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文檔簡介

1、免疫學(xué)檢測是臨床常用的方法,包括血清免疫球蛋白(Ig)測定、血清補(bǔ)體測定、細(xì)胞免疫檢測、感染免疫檢測、自身免疫檢查、肝炎病毒標(biāo)志物檢測和腫瘤標(biāo)志物檢測以及血清免疫球蛋白分類。免疫球蛋白通常指具有抗體活性和/或抗體樣結(jié)構(gòu)的球蛋白。免疫球蛋白可通過免疫電泳和超速離心分析分為五類:IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。免疫球蛋白:最豐富或占優(yōu)勢的免疫球蛋白(75%),唯一能通過胎盤的免疫球蛋白。主要由脾臟和淋巴結(jié)中的漿細(xì)胞合成和分泌。IgA:約10%,SIgA在局部免疫中起重要作用。它主要由腸淋巴組織中的漿細(xì)胞產(chǎn)生。血清免疫球蛋白,IgM:最高分子量,由5個(gè)IgM單體通過J鏈連接。它是最早的免疫球

2、蛋白和抗原刺激后最早的抗體。其殺菌、溶菌、溶血、吞噬和凝集作用比IgG高500-1000倍。測定方法:單向免疫擴(kuò)散法或免疫比濁法。血清免疫球蛋白測定參考值:IgG: 7.616.6克/升(RID法),IgA: 7103350毫克/升,IgM: 0.482.12克/升。免疫球蛋白多克隆增加:的臨床意義在各種慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和一些自身免疫性疾病中是常見的。免疫球蛋白減少在患有各種先天性免疫缺陷疾病、獲得性免疫缺陷疾病、聯(lián)合免疫缺陷疾病和長期使用免疫抑制劑的患者中很常見。免疫擴(kuò)散法測定血清IgD: 0.62毫克/升已經(jīng)發(fā)現(xiàn),一些抗核抗體、抗基底膜抗體、抗甲狀腺抗體和抗“O”抗體是I

3、gD的,但它們的活性很低。血清IgE主要由鼻咽、支氣管、胃腸道等固有層的漿細(xì)胞分泌。它是一種嗜細(xì)胞抗體,可與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞膜上的流式細(xì)胞儀結(jié)合產(chǎn)生型過敏。elasa:0 . 10 . 9毫克/升臨床意義:1 .I型過敏2。IgE骨髓瘤、寄生蟲感染等。3.慢性肝炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。是由單克隆B淋巴細(xì)胞異常增殖產(chǎn)生的IgG分子或片段,通常沒有抗體活性。參考值:蛋白質(zhì)電泳,免疫電泳:陰性意義:1。多發(fā)性骨髓瘤(MM),占35%,其中IgG型約占60%;IgA型約占20%;輕鏈型約占15%;IgD和IgE是罕見的。2.巨球蛋白血癥。3.重鏈疾病。4.半分子疾病。5.惡性淋巴瘤

4、。6.良性蛋白尿。血清M蛋白(單克隆免疫球蛋白)和血清補(bǔ)體測定表明,補(bǔ)體是一種具有酶活性的熱穩(wěn)定球蛋白,分為三組:9種補(bǔ)體成分(C1C 9);b、D、P、H和I因素;補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白,如C1抑制劑、C4結(jié)合蛋白和衰變促進(jìn)因子??傃a(bǔ)體溶血活性(CH50)測定參考值試管法:5000010000 u/l顯著性:發(fā)現(xiàn)急性炎癥、急性組織損傷、惡性腫瘤和妊娠增加。急性腎小球腎炎、自身免疫性疾病、亞急性感染性心內(nèi)膜炎、慢性肝病、肝硬化、艾滋病、嚴(yán)重?zé)齻葴p少。血清補(bǔ)體測定和血清C3:主要由巨噬細(xì)胞和肝臟合成,在經(jīng)典激活途徑和旁路激活途徑中發(fā)揮重要作用。參考值:0.851.70克/升通過免疫比濁法增加為急性期蛋白

5、,在急性炎癥、早期感染性疾病、急性組織損傷、惡性腫瘤和抑制劑排斥反應(yīng)中增加。補(bǔ)體合成能力下降;合成原料不足;消耗或損失太多;先天性補(bǔ)體缺乏。血清補(bǔ)體的測定和血清C4的測定:由肝臟和吞噬細(xì)胞合成,參與補(bǔ)體的經(jīng)典激活途徑。參考值:單向免疫擴(kuò)散法:0.197/-0.109/升。臨床意義與C3基本相似,多發(fā)性骨髓瘤、IgA腎病、遺傳性C4缺乏癥等也有所下降。血清補(bǔ)體C1q測定及參考值補(bǔ)體C1q測定:0.1790.04克/升臨床意義:與C3相似,在活動(dòng)性混合結(jié)締組織病、嚴(yán)重營養(yǎng)不良、腎病綜合征、重度b因子測定-C3激活物前體,細(xì)胞免疫測定,淋巴細(xì)胞表面標(biāo)記物檢測,淋巴細(xì)胞表面標(biāo)記物檢測:玫瑰花結(jié)形成試驗(yàn)

6、,IFA,流式細(xì)胞儀,免疫金銀法和免疫酶染色法。e玫瑰花結(jié)形成試驗(yàn)SRBC CD2參考值Et 64.4%6.7%免疫熒光法和檢測t淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物可用于t淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、t淋巴細(xì)胞亞群分類和判斷t淋巴細(xì)胞活化程度。CD3分子在所有成熟T淋巴細(xì)胞表面表達(dá),是總T淋巴細(xì)胞的重要標(biāo)志。CD3在甲狀腺功能亢進(jìn)、淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎、重癥肌無力和器官移植后排斥反應(yīng)中很常見。CD3主要存在于免疫缺陷病中,如艾滋病、先天性胸腺發(fā)育不全綜合征和聯(lián)合免疫缺陷病。也可見于惡性腫瘤、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、免疫抑制療法等。成簇分化CD3代表總的T淋巴細(xì)胞,CD4是輔助和誘導(dǎo)T細(xì)胞的標(biāo)志,CD8是抑制和殺傷T細(xì)胞的標(biāo)志。用單克

7、隆抗體和熒光標(biāo)記的二級(jí)抗體在熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀下計(jì)數(shù)鎘的百分比。參考值:IFA): CD3為63.1.8 %;CD4為42.8%9.5%。CD8 19.6% 5.9%;CD4 /CD8為(2.20.7)/1。流式細(xì)胞術(shù):CD3 61%;CD4 28X %;CD8 19H %;CD4 /CD80.92.0/1 .T細(xì)胞分化抗原試驗(yàn),臨床意義CD3 CD4 T細(xì)胞下降在某些病毒性傳染病中很常見,如艾滋病、MCV病、嚴(yán)重創(chuàng)傷、全身麻醉、大手術(shù)、應(yīng)用免疫抑制劑等。活動(dòng)期類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎發(fā)病率升高。CD8 T細(xì)胞下降在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、干燥綜合征、重癥肌無力、糖尿病(型)和膜性腎小球腎炎中很常見。在傳染

8、性單核細(xì)胞增多癥、MCV病和慢性乙型肝炎的急性期升高.CD4 /CD8比值下降,這在艾滋病、瘤性麻風(fēng)、惡性腫瘤的分期和復(fù)發(fā)中較為常見。在傳染性單核細(xì)胞增多癥、MCV病、血吸蟲病等傳染病中也發(fā)現(xiàn)了這種病毒。在活動(dòng)性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、重癥肌無力、膜性腎小球腎炎和器官移植后的排斥反應(yīng)中發(fā)現(xiàn)了這種增加。淋巴細(xì)胞功能檢測,T細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)形態(tài)學(xué)方法:T細(xì)胞轉(zhuǎn)化率60.1%7.6% 3H-TdR摻入法:用液體閃爍計(jì)數(shù)器測定培養(yǎng)的淋巴細(xì)胞,記錄每分鐘脈沖數(shù)。SI(刺激指數(shù))=PHA刺激管的平均cpm=對(duì)照管的平均CPM。SI2顯著,而SI2是淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的降低。t細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn),具有

9、判斷機(jī)體細(xì)胞免疫功能水平的臨床意義,并降低那些常見的細(xì)胞免疫缺陷或細(xì)胞免疫功能低下,如惡性腫瘤、淋巴瘤、重癥肺結(jié)核、肝硬化等。唐氏綜合征中升高是常見的。評(píng)價(jià)疾病的療效和預(yù)后,檢測B淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物。表面抗原包括CD19、CD20、CD21、CD22和CD40,如B細(xì)胞抗原受體(BCR)、細(xì)胞因子受體(CKR)、補(bǔ)體受體(CR)和Fc受體。B細(xì)胞表面免疫球蛋白(BCR,SmIg)是B細(xì)胞的特征性表面標(biāo)志。通過檢測針對(duì)不同類型免疫球蛋白的熒光標(biāo)記單克隆抗體,b細(xì)胞可分為smIgg、SmIgM、SmIgA、SmIgD和SmIgE。B淋巴細(xì)胞表面標(biāo)記物檢測,參考值:免疫熒光(綿羊抗人)(以攜帶該標(biāo)記

10、物的細(xì)胞百分比表示):SmIg細(xì)胞總數(shù):平均21% (16 (%) smig細(xì)胞:平均7.1% (4%) smim細(xì)胞:平均8.9%(7%)SMig細(xì)胞:平均2.2%(1%4%) SmIgD細(xì)胞:平均值為0.9%(0%1.5%),B淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測顯示,臨床上SmIg細(xì)胞增多,常與B細(xì)胞惡性增殖有關(guān),主要表現(xiàn)在慢性淋證、毛細(xì)胞白血病和巨球蛋白血癥。SmIg細(xì)胞的減少主要與體液免疫缺陷有關(guān),這在性免疫球蛋白缺乏和嚴(yán)重的聯(lián)合免疫缺陷病中很常見。B淋巴細(xì)胞表面標(biāo)記物的檢測和B細(xì)胞分化抗原CD19、CD20、CD21、CD22的測定參考值:FACS:CD19細(xì)胞11.74%3.73%臨床意義CD

11、19是所有B細(xì)胞的共同表面標(biāo)記物,其在B細(xì)胞系統(tǒng)惡性腫瘤中增加,在體液免疫缺陷病中減少。自然殺傷細(xì)胞可以直接殺死效應(yīng)細(xì)胞,具有抗腫瘤、抗感染和免疫調(diào)節(jié)功能,還參與移植排斥、自身免疫性疾病和超敏反應(yīng)。LDH釋放參考值細(xì)胞毒性指數(shù):27.50.5% 51Cr釋放參考值NK細(xì)胞活性(自然殺傷率):47.60.8%,NK細(xì)胞活性測定,活性增加的臨床意義常見于病毒感染早期、唐氏綜合征、接受器官移植和骨髓移植的患者以及接受免疫增強(qiáng)劑治療的患者?;钚越档驮趷盒阅[瘤、嚴(yán)重的聯(lián)合免疫缺陷病、艾滋病和免疫抑制劑患者中很常見。評(píng)價(jià)腫瘤療效和預(yù)后時(shí),自然殺傷細(xì)胞可釋放細(xì)胞因子如干擾素、干擾素和粒細(xì)胞集落刺激因子。HB

12、eG、抗-HBe或抗-HBe HBeG、抗-Hbc或抗-HBc方法:ELASA、RIA、HBsAg、抗-HBs或抗-HBs、乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物檢測、HBsAg()表明在肝臟中發(fā)現(xiàn)HBV:乙型肝炎潛伏期和急性期。慢性遷延性肝炎、慢性活動(dòng)性肝炎、肝硬化、肝癌。慢性乙型肝炎表面抗原攜帶者。抗-HBs或抗-HBs:中和抗體,檢測乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物,HBeAg:患有乙型肝炎,這是病毒復(fù)制活躍和傳染性強(qiáng)的指標(biāo);持續(xù)陽性容易轉(zhuǎn)變?yōu)槁愿窝?;乙型肝炎表面抗原和乙型肝炎表面抗原可以垂直傳播??挂腋尾《净蚩挂腋尾《荆撼霈F(xiàn)在急性感染恢復(fù)期,持續(xù)時(shí)間長。這意味著HBV被部分消除或抑制,復(fù)制減少,傳染性降低。乙

13、型肝炎病毒血清標(biāo)記物抗-HBc或抗-HBc:反映HBV對(duì)肝細(xì)胞侵襲的指標(biāo),主要包括IgM、IgG和IgA。抗-HBc IgM陽性是最早的特異性抗體,是診斷急性乙型肝炎和判斷病毒主動(dòng)復(fù)制的指標(biāo),提示患者的血液具有高度傳染性。它也見于慢性活動(dòng)性肝炎???HBc抗體陽性滴度高,表明其患有乙型肝炎并被感染;低滴度是先前感染的指標(biāo),在體內(nèi)需要很長時(shí)間。乙型肝炎病毒和HBV-脫氧核糖核酸血清標(biāo)志物的定性和定量測定:目前,定量測定范圍為102 108拷貝/毫升。用血清免疫學(xué)結(jié)果綜合評(píng)價(jià)乙型肝炎表面抗原、抗乙型肝炎表面抗原、抗乙型肝炎表面抗原和抗乙型肝炎表面抗原及聯(lián)合檢測的臨床意義。丙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測、抗

14、丙型肝炎病毒抗體(ELISA)和抗丙型肝炎病毒抗體(IgM)陽性在急性丙型肝炎感染中較為常見,是診斷丙型肝炎的早期敏感指標(biāo);它是丙型肝炎病毒活性的指標(biāo)和丙型肝炎病毒傳染性的指標(biāo)。反轉(zhuǎn)錄巢式聚合酶鏈反應(yīng)和熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測抗丙型肝炎病毒抗體(第三代試劑抗原包括丙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒;丙型肝炎病毒容易變異,抗丙型肝炎病毒陽性轉(zhuǎn)化的時(shí)間也大不相同。測定血清抗鏈球菌溶血素“0”,參考值:乳膠凝集(LAT): 500 U含義:在與A組溶血性鏈球菌感染有關(guān)的疾病中,如扁桃體炎、感染性心內(nèi)膜炎、風(fēng)濕熱和鏈球菌感染后的腎小球腎炎中,這種增加是常見的。A組溶血

15、性鏈球菌感染后1周開始增加,46周達(dá)到高峰,持續(xù)數(shù)月或數(shù)年。假陽性和假陰性,傷寒沙門氏菌和副傷寒的免疫測定,肥達(dá)反應(yīng)參考值O凝集值1: 80傷寒沙門氏菌H凝集值1: 160副傷寒沙門氏菌A、B、C凝集值1: 80傷寒沙門氏菌和副傷寒抗體IgM測定參考值ELASA法:陰性或效價(jià)1: 20。傷寒和副傷寒的免疫測定,臨床意義o升高,h正常,o升高,h升高,o升高,a、b和c中的任何一個(gè)升高,并測定血清c反應(yīng)蛋白。c-反應(yīng)蛋白是肝臟合成的急性期反應(yīng)蛋白,可與肺炎球菌的c-多糖反應(yīng),具有激活補(bǔ)體、促進(jìn)吞噬和免疫調(diào)節(jié)的作用。參考值:8.2毫克/升(免疫比濁法)。重大組織損傷,如大手術(shù)、嚴(yán)重創(chuàng)傷、燒傷、心肌

16、梗塞等。發(fā)病數(shù)小時(shí)后迅速增加,然后rap下降增加再次表明繼發(fā)感染或深靜脈血栓形成。風(fēng)濕熱活躍期,可達(dá)200毫克/升以上.細(xì)菌感染經(jīng)常明顯上升,而病毒感染不明顯或輕微上升。惡性腫瘤、器官移植后排斥、妊娠等。可明顯增加,在疾病發(fā)作后數(shù)小時(shí)內(nèi)可迅速增加,然后在病情改善后迅速降至正常。腎綜合征出血熱病毒抗體檢測,參考值IFA,ELASA:陰性特異性IgM-在感染后23天檢測,并在710天達(dá)到峰值。特異性IgG在感染后兩周出現(xiàn),并持續(xù)多年。艾滋病血清學(xué)檢查和抗艾滋病病毒(型或型)檢測是艾滋病診斷的主要指標(biāo)。該抗原是艾滋病毒感染的T細(xì)胞株的病毒抗原(HLA-DR抗原污染可導(dǎo)致假陽性)。方法:初篩試驗(yàn)ELA

17、SA法、乳膠凝集法、免疫印跡法和斑點(diǎn)免疫滲濾法。蛋白質(zhì)印跡試驗(yàn)和聚合酶鏈反應(yīng)可以用來檢查艾滋病毒的基因。用人類免疫缺陷病毒抗原檢測P24抗原(具有群體特異性的病毒衣殼蛋白)。艾滋病病毒核酸檢測;梅毒血清學(xué)檢查,是一種由梅毒螺旋體梅毒亞種引起的性傳播疾病。梅毒螺旋體抗體檢測:非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)和梅毒螺旋體抗原試驗(yàn),前者是篩查試驗(yàn)和治療效果監(jiān)測,后者是確診。梅毒螺旋體的聚合酶鏈反應(yīng)檢測和甲胎蛋白(AFP)的暗場顯微鏡測定,參考值CLIA,放射免疫分析,ELASA:血清25g/L,原發(fā)性肝癌的臨床意義明顯增加,而病毒性肝炎和肝硬化患者的AFP300 g/L有不同程度的增加,但通常為300 g/L.性腺胚胎腫瘤血清甲胎蛋白升高25%,提示為原發(fā)性肝癌。自身抗體檢查、自身免疫性疾病、器官特異性和非器官特異性(抗原是細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)成分)和中間型??购丝贵w是以細(xì)胞的核成分為靶抗原的自身抗體的總稱。間接免疫熒光檢查有四種熒光模式:同質(zhì)型(抗dsDNA抗體和抗組蛋白抗體);外周型(抗dsDNA抗體);點(diǎn)狀或粒狀(抗U1-RNP、抗Sm、抗Scl-70、抗SS-

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