1、超敏反應/變態(tài)反應 Hypersensitivity/Allergy,定義：機體接觸到某種抗原并且致敏后，再次受到相同抗原刺激時，出現(xiàn)生理功能紊亂或組織細胞損傷的異常適應性免疫應答。 變應原(Allergen):引起超敏反應的抗原,超敏反應分為四型 （依發(fā)生機制和臨床特點）： 型超敏反應 (速發(fā)型超敏反應) 型超敏反應 (細胞溶解型或細胞毒型) 型超敏反應 (免疫復合物型或血管炎型) 型超敏反應 (遲發(fā)型超敏反應),型超敏反應 特點： 發(fā)生快，恢復快； 常引起生理功能紊亂，一般無組織損傷； 由IgE介導，肥大細胞和嗜堿性粒細胞參與 有明顯的個體差異和遺傳背景。,型超敏反應,一.參與型超敏反應的

2、成分 (一)變應原 藥物或化學物質(zhì) - 青霉素、磺胺等 吸入性變應原 - 花粉、屋塵(塵螨、皮屑、真菌的孢子等 食物變應原 - 魚、蝦、肉、蛋、牛奶等 接觸性變應原-工業(yè)產(chǎn)品及合成物,型超敏反應,(二)抗體 IgE (三)細胞 肥大細胞和嗜堿性粒細胞 IgE Fc受體 嗜酸性粒細胞,預先存在的介質(zhì)（脫顆粒）,組織胺(histamine) 趨化因子 激肽原酶 蛋白水解酶,白三烯（Leucotrienes，LTs）,前列腺素（PGD2）,即 刻 早 期,晚 期,I 型超敏反應發(fā)生的機制,血小板活化因子 （Platelet activity factor，PAF）,新合成的介質(zhì),型超敏反應的常見疾病

3、 （一）過敏性休克 藥物過敏性休克 血清過敏性休克 （二）呼吸道過敏反應 過敏性鼻炎(枯草熱)、支氣管哮喘 （三）消化道過敏反應 （四）皮膚過敏反應 蕁麻疹、濕疹、血管神經(jīng)性水腫。,蕁麻疹,濕 疹,結(jié)膜炎,哮喘病,I型超敏反應免疫學檢測項目,皮膚試驗,實驗原理： 變應原 致敏者皮膚 Ag+IgE （M、B),皮膚挑刺、劃痕,皮內(nèi)注射,釋放生物活性介質(zhì),20-30m局部皮膚出現(xiàn)紅暈、紅斑、風團 陽性,皮膚試驗,皮內(nèi)試驗方法 皮膚消毒變應原提取液注入前臂內(nèi)側(cè)皮內(nèi)（0.01-0.02ml）2-3mm的皮丘兩種間距2.2-5.0cm 15-25分鐘觀察結(jié)果 陰性對照-生理鹽水 陽性對照-鹽酸組胺,皮膚

4、試驗,假陽性原因 變應原稀釋液偏酸或偏堿 患者有皮膚劃痕癥 抗原不純和被污染 抗原量注射過多 假陰性原因 變應原抗原性喪失或濃度過低 患者皮膚反應較低 受試者正使用抗組胺類藥或激素類藥 注射部位過深或注射量太少,型超敏反應,臨床意義 尋找變應原 預防藥物或疫苗過敏 應用評價 過敏原有限 食物過敏與皮膚試驗相關(guān)性較差 選擇過敏原應結(jié)合實際情況,型超敏反應,血清總IgE檢測 常用方法：免疫比濁法 化學發(fā)光免疫法 酶聯(lián)免疫吸附法-適用于中小實驗室 臨床意義：升高見于型超敏反應性疾病， 寄生蟲感染， IgE型多發(fā)性骨髓瘤 應用評價：應建立當?shù)厝巳篒gE水平的參考區(qū)間,臨床實驗室常用,型超敏反應,特異性

5、IgE檢測（sIgE） 放射變應原吸附試驗 免疫印跡測定法,斑點酶免疫印跡法實驗原理,用NC膜作為固相支持物，檢測區(qū)的不同區(qū)域包被有特異性的過敏原。檢測時將稀釋的病人血清加入反應槽內(nèi)，血清中的sIgE與NC膜上的相應過敏原結(jié)合，再加入酶標記的抗人IgE抗體，此抗體會與檢測區(qū)NC膜上的sIgE結(jié)合，然后加入底物顯色。通過顯色區(qū)帶確定血清中含有哪種sIgE，進而判斷待檢者對哪種過敏原過敏。,稀釋好的洗液將檢測條要充分浸透，放在搖床上搖10分鐘,倒掉洗液，加入稀釋好的測試者血清，放于搖床室溫反應1.5小時,倒掉小槽中的血清，依次加入洗液，震蕩10分鐘，重復三次,每槽加入堿性磷酸酶標記的抗人IgE，放

6、于搖床上室溫反應30分鐘,將堿性磷酸酶標記的抗人IgE倒掉，用洗液洗三次，每次10分鐘,加入堿性磷酸酶底物，放于搖床，避光反應約10分鐘,去掉底物溶液，用純水洗三次，每次5分鐘,操作步驟,將檢測條放在干燥紙上，等檢測條完全干燥后判定檢測結(jié)果,結(jié)果分析,通過顯色區(qū)帶確定血清中含有哪種sIgE，進而判斷待檢者對哪種過敏原過敏。,臨床意義 slgE測定是體外檢測變應原的重要手段，主要用于型超敏反應的診斷。該檢測條包被有多種特異性過敏原，通過檢測血漿（血清）中過敏原slgE，篩查待檢者對何種過敏原過敏，為臨床進行脫敏治療奠定基礎。,II 型超敏反應,定義： II型超敏反應又稱細胞毒型（cytotoxi

7、c type）或細胞溶解型（cytolytic type）超敏反應，它是由靶細胞表面的抗原與相應IgG或IgM類抗體結(jié)合后，在補體、巨噬細胞和NK細胞參與下，引起的以細胞溶解或組織損傷為主的病理性免疫反應。,II 型超敏反應,特點： 1. 直接或間接與細胞有關(guān) 2. IgG 或 IgM 介導 3. 補體、吞噬細胞、NK細胞參與 4. 造成細胞溶解或功能紊亂,II 型超敏反應,靶細胞：正常組織細胞、改變的自身組織細胞、修飾的自身組織細胞 抗原：同種異型抗原、共同抗原、變性自身抗原、外來抗原 抗體：IgG和IgM類抗體 參與細胞損傷的物質(zhì)：補體 、吞噬細胞、NK細胞,變應原,輸血反應（transf

8、usion reaction） 新生兒溶血（hemolytic of the newborn） 自身免疫性溶血性貧血（autoimmune hemolytic anemia） 藥物過敏性血細胞減少 甲狀腺機能亢進（Graves disease） 鏈球菌感染后腎小球腎炎,Type II Hypersensitivity Reactions: Examples of Diseases,甲狀腺機能亢進(Graves病),5,II型超敏反應免疫學檢測項目,患者紅細胞,Coombs試劑,檢測紅細胞上不完全抗體,直接Coombs試驗,試管法操作步驟 用生理鹽水配5%紅細胞懸液 取潔凈小試管2支，1管加1滴

9、5%紅細胞懸液，另一管加生理鹽水作對照 在生理鹽水和5%紅細胞懸液中分別加入診斷試劑一滴，使其混勻，室溫稍待片刻 1000r離心1 min或3000r離心15s。 取出試管先以肉眼觀察有無溶血，再輕輕搖動試管，如有凝集，則為陽性結(jié)果；如無凝集，應在室溫延長1530 min的反應時間，再離心看結(jié)果。,結(jié)果分析 生理鹽水對照不應發(fā)生凝集，為均勻渾濁的乳狀液。在紅細胞懸液中，如紅細胞凝集成片狀，邊緣皺褶如花邊狀或邊緣松散為陽性。如與對照相同，為陰性。,臨床意義 直接Coombs試驗用于檢測患者紅細胞上不完全抗體，Coombs試驗陽性可見于自身免疫性溶血性貧血、冷凝集素綜合征、藥物誘發(fā)的免疫性溶血性貧

10、血、新生兒同種免疫性溶血病、某些高球蛋白血癥患者，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕、惡性腫瘤等。,患者血清,靶紅細胞,致敏紅細胞,Coombs試劑,檢測血清中的抗紅細胞抗體,間接Coombs試驗,微柱法操作步驟,撕開微柱凝膠卡密封紙，標記 加1%篩選紅細胞50l及受檢者血清25l 37孵育15min 離心機離心10min，1000r/min 觀察結(jié)果，如紅細胞懸浮在反應管頂部或凝膠中，則為陽性結(jié)果；反之，如紅細胞沉于凝膠底部（管底尖部），則為陰性結(jié)果。,結(jié)果分析,- 100%的紅細胞沉在微管的底部 +/- 100%的紅細胞沉在微管的下端1/3之內(nèi) 1+ 80%的紅細胞沉在微管的下端2/3之內(nèi) 2+ 8

11、0%的紅細胞沉在微管的上端2/3之內(nèi) 3+ 80%的紅細胞沉在微管的上端1/3之內(nèi) 4+ 凝集的細胞全部處于微管的頂部 d.p. 雙群 Hemo. 溶血,反應格局及判斷標準,臨床意義 間接Coombs試驗用于檢測患者游離血清中的不完全抗體。此實驗多用于檢測母體Rh（D）抗體，以便及早發(fā)現(xiàn)和避免新生兒溶血癥的發(fā)生，亦可對紅細胞不相容的輸血所產(chǎn)生的血型抗體進行檢測。,III 型超敏反應,定義： III型超敏反應是指由可溶性免疫復合物沉積于局部或全身多處毛細血管基底膜，通過激活補體,并在血小板、嗜堿性粒細胞、中性粒細胞等的參與下，引起的以充血水腫、局部壞死和中性粒細胞浸潤為主要特征的炎癥反應和組織損

12、傷。,Blood cell antigen,Adsorbed drug or Drug metabolite,Antibody to drug,complement,Lysis,藥物過敏性血細胞減少,III 型超敏反應,特點： 1. 形成中等大?。?06 Da）、可溶性（19s）復合物（IC)， IC沉積在血管基底膜上 2. IgG,IgM 或 IgA介導 3. 補體、中性粒細胞參與 4. 造成血管及周圍組織炎癥,免疫復合物易于形成與沉積的因素 1.抗原成分在體內(nèi)長期滯留 2.血管通透性增強 3.組織的解剖學及血流動力學 免疫復合物易沉積于靜脈壓較高及形成渦流的毛細血管迂回處，如腎小球基底膜及

13、關(guān)節(jié)滑膜、肝、脾、血管等部位。 4.免疫復合物的性質(zhì) 中等大小，可溶性免疫復合物 組織內(nèi)沉積。,III 型超敏反應,Arthus反應及類Arthus反應 (局部免疫復合物病) 血清?。╯erum sickness） 鏈球菌感染后腎小球腎炎 類風濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis） 系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）等,臨床常見的III型超敏反應性疾病,III 型超敏反應,RA 患者手指關(guān)節(jié)實質(zhì)性損傷,III型超敏反應免疫學檢測項目,PEG比濁法實驗原理 本試驗是檢測抗原非特異性循環(huán)免疫復合物的一種方法。PEG是環(huán)氧乙烷和水的多聚物，為一種不帶電荷的直鏈大分子多糖。終濃度為3%4%的PE

14、G能相對選擇性地沉淀CIC。用分光光度計測定濁度，反應沉淀物含量。,臨床意義 循環(huán)免疫復合物（Circulationimmunecomplex，CIC）又稱可溶性免疫復合物，分子量為50萬100萬，沉降系數(shù)8.819S，它不易被吞噬細胞吞噬，又不能經(jīng)腎小球排出，可較長時間在血液中循環(huán)，一旦大量循環(huán)免疫復合物沉積于組織中，則引起組織損傷及相關(guān)的免疫復合物病。 CIC陽性常見于： 1. 部分自身免疫性疾病，如SLE，類風濕關(guān)節(jié)炎等； 2. 膜增殖性腎炎，鏈球菌感染后腎炎； 3. 傳染病，如慢性乙型肝炎，瘧疾，麻風等； 4. 惡性腫瘤。,IV 型超敏反應,主要以T細胞介導- CD4Th1(主要)和 CD8CTL細胞 以單個核細胞浸潤為主的炎癥反應； 遲發(fā)，常在再次接觸抗原后2472小時發(fā)生,臨床常見遲發(fā)型超敏反應疾病 1、傳染性遲發(fā)型超敏反應性疾病：如結(jié) 核、麻風及