1、中和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)對HBsAg弱反應(yīng)性結(jié)果的確認(rèn)及應(yīng)用評價,南充市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科,目的：應(yīng)用中和確認(rèn)試驗(yàn)對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）弱反應(yīng)性樣本的結(jié)果進(jìn)行確認(rèn)。,方法：采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)(ECLIA)檢測乙型肝炎表面抗原，對從中篩選的26例弱反應(yīng)性樣本進(jìn)行中和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)，并對結(jié)果進(jìn)行分析評價。,結(jié)果：26例弱反應(yīng)性標(biāo)本中，經(jīng)確認(rèn)陽性的有22例（84.6%）,陰性2例（7.7%）,不確定2例（7.7%）。,結(jié)論：對于HBsAg弱反應(yīng)性標(biāo)本，應(yīng)用中和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)確認(rèn)。,許多實(shí)驗(yàn)室采用時間分辨免疫熒光法（TRFIA）和電化學(xué)發(fā)光法（ECLIA）代替?zhèn)鹘y(tǒng)的ELISA法，其檢測的靈敏度特異性都有了顯著提

2、高，有效避免了乙型肝炎病毒感染的漏檢，和輸血、器官移植中的安全隱患，以及由此引起的醫(yī)患糾紛。但檢測靈敏度提高的同時，弱反應(yīng)性陽性標(biāo)本中是否存在假陽性？為此我們采用HBsAg確認(rèn)試驗(yàn)，對弱反應(yīng)性標(biāo)本進(jìn)行中和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)。,實(shí)驗(yàn)原理,該實(shí)驗(yàn)是根據(jù)特異性抗體的中和原理進(jìn)行。由于polyclonal HBsAg特異性抗體附著在乙肝病毒表面抗原的優(yōu)勢免疫表位，從而阻塞了Elecsys HBsAg檢測中所使用的抗體結(jié)合部位。確認(rèn)試劑中過量的抗HBs抗體中和了該樣本中所有HBsAg，在之后的Elecsys HBsAg檢測中，與初測值相比降低了COI值。（樣本信號/cutoff),弱反應(yīng)性的標(biāo)本的處理,經(jīng)E170

3、 HBsAg檢測中的弱反應(yīng)性的標(biāo)本，用證實(shí)試劑和對照試劑按如下方式平行處理：表 1 COI7標(biāo)本的處理,表2 7=COI=30的標(biāo)本的處理,表3 COI30的標(biāo)本的處理,表4 precicontrol HBsAg2標(biāo)本的處理,充分混勻以上經(jīng)處理的反應(yīng)物，然后置2-8度溫育過夜。證實(shí)試劑中過量的抗HBsAg抗體中和標(biāo)本中的HBsAg。在隨后進(jìn)行的Elecsys HBsAg實(shí)驗(yàn)中，標(biāo)本的cut-off指數(shù)(COI)將比原值降低。,表5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下 表6,討論,本次實(shí)驗(yàn)，26例弱反應(yīng)性樣本中有2例判斷為不確定，占7.7%，分析未被確認(rèn)的原因認(rèn)為是COI值太低（均1.1）,因陽性值過低，在預(yù)處理過程中，被對照試劑稀釋，而使得標(biāo)本與對照試劑反應(yīng)后COI1,無法判定確認(rèn)結(jié)果。26例弱反應(yīng)性標(biāo)本有24例得到了確認(rèn)，達(dá)92.3%，22例為確認(rèn)陽性，2例為確認(rèn)陰性。,有報道稱HBV感染者中存在一部分隱匿性乙型肝炎感染的情況，即HBV持續(xù)存在，肝內(nèi)可檢出病毒，但血清中不能檢出HBsAg，病毒HBVDNA低水平或陰性產(chǎn)生HBsAg弱陽性的現(xiàn)象可能是患者免疫功能受損后，機(jī)體與HBV或其產(chǎn)物產(chǎn)生新的平衡反應(yīng)，一般情況下不具有嚴(yán)重致命性，但部分滴度低的HBsAg陽性者仍存在HBV復(fù)制，因此在機(jī)體免疫功能受損時可導(dǎo)致肝臟病情加重，甚至癌變。,本次試驗(yàn)弱反應(yīng)性標(biāo)本出現(xiàn)了不確定和假陽性，因此使