1、第8章吸收光譜法,基于物質(zhì)對(duì)的選擇性吸收而建立起來的分析測定方法原子吸收光譜法,紅外吸收光譜法,紫外-可見吸收光譜法,分子吸收光譜法,核磁共振波譜法,紫外可見吸收光譜特點(diǎn)：靈敏度較高最低測量濃度可達(dá)10-610-5mol/L可測10-7-10-4gmL-1的微量組分。具有一定的選擇性準(zhǔn)確度較高，相對(duì)誤差為1%3%儀器簡單、操作簡便、測定速度快、應(yīng)用廣泛。,8.1吸收光譜,8.1.1光的基本性質(zhì)電磁波譜,光的基本性質(zhì)光由一個(gè)個(gè)的光子組成，每個(gè)光子具有的能量和質(zhì)量E=h，E=mc2h-普朗克常數(shù)6.6310-34m2kgs-1-頻率（每秒鐘光波振動(dòng)的周數(shù)），周/秒或HzC-光速，在真空中C=310

2、10cm/s=c/-光波移動(dòng)一周的距離，cm、m、nm、1cm=104m=107nm=108光是電磁波，電磁波是一種橫波,8.1.2分子吸收光譜的產(chǎn)生,當(dāng)用頻率為的電磁波照射分子，而該分子的較高能級(jí)與較低能級(jí)之差E恰好等于該電磁波的能量h時(shí)，即有E=h（h為普朗克常數(shù)）在微觀上出現(xiàn)分子由較低的能級(jí)躍遷到較高的能級(jí)；在宏觀上則透射光的強(qiáng)度變小。,電子光譜是由分子中的價(jià)電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的。有機(jī)化合物的價(jià)電子包括成鍵電子、成鍵電子和非鍵電子（以n表示）。分子的空軌道包括反鍵*軌道和反鍵*軌道，因此，可能的躍遷為*、*、n*n*等各種電子躍遷相應(yīng)的吸收峰和能量示意圖,能量,*反鍵軌道,*反鍵軌道,n

3、非鍵軌道城鍵軌道成鍵軌道,200,300,400,/nm,*,*,*,n*,*,n*,無機(jī)化合物的紫外可見吸收光譜無機(jī)化合物的吸收帶主要由電荷遷移和配位場躍遷（即dd躍遷和ff躍遷）產(chǎn)生。,8.1.3物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收與物質(zhì)顏色的關(guān)系可見光波長范圍：400nm800nm物質(zhì)顏色與吸收光顏色的互補(bǔ)關(guān)系白光（復(fù)合光）、單色光、互補(bǔ)色,560580400450,580600450480,600650480490,650780490500,常用術(shù)語,(1)吸收曲線,（2)生色團(tuán)和助色團(tuán)生色團(tuán)是指分子中可以吸收光子而產(chǎn)生電子躍遷的原子基團(tuán)。但是，人們通常將能吸收紫外、可見光的原子團(tuán)或結(jié)構(gòu)定義為生色團(tuán)。

4、,助色團(tuán)指帶有非鍵電子對(duì)的基團(tuán)，如-OH、-OR、-NHR、-SH、-Cl、-Br、-I等，不吸收大于200nm的光，但與生色團(tuán)相連時(shí)，會(huì)使生色團(tuán)的吸收峰向長波方向移動(dòng)，并且增加其吸光度。（3）紅移與藍(lán)移（紫移）(Redshiftorblueshift)某些有機(jī)化合物經(jīng)取代反應(yīng)引入含有未共享電子對(duì)的基團(tuán)（-OH、-OR、-NH2、-SH、-Cl、-Br、-SR、-NR2）之后，吸收峰的波長將向長波方向移動(dòng)，稱為紅移效應(yīng)。這種會(huì)使某化合物的最大吸收波長向長波方向移動(dòng)的基團(tuán)稱為向紅基團(tuán)。在某些生色團(tuán)如羰基的碳原子一端引入一些取代基之后，吸收峰的波長會(huì)向短波方向移動(dòng)，稱為藍(lán)移（紫移）效應(yīng)。這些會(huì)使某

5、化合物的最大吸收波長向短波方向移動(dòng)的基團(tuán)（如-CH2、-CH2CH3、-OCOCH3）稱為向藍(lán)（紫）基團(tuán)。,溶劑的選擇,1.同一濃度的有色溶液對(duì)不同波長的光有不同的吸光度;2.對(duì)于同一有色溶液，濃度愈大，吸光度也愈大；3.對(duì)于同一物質(zhì)，不論濃度大小如何，最大吸收峰所對(duì)應(yīng)的波長(最大吸收波長max)不變.并且曲線的形狀也完全相同。,8.1.4定量分析,吸收曲線：物質(zhì)在不同波長下吸收光的強(qiáng)度大小，A關(guān)系,光吸收定律朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律吸光光度法的理論依據(jù)，研究光吸收的最基本定律,I0=Ir+It+Ia,I0=It+Ia,T=It/I0,T:透射比或透光度A=lg(I0/It)

6、lg(1/T),A:吸光度,朗伯定律（1760年）：光吸收與溶液層厚度成正比比爾定律（1852年）：光吸收與溶液濃度成正比,定量依據(jù),當(dāng)一束平行單色光垂直照射到稀溶液時(shí)，溶液的吸光度與溶液的濃度及光程（溶液的厚度）成正比關(guān)系朗伯比爾定律光吸收定律數(shù)學(xué)表達(dá)：Alg(1/T)=klc其中，A:吸光度，T:透射比，k:比例常數(shù)，l:溶液厚度，c:溶液濃度,注意：平行單色光均相介質(zhì)無發(fā)射、散射或光化學(xué)反應(yīng),摩爾吸光系數(shù)e,吸收系數(shù),A=elc,A=klc,c:mol/L,表示物質(zhì)的濃度為1mol/L,液層厚度為1cm時(shí)溶液的吸光度。單位：(Lmol-1cm-1)是吸光物質(zhì)吸光能力的量度，可以用的大小估

7、計(jì)定量方法的靈敏度,越大，靈敏度越高。與入射光的波長、吸光物質(zhì)的性質(zhì)和溫度等有關(guān)，與吸光物質(zhì)的濃度、光程無關(guān),c:g/L,A=alca:吸光系數(shù),定量方法（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）通常用標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行測定。具體方法為:C12345A,圖9-4標(biāo)準(zhǔn)溶液系列配制,有時(shí)標(biāo)準(zhǔn)曲線不通過原點(diǎn).可能的原因是：參比溶液選擇不當(dāng)吸收池厚度不等吸收池位置不妥，吸收池透光面不清潔等是系統(tǒng)誤差，找出原因，加以避免,校正曲線,偏離朗伯-比爾定律的因素在吸光光度分析中，經(jīng)常出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不呈直線的情況，特別是當(dāng)吸光物質(zhì)濃度較高時(shí)，明顯地看到通過原點(diǎn)向濃度軸彎曲的現(xiàn)象（吸光度軸彎曲)。這種情況稱為偏離朗伯-比爾定律。若在曲線彎曲部分進(jìn)行

8、定量，將會(huì)引起較大的誤差。偏離朗伯比爾定律的原因主要是儀器或溶液的實(shí)際條件與朗伯-比爾定律所要求的理想條件不一致,非單色光引起的偏移物理化學(xué)因素：非均勻介質(zhì)及化學(xué)反應(yīng),對(duì)朗伯-比爾定律的偏移,（1）儀器的影響朗伯-比爾定律只適用于單色光由于單色器色散能力的限制和出口狹縫需要保持一定的寬度，所以目前各種分光光度計(jì)得到的入射光實(shí)際上都是具有某一波段的復(fù)合光。由于物質(zhì)對(duì)不同波長的光的吸收程度的不同，因而導(dǎo)致對(duì)朗伯比爾定律的偏離,克服非單色光引起的偏離的措施使用比較好的單色器，從而獲得純度較高的“單色光”人射光波長選擇在被測物質(zhì)的最大吸收處，保證測定有較高的靈敏度測定時(shí)應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)臐舛确秶?，使吸光度讀

9、數(shù)在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi),復(fù)合光由l1和l2組成，對(duì)于濃度不同的溶液a和b,引起的吸光度的偏差不一樣，濃度大，復(fù)合光引起的誤差大，故在高濃度時(shí)線性關(guān)系向下彎曲。,（2）樣品性質(zhì)的影響朗伯比爾定律適用于稀溶液,溶液中的吸光物質(zhì)常因解離、締合、形成新化合物或互變異構(gòu)等化學(xué)變化而改變其濃度，因而導(dǎo)致偏離朗伯比爾定律。（A）解離-大部分有機(jī)酸堿的酸式、堿式對(duì)光有不同的吸收性質(zhì)，溶液的酸度不同，酸(堿)解離程度不同，導(dǎo)致酸式與堿式的比例改變，使溶液的吸光度發(fā)生改變。（B）配位-顯色劑與金屬離子生成的是多級(jí)配合物，且各級(jí)配合物對(duì)光的吸收性質(zhì)不同，例如在Fe()與SCN-的配合物中，F(xiàn)e(SCN)3顏色最深

10、，F(xiàn)e(SCN)2+顏色最淺，故SCN-濃度越大，溶液顏色越深（C）締合-例如在酸性條件下，CrO42-會(huì)締合生成Cr2O72-，而它們對(duì)光的吸收有很大的不同。Cr2O72-+H2O2HCrO4-2H+2CrO42-,介質(zhì)不均勻引起的偏離朗伯比爾定律要求吸光物質(zhì)的溶液是均勻的如果被測溶液不均勻，是膠體溶液、乳濁液或懸浮液時(shí)，入射光通過溶液后，除一部分被試液吸收外，還有一部分因散射現(xiàn)象而損失，使透射比減少，因而實(shí)測吸光度增加，便標(biāo)準(zhǔn)曲線偏離直線向吸光度軸彎曲。故在光度法中應(yīng)避免溶液產(chǎn)生膠體或混濁,要求：a.選擇性好b.靈敏度高(104)c.產(chǎn)物的化學(xué)組成穩(wěn)定d.化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定e.反應(yīng)和產(chǎn)物有明顯的

11、顏色差別(l60nm),沒有顏色的化合物，需要通過適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)定量生成有色化合物再測定顯色反應(yīng),1、分光光度計(jì)的組成,8.2分光光度計(jì),光源,單色器,吸收室,檢測器,顯示,(1)光源在紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。,可見光區(qū)：鎢燈作為光源，其輻射波長范圍在3202500nm。紫外區(qū)：氫、氘燈。發(fā)射185375nm的連續(xù)光譜。,常用光源,(2)單色器,將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成單色光并可從中選出一任波長單色光的光學(xué)系統(tǒng)。入射狹縫：光源的光由此進(jìn)入單色器；準(zhǔn)光裝置：透鏡或返射鏡使入射光成為平行光束；色散元件：將復(fù)合光分解成單色光；棱鏡或光柵；,

12、聚焦裝置：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色光聚焦至出射狹縫；出射狹縫。,3.吸收池,吸收池（比色皿）和相應(yīng)的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池兩種。在紫外區(qū)須采用石英池，可見區(qū)一般用玻璃池。4.檢測器利用光電效應(yīng)將透過吸收池的光信號(hào)變成可測的電信號(hào)，常用的有光電管、光電倍增管、光二級(jí)管陣列。,5.結(jié)果顯示記錄系統(tǒng)檢流計(jì)、數(shù)字顯示、微機(jī)進(jìn)行儀器自動(dòng)控制和結(jié)果處理,分為紅敏和紫敏，陰極表面涂銀和氧化銫為紅敏，適用6251000nm波長；陰極表面涂銻和銫為紫敏，適用200625nm波長,分光光度計(jì)的類型,1.單光束簡單，價(jià)廉，適于在給定波長處測量吸光度或透光度，一般不能作全波段光譜掃描，要求光源

13、和檢測器具有很高的穩(wěn)定性。,2.雙光束可消除光源不穩(wěn)定、檢測器靈敏度變化等因素的影響，,3.雙波長將不同波長的兩束單色光(1、2)快束交替通過同一吸收池而后到達(dá)檢測器。產(chǎn)生交流信號(hào)。無需參比池。=12nm。兩波長同時(shí)掃描即可獲得導(dǎo)數(shù)光譜。,8.3顯色反應(yīng)及其影響因素8.3.1顯色反應(yīng)按顯色反應(yīng)的類型來分，主要有氧化還原反應(yīng)2Mn2+5S2O82-+8H2O=2MnO4-+10SO42-+16H+配位反應(yīng)Fe2+3phen=Fe(phen)32+,8.3.2顯色劑（1)無機(jī)顯色劑不多，因?yàn)樯傻呐浜衔锊环€(wěn)定，靈敏度和選擇性也不高。如用KSCN顯色測鐵、鉬、鎢和鈮；用鉬酸銨顯色測硅、磷和釩;用H2

14、O2顯色測鈦等。,(2)有機(jī)顯色劑A、磺基水楊酸OO型螯合劑，可與很多高價(jià)金屬離子生成穩(wěn)定的螯合物，主要用于測Fe3+。B、丁二酮肟NN型螯合顯色劑，用于測定Ni2+。C、1，10-鄰二氮菲NN型螯合顯色劑，測微量Fe2+。D、二苯硫腙含S顯色劑，萃取光度測定Cu2+，Pb2+，Zn2+，Cd2+，Hg2+等。E、偶氮胂(鈾試劑)偶氮類螯合劑，強(qiáng)酸性溶液中測Th(),Zr()，U()等；在弱酸性溶液中測稀土金屬離子。F、鉻天青S三苯甲烷類顯色劑，測定Al3+G、結(jié)晶紫三苯甲烷類堿性染料，測定Tl3+。,8.3.3多元絡(luò)合物多元配合物是由三種或三種以上的組分所形成的配合物。重要的三元配合物類型：

15、A、三元混配配合物金屬離子與一種配合劑形成未飽和配合物，然后與另一種絡(luò)合劑結(jié)合，形成三元混合配合物，簡稱三元混配配合物。例如；V(V)，H2O2和吡啶偶氮間苯二酚(PAR)形成1:1:1的有色絡(luò)合物，可用于釩的測定，其靈敏度高，選擇性好,B、離子締合物金屬離子先與配合劑生成配陰離子或配陽離子，再與帶反電荷的離子生成離子締合物。主要用于萃取光度法。如：Ag+與1，10-鄰二氮菲形成陽離子，再與溴鄰苯三酚紅的陰離子形成深藍(lán)色的離子締合物。用F-、H2O2、EDTA作掩蔽劑，可測定微量Ag+。作為離子締合物的陽離子，有堿性染料、1，10-鄰二氮菲及其衍生物、安替比林及其衍生物、氯化四苯砷(或磷、銻)

16、等;作為陰離子，有X-，SCN-，ClO4-，無機(jī)雜多酸和某些酸性染料等,C、金屬離子-配位劑-表面活性劑體系金屬離子與顯色劑反應(yīng)時(shí)，加入某些表面活性劑，可以形成膠束化合物，它們的吸收峰向長波方向移動(dòng)(紅移)，而測定的靈敏度顯著提高。例如，稀土元素、二甲酚橙及溴化十六烷基吡啶反應(yīng)，生成三元絡(luò)合物，在pH89時(shí)呈藍(lán)紫色，用于痕量稀土元素總量的測定,顯色反應(yīng)的選擇A、靈敏度高，有色物質(zhì)的應(yīng)大于104。B、選擇性好，干擾少，或干擾容易消除;有色化合物的組成恒定，符合一定的化學(xué)式。C、有色化合物的組成恒定，符合一定的化學(xué)式?；瘜W(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，至少保證在測量過程中溶液的吸光度基本恒定。這就要求有色化合物不容

17、易受外界環(huán)境條件的影響。D、有色化合物與顯色劑之間的顏色差別要大，即顯色劑對(duì)光的吸收與有色化合物的吸收有明顯區(qū)別，要求兩者的吸收峰波長之差(稱為對(duì)比度)大于60nm,8.3.4影響顯色反應(yīng)的選因素溶液酸度顯色劑用量顯色時(shí)間顯色溫度,（1）溶液的酸度M+HR=MR+H+*影響顯色劑的平衡濃度和顏色*影響被測金屬離子的存在狀態(tài)*影響配合物的組成Fe3+與磺基水楊酸(Sal2-)的反應(yīng),pH=1.82.5Fe3Sal2Fe（Sal）紫紅色pH=48Fe32Sal2Fe（Sal）2紫褐色pH=811.5Fe33Sal2Fe（Sal）33黃色pH12配合物被破壞，生成Fe（OH）3沉淀,（2）顯色劑的用

18、量M(被測組分)+R(顯色劑)=MR(有色絡(luò)合物)為使顯色反應(yīng)進(jìn)行完全，需加入過量的顯色劑。但顯色劑不是越多越好。（3）顯色反應(yīng)時(shí)間有些顯色反應(yīng)瞬間完成，溶液顏色很快達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)，并在較長時(shí)間內(nèi)保持不變;有些顯色反應(yīng)雖能迅速完成，但有色絡(luò)合物的顏色很快開始褪色;有些顯色反應(yīng)進(jìn)行緩慢，溶液顏色需經(jīng)一段時(shí)間后才穩(wěn)定。制作吸光度-時(shí)間曲線確定適宜時(shí)間。,（4）顯色反應(yīng)溫度顯色反應(yīng)大多在室溫下進(jìn)行。但是，有些顯色反應(yīng)必需加熱至一定溫度完成。,（5）共存離子的干擾及消除a.控制溶液酸度b.加入掩蔽劑選取的條件是掩蔽劑不與待測離子作用，掩蔽劑以及它與干擾物質(zhì)形成的絡(luò)合物的顏色應(yīng)不干擾待測離子的測定。c.利

19、用氧化還原反應(yīng)，改變干擾離子的價(jià)態(tài)。d.用參比溶液消除顯色劑和某些共存有色離子的干擾。e.選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩLf.分離以上方法均不奏效時(shí)，采用預(yù)先分離的方法,8.4定量分析條件的選擇,11.4.4.1測量條件的選擇（1）入射光波長的選擇,選擇原則：“吸收最大，干擾最小”,靈敏度,選擇性,（2）吸光度讀數(shù)范圍的選擇一般應(yīng)控制標(biāo)準(zhǔn)溶液和被測試液的吸光度在0.151.0范圍內(nèi),=,T,吸光度測量的誤差在吸光光度分析中，儀器測量不準(zhǔn)確也是誤差的主要來源。任何光度計(jì)都有一定的測量誤差。這些誤差可能來源于光源不穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)條件偶然變動(dòng)，讀數(shù)不準(zhǔn)確等。在光度計(jì)中，透射比的標(biāo)尺刻度均勻。吸光度標(biāo)尺刻度不均勻。對(duì)于同一

20、儀器，讀數(shù)的波動(dòng)對(duì)透射比為一定值；而對(duì)吸光度讀數(shù)波動(dòng)則不再為定值,吸光度越大，讀數(shù)波動(dòng)所引起的吸光度誤差也越大，透射比很小或很大時(shí)，濃度測量誤差都較大，即光度測量最好選吸光度讀數(shù)在刻度尺的中間而不落兩端。待測溶液的透射比T在70%10%之間，或使吸光度A在0.151.0之間，才能保證濃度測量的相對(duì)誤差較小，約為1.4%2.2%。當(dāng)A=0.434(或透射比T=36.8%)時(shí)，測量的相對(duì)誤差最小,（3）參比溶液的選擇利用參比溶液來調(diào)節(jié)儀器的零點(diǎn)消除由吸收池壁及溶劑對(duì)入射光的反射和吸收帶來的誤差扣除干擾A=lgI0/IlgI參比/I試液,試劑參比試樣參比溶劑參比,a、試液及顯色劑均無色，用溶劑作參比

21、溶液。b、顯色劑有顏色，可選擇不加試樣溶液的試劑作參比溶液。c、顯色劑為無色，被測試液中存在其他有色離子，用不加顯色劑的被測試液作參比溶液。d、顯色劑和試液均有顏色，可將一份試液加入適當(dāng)掩蔽劑，將被測組分掩蔽起來，使之不再與顯色劑作用，而顯色劑及其他試劑均按試液測定方法加入，以此作為參比溶液，這樣就可以消除顯色劑和一些共存組分的干擾e、改變加入試劑的順序，使被測組分不發(fā)生顯色反應(yīng)，可以此溶液作為參比溶液消除干擾。,干擾及其消除方法a.控制溶液酸度b.加入掩蔽劑選取的條件是掩蔽劑不與待測離子作用，掩蔽劑以及它與干擾物質(zhì)形成的絡(luò)合物的顏色應(yīng)不干擾待測離子的測定。c.利用氧化還原反應(yīng)，改變干擾離子的

22、價(jià)態(tài)。d.用參比溶液消除顯色劑和某些共存有色離子的干擾。e.選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩLf.以上方法均不奏效時(shí)，采用預(yù)先分離的方法,8.5其他定量分析法,(1)示差分光度法吸光光度法一般僅適用于微量組分的測定，當(dāng)待測定組分濃度過高或過低，會(huì)引起很大的測量誤差，導(dǎo)致準(zhǔn)確度降低。示差吸光光度法可克服這一缺點(diǎn)。示差吸光光度法用一個(gè)比試液濃度稍低的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比溶液試液濃度Cx,參比溶液濃度Cs,CxCs,I0,Ix,Is普通分光光度法:Ts=Is/I0=10-bcs,Tx=Ix/I0=10-bcx示差吸光光度法:Tr=Ix/Is=Ix/I0Ix/I0=10-b(cx-cs)Ar=Ax-As=A=b(Cx-Cs)=

23、bC,普通法：Ts=10%,Tx=5%示差法：Tr=100%,Tr,x=50%,差示光度法標(biāo)尺擴(kuò)大原理圖,（2）光度滴定法,能測出化學(xué)計(jì)量點(diǎn)附近溶液顏色的微弱變化，并且由多次測量的數(shù)據(jù)來確定終點(diǎn)，因而有較高的精密度。分光光度滴定只有參與滴定反應(yīng)的有色雜質(zhì)才干擾測定，如果有色雜質(zhì)不參與滴定，盡管它對(duì)測定波長光有吸收，也不會(huì)影響測定結(jié)果，因此光度滴定法有較好的選擇性。在滴定劑、待測物質(zhì)或反應(yīng)產(chǎn)物中，只要有一種對(duì)紫外及可見光有吸收，就可以進(jìn)行光度滴定，這樣就降低了對(duì)滴定反應(yīng)的要求，使滴定分析獲得更廣泛應(yīng)用。,幾種典型光度滴定曲線,（a)待測物質(zhì)對(duì)光吸收，滴定劑和產(chǎn)物都不吸收。(b)滴定劑有吸收，待測

24、物質(zhì)和產(chǎn)物都不吸收。產(chǎn)物有吸收，待測物質(zhì)和滴定劑都不吸收。待測物質(zhì)和滴定劑都有吸收，產(chǎn)物不吸收。(e)滴定劑和產(chǎn)物有吸收，待測物質(zhì)不吸收。(f)待測物質(zhì)和產(chǎn)物都有吸收，而滴定劑不吸收,幾種典型光度滴定曲線,（3）多組分分析,（4）雙波長分光光度法使兩束不同波長的單色光以一定的時(shí)間間隔交替地照射同一吸收池，測量并記錄兩者吸光度的差值。這樣就可以從分析波長的信號(hào)中扣除來自參比波長的信號(hào)，消除各種干擾，得待測組分的含量。分析方法的靈敏度、選擇性及測量的精密度高。被廣泛用于環(huán)境試樣及生物試樣的分析。,原理：,設(shè)在兩個(gè)波長處都有背景吸收，吸光度為Ab，并且兩道單色光的強(qiáng)度都相等于I0，則在兩個(gè)波長位置，有下列關(guān)系：,1和2一般相差很少，Ab可視為相等，固有：,A與吸光物質(zhì)濃度成正比。這是定量的理論依據(jù)。只用一個(gè)吸收池，以試液本身對(duì)某一波長的光的吸光度為