發(fā)展不僅提高了檢測靈敏度，而且減少了操作步驟和污染機(jī)會。兒童社區(qū)獲得性肺炎管理指南2013年修訂，2016年成人CAP:病毒檢測方法及評價，呼吸道病毒檢測試劑盒，呼吸道病毒檢測(根據(jù)疾病自由組合)流感病毒呼吸道合胞病毒副流感病毒鼻病毒腺病毒人偏肺病毒技術(shù)原理：熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)可以直接檢測特定病原體的DNA，送檢，送檢，一次送檢，同時檢測多種病毒熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)，2小時報(bào)告，樣本采集， 在采集痰標(biāo)本前，受檢者應(yīng)刷牙漱口，清除口腔中的大部分外來細(xì)菌，并指導(dǎo)受檢者在無菌痰杯中咳出氣管深處的痰，痰量不小于1

8、毫升，最好是晨痰。 樣品應(yīng)立即密封檢查。痰液、鼻咽、氣管吸出物及其他下呼吸道標(biāo)本、口咽拭子，用拭子適度擦拭咽后壁及兩側(cè)扁桃體，并避免觸及舌頭；迅速將拭子浸入樣本收集管中，丟棄尾部，擰緊管蓋并密封以防止其干燥。鼻拭子將拭子輕輕插入鼻道中的鼻子和上顎，停止一分鐘后慢慢旋轉(zhuǎn)，用相同的拭子擦拭兩邊的鼻孔。迅速將拭子浸入樣本收集管中，丟棄尾部，擰緊管蓋并密封以防止其干燥。熒光聚合酶鏈反應(yīng)方法具有靈敏度高、特異性高、操作簡單、封閉管反應(yīng)和減少交叉污染的優(yōu)點(diǎn)。是快速診斷呼吸道病毒感染的首選方法，對社區(qū)獲得性肺炎的早期診斷具有重要意義。呼吸道病毒熒光聚合酶鏈反應(yīng)檢測，臨床意義重大，是唯一有價值的早期診斷方法。2016CAP指南填補(bǔ)了在抗體檢測窗口中無法檢測病原體的空白。目前常用的方法是回顧性的，這不能幫助臨床選擇治療藥物來快速確定患者的呼吸道疾病是否源于病毒，從而及時確定合適的治療方案，因?yàn)榭共《舅幬镌诨颊叱霈F(xiàn)感染癥狀的前2天最有效。鑒別診斷可以指導(dǎo)臨床合理使用抗菌和抗病毒藥物。，VervloetLA，MarguetC，CamargoSpainfectionBy霉形體肺炎AnDitsIMPOrtantonicalacindchildhoodCommunity-acquiddpneumoniasJbrazjinFectdis，