1、分離技術(shù)，生物制藥工藝學(xué)第4章到第11章，第4章固相析出分離法改變?nèi)芤簵l件，將溶質(zhì)作為固體從溶液中分離的操作技術(shù)稱為固相析出分離法。 析出物為結(jié)晶時，稱為結(jié)晶的析出物為非晶質(zhì)體固體稱為沉淀法。 固相沉積法主要有鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法、等電點沉淀法、結(jié)晶法等。 鹽析法是利用各種生物分子在濃鹽溶液中的溶解度的差異，在溶液中導(dǎo)入一定量的中性鹽，使目標(biāo)物和雜蛋白沉淀析出，達(dá)到精制目的的方法。 鹽析的反應(yīng)歷程：高濃度中性鹽溶液中存在大量帶電的鹽絡(luò)離子，它們能中和生物分子表面的電荷，損傷穩(wěn)定的電雙層，破壞分子周邊的水合層，而且大量鹽絡(luò)離子本身的水化作用可使自由水濃度降低，同時破壞水合層，使生物分子相互聚集

2、沉淀。 有機(jī)溶劑沉淀法是在水溶液中加入一定量的親水性有機(jī)溶劑，降低溶質(zhì)的溶解度，使其沉淀析出的分離純化方法。 主要反應(yīng)歷程： (1)將親水性有機(jī)溶劑加入溶液中，介質(zhì)的介電常數(shù)降低，溶質(zhì)分子間的靜電引力增加，凝聚形成沉淀。 (2)水溶性有機(jī)溶劑本身的水化作用降低了自由水的濃度，壓縮了親水溶質(zhì)分子表面本來的水合層的厚度，降低了其親水性，引起了脫水凝聚。 等電點沉淀法的兩性電解質(zhì)是當(dāng)溶液pH處于等電點(pI )時，分子表面凈電荷為零，導(dǎo)致穩(wěn)定的電雙層以及水合膜弱化或破壞，分子間引力增加，溶解度降低。 調(diào)節(jié)溶解的pH，降低兩性溶質(zhì)溶解度，使沉淀析出的操作。 結(jié)晶法改變?nèi)芤旱哪承l件，使其中的溶質(zhì)以結(jié)晶

3、狀態(tài)析出的過程稱為結(jié)晶。 (1)鹽析結(jié)晶法這是生化制藥使用最多的結(jié)晶方法。 其作用是，通過向結(jié)晶溶液中導(dǎo)入中性鹽，使溶質(zhì)的溶解度逐漸降低，使其過飽和，經(jīng)過一定時間后形成結(jié)晶，逐漸成長。 (二)透析晶體(三)有機(jī)溶劑晶體(四)等電點晶體(五)的溫度誘導(dǎo)晶體，第五章吸附法吸附是物質(zhì)分子在兩相界面濃度的增加。 由于界面分子在云同步上受到不均勻的兩相分子的力，界面分子的力場不會飽和，即存在固體表面力，它從外部吸附分子、原子或絡(luò)離子，在吸附劑的表面附近形成多分子層或單分子層。 物質(zhì)從流變性(氣或液相)濃縮到固體表面而分離的過程稱為吸附作用。 表面發(fā)生吸附作用的固體叫吸附劑，被吸附的物質(zhì)叫吸附劑。 常用吸

4、附劑：1)活性碳是吸附能力強(qiáng)的無極性吸附劑，其吸附作用在水溶液中最強(qiáng)，在有機(jī)溶劑中弱，吸附能力的順序為水乙醇甲醇冰乙酸乙基丙酮三氯甲烷。 2 )人工沸石人工沸石是由人造的合成的無機(jī)陽離子交換劑。 用于細(xì)胞色素c的分離。 3 )磷酸鈣元素凝膠在蛋白質(zhì)的分離純化中，較常用的吸附劑是磷酸鈣元素凝膠。 (羥基磷灰石)活性部位是鈣元素絡(luò)離子。 4 )白陶土5 )氫氧化鋁凝膠可用于蛋白質(zhì)及酶催化劑的分離。 6 )氧化鋁活性氧化鋁是最常用的吸附劑，特別適于親脂性成分的分離，廣泛用于醇、酚、生物堿、染料、甾類化合物化合物、氰苷類、氨基酸、蛋白質(zhì)和維生素等物質(zhì)的分離。 7 )硅凝膠是最常用的8 )滑石粉惰性過濾

5、器9 )硅藻泥惰性過濾器10 )皂土11 )聚酰胺粉粉12 )大孔網(wǎng)聚合物吸附樹脂極性、弱極性、非極性大孔吸附樹脂強(qiáng)酸性、弱酸性、強(qiáng)堿性、弱堿性等，第6章離子交換法離子交換法利用溶液中各種粒子電荷的帶電粒子和離子交換劑這些個的結(jié)合是可逆的，可以在一定條件下結(jié)合，即使條件改變也會釋放。 絡(luò)離子交換劑由惰性的不溶性載體、功能化學(xué)基和平衡絡(luò)離子組成。/x，z，z，x，x，y，z，z，z，z，可以說，x，z，可以說，x，z，可以說，可以說，x，z，可以說，x，z，z，x，x，y，z，x，y，z，x，x，x，x，y，y，y，z，y，z，x，x，x，x，y，y ， 您可以選擇、或者、或者、或者、或者、或者

6、、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者用、親和色譜法可逆地結(jié)合的專一性物質(zhì)被稱為配體，與配體結(jié)合的色譜分析法介質(zhì)被稱為沉積基質(zhì)親和色譜法的設(shè)定校正原理和過程：1)配體固定化選擇適當(dāng)?shù)呐潴w與不溶性的支撐體結(jié)合，或者共價鍵合成為具有專一性親和性的分離介質(zhì)。 2 )吸附樣品的親和色譜法介質(zhì)有選擇地吸附酶催化劑和其他生物活性物質(zhì)，由于雜質(zhì)和色譜分析法沒有親和性，所以不被吸附而被洗凈除去。 3 )選擇適當(dāng)?shù)臈l件洗脫吸附的親和介質(zhì)上的酶催化劑和其他生物活性物質(zhì)。 利用l，s，l，l，s，s，s，雜質(zhì)，s，s，l，l，l，配體離心技術(shù)離心力場加速混懸劑中固體粒子的沉降速度的方法稱為離心技術(shù)。 相對離心力通常由離心機(jī)的離心力與重力之比表示，也稱為分離因子，用符號g或g表示。 第10章膜分離技術(shù)，第11章制造型高速液相色譜法制造型HPLC技術(shù)，利用大徑柱分離制造大量純物質(zhì)(0.1g) HPLC的分離依據(jù)是樣品中各成分間的帶電性、極性、疏水性、分子尺寸、等電點、親和性、螯合性等理化性質(zhì)的差異。 將試料導(dǎo)入柱頭，流動相通過高壓泵精確控制其產(chǎn)水量，使得試料中的各成分在柱中形成檢查遷移，使得色譜分析法柱按照時間序列流出，進(jìn)行了檢測和分支構(gòu)造收集。 HPLC光譜重要殘奧計：分離度、分離速度、回收率、樣本容量，根據(jù)固定的相對樣品保持反