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1、1,艾滋病 (AIDS),1,2,實(shí) 驗(yàn) 室 檢 查,2,3,免疫學(xué)檢測(cè),流式細(xì)胞儀測(cè)定,3,4,血清學(xué)檢測(cè)(),HIV抗體的初篩試驗(yàn)ELISA(酶聯(lián)免疫試驗(yàn)),4,5,血清學(xué)檢測(cè)(),HIV抗體的確證試驗(yàn)Western blot (免疫印跡試驗(yàn)),5,6,血清學(xué)檢測(cè)(),HIV抗原檢測(cè)ELISA夾心法,測(cè)定p24抗原 敏感性很高(710 pg/ml) 特異性稍差(可有假陽(yáng)性),6,7,分子生物學(xué)檢測(cè)(1),HIV RNA檢測(cè)RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)),PCR:高溫變性(94)低溫退火(55)適溫延伸(72);經(jīng)2530個(gè)循環(huán),成倍數(shù)擴(kuò)增 熒光定量PCR:比常規(guī)PCR多一個(gè)寡聚核苷酸

2、探針(帶一個(gè)熒光發(fā)光分子和一個(gè)熒光淬滅分子) 應(yīng)用:PCR查PBMCs前病毒DNA;RT-PCR查血漿中的病毒RNA,7,8,分子生物學(xué)檢測(cè)(2),淋巴細(xì)胞HIV RNA檢測(cè) Northern印跡雜交(Northern blot),原理: RNA片段經(jīng)電泳分離,從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜,再用探針雜交,8,9,分子生物學(xué)檢測(cè)(3),HIV變異株檢測(cè)Sanger測(cè)序法,原理:核酸擴(kuò)增時(shí),核苷酸在某一固定點(diǎn)開(kāi)始,隨機(jī)在某一特定的堿基處終止,產(chǎn)生A、T、C、G四組不同長(zhǎng)度的一系列核苷酸,通過(guò)在尿素變性的PAGE膠上電泳,獲得DNA序列,9,10,病毒檢測(cè),血漿、單核細(xì)胞、腦脊液可分離出HIV 操作

3、復(fù)雜,主要用于科研,10,11,診 斷,11,12,診斷原則,流行病學(xué)史:有靜脈注射毒品史;多個(gè)性伴和不潔性生活史;輸入未經(jīng)HIV抗體檢測(cè)的血液和血制品史;HIV抗體陽(yáng)性所生的子女;其它(如職業(yè)暴露或醫(yī)源性感染史)。 臨床表現(xiàn): 高危對(duì)象出現(xiàn)上感樣及單核細(xì)胞增多癥樣表現(xiàn), 頸、腋及枕部淋巴結(jié)腫大,肝脾腫大,可考慮急性HIV感染。 無(wú)癥狀期、艾滋病期臨床表現(xiàn)。 實(shí)驗(yàn)室檢查:HIV抗體陽(yáng)性,并經(jīng)確證試驗(yàn)確認(rèn)。CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)明顯減少。HIV RNA和P24抗原的檢測(cè)有助于早期診斷新生兒的HIV感染。,12,13,診斷標(biāo)準(zhǔn),急性期 流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)、HIV抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽(yáng)性 僅實(shí)驗(yàn)室檢查HI

4、V抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽(yáng)性 無(wú)癥狀期 流行病學(xué)史、HIV抗體陽(yáng)性 僅實(shí)驗(yàn)室檢查HIV抗體陽(yáng)性,13,14,診斷標(biāo)準(zhǔn),艾滋病期 流行病學(xué)史,HIV抗體陽(yáng)性,臨床表現(xiàn)有下列一項(xiàng)或以上: 1.短期(6個(gè)月內(nèi))體重下降10以上;2.咳嗽或腹瀉超過(guò)4周;3.持續(xù)或間歇發(fā)熱超過(guò)4周;4.全身淋巴結(jié)腫大;5.反復(fù)帶狀皰疹或慢性播散性HSV感染;6.口咽念珠菌?。?.全身搔癢性皮炎;8.反復(fù)發(fā)生的敗血癥;9.深部真菌感染,馬爾尼非青霉菌;10.肺孢子蟲(chóng)肺炎;11.活動(dòng)性巨細(xì)胞病毒感染;12.弓形蟲(chóng)腦病。13.反復(fù)發(fā)生、難治性肺部感染或進(jìn)展迅速的活動(dòng)性結(jié)核?。?4.中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損、占位性病變或中、青年癡呆癥;15.

5、卡波西肉瘤或淋巴瘤。,14,15,診斷標(biāo)準(zhǔn),HIV抗體陽(yáng)性 CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)200/mm3 無(wú)上述表現(xiàn)或癥狀,15,16,鑒別診斷,原發(fā)性CD4+淋巴細(xì)胞減少癥 無(wú)HIV感染流行病學(xué)資料,HIV-1和HIV-2病原學(xué)檢測(cè)陰性。 繼發(fā)性CD4+淋巴細(xì)胞減少 腫瘤和自生免疫性疾病(autoimmune disease)化療或免疫抑制治療后。,16,17,預(yù) 后,17,18,影響預(yù)后的因素,感染的HIV型別及亞型: HIV-1較HIV-2臨床進(jìn)展快 并發(fā)的機(jī)會(huì)性感染: 同時(shí)合并卡波濟(jì)肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高;合并丙型肝炎者預(yù)后差 抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療: 治療改變了艾滋病進(jìn)程,18,19,HIV感染未治療者的結(jié)局,典型 (70%80%):510年進(jìn)展為艾滋病

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