1、第四章是食品安全檢測(cè)技術(shù)的研究進(jìn)展第一節(jié)三聚氰胺檢測(cè)方法目前檢測(cè)三聚氰胺的方法很多，其中常用的有高效液相色譜、液相色譜-質(zhì)譜和氣相色譜-質(zhì)譜。本網(wǎng)站收集了一些國(guó)內(nèi)相關(guān)文章，并整理如下。方法包括氣相色譜-質(zhì)譜、光譜-四極線檢測(cè)、超高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜、反相高效液相色譜、高效液相色譜-二極管陣列法、高效液相色譜-四極桿質(zhì)譜、固相萃取和高效液相色譜、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜等。液相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定三聚氰胺1.超高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定飼料中的三聚氰胺殘留飼料樣品經(jīng)1%三氯乙酸2二甲基亞砜提取，水RS O AS IS MCX柱凈化，超高效液相色譜分離，電噴霧四極桿質(zhì)譜檢測(cè)。結(jié)果表明，飼料中

2、三聚氰胺含量在10 5000g/kg之間時(shí)，線性關(guān)系良好。在10 100 g/kg范圍內(nèi)，平均回收率為83% 94%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為41.2% 61.5%。該方法的檢出限為10g/kg。2.高效液相色譜-四極桿質(zhì)譜法測(cè)定飼料中的三聚氰胺實(shí)驗(yàn)中采用自動(dòng)固相萃取裝置，建立合適的過柱程序；采用Agilent HP1100高效液相色譜-四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀優(yōu)化質(zhì)譜條件，建立飼料中三聚氰胺殘留量的測(cè)定方法。該方法線性范圍為0.010 0.500 g/ml，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.2% 7.7%，回收率為72.4% 91.2%，具有良好的準(zhǔn)確度和精密度。3.液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析寵物食品中的三聚氰胺建立了液相色譜

3、-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定寵物食品中三聚氰胺的方法，并與美國(guó)進(jìn)行了比較將美國(guó)食品和藥物管理局出版的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀與液相色譜液相色譜方法進(jìn)行了比較。結(jié)果表明，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法是一種前處理過程簡(jiǎn)單、靈敏度高、選擇性好的分析方法。4.液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定飼料中三聚氰胺殘留量液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定飼料中三聚氰胺殘留量樣品用v乙腈：v H2O=1 1溶液提取，高速離心，用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜進(jìn)行定性和定量分析。流動(dòng)相為乙腈H2O=8020的混合溶液。使用電噴霧離子源，定性離子對(duì)是127。85年2月。2和127。2 /68。2 .定量離子對(duì)是127。85年2月。2.當(dāng)添加0.5 10.0毫克/千克三聚氰

4、胺標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，回收率為92.6% 103.2%。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.8%-2.0%。檢測(cè)限為0。2毫克/千克。5.固相萃取-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)食品中的三聚氰胺將樣品均質(zhì)化，用1%三氯乙酸溶液提取，用OASIS MCX固相萃取柱純化，減壓濃縮，溶于甲醇至恒量，用水beh-C純化.柱分離，乙腈和水為流動(dòng)相，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)。三聚氰胺的線性范圍為0.1-10.0 mg/kg，相關(guān)系數(shù)為0.9999，平均回收率為71%-95%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.56%-9.82%，n=6，方法的檢出限為0.5 mg/kg。光譜四元法在線分析三聚氰胺含量三聚氰胺含量的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法存在檢測(cè)結(jié)果受蛋白質(zhì)分子中氮含量

5、影響較大的問題，這種相似性將使三聚氰胺的檢測(cè)變得極其困難。賽默費(fèi)希爾科技(上海)有限公司提供的光譜-四元在線成分分析儀可實(shí)現(xiàn)三聚氰胺含量的在線實(shí)時(shí)連續(xù)檢測(cè)(見圖1)，能更好地解決檢測(cè)結(jié)果受蛋白質(zhì)含量影響的問題。光譜四極儀采用近紅外吸收檢測(cè)技術(shù)，是一種非接觸、無損、無危害的檢測(cè)方法。傳感器用特定波長(zhǎng)的近紅外線照射樣品，并分析反射光。光譜四元分析儀使用的光亮度非常低，不會(huì)加熱或損壞樣品。三聚氰胺的含量越高，反射的光越少。在實(shí)際檢測(cè)中，檢測(cè)人員可以將Spectra-Quad傳感器固定在任何現(xiàn)有的傳輸設(shè)備上，利用粉末采樣器實(shí)現(xiàn)對(duì)氣動(dòng)傳輸產(chǎn)品中三聚氰胺含量的連續(xù)檢測(cè)，并將檢測(cè)數(shù)據(jù)輸出到某個(gè)過程控制系統(tǒng)或

6、PC控制器，從而保證產(chǎn)品不受三聚氰胺污染。高效液相色譜法測(cè)定三聚氰胺1.反相高效液相色譜法測(cè)定飼料中的三聚氰胺2.高效液相色譜-二極管陣列法測(cè)定高蛋白食品中的三聚氰胺建立了高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)高蛋白食品中三聚氰胺的方法。不同的樣品采用不同的預(yù)處理方法，然后是安捷倫TC2C18 4。使用6 250 mm色譜柱，柱溫為40，流動(dòng)相為0。02 mol/L硫酸銨甲醇=946vv，流速為0。用二極管陣列檢測(cè)器在235 nm波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè)，用保留時(shí)間和三維譜圖相似系數(shù)表征，不同樣品的回收率在98。8%比101。5%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于1。2%。該方法的線性范圍為0。1 150 g/ml，檢出限為0。

7、相關(guān)系數(shù)為0。999 9.3.高效液相色譜法測(cè)定飼料中的三聚氰胺建立了高效液相色譜法測(cè)定飼料中三聚氰胺的方法。該方法以C18對(duì)稱柱為分離柱，用二極管陣列紫外檢測(cè)器檢測(cè)max=236nm。該方法簡(jiǎn)單、快速、重現(xiàn)性好。平均回收率大于90%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于3%。0%，線性范圍為1毫克/升-100毫克/升.4.固相萃取-高效液相色譜法測(cè)定寵物食品中的三聚氰胺樣品提取液經(jīng)陽(yáng)離子交換2反相萃取柱凈化，用高效液相色譜法測(cè)定寵物食品中的三聚氰胺，結(jié)果令人滿意。復(fù)雜基質(zhì)中154種農(nóng)藥殘留的分析2006年，日本引入了肯定列表制度，規(guī)定了800種農(nóng)藥的殘留限量，使農(nóng)藥殘留分析成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。目前，用于農(nóng)藥殘留

8、分析的主要技術(shù)有氣相色譜/單四極桿質(zhì)譜選擇性離子掃描1-2離子阱質(zhì)譜多選擇性反應(yīng)監(jiān)測(cè)技術(shù)3和全掃描計(jì)算機(jī)輔助技術(shù)4-5。單四極桿選擇性離子技術(shù)質(zhì)譜信息少，選擇性差，結(jié)果不確定。離子阱質(zhì)譜和二次質(zhì)譜在時(shí)間上是串聯(lián)的，因此對(duì)于多組分化合物的同時(shí)分析存在掃描速度有限的問題。本文采用了Thermo公司引進(jìn)的最新一代氣相色譜/三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜(TSQ量子氣相色譜)。通過其高通量離子傳輸性能、碰撞室零串?dāng)_技術(shù)和高選擇性反應(yīng)監(jiān)測(cè)技術(shù)(H-SRM)，一次進(jìn)樣可實(shí)現(xiàn)154種化合物的同時(shí)分析，整個(gè)分析過程可在22分鐘內(nèi)完成，從而保證了結(jié)果的準(zhǔn)確性，大大提高了分析效率。實(shí)驗(yàn)部分以下是實(shí)驗(yàn)中使用的色譜和質(zhì)譜儀器及操

9、作條件。表1顯示了量子氣相色譜質(zhì)譜的分段掃描程序。氣相色譜：超痕量氣相色譜色譜柱：Rti-5MS(Restek)15毫米0.25毫米內(nèi)徑df=0.25微米注射模式：無分流注射溫度：220傳輸線溫度：280烘箱溫度：70(1分鐘)25/分鐘13015/分鐘1605/分鐘21025/分鐘290(5分鐘)流量：恒定流量1.0毫升/分鐘質(zhì)譜：離子源溫度，250發(fā)射電流：50A電離模式：電子電離離子體積：封閉電子電離分析模式：h-固體火箭發(fā)動(dòng)機(jī)(高選擇性反應(yīng)監(jiān)測(cè))掃描寬度：0.002米/z掃描時(shí)間：0.025秒固體火箭發(fā)動(dòng)機(jī)的峰值寬度：Q1，0.4 Da；Q3，0.7Da碰撞氣體壓力：1.5毫托(氬)結(jié)

10、果和討論掃描線段的建立隨著檢測(cè)項(xiàng)目的增多，分析方法的效率和準(zhǔn)確性已成為影響實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力的主要因素之一。TSQ量子氣相色譜具有高通量離子傳輸和碰撞室內(nèi)零串?dāng)_的特點(diǎn)。該方法通過一次進(jìn)樣，在22分鐘內(nèi)成功實(shí)現(xiàn)了154種農(nóng)藥的準(zhǔn)確定性和定量分析。眾所周知，用一根毛細(xì)管柱完全分離100多種化合物是非常困難的1。為了提高分析效率和縮短分析時(shí)間，該方法使用15 m的色譜柱。在此條件下，154種化合物的保留時(shí)間分布非常緊湊，在某一保留時(shí)間內(nèi)，34種化合物會(huì)同時(shí)達(dá)到峰值。因此，質(zhì)譜必須具有高通量離子掃描功能，以確保所有化合物都能準(zhǔn)確、快速地檢測(cè)出來。TSQ量子氣相色譜是目前通量離子傳輸效率最高的三重四極質(zhì)譜。

11、基于這一特點(diǎn)，該方法可實(shí)現(xiàn)154種化合物的一次性進(jìn)樣和連續(xù)分析。圖1是韭菜中添加濃度為1 ppb的農(nóng)藥的色譜圖。從圖中可以看出，根據(jù)表1所列條件，采用TSQ量子氣相色譜進(jìn)行分析，獲得了超高的靈敏度和良好的定量結(jié)果。零串?dāng)_功能的使用對(duì)于多組分化合物的同時(shí)分析，碰撞池中離子間的串?dāng)_是影響分析結(jié)果的另一個(gè)主要因素。在三重四極桿質(zhì)譜的固體火箭發(fā)動(dòng)機(jī)掃描過程中，當(dāng)后一組離子進(jìn)入碰撞池時(shí)，如果前一組離子仍然存在，將存在離子串?dāng)_的可能性，這將導(dǎo)致第二組離子的色譜圖錯(cuò)誤。當(dāng)兩組不同的固體火箭發(fā)動(dòng)機(jī)事件具有相同的“子”離子時(shí)，這個(gè)問題將更加嚴(yán)重。當(dāng)將100多種化合物注射到一根針中進(jìn)行同時(shí)檢測(cè)和分析時(shí)，不可避免地

12、要將多組離子放入一個(gè)窗口中進(jìn)行同時(shí)固體火箭發(fā)動(dòng)機(jī)分析。如果儀器中存在交叉干擾，最終結(jié)果將會(huì)失去準(zhǔn)確性。TSQ量子三重四極桿質(zhì)譜采用直角碰撞池設(shè)計(jì)，可有效消除離子串?dāng)_。這種設(shè)計(jì)被稱為無離子串?dāng)_技術(shù)。這種“無離子串?dāng)_技術(shù)”有效地消除了儀器檢測(cè)產(chǎn)生假陽(yáng)性的可能性，從而確保了TSQ量子同時(shí)分析154種化合物的準(zhǔn)確性。高選擇性反應(yīng)檢測(cè)可有效消除基質(zhì)干擾另一個(gè)主要困難是分析復(fù)雜基質(zhì)中的多組分殘留物，并在沒有基質(zhì)干擾的情況下準(zhǔn)確定量目標(biāo)化合物。對(duì)于三重四極桿質(zhì)譜，選擇性反應(yīng)監(jiān)測(cè)是目標(biāo)化合物定量分析中最基本的掃描技術(shù)。然而，通過單位質(zhì)量分辨率選擇母體離子經(jīng)常受到生物體本身和環(huán)境基質(zhì)的干擾。在高選擇性反應(yīng)監(jiān)測(cè)(

13、H-SRM)中，利用Q1上的分辨增強(qiáng)峰可以獲得耐受性較強(qiáng)的母體離子，這可以有效提高待測(cè)化合物分析的選擇性。TSQ量子氣相色譜是唯一一種具有氫-固體火箭發(fā)動(dòng)機(jī)功能的氣相色譜/三重四極桿質(zhì)譜儀。圖2是通過掃描固體火箭發(fā)動(dòng)機(jī)(Q1，0.7 FWHM)和掃描高選擇性氫固體火箭發(fā)動(dòng)機(jī)(Q1，0.4 FWHM)獲得的色譜圖，其中通過TSQ量子氣相色譜法向韭菜中加入1pb甲基苯并噻唑。從圖2A的分析可以看出，當(dāng)使用固體火箭發(fā)動(dòng)機(jī)掃描時(shí)，在待檢測(cè)的目標(biāo)化合物處有大的干擾(6.80分鐘)，這使得不可能定量分析目標(biāo)化合物。圖b是用分辨率為0.4的氫-固體火箭發(fā)動(dòng)機(jī)掃描的Q1色譜圖，從中可以看出有效地消除了基質(zhì)的干

14、擾，獲得了待測(cè)化合物的理想色譜峰。通過圖像甲和圖像乙的比較，可以有效去除矩陣干擾，提高方法的檢測(cè)限。圖3是在韭菜中添加1pb的各種農(nóng)藥后，用氫譜儀掃描的色譜圖，所有化合物都獲得了理想的靈敏度。結(jié)論在22分鐘內(nèi)，利用TSQ量子氣相色譜超高的離子傳輸效率，通過設(shè)置多段掃描通道，一次進(jìn)樣可同時(shí)分析154種農(nóng)藥成分。TSQ量子氣相色譜的高選擇性反應(yīng)檢測(cè)掃描可以有效地消除基體干擾。與離子阱和單四極桿質(zhì)譜相比，可以更有效地消除假陽(yáng)性，進(jìn)一步保證定量和定性的準(zhǔn)確性。該方法靈敏度高，復(fù)雜基質(zhì)中某些農(nóng)藥的檢出限可達(dá)0.5ppb，完全符合陽(yáng)性列表等國(guó)際法規(guī)的檢測(cè)要求。食品基質(zhì)中403種農(nóng)藥殘留的測(cè)定復(fù)雜食品基質(zhì)(

15、如谷物、蜂蜜、蘋果和肉類)中痕量農(nóng)藥殘留的分離和檢測(cè)非常復(fù)雜。本文建立了安捷倫快速高分辨率液相色譜(RRLC)與三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，獲得了良好的線性關(guān)系和重復(fù)性。與常規(guī)高效液相色譜相比，它顯著提高了復(fù)雜樣品的分辨率，大大提高了檢測(cè)靈敏度和分析通量，在復(fù)雜食品基質(zhì)中的痕量成分方面具有廣闊的應(yīng)用前景。儀器和主要試劑安捷倫1200 RRLC快速高分辨率液相色譜；安捷倫6410 QQQ(三重四極桿質(zhì)譜)；振蕩器：氮?dú)獯蹈蓹C(jī)。所有試劑都是色譜純的，購(gòu)自西格瑪公司。C18固相萃取柱(超高效液相色譜-18，3毫升管，超高效液相色譜)；0.45微米(sup elco)；所有農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)都是從西格瑪公司購(gòu)買的標(biāo)

16、準(zhǔn)溶液的制備標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：準(zhǔn)確稱取5.0毫克，放入10毫升容量瓶。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的溶解度，選擇甲醇、乙腈等溶劑溶解并固定在刻度上。混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(混合標(biāo)準(zhǔn)溶液A、B、C、D、E和F):根據(jù)農(nóng)藥和相關(guān)化學(xué)品的性質(zhì)和保留時(shí)間，將403種農(nóng)藥和相關(guān)化學(xué)品分為六組：A、B、C、D、E和F根據(jù)每種農(nóng)藥的分組，取一定量的單一農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，放入100毫升容量瓶中，用甲醇調(diào)節(jié)至刻度。所有分析物的線性濃度范圍為0.5 500納克/毫升?；旌蠘?biāo)準(zhǔn)溶液在4避光保存，可使用一個(gè)月。樣品的提取和純化稱取10g樣品放入300毫升三角瓶中，加入100毫升乙腈，振蕩30分鐘，將乙腈提取液過濾至100毫升梨形瓶中，在40水浴中濃縮至約5毫升。100毫升4%氯化鈉水溶液分三次溶解濃縮液，全部轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，加入50毫升二氯甲烷振蕩提取10分鐘(重復(fù)兩次)。將下層有機(jī)相通過裝有無水硫