1、層析工藝驗(yàn)證,簡(jiǎn)介 層析驗(yàn)證的先決條件 工藝風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估 原材料 工藝特性研究 分析方法 微生物負(fù)載和內(nèi)毒素控制 研發(fā)和特性研究文件 層析柱工藝驗(yàn)證 一致性批次：生產(chǎn)規(guī)模驗(yàn)證 小規(guī)模驗(yàn)證研究 驗(yàn)證文件 后驗(yàn)證活動(dòng) 持續(xù)監(jiān)測(cè)和維護(hù) 變更控制,目錄,定義：層析工藝驗(yàn)證是證明層析柱分離工藝能始終如一的按照批準(zhǔn)的方案、既定的操作參數(shù)執(zhí)行。,簡(jiǎn)介,簡(jiǎn)介,以上是理想狀態(tài)，不同項(xiàng)目的活動(dòng)和順序是可變的,簡(jiǎn)介,工藝風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估 工藝開(kāi)發(fā)和特性研究的早期階段：風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估可將資源集中在最有可能對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量帶來(lái)風(fēng)險(xiǎn)的操作參數(shù)或雜質(zhì)。 工藝開(kāi)發(fā)和特性研究的后期階段：風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估促使工作有條不紊。 規(guī)模放大：回顧所有操作參數(shù)和范圍，評(píng)

2、估和確認(rèn)潛在風(fēng)險(xiǎn)，識(shí)別缺失數(shù)據(jù)。風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果可能指出需要額外的特性研究。 工藝開(kāi)發(fā)和特性研究完成后，關(guān)鍵步驟過(guò)程控制知識(shí)建立后：識(shí)別和分級(jí)潛在工藝風(fēng)險(xiǎn)，必要情況下，可開(kāi)發(fā)一個(gè)降低風(fēng)險(xiǎn)的措施。,層析驗(yàn)證先決條件,原材料 建立原材料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和供應(yīng)商變更控制程序。 正式工藝驗(yàn)證之前，原材料應(yīng)經(jīng)過(guò)確認(rèn)。 層析填料有一些獨(dú)特因素：通常是單一來(lái)源，很少有備用填料能執(zhí)行同一功能，沒(méi)有法定標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)工藝結(jié)果有極高的影響。 層析不應(yīng)采用動(dòng)物源性的原材料。,層析驗(yàn)證先決條件,工藝特性研究 目的：建立工藝知識(shí)，包括可接受范圍、設(shè)計(jì)空間、失敗邊緣。 工藝特性研究要獲取設(shè)定范圍內(nèi)的工藝操作參數(shù)（輸入）是如何影響工藝性能（

3、輸出）的，據(jù)此鑒定關(guān)鍵操作參數(shù)、定義目標(biāo)設(shè)定點(diǎn)和可接受范圍。 工藝特性研究主要采用小規(guī)模研究。通過(guò)各種統(tǒng)計(jì)學(xué)方法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，以更少的實(shí)驗(yàn)獲得更多的數(shù)據(jù)。,層析驗(yàn)證先決條件,工藝特性研究 在項(xiàng)目開(kāi)發(fā)的早期階段（如臨床I期前），可以只開(kāi)發(fā)層析步驟，不定義最佳操作范圍。當(dāng)產(chǎn)品即將獲得許可，再來(lái)優(yōu)化生產(chǎn)的操作參數(shù)。 特性研究的基礎(chǔ)：設(shè)備和設(shè)施的能力、已開(kāi)發(fā)的工藝、理論知識(shí)、以往經(jīng)驗(yàn)、供應(yīng)商建議、文獻(xiàn)、生產(chǎn)歷史。,層析驗(yàn)證先決條件,工藝特性研究 特性研究應(yīng)集中于影響層析性能的參數(shù)。例如，在離子交換操作，應(yīng)評(píng)估上樣蛋白的pH和離子強(qiáng)度、沖洗和洗脫條件、上樣載量的影響。其他運(yùn)行參數(shù)的范圍（例如，溫度、裝柱情況

4、、或清洗條件），可能對(duì)工藝性能的影響較小。它們也應(yīng)進(jìn)行測(cè)試，以建立一個(gè)穩(wěn)定的工藝。,層析驗(yàn)證先決條件,工藝特性研究 最終選定的范圍應(yīng)該跨越設(shè)備的已知變化和偏離。 參數(shù)的相互作用，可能會(huì)對(duì)性能產(chǎn)生多因素的影響，使用實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（DOE）方法可進(jìn)行有效地測(cè)試。,層析驗(yàn)證先決條件,小規(guī)模模型 如何證明小規(guī)模和生產(chǎn)規(guī)模的等效性？ 通常通過(guò)在既定參數(shù)下多次運(yùn)行并比較結(jié)果來(lái)實(shí)現(xiàn)。 評(píng)估影響工藝一致性的參數(shù)，如收率、洗脫圖譜、洗脫體積和/或保留時(shí)間 評(píng)估代表產(chǎn)品質(zhì)量的參數(shù)，如樣品純度、工藝相關(guān)和宿主細(xì)胞相關(guān)雜質(zhì)的水平。,層析驗(yàn)證先決條件,層析驗(yàn)證先決條件,舉例：疏水層析，小規(guī)模和生產(chǎn)規(guī)模輸入?yún)?shù)比較,操作參數(shù)的

5、識(shí)別和分級(jí) 為了建立低風(fēng)險(xiǎn)的工藝控制策略并將驗(yàn)證集中于保持產(chǎn)品質(zhì)量，把操作參數(shù)分為四類：,層析驗(yàn)證先決條件,層析驗(yàn)證先決條件,工藝穩(wěn)健性 定義：工藝穩(wěn)健性是指工藝在一個(gè)較寬的操作范圍下，能始終如一且可靠地生產(chǎn)出符合預(yù)定指標(biāo)的產(chǎn)品。一個(gè)穩(wěn)健的純化工藝不受內(nèi)源性變化的影響。,層析驗(yàn)證先決條件,內(nèi)源性變化 由于細(xì)胞培養(yǎng)/發(fā)酵的生物差異，原料會(huì)變化。這會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)品效價(jià)、質(zhì)量和宿主細(xì)胞雜質(zhì)水平、或工藝相關(guān)雜質(zhì)（細(xì)胞培養(yǎng)基成分）等的變化。 樣品長(zhǎng)時(shí)間存放也會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)品變化。 圍繞設(shè)定點(diǎn)波動(dòng)的動(dòng)態(tài)工藝控制也會(huì)帶來(lái)變化。 在極端條件下（由特性研究確定）運(yùn)行，結(jié)果會(huì)有極大差異。,層析驗(yàn)證先決條件,在定義工藝設(shè)計(jì)空間

6、時(shí)，要考慮以下幾點(diǎn)： 原料差異性 工藝差異性 工藝相關(guān)雜質(zhì) 最差情況工藝能力,層析驗(yàn)證先決條件,原料差異性： 為了有效的評(píng)估正常發(fā)酵/細(xì)胞培養(yǎng)差異性（效價(jià)、產(chǎn)品變異、宿主細(xì)胞雜質(zhì)、工藝相關(guān)雜質(zhì)、粘度）的影響，可能的話要測(cè)試多批原料。,層析驗(yàn)證先決條件,工藝差異性： 一些工藝條件和保存時(shí)間會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量。例如，蛋白A采用親和層析，低pH洗脫可能會(huì)導(dǎo)致樣品發(fā)生聚合，或是離子交換層析時(shí)高pH可能會(huì)導(dǎo)致樣品大量脫氨化。在這兩種情況中，必須證明在保存期限內(nèi)，下游工藝步驟可以將這些變異體降低至可接受水平。,層析驗(yàn)證先決條件,工藝相關(guān)雜質(zhì)： 工藝相關(guān)雜質(zhì)可能來(lái)自發(fā)酵（比如核酸、抗生素）或來(lái)自下游工藝（比如蛋

7、白A配基脫落，緩沖液組分）。檢測(cè)這些組分的去除，要采用上述研究的物料。另外，還可以進(jìn)行摻標(biāo)研究，特別是分析方法不適用或不夠靈敏時(shí)。,層析驗(yàn)證先決條件,最差情況工藝能力： 指在正常操作范圍內(nèi)處理極端原料，或者在最寬的可接受范圍內(nèi)處理正常原料。,層析驗(yàn)證先決條件,分析方法 純化的目的是去除工藝相關(guān)雜質(zhì)、產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)和污染物。因此在層析驗(yàn)證研究中使用的分析方法應(yīng)當(dāng)能夠可靠的檢測(cè)和定量這些物質(zhì)在不同緩沖體系中的預(yù)期范圍。要適當(dāng)控制這些方法以保證結(jié)果可靠。用于特定時(shí)期的分析方法，比如驗(yàn)證研究，應(yīng)證明它們適用于預(yù)期目的（比如靈敏度、線性、精度、準(zhǔn)確度）來(lái)確認(rèn)。用于日常檢測(cè)的分析方法也應(yīng)驗(yàn)證,層析驗(yàn)證先決條

8、件,微生物負(fù)載和內(nèi)毒素控制 層析步驟一般不在無(wú)菌條件下進(jìn)行，因此必須適當(dāng)控制微生物負(fù)載。在選擇填料、清洗液、保存條件和工藝設(shè)備時(shí),必須考慮生物負(fù)載控制。一旦有微生物（比如芽孢子類細(xì)菌）繁殖，填料將很難消毒。因此工藝設(shè)計(jì)時(shí)要避免引入微生物污染，這是很重要的。額外的控制并不少見(jiàn)。,層析驗(yàn)證先決條件,微生物負(fù)載和內(nèi)毒素控制 通常，柱子使用后經(jīng)消毒再用抑菌劑保存。產(chǎn)品和平衡液的制備和儲(chǔ)存應(yīng)盡量減少微生物的引入。層析系統(tǒng)的設(shè)計(jì)應(yīng)有助于生物負(fù)載控制，比如，必須避免不必要的儀表、閥門和死體積。在工藝開(kāi)發(fā)時(shí)，必須確定有效的柱子消毒程序，在生產(chǎn)規(guī)模一致性批次時(shí)進(jìn)行確認(rèn)，并且在日常工藝中監(jiān)測(cè)。,層析驗(yàn)證先決條件,

9、研發(fā)和特性研究文件 經(jīng)批準(zhǔn)的研究文件是工藝驗(yàn)證方案的基礎(chǔ)。研發(fā)和特性研究活動(dòng)應(yīng)該按照公司的政策進(jìn)行記錄、審核、批準(zhǔn)。這些文檔必須全部都能追溯到原始數(shù)據(jù)。轉(zhuǎn)讓文件（比如從研發(fā)者轉(zhuǎn)讓給商業(yè)操作者）可以參考這些信息，研究報(bào)告必須總結(jié)早期研究成果并描述工藝原理。這些研究可作為工藝特性研究的出發(fā)點(diǎn)。工藝特性研究要按照質(zhì)量部依據(jù)公司政策批準(zhǔn)的方案執(zhí)行。 。,層析驗(yàn)證先決條件,驗(yàn)證研究的規(guī)模,層析柱工藝驗(yàn)證,當(dāng)有類似設(shè)備或步驟，大部分公司會(huì)根據(jù)單元操作進(jìn)行驗(yàn)證。另一種方法是依據(jù)前驗(yàn)證的數(shù)據(jù)進(jìn)行模塊化驗(yàn)證。每個(gè)單元操作都應(yīng)該單獨(dú)考慮。設(shè)計(jì)驗(yàn)證研究時(shí)，要考慮每個(gè)單元操作的功能。,層析柱工藝驗(yàn)證,一致性批次：生產(chǎn)

10、規(guī)模驗(yàn)證 在一致性批次研究開(kāi)始前，要建立有操作參數(shù)的批生產(chǎn)記錄并通過(guò)批準(zhǔn)。這些操作參數(shù)來(lái)源于研發(fā)實(shí)驗(yàn)、特性研究以及早期的臨床生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)。 一致性批次生產(chǎn)的指標(biāo)和范圍通常和商業(yè)化批次一樣。他們的主要目的是，在生產(chǎn)環(huán)境下，工藝符合可接受標(biāo)準(zhǔn)。一致性批次生產(chǎn)時(shí)，取樣和分析都要在驗(yàn)證方案中定義。數(shù)據(jù)要記錄，在報(bào)告中分析，并與可接受標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較。驗(yàn)證報(bào)告也要分析偏差，以及和驗(yàn)證方案或批生產(chǎn)記錄不符合的地方。,層析柱工藝驗(yàn)證,一致性批次通常要進(jìn)行以下研究： 操作參數(shù)控制 層析柱性能控制 雜質(zhì)去除 微生物負(fù)載和內(nèi)毒素控制 層析柱清洗和再生 保存,層析柱工藝驗(yàn)證,操作參數(shù)的控制 一致性批次生產(chǎn)時(shí)，操作參數(shù)要在設(shè)

11、定點(diǎn)運(yùn)行而且要確認(rèn)它們始終在各自規(guī)定的范圍內(nèi)。 通常，操作范圍窄的設(shè)備需要更精細(xì)的控制和監(jiān)測(cè)程序。 在工藝的所有階段都要評(píng)價(jià)柱層析的參數(shù)：平衡、上樣、沖洗、洗脫、再生、清洗和保存,層析柱工藝驗(yàn)證,操作參數(shù)的控制 建立層析柱時(shí)，部分參數(shù)就確定了，比如柱高、柱體積和各類填料的柱效。 層析操作時(shí)通常還要監(jiān)測(cè)其它的參數(shù)，包括流速、保留時(shí)間、操作壓力、過(guò)柱的溶液體積、PH、電導(dǎo)、溫度以及工藝時(shí)間。例如，采用在線檢測(cè)來(lái)分段收集樣品，決定哪部分樣品要收集的標(biāo)準(zhǔn)通常是關(guān)鍵操作參數(shù)。 并非所有參數(shù)都與工藝直接相關(guān)，比如說(shuō)最大操作壓力通常受制于層析柱。,層析柱工藝驗(yàn)證,操作參數(shù)的控制 下游操作通常要使用各種溶液如

12、工藝緩沖液、病毒滅活溶液和層析柱再生/消毒溶液。溶液參數(shù)如PH和電導(dǎo)在制備和保存時(shí)可能會(huì)變化，但是在使用期間都應(yīng)該保持在可接受范圍內(nèi)。 溶液必須按照批生產(chǎn)記錄進(jìn)行配制并有適當(dāng)?shù)倪^(guò)程控制。,層析柱工藝驗(yàn)證,操作參數(shù)的控制 提前配制濃縮液，再通過(guò)計(jì)量泵或比例調(diào)節(jié)閥來(lái)稀釋，會(huì)使工藝更加復(fù)雜且需要額外的監(jiān)測(cè)。 梯度洗脫工藝，在柱前或混合器后通常有額外的傳感器來(lái)反饋控制，如UV，pH，電導(dǎo)率，或近紅外光譜水平。 若工藝要求偏離室溫操作，需要監(jiān)測(cè)熱交換器兩端或中間體儲(chǔ)罐的溫度。,層析柱工藝驗(yàn)證,層析柱性能監(jiān)測(cè) 一致性批次生產(chǎn)比日常生產(chǎn)需要更多的監(jiān)測(cè)和取樣。 層析柱性能通過(guò)分析輸出參數(shù)來(lái)監(jiān)測(cè)的（如色譜圖，運(yùn)

13、行記錄，完整步驟的確認(rèn)，收率），以此來(lái)保證產(chǎn)品質(zhì)量和雜質(zhì)水平在可接受的范圍內(nèi),層析柱工藝驗(yàn)證,層析柱性能監(jiān)測(cè) 層析用于各種分離，每個(gè)分離都應(yīng)取樣分析，證明該步的目的已達(dá)到。分析應(yīng)能證明產(chǎn)品和雜質(zhì)按照預(yù)期進(jìn)行分離。這對(duì)于那些影響最終產(chǎn)品安全性、效價(jià)和效力的特定雜質(zhì)特別重要。因此要證明這些雜質(zhì)能始終如一地被去除。,層析柱工藝驗(yàn)證,層析柱性能監(jiān)測(cè) 一般認(rèn)為回顧色譜圖是定性，要爭(zhēng)取將峰形比較定量化。可以分析幾個(gè)特征，如保留時(shí)間（或體積），峰面積（要在檢測(cè)器的線性范圍內(nèi)），和峰對(duì)稱性。穿透上樣法測(cè)柱效是一個(gè)準(zhǔn)確且靈敏的工具，用于監(jiān)測(cè)層析柱性能和填料完整性。此外，色譜圖出現(xiàn)的任何異常變化都要記錄和調(diào)查，如

14、峰/谷/雙肩的數(shù)量和形狀。目的是發(fā)現(xiàn)和識(shí)別層析文件不符常規(guī)的地方。由于變化會(huì)受到諸如原料等的影響，因此在評(píng)價(jià)色譜圖時(shí)要比較定性和定量限度。,層析柱工藝驗(yàn)證,雜質(zhì)去除 一致性批次驗(yàn)證要證明雜質(zhì)（如宿主細(xì)胞蛋白、DNA）去除到預(yù)期水平具有重現(xiàn)性。選擇研究雜質(zhì)要依據(jù)研發(fā)時(shí)定義的該步驟的目的，且要滿足與生產(chǎn)規(guī)模一樣的標(biāo)準(zhǔn)。,層析柱工藝驗(yàn)證,微生物負(fù)載和內(nèi)毒素控制 驗(yàn)證期間，微生物負(fù)載和內(nèi)毒素控制要通過(guò)測(cè)試每一柱的樣品來(lái)證明。驗(yàn)證期間的微生物負(fù)載和內(nèi)毒素控制反應(yīng)層析工藝所用清洗液和保存液的效力，也反應(yīng)商業(yè)設(shè)備的清洗和消毒效力。日常生產(chǎn)要設(shè)置控制限（或過(guò)程控制）。,層析柱工藝驗(yàn)證,小規(guī)模驗(yàn)證研究 小規(guī)模驗(yàn)

15、證研究包括不能采用生產(chǎn)規(guī)模的研究（如病毒去除驗(yàn)證）或不希望采用生產(chǎn)規(guī)模的研究（如填料壽命研究）。這些研究可以在生產(chǎn)規(guī)模研究的前、中、后進(jìn)行。,層析柱工藝驗(yàn)證,病毒去除研究 病毒去除研究應(yīng)證明層析步驟去除和滅活病毒的能力。由于生產(chǎn)設(shè)備不適合引入病毒，病毒去除研究采用能代表生產(chǎn)工藝的小規(guī)模模型。生產(chǎn)工藝的病毒去除研究，連同原料篩選和適當(dāng)?shù)漠a(chǎn)品測(cè)試，保證從產(chǎn)品傳遞到患者的病毒下降到安全水平。迄今為止，還沒(méi)有來(lái)源于細(xì)胞系的生物技術(shù)產(chǎn)品牽扯到病毒傳染中。,層析柱工藝驗(yàn)證,病毒去除研究 病毒去除驗(yàn)證從研發(fā)早期開(kāi)始，到臨床III期要求更為嚴(yán)格。 所有選定步驟都要經(jīng)過(guò)適合病毒復(fù)制的培養(yǎng)皿測(cè)試。 研究要精心設(shè)計(jì)

16、，可以的話，要研究工藝的最差情況。如果能夠證明特定步驟能夠充分去除病毒，就不需要評(píng)價(jià)純化工藝每個(gè)步驟的病毒去除。如果可以，要確定病毒在層析峰中的分布情況，這可增加工藝知識(shí)。,層析柱工藝驗(yàn)證,填料壽命研究 填料壽命研究證明填料在預(yù)期使用期限內(nèi)，能夠始終保持可接受的性能。該研究先采用小規(guī)模預(yù)估填料壽命，為大規(guī)模生產(chǎn)提供保證。此外在生產(chǎn)規(guī)模，要通過(guò)驗(yàn)證方案進(jìn)行長(zhǎng)期確認(rèn)。另一種確認(rèn)方法是將小規(guī)模研究柱子性能的可接受標(biāo)準(zhǔn)納入日常工藝監(jiān)控程序。,層析柱工藝驗(yàn)證,填料壽命研究 生產(chǎn)規(guī)模壽命研究通常采用統(tǒng)計(jì)過(guò)程控制和性能屬性監(jiān)測(cè)趨勢(shì)，來(lái)核實(shí)已驗(yàn)證的操作參數(shù)，如最大使用次數(shù)和或最長(zhǎng)使用期限。 隨著重復(fù)使用和長(zhǎng)期

17、儲(chǔ)存，填料性能會(huì)發(fā)生改變。,層析柱工藝驗(yàn)證,填料壽命研究 影響填料壽命的因素有: 料液性質(zhì)(雜質(zhì)的數(shù)量和性質(zhì))， 所處的工藝階段（捕獲VS精純）， 填料類型， 工藝條件（包括再生和清洗）， 儲(chǔ)存條件 柱子的重裝。,層析柱工藝驗(yàn)證,層析柱清洗和再生 層析填料專用于一個(gè)產(chǎn)品，然而，批與批之間的攜帶量應(yīng)最小化。 多次使用導(dǎo)致填料老化的最重要因素之一是再生。 在進(jìn)行驗(yàn)證研究設(shè)計(jì)時(shí)就應(yīng)考慮介質(zhì)的再生方法，以便建立介質(zhì)重復(fù)使用限度。在工藝開(kāi)發(fā)階段，就應(yīng)開(kāi)發(fā)有效的介質(zhì)清潔程序，以便介質(zhì)可以重復(fù)使用并且提供充分的消毒。,層析柱工藝驗(yàn)證,層析柱清洗和再生 介質(zhì)清洗程序的有效性通過(guò)縮小規(guī)模前驗(yàn)證研究建立，然后在生

18、產(chǎn)規(guī)模條件下，通過(guò)一個(gè)驗(yàn)證方案或者通過(guò)連續(xù)的監(jiān)測(cè)進(jìn)行確認(rèn)。介質(zhì)的清潔程序應(yīng)有效，以阻止殘留物的積累。這將最小化對(duì)后續(xù)批的殘留，保持介質(zhì)的性能。,層析柱工藝驗(yàn)證,有效的介質(zhì)清潔和最小化攜帶量可按照如下程序進(jìn)行空白/模擬洗脫來(lái)證明： 清洗和儲(chǔ)存柱子 按往常一樣準(zhǔn)備柱子，然而不上樣品或使用平衡液取代樣品進(jìn)行上樣。 進(jìn)行常規(guī)的后續(xù)步驟，包括洗脫步驟并收集代表常規(guī)樣品洗脫體積的洗脫液。 進(jìn)行產(chǎn)品殘留和雜質(zhì)殘留量測(cè)試。,層析柱工藝驗(yàn)證,儲(chǔ)存 介質(zhì)儲(chǔ)存溶液應(yīng)能夠控制微生物的生長(zhǎng)，同時(shí)與介質(zhì)和設(shè)備相容 儲(chǔ)存溶液的有效性應(yīng)通過(guò)抑制細(xì)菌和抑制真菌驗(yàn)證，同時(shí)評(píng)價(jià)對(duì)介質(zhì)的潛在影響（例如配基脫落或介質(zhì)基質(zhì)降解）。 通常

19、用于生物負(fù)載和內(nèi)毒素測(cè)試的樣品取自保存后。 儲(chǔ)存時(shí)間應(yīng)進(jìn)行確認(rèn)。在平衡時(shí)，儲(chǔ)存溶液的去除應(yīng)進(jìn)行證明。 在介質(zhì)壽命驗(yàn)證過(guò)程中已裝填或未裝填介質(zhì)的儲(chǔ)存條件將進(jìn)行驗(yàn)證。因?yàn)樵谛∫?guī)模條件下進(jìn)行前瞻性的、長(zhǎng)期的儲(chǔ)存研究是不切實(shí)際的。,層析柱工藝驗(yàn)證,工藝相關(guān)雜質(zhì) 除了生產(chǎn)規(guī)模一致性批測(cè)試，層析柱壽命的小規(guī)模研究將用于證明介質(zhì)能始終如一地去除相關(guān)雜質(zhì)（如，宿主細(xì)胞蛋白）。這些數(shù)據(jù)在支持驗(yàn)證雜質(zhì)的去除以取代進(jìn)行放行測(cè)試的需求方面是有效的,層析柱工藝驗(yàn)證,工藝相關(guān)雜質(zhì) 色譜介質(zhì)也可能引入雜質(zhì)到樣品中（脫落物）。這對(duì)于那些擁有高分子量配基的介質(zhì)來(lái)說(shuō)是尤其重要的，例如蛋白A或MAbs連接的介質(zhì)基質(zhì)，它們將有進(jìn)入后

20、續(xù)純化步驟的風(fēng)險(xiǎn)，而在隨后的超濾過(guò)程中不能除去，最終進(jìn)入到蛋白制劑中。因此，對(duì)于這些類型的介質(zhì)，在介質(zhì)壽命研究過(guò)程中，配基的脫落也應(yīng)進(jìn)行調(diào)查。,層析柱工藝驗(yàn)證,工藝相關(guān)雜質(zhì) 擁有小分子功能基團(tuán)的介質(zhì)（如離子交換介質(zhì)）也可能脫落到樣品中。通常，對(duì)于這些類型的介質(zhì)，由于它們的穩(wěn)定性（也就是很低水平的脫落）和與產(chǎn)品共純化的低風(fēng)險(xiǎn)性（也就是它們將在隨后的超濾和色譜純化過(guò)程中除去），并不進(jìn)行配基脫落檢查。有關(guān)介質(zhì)的脫落和溶出信息通常可在廠家提供的法規(guī)支持文件中找到。共純化的可能性和潛在的后果，如果某種配基確實(shí)共純化，應(yīng)在驗(yàn)證測(cè)試中決定。,層析柱工藝驗(yàn)證,驗(yàn)證文件 驗(yàn)證文件要清楚地證明工藝按照設(shè)計(jì)進(jìn)行安裝和運(yùn)行，能夠重復(fù)地產(chǎn)生預(yù)期結(jié)果。 主要的驗(yàn)證文件由經(jīng)批準(zhǔn)的包含可接受標(biāo)準(zhǔn)的方案和相關(guān)的最終報(bào)告組成。驗(yàn)證主計(jì)劃，工藝特性報(bào)告，和其他的研究報(bào)告為這些文件提供基礎(chǔ)保證。 方案和報(bào)告應(yīng)當(dāng)為生產(chǎn)工藝提供數(shù)據(jù)支持。 每個(gè)層析步驟可能有一個(gè)單獨(dú)的方案和報(bào)告，或者一個(gè)完整的純化工藝采用一個(gè)大的方案。,層析柱工藝驗(yàn)證,方案和報(bào)告 層析系統(tǒng)驗(yàn)證的方案和報(bào)告和其他工藝驗(yàn)證方案一樣。開(kāi)發(fā)方案要基于研發(fā)報(bào)告的數(shù)據(jù)。要清楚定義可接受標(biāo)