1、單一溶劑的極性順序為（從小到大）： 石油醚環(huán)己烷四氯化碳三氯乙烯苯甲苯二氯甲烷氯仿乙醚乙酸乙酯乙酸甲酯丙酮正丙醇甲醇吡啶乙酸混合溶劑的極性順序（從小到大）： 苯氯仿（1+1） 環(huán)己烷乙酸乙酯（8+2）氯仿丙酮（95+5）苯丙酮（9+1）苯乙酸乙酯（8+2）氯仿乙醚（9+1）苯甲醇（95+5） 苯乙醚（6+4）環(huán)己烷乙酸乙酯（1+1）氯仿乙醚（8+2）氯仿甲醇（99+1）苯甲醇（9+1）氯仿丙酮（85+15）苯乙醚（4+6）苯乙酸乙酯（1+1）氯仿甲醇（95+5）氯仿丙酮（7+3）苯乙酸乙酯（3+7）苯乙醚（1+9）乙醚甲醇（99+1）乙酸乙酯甲醇（99+1）苯丙酮（1+1）氯仿甲醇（9+1）1

2、薄層板的選擇和鋪制（1）薄板的選擇 最常用的薄板是玻璃板，其大小選擇：根據(jù)目的、樣品量、組分的數(shù)目多少和展開的方式等綜合而定。小量制備：待分離組分總量在0.51g左右，可采用400mm350mm的薄板13塊即可。預試或定性分析：用單項展開時，多用載玻片（200mm50mm，200mm25mm或75mm25mm）。雙向展開或小量制備時，一般采用200mm200mm或400mm200mm的大板。玻璃板要求：平整、光滑、干凈。（2）制板方法：干鋪法和濕鋪法 干鋪法概念：就是將吸附劑顆粒或粉末均勻地平鋪在玻璃板上的方法，所制得薄板稱為干板。吸附劑粒度要求：一般為150200目左右。涂鋪方法：把玻璃板平

3、放在平臺上或實驗臺面上，先將吸附劑大致平攤在玻板上，然后兩手握住一根帶有兩個套圈的粗玻璃棒，按照圖所示方向推動，把多余的吸附劑除去，便可得到一塊均勻的薄板。玻棒套圈可以用塑料管或膠布等制成。兩個套圈的厚度和距離，便是薄層的厚度和寬度。濕鋪法 概念：將溶劑或含粘合劑的溶劑和吸附劑按一定的比例，一般硅膠為30g/(7590) ml，氧化鋁為25g/50ml，加到一起，調成糊狀，然后再將糊狀物均勻的鋪在薄板上的方法。濕鋪法的操作步驟： 調糊 硅膠G、氧化鋁G、硅膠GF254或不含粘合劑的吸附劑如硅膠H、氧化鋁H的充分調勻，均是取1份吸附劑，加入23份水。用CMC作粘合劑：0.5%羧甲基纖維素鈉溶液1

4、00ml, 加硅膠H（200250目）30g或氧化鋁50g，充分調勻后，即可涂鋪。用淀粉作粘合劑時：取硅膠H（200250目）0.95份，加0.05份淀粉（可溶性淀粉不能用），加水2-3份，將容器放在沸水浴上加熱，不停攪拌下煮沸5分鐘，直到獲得最大的粘稠度，再加水1份，再煮1-2min，調勻，冷后涂鋪。纖維素粉作粘合劑：纖維素粉1份，加水（或丙酮）56份調成糊狀后涂鋪。聚酰胺作粘合劑：聚酰胺1g，加6mL 85%甲酸，攪拌溶解后，再加70%乙醇3mL，調勻后，便可涂鋪。薄板的后處理：晾干后，活化。硅膠板一般在105,最高不超過128 ，烘箱中烘烤半小時，冷卻后取出在干燥器中保存?zhèn)溆?。作為分配?/p>

5、譜的硅膠薄層板無需活化，在室溫下放置12h24h后即可使用；氧化鋁板200220活化4h，得活性為級的板。150160 活化4h，得活性為級的板。柱色譜（一）吸附劑與洗脫劑 根據(jù)待分離組分的結構和性質選擇合適的吸附劑和洗脫劑是分離成敗的關鍵。1吸附劑的要求對樣品組分和洗脫劑都不會發(fā)生任何化學反應，在洗脫劑中也不會溶解。對待分離組分能夠進行可逆的吸附，同時具有足夠的吸附力，使組分在固定相與流動相之間能最快地達到平衡。顆粒形狀均勻，大小適當，以保證洗脫劑能夠以一定的流速（一般為1.5mLmin-1）通過色譜柱。材料易得，價格便宜而且是無色的，以便于觀察。2、常用吸附劑的種類：硅膠、氧化鋁、聚酰胺、

6、硅酸鎂、滑石粉、氧化鈣（鎂）、淀粉、纖維素、蔗糖和活性炭等。3、幾種常見吸附劑的特性（1）氧化鋁：市售的層析用氧化鋁有堿性、中性和酸性三種類型，粒度規(guī)格大多為100150目。堿性氧化鋁（pH9-10）：適用于堿性物質（如胺、生物堿）和對酸敏感的樣品（如縮醛、糖苷等），也適用于烴類、甾體化合物等中性物質的分離。但這種吸附劑能引起被吸附的醛、酮的縮合。酯和內酯的水解、醇羥基的脫水、乙酰糖的去乙酰化、維生素A和K等的破壞等不良副反應。所以，這些化合物不宜用堿性氧化鋁分離。酸性氧化鋁（pH3.5-4.5）：適用于酸性物質如有機酸、氨基酸等以及色素和醛類化合物的分離。中性氧化鋁（pH7-7.5）：適用于

7、醛、酮、醌、苷和硝基化合物以及在堿性介質中不穩(wěn)定的物質如酯、內酯等的分離，也可以用來分離弱的有機酸和堿等。（2）硅膠：硅膠是硅酸的部分脫水后的產物，其成分是SiO2xH2O。柱色譜用硅膠一般不含粘合劑。適用范圍：非極性和極性化合物，適用于芳香油、萜類、甾體、生物堿、強心甙、蒽醌類、酸性、酚性化合物、磷脂類、脂肪酸、氨基酸，以及一系列合成產品如有機金屬化合物等。（3）聚酰胺：色譜用聚酰胺主要包括尼龍6（聚己內酰胺）和尼龍66（聚己二酰己二胺）兩種，分子量一般在1600020000，其親水性和親脂性均較好，因此既可分離水溶性成份，也可分離脂溶性成分?？扇苡跐恹}酸、甲酸及熱的乙酸、甲酰胺和二甲基甲酰

8、胺中；微溶于乙酸和苯酚等；不溶于醇、氯仿、丙酮、乙醚、苯等；對堿穩(wěn)定，對強酸可水解。分離對象：能與聚酰胺形成氫鍵的化合物，如酚類、酸類、醌類、硝基化合物及含羥基、氨基、亞氨基的化合物及腈和醛等類化合物。聚酰胺在水中吸附能力的規(guī)律：形成氫鍵的基團(如：酚經基、按基、酪基、硝基等)越多，則吸附力越強。如：丁二酸丁酸（4）硅酸鎂：中性硅酸鎂的吸附特性介于氧化鋁和硅膠之間，主要用于分離甾體化合物和某些糖類衍生物。為了得到中性硅酸鎂，用前先用稀鹽酸，然后用醋酸洗滌，最后用甲醇和蒸餾水徹底洗滌至中性。3吸附劑的活度及其調節(jié)吸附劑的活性取決于它們含水量的多少，活性最強的吸附劑含有最少的水。吸附劑的活性一般分為五級，分別用、和表示。數(shù)字越大，表示活性越小，一般常用。向吸附劑中添加一定的水，可以降低其活性。反之，如果用加熱處理的方法除去吸附劑中的部分水，則可以增加其活性，后者稱為吸附劑的活化。色譜柱的選擇：有玻璃柱和不銹鋼柱兩種；徑長比一般為1:101:20，特例1:40；內壁光滑均勻，上下