1、課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,1,緒言 共六部分，介紹微生物與微生物學(xué)的概念，微生物學(xué)發(fā)展簡史，微生物學(xué)理論與技術(shù)成就及應(yīng)用，獸醫(yī)微生物學(xué)的地位、任務(wù)與貢獻。 細菌總論 共七章，介紹細菌的形態(tài)、構(gòu)造、生理，消毒與滅菌，細菌生態(tài)、致病機理、遺傳變異，細菌分類與命名等。 免疫基礎(chǔ) 共七章，介紹抗原抗體，免疫系統(tǒng)，抗感染免疫，變態(tài)反應(yīng)，免疫調(diào)節(jié)，免疫技術(shù)及應(yīng)用等。 細菌各論 共十二章，介紹各屬重要病原細菌的形態(tài)、生化特性、致病性、微生物學(xué)診斷和免疫防治等。 真菌 共二章，介紹真菌的分類、形態(tài)、生化及致病特性，真菌病的診斷與防治等。 病毒 共十四章，介紹病毒的形態(tài)、構(gòu)造、繁殖、遺傳、培養(yǎng)，病毒的致

2、病性。各科屬重要病毒形態(tài)、生化及致病特性，微生物學(xué)診斷和防治等。 實驗 共十多個，顯微鏡油鏡的使用，細菌形態(tài)及構(gòu)造觀察，細菌抹片制備及染色，培養(yǎng)基的制備，細菌的分離培養(yǎng)、生長表現(xiàn)觀察、生化試驗、藥敏試驗，沉淀反應(yīng)和凝集反應(yīng)，重要病原菌的認識，真菌與病毒培養(yǎng)測定等。,內(nèi)容簡介,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,2,第一章 細菌的形態(tài)與構(gòu)造 第二章 細菌的生理 第三章 消毒與滅菌 第四章 細菌的微生態(tài) 第五章 細菌的致病機理 第六章 細菌的遺傳變異 第七章 細菌的分類與命名,第一篇,總論,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,3,第二章 細菌的生理,第一篇,第一節(jié) 細菌的化學(xué)組成 第二節(jié) 細菌的營養(yǎng)與

3、代謝過程 第三節(jié) 細菌的生長繁殖 第四節(jié) 細菌的人工培養(yǎng) 第五節(jié) 細菌生化試驗 第六節(jié) 細菌生存的調(diào)節(jié),課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,4,第一節(jié) 細菌的化學(xué)組成,細菌的元素成分：碳、氮、氫、氧四種主要的有機元素和磷、鉀、鎂、硫、鈣以及鐵、鈉、氯、銅、鋅等各種灰分元素。這些元素主要以化合物的狀態(tài)存在，構(gòu)成了細菌細胞的水分和有機物、無機物等成分。 (一)水分 水分在細菌細胞中含量最大，約占菌細胞總重量的75-80。細菌的芽胞含水較少（40左右）。菌體中的水分，可分為結(jié)合水和非結(jié)合水，前者是蛋白質(zhì)等復(fù)雜有機物質(zhì)的組成成分，后者是細胞物質(zhì)的溶媒。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,5,(二

4、)固體成分(干物質(zhì)) 細菌細胞內(nèi)的固體成分，約占總重量15-25。包括有機物和礦物質(zhì)。有機物占90-97，礦物質(zhì)占3-10。1.有機物 包括蛋白質(zhì)、核酸、糖、脂類等。 蛋白質(zhì) 細菌細胞體內(nèi)含有大量的蛋白質(zhì)，約占固體成分的50，多者可達80，少者只有13-16。蛋白質(zhì)中包括單純蛋白質(zhì)和復(fù)合蛋白質(zhì)(如核蛋白、糖蛋白、脂蛋白等)，后者含量較多，也較重要。 核糖核酸 包括RNA和 DNA。前者在胞槳內(nèi)，功能是翻譯遺傳信息，控制蛋白質(zhì)的合成(包括酶)，后者在核質(zhì)中，儲存和轉(zhuǎn)錄遺傳信息。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,6,糖 糖占10-30，如莢膜多糖、纖維素、半纖維素、淀粉等。 糖類往往和蛋

5、白質(zhì)或脂類結(jié)合存在，共同構(gòu)成細胞構(gòu)造的組成物質(zhì)。一些糖類呈游拐狀態(tài)。糖類是細菌的重要碳素來源，是細菌活動所需能量的原料。 脂類 脂類包括游離的脂肪酸、中性脂肪、磷脂、類脂質(zhì)和蠟質(zhì)等，含量約為3-7，多者可達40，少者不到2。脂類常和蛋白質(zhì)或糖類結(jié)合為脂蛋白或糖脂，或者形成蠟質(zhì)，成為細胞的構(gòu)造成分。 其他化合物 少量維生素(主要是B族維生素)；生長因素、色素等。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,7,2.礦物質(zhì)(灰分) 礦物質(zhì)約占3-10，以磷、鉀、硫、鈣、鐵、鎂、氯、鈉等為主，尚有銅、鋅、碘及其他微量元素。其中以磷最多，鉀次之。這些礦物質(zhì)元素，一部分參與有機物的組成，一部分則組成無機鹽

6、類。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,8,細菌為了生長繁殖，必須從外界攝取各種營養(yǎng)物質(zhì)，進行分解與合成代謝。（一）細菌的營養(yǎng)需要及營養(yǎng)類型 細菌的營養(yǎng)需要可以分為：水、碳素營養(yǎng)、氮素營養(yǎng)、灰分元素及生長因素等。1.水 水是微生物細胞的重要組成成分之，同時又是一種良好的溶媒，各種生命活動必須有水。2.碳素營養(yǎng)和氮素營養(yǎng) 碳素和氮素都是構(gòu)成原生質(zhì)所必需的主要成分。由于各種微生物的合成能力不同，對各種營養(yǎng)物質(zhì)，特別是對碳素營養(yǎng)和氮素營養(yǎng)的利用，具有明顯的選擇性。,第二節(jié) 細菌的營養(yǎng)與代謝過程,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,9,有的細菌有高度合成能力，可以利用無機碳和氮作養(yǎng)料，有

7、的則不能，必須有機物存在才能生長。 根據(jù)微生物對碳素利用能力的不同，可分為兩種類型：自養(yǎng)菌和異養(yǎng)菌。 自養(yǎng)菌 有些細菌有高度的合成能力，利用CO2或碳酸鹽類作為唯一碳源，利用氨、氨鹽、硝酸鹽或亞硝酸鹽等作為氮源。這類細菌又可稱為無機營養(yǎng)菌。又分為化能自養(yǎng)菌和光能自養(yǎng)菌。 異養(yǎng)菌 這類細菌對無機物的利用能力較差，不能利用C02或碳酸鹽類為唯一的碳素營養(yǎng)，需要有較復(fù)雜的有機化合物，如糖類、醇類和有機酸等作為碳源才能生長，又稱為有機營養(yǎng)菌。又分為化能異養(yǎng)菌和光能異養(yǎng)菌。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,10,根據(jù)其寄居對象的不同，異養(yǎng)菌又可分為腐物寄生菌和活物寄生菌。前者通常利用死的有機物

8、質(zhì)作為營養(yǎng)；后者需寄生在動、植物的活組織中，吸取營養(yǎng)而營寄生生活，病原菌即屬于這一類。 微生物對具體營養(yǎng)物的利用有一定的專性范圍。這種專性，在微生物的鑒定上具有重大意義。 3.灰分元素營養(yǎng) 細菌對灰分元素的需要量很少，但灰分元素對細菌的作用卻十分重要。它們有些參與細胞組成，有些則組成無機鹽類，有維持原生質(zhì)膠體狀態(tài)和調(diào)節(jié)滲透壓。有些更參與酶的組成或起激活酶的作用。 灰分元素對微生物的生長繁殖非常重要。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,11,4.生長因素 有些細菌的生長還需要少量的生長因素，生長因素實際上就是細菌生長所必需的微量有機物質(zhì)，包括維生素類（特別是B族維生素）和一些有機酸、嘌呤

9、、嘧啶等，如硫胺素、核黃袁、生物素、泛酸、葉酸等。這些生長因素多半是輔基或輔酶的主要成分，對細菌的生命活動至關(guān)重要。充足的生長因素可使細菌生長加快數(shù)百倍。 各種細菌對生長因素的需要情況有所不同。某些微生物能合成和積累生長因素的特性，已被用于人類生產(chǎn)和醫(yī)藥、食品、飼料等。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,12,(二)細菌的酶 酶是活細胞產(chǎn)生的有機催化劑。 胞內(nèi)酶與胞外酶 細菌含有各種酶系統(tǒng)，包括很多種酶（大腸桿菌有30多種）。有些酶僅于細胞內(nèi)部存在和起作用，稱為胞內(nèi)酶。如呼吸酶類等。有些則透過細胞壁膜分泌于細菌體外，稱為胞外酶。如水解酶類等。 固有酶與誘導(dǎo)酶 在正常情況下穩(wěn)定存在和發(fā)揮

10、作用的酶稱為固有酶。而當(dāng)環(huán)境中存在某些本來不能利用營養(yǎng)物質(zhì)時，也可以誘導(dǎo)產(chǎn)生能對該物質(zhì)起作用的相應(yīng)酶類，稱為誘導(dǎo)酶。當(dāng)誘導(dǎo)物質(zhì)消除后，誘導(dǎo)酶也隨著不再產(chǎn)生，而固有酶則仍然存在。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,13,(三)細菌的呼吸 1.細菌呼吸的概念 由細菌引起的，使代謝基質(zhì)發(fā)生復(fù)雜的氧化-還原作用，以釋放能量，供細菌生命活動利用的生物化學(xué)過程，稱為細菌的呼吸。 細菌的呼吸作用既是能量代謝過程，也是物質(zhì)代謝過程。由細菌的呼吸酶系統(tǒng)完成，其主要的化學(xué)作用，是使有機物分子的碳-碳鏈破裂，分解和釋放能量。呼吸酶分為兩大類：發(fā)酵酶類和氧化還原酶類。 一種細菌只能具有一定種類和數(shù)量的呼吸酶，

11、其呼吸作用，可利用一定的基質(zhì)，產(chǎn)生一定的產(chǎn)物，這是具有種的特征性，在生產(chǎn)上和微生物鑒定上有實際意義。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,14,2.細菌呼吸的類型 具有不同呼吸酶系統(tǒng)的細菌，在進行呼吸時，對于空氣中分子氧利用能力也是不同的。據(jù)此，可以把細菌及其呼吸作用分為三個主要類型。 (1)厭氧性細菌及厭氧性呼吸 有些細菌由于缺乏利用分子氧的酶，它們的呼吸屬于厭氧性呼吸，這類細菌稱為厭氧性細菌。這些細菌只能在沒有分子氧存在于的環(huán)境中，才能夠進行呼吸及生長發(fā)育，分子狀態(tài)的氧對這類細菌來說，不但不能被利用，而且還是有害的。 厭氧性呼吸是使基質(zhì)脫氫(或失去電子)氧化，并把脫出來的活化氫(電子

12、)轉(zhuǎn)移給非氧受氫體，使基質(zhì)氧化而釋放能量的呼吸過程。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,15,(2)需氧性細菌及需氧性呼吸 在有分子狀態(tài)氧存在的情況下，才能進行呼吸及生長發(fā)育的細菌稱需氧性細菌。 需氧性呼吸是使基質(zhì)脫氫(或失去電子)氧化，并把脫出的活化氫(電子)轉(zhuǎn)移給分子氧，使基質(zhì)氧化釋放能量的呼吸過程。 (3)兼性細菌及其呼吸 兼性細菌具有更復(fù)雜的酶系統(tǒng)，不論在有或沒有分子狀態(tài)氧的情況下，均能進行呼吸和生長發(fā)育，它們既可以營需氧性呼吸，也可以營厭氧性呼吸。 需氧性呼吸基質(zhì)分解徹底，可獲得更多的能量，所以兼性細菌在可能時多營需氧性呼吸。大多數(shù)細菌為兼性呼吸菌。,第一章,課件002,獸醫(yī)

13、微生物學(xué)教學(xué)課件,16,(四)細菌的代謝過程細菌與動物等真核生物新陳代謝的主要區(qū)別 第一、細菌生長和繁殖速度極快，是動物細胞10-100倍。 第二、細菌利用能源的能力遠強于動物細胞。 第三、細菌的營養(yǎng)物質(zhì)更加多種多樣，代謝途徑更多。 第四、細菌可利用非常流水線方式合成大分子物質(zhì)。 第五、細菌能產(chǎn)生如肽聚糖、脂多糖、磷壁酸等特殊物質(zhì)。 細菌的代謝過程可分為：物質(zhì)攝取與排出、生物合成、聚合作用及組裝四個步驟。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,17,1.物質(zhì)攝取與排出 細菌的營養(yǎng)物質(zhì)包括能量物質(zhì)及其他代謝基質(zhì)。物質(zhì)吸收是從周圍環(huán)境獲得營養(yǎng)，排出是將代謝物質(zhì)或廢物運出細胞。革蘭氏陽性或陰性菌

14、的細胞膜是一層雙脂膜，具有高度的選擇透性，革蘭氏陰性菌的OMP等在物質(zhì)吸收過程中也發(fā)揮重要作用。 物質(zhì)主要通過單純擴散、促進擴散、主動輸送及基團轉(zhuǎn)位等方式進出細菌細胞。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,18,單純擴散 亦稱被動擴散，是一種最簡單的物質(zhì)交換方式。細胞膜兩側(cè)的物質(zhì)靠濃度差(濃度梯度)進行分子擴散，不需要能量。此種方式無特異性或選擇性，細胞內(nèi)外溶質(zhì)濃度平衡時，擴散便停止，不是物質(zhì)運輸?shù)闹饕绞?。?2、水、乙醇等。 促進擴散 某些物質(zhì)如糖或氨基酸與位于細胞膜的特異性載體蛋白相結(jié)合，而后將其轉(zhuǎn)運至細胞內(nèi)外。具有特異性和選擇性，不需要能量。 主動輸送 是細菌吸收營養(yǎng)物質(zhì)的一種主

15、要方式，與促進擴散一樣，需要特異性載體蛋白，能將特異性溶質(zhì)逆濃度梯度泵入泵出細胞，需要能量。如乳糖等。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,19,基團轉(zhuǎn)位 物質(zhì)在運輸?shù)耐瑫r受到化學(xué)修飾，需要特異性載體蛋白參與，需要能量。 金屬離子的吸收 細菌通過分泌載鐵體攝取與蛋白結(jié)合的Fe3+，形成含鐵螯合物，通過特異的主動輸送，進入菌體細胞。 2.生物合成 吸收的各種前體代謝物通過各種代謝途徑，合成所需物質(zhì)：多種氨基酸、核苷酸、糖、脂肪酸及其大分子物質(zhì)。各種細菌的合成途徑和合成能力不同，對營養(yǎng)的需要以及代謝產(chǎn)物也不盡相同，可作為細菌鑒定指標(biāo)。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,20,3.聚合

16、作用 復(fù)制 細菌DNA的聚合作用稱為復(fù)制。其DNA復(fù)制從基因組的特定起始部位開始，進行半保留復(fù)制。最后由酶連接成完成DNA鏈。 轉(zhuǎn)錄 細菌的轉(zhuǎn)錄是由同一個RNA聚合酶、催化合成細菌 mRNA、tRNA 及 rRNA。該酶還可以RNA作為母板合成DNA互補鏈。 翻譯 是蛋白質(zhì)合成過程。20種氨基酸激活后與相應(yīng)的 tRNA結(jié)合，形成的氨基酰-tRNA與核糖體結(jié)合。氨基酸根據(jù) mRNA上的密碼子序列聚合成多肽。 細菌具有高效的翻譯合成能力。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,21,4.組裝 細菌組裝有兩種方式：自我組裝（如鞭毛及核糖體等）及指導(dǎo)組裝（如表面膜結(jié)構(gòu)等）。第三節(jié) 細菌的生長繁殖

17、細菌細胞的生長繁殖，體現(xiàn)在個體和群體兩方面。1.細菌個體的生長繁殖 細菌以二分裂法進行無性繁殖。大腸桿菌菌體的分裂過程涉及30多個基因的調(diào)控。 一個菌體分裂為兩個菌體所需的時間稱為世代時間。大腸桿菌等在適宜的條件下，分裂一次僅需 20 min。分支桿菌等繁殖較慢，需18-24h才分裂一次。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,22,2.細菌群體的生長繁殖 如將細菌接種在液體培養(yǎng)基并置于適宜的溫度中，定時取樣檢查活菌數(shù)，了解其生長過程的規(guī)律。以時間為橫坐標(biāo)，以活菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標(biāo)，可得出細菌生長曲線。細菌生長繁殖可分為4個期。 遲緩期 是細菌初到新環(huán)境的適應(yīng)期。此時菌體增大、代謝活躍、合成

18、所需酶系統(tǒng)。RNA含量明顯增多，DNA無變化，此時細菌數(shù)并不增加。l-4h。 對數(shù)期 細菌迅速分裂繁殖，活菌數(shù)以幾何級數(shù)增長，生長曲線近斜線。該期病原菌致病力最強，其形態(tài)染色及生理均較典型，對抗菌藥物敏感。6-10h。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,23,穩(wěn)定期 因營養(yǎng)消耗、代謝產(chǎn)物蓄積等，此時新繁殖的活菌與死菌平衡，活菌數(shù)最多。該期形態(tài)染色不特異。產(chǎn)生毒素等代謝產(chǎn)物。一般8h。 衰亡期 細菌死亡速度加大，繁殖速度變小。如不移植到新培養(yǎng)基，最終可全部死亡。此期菌體變形或自溶，染色不典型。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,24,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,25

19、,第四節(jié) 細菌的人工培養(yǎng) 細菌培養(yǎng)是微生物學(xué)研究和實踐的重要技術(shù)。以此可培養(yǎng)、鑒定和利用細菌。 培養(yǎng)細菌，需為其提供適宜的營養(yǎng)物質(zhì)、酸堿度、溫度及氣體環(huán)境等。1. 培養(yǎng)基 是人工配制的含有細菌生長繁殖所需營養(yǎng)的基質(zhì)。培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后才能使用。 制備培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)由牛肉浸汁、牛肉浸膏、肝浸汁、蛋白陳、NaCl、磷酸鹽、葡萄糖、血液、血清、腹水、雞蛋等提供。pH一般調(diào)整至7.2-7.6 。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,26,培養(yǎng)基可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基和營養(yǎng)培養(yǎng)基；固體、半固體及液體培養(yǎng)基；鑒別、選擇及厭氧培養(yǎng)基等。2. 酸堿度 每種細菌均有可適pH范圍及最適pH。大多數(shù)細菌可在pH 6-

20、8之間以生長，但多數(shù)細菌的最適pH 為7.2-7.6。 3. 溫度 不同細菌適應(yīng)的溫度范圍不同，細菌有各自的可適溫度范圍及最適溫度。根據(jù)細菌適應(yīng)的溫度范圍，可將細菌分為3類： 嗜冷菌，范圍 5-30，最適10-20； 嗜溫菌，范圍10-45，最適20-40； 嗜熱菌，范圍25-95，最適50-60。 病原菌均為嗜溫菌，最適溫度為37。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,27,4. 氣體環(huán)境 根據(jù)細菌對氧的需要，將其分為厭氧菌、需氧菌及兼性厭氧菌。需氧菌行需氧呼吸，須在有一定濃度的游離氧的條件下才能生長繁殖；厭氧菌行厭氧呼吸，須在無游離氧的條件下才能存活生長；兼性厭氧菌既可需氧呼吸，又可

21、厭氧呼吸，通常在有氧條件比無氧環(huán)境生長更好。有些細菌生長還需一定濃度的N2或CO2 環(huán)境。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,28,第五節(jié) 細菌生化試驗,各種細菌分解能力不同，代謝基質(zhì)與產(chǎn)物也不同。據(jù)此可設(shè)計特定的生化試驗，區(qū)別和鑒定細菌。 （一）細菌的代謝產(chǎn)物 1.無機酸和有機酸 有些細菌能產(chǎn)生無機酸，有的可產(chǎn)生有機酸。無機酸如硫酸和硝酸等；有機酸如乳酸、醋酸、丙酸、丁酸等，與食品加工有關(guān)。也可用于細菌鑒定。 2.醇類、酯類和其他芳香物質(zhì) 這類物質(zhì)與工業(yè)生產(chǎn)和農(nóng)、畜產(chǎn)品加工利用有關(guān)。如乙醇、丁醇等。用于釀酒、乳品加工、飼料加工等。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,29,3.

22、氣體 細菌能產(chǎn)生的氣體有：CO2、H2、CH4(沼氣)、NH3、Cl2、H2S等。常應(yīng)用于細菌鑒定。 4.維生素及其他生長刺激素 有些微生物能產(chǎn)生大量的維生素(主B族素)和一些復(fù)雜的生長刺激素，可用于畜牧業(yè)和工業(yè)生產(chǎn)中。 5.抗菌素 抗菌素是某種微生物產(chǎn)生的用以拮抗另一些微生物的物質(zhì)，它能抑制一定種類微生物的生長發(fā)育?？捎糜诜乐文承﹦游锛膊　⒋碳游锷L。 6.毒素 某些動物病原菌，能產(chǎn)生對動物有毒的物質(zhì)，使使其發(fā)生一定癥狀的疾病，這類物質(zhì)稱為毒素。可分為外毒素與內(nèi)毒素。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,30,7.熱 細菌在呼吸作用中所產(chǎn)生的能量，只有一小部分(5-10)被用于生命活

23、動，大部分能量，常轉(zhuǎn)化為熱放出。堆肥和發(fā)酵飼料（可達70以上）。 8.熱原質(zhì) 許多細菌，特別是革蘭氏陰性菌，能產(chǎn)生一種多糖物質(zhì)，注入人或動物體內(nèi)，可以引起發(fā)熱反應(yīng)，稱為熱原質(zhì)。 9.色素 多種微生物能產(chǎn)生色素，顏色有紅、橙、黃、綠、青、藍、紫、黑等，可用于細菌鑒定、食品、化妝品等。 10.光 少數(shù)細菌能借發(fā)光以散發(fā)部分產(chǎn)生的能量，發(fā)光強度可用以攝照本身相片。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,31,（二）常用的細菌的生化試驗 常用的生化試驗有：糖發(fā)酵試驗、氧化酶試驗、觸酶試驗、氧化發(fā)酵(O/F)試驗、VP試驗、甲基紅 (MR)試驗及吲哚試驗等?？刹捎梦⒘糠ɑ虺Ａ糠ā，F(xiàn)有商品化的微量生化

24、試驗試劑盒。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,32,復(fù)習(xí)思考題 1.細菌個體代謝過程的特點? 2.菌體快速分裂的原因?3.細菌的生長曲線如何確定?有何意義?4.試述細菌生長的各個期的特點。 5.培養(yǎng)基有哪些種類?6.病原菌對氧氣和溫度的需求有何特點?7.試述主要的細菌生化反應(yīng)的原理及用途。,第一章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,33,感謝觀看此片 歡迎指導(dǎo),END,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,34,天津農(nóng)學(xué)院 動物醫(yī)學(xué),獸醫(yī)微生物學(xué),獸醫(yī)微生物學(xué),(多媒體教學(xué)課件) 天津農(nóng)學(xué)院動科系動物預(yù)防醫(yī)學(xué)教研室制作 2003/02/28,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,36,緒言

25、共六部分，介紹微生物與微生物學(xué)的概念，微生物學(xué)發(fā)展簡史，微生物學(xué)理論與技術(shù)成就及應(yīng)用，獸醫(yī)微生物學(xué)的地位、任務(wù)與貢獻。 細菌總論 共七章，介紹細菌的形態(tài)、構(gòu)造、生理，消毒與滅菌，細菌生態(tài)、致病機理、遺傳變異，細菌分類與命名等。 免疫基礎(chǔ) 共七章，介紹抗原抗體，免疫系統(tǒng)，抗感染免疫，變態(tài)反應(yīng)，免疫調(diào)節(jié)，免疫技術(shù)及應(yīng)用等。 細菌各論 共十二章，介紹各屬重要病原細菌的形態(tài)、生化特性、致病性、微生物學(xué)診斷和免疫防治等。 真菌 共二章，介紹真菌的分類、形態(tài)、生化及致病特性，真菌病的診斷與防治等。 病毒 共十四章，介紹病毒的形態(tài)、構(gòu)造、繁殖、遺傳、培養(yǎng)，病毒的致病性。各科屬重要病毒形態(tài)、生化及致病特性，微

26、生物學(xué)診斷和防治等。 實驗 共十多個，顯微鏡油鏡的使用，細菌形態(tài)及構(gòu)造觀察，細菌抹片制備及染色，培養(yǎng)基的制備，細菌的分離培養(yǎng)、生長表現(xiàn)觀察、生化試驗、藥敏試驗，沉淀反應(yīng)和凝集反應(yīng)等。,內(nèi)容簡介,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,37,第一章 細菌的形態(tài)與構(gòu)造 第二章 細菌的生理 第三章 消毒與滅菌 第四章 細菌的微生態(tài) 第五章 細菌的致病機理 第六章 細菌的遺傳變異 第七章 細菌的分類與命名,第一篇,細菌總論,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,38,第三章 消毒與滅菌,第一篇,第一節(jié) 物理因素對微生物的影響 第二節(jié) 化學(xué)因素對微生物的影響 第三節(jié) 生物因素對微生物的影響 第四節(jié) 微生物的亞致死

27、性損傷及其修復(fù),課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,39,第三章,第三章 消毒與滅菌 微生物的生命活動極易受外界環(huán)境條件影響。了解外界環(huán)境因素對微生物的影響，以便控制外界因素，達到利用或消滅微生物的目的。 本章著重介紹物理、化學(xué)、生物學(xué)因素對微生物的抑制或殺滅作用以及消毒滅菌方法。介紹幾個基本概念。 殺菌作用 指某些物質(zhì)或因素具有的殺死微生物的作用。 抑菌作用 指某些物質(zhì)或因素所具有的抑制微生物生長繁殖的作用。,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,40,第三章,抗菌作用 指某些藥物所具有的抑制或殺滅微生物的作用。 滅菌 指殺滅物體中所有微生物（包括芽孢和孢子）的方法。 消毒 指殺滅物體中病原微生物

28、的方法。用于消毒的化學(xué)藥品叫消毒劑或殺菌劑。 防腐 指阻止或抑制微生物生長繁殖的方法。用于防腐的化學(xué)藥品叫防腐劑或抑菌劑。 無菌 指在一定空間內(nèi)沒有活微生物的狀態(tài)。防止任何微生物進入動物機體或物體的方法，叫無菌法。以無菌法進行的操作稱無菌技術(shù)或無菌操作。,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,41,第一節(jié) 物理因素對微生物的影響 對微生物影響較大的物理因素包括：溫度、輻射、干燥、聲波、微波、濾過等。 一、溫 度 適當(dāng)?shù)臏囟扔欣谖⑸锏纳L發(fā)育，溫度過高或過低都會影響微生物的新陳代謝和生長發(fā)育，甚至使之死亡。 1. 低溫 數(shù)微生物對低溫具有很強的抵抗力。當(dāng)微生物處于最低生長溫度以下時，其代謝活動降

29、低到最低水平，生長繁殖停止，但仍可長時間保持活力。常在低溫下保存微生物種。,第三章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,42,冷凍保存 動存微生物種時，必須迅速降低溫度，起用時也應(yīng)迅速融化。防止胞漿水分形成冰晶，破壞胞漿膠體、胞漿膜和細胞壁。反復(fù)冷凍與融化對微生物具有很大傷害，應(yīng)盡力避免。 為了減少細菌在冷凍時的死亡，可于菌液內(nèi)加入10左右甘油、蔗糖、脫脂乳或5二甲基亞砜作為保護劑。 冷凍真空干燥（凍干）法 是保存菌毒種、疫苗、 補體、血清等的良好方法，可保存微生物及生物制 劑數(shù)月至數(shù)年不失活。其原理是迅速冷凍，不形成冰晶，同時抽真空讓固體冰中的水分子升華除去，封閉瓶口保存。,第三章,課件002

30、,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,43,2. 高溫 高溫對微生物具有致死作用，常用于消毒和滅菌。高溫對菌體蛋白質(zhì)、核酸、酶系統(tǒng)等產(chǎn)生破壞作用。導(dǎo)致菌體死亡。 高溫滅菌法 分干熱滅菌和濕熱滅菌兩類，濕熱傳導(dǎo)性好、穿透力強滅菌效力大。 （1）干熱滅菌法 包括火焰滅菌和熱空氣滅菌兩類。 火焰滅菌法是以火焰直接燒灼殺死物體中微生物的方法。分為灼燒和焚燒兩種。 熱空氣滅菌指利用干熱滅菌器以干熱空氣進行滅菌的方法。用于耐高溫物品。滅菌條件：160維持 l-2h，才能殺死所有微生物（芽孢、孢子）。,第三章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,44,（2）濕熱滅菌法 有煮沸滅菌、巴氏消毒、流通蒸汽滅菌、高壓蒸汽滅菌幾種。

31、 煮沸滅菌 煮沸10-20min可殺死所有細菌繁殖體，芽抱常需煮沸1-2h才被殺死。手術(shù)器械、注射器、針頭及食具等可用此法。 巴氏消毒法 以較低溫度殺滅液態(tài)食品中病原菌或特定微生物，盡量保持其營養(yǎng)成分和風(fēng)味的消毒方法。主要用于葡萄酒、啤酒、果酒及牛乳等食品的消毒。,第三章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,45,巴氏消毒法具體方法有三種 低溫維持巴氏消毒法（LTH） 63-65 30min； 高溫瞬時巴氏消毒法(HTST) 71-72 15s； 超高溫巴氏消毒法(UHT) 132 1-2s。 消毒后均須迅速冷卻至10以下，促進細菌死亡，稱為冷擊法。超高溫巴氏消毒的鮮乳在常溫下，保存期可達6個月

32、。 流通蒸汽滅菌法 是利用蒸汽在流通蒸汽滅菌器內(nèi)進行滅菌的方法，100維持30min。 間歇滅菌法：100 維持30min，37溫箱過夜，連續(xù)進行3次滅菌和2次保溫，達到完全滅菌目的。用于不耐高溫的培養(yǎng)基的滅菌。,第三章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,46,高壓蒸汽滅菌法 即用高壓蒸汽滅菌器進行滅菌的方法。是應(yīng)用最廣、最有效的滅菌方法。 原理 給高壓蒸汽滅菌器加水、放入被滅菌物品、密閉、加熱，蒸汽產(chǎn)生壓力，隨壓力的增大水的沸點升高，溫度也升至100以上，以提高滅菌的效果，縮短滅菌時間。 滅菌條件 常用1.02kgcm2 （每平方英寸15磅）的壓力，在12l.3溫度下，維持15-20min，

33、即可殺死所有微生物，達到完全滅菌的目的。 常用于如培養(yǎng)基、溶液、器皿、器械、敷料、橡皮手套、工作服和小實驗動物尸體等的滅菌。 滅菌注意 須充分排除滅菌器內(nèi)原有的冷空氣。,第三章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,47,二、輻 射 包括電磁波輻射和粒子輻射，對微生物作用為：電離輻射和非電離輻射。非電離輻射包括可見光、日光、紫外線。 1.可見光 指在紅外線和紫外線之間，肉眼可見的光線，波長400-800nm。可見光線只有微弱的殺菌作用。 2.陽光 直射日光有強烈殺菌作用，是天然殺菌因素，紫外線是日光殺菌作用的主要因素。許多微生物在直射日光下，半小時到數(shù)小時即可死亡。芽抱的抵抗力強，經(jīng)20h才死亡。

34、,第三章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,48,3.紫外線 紫外線中波長200-300nm部分具有殺菌作用，其中以265-266nm段的殺菌力最強，這與DNA吸收光譜范圍一致。常用的紫外線殺菌燈波長為 253.7nm，殺菌力強而穩(wěn)定。 缺點 紫外線的穿透力不強，即使是很薄的玻璃也不能透過，所以只用物體表面消毒。 用途 微生物實驗室、無菌室、手術(shù)室、傳染病房、種蛋室等的空氣消毒。 原理 紫外線照射后，DNA分子吸收約260nm紫外線，使同一條DNA鏈上相鄰胸腺嘧啶產(chǎn)生共價結(jié)合成二聚體，影響DNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄，引起致死性突變而死亡。此外，紫外線可使空氣中分子氧變?yōu)槌粞酰粞醴懦鲅趸芰姷脑友酰?/p>

35、呈現(xiàn)殺菌作用。,第三章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,49,劑量與誘變育種 紫外線的殺菌作用隨照射量的增加而加強。若紫外線照射量不足以致死細菌，則可引起核酸的部分改變，使其發(fā)生突變。因此，紫外線照射也是一種有效的誘變方法。 4.電離輻射 放射性同位素射線（ ）和X射線等可使被照射物質(zhì)發(fā)生電離。 殺菌作用 X射線（波長0.06-13.6nm）、射線(波長0.00l-0.4nm) 的電離輻射微弱。與射線的電離輻射作用較強，有抑殺菌作用。 用途 與射線穿透力強。主要是X 、和射線，用于消毒、食品保藏和育種等方面。,第三章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,50,三、干 燥和滲透壓 作用 微生物在

36、干燥的環(huán)境中失去水分，新陳代謝障礙，菌體蛋白變性，逐漸死亡。微生物對干燥的抵抗力差異很大。巴氏桿菌、嗜血桿菌、鼻疽桿菌等在干燥的環(huán)境中僅能存活幾天，而結(jié)核桿菌能耐受干燥 90d。細菌的芽孢對干燥有強大的抵抗力，如炭疽桿菌芽孢在干燥條件下可存活數(shù)十年。霉菌的孢子對干燥也有較強的抵抗力。 用途 微生物在干燥環(huán)境中不能生長繁殖，常用干燥法來保存食品、飼料、谷類、皮張、藥材等。利用高濃度的鹽水或糖水保存食品，高滲溶液吸取菌體水分，造成生理干燥而抑菌。,第三章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,51,四、超 聲 波 頻率在2萬-20萬hz的聲波稱為超聲波。細菌和酵母菌在超聲波作用下于幾十分鐘內(nèi)死亡。小型

37、病毒、芽抱對超聲波有抵抗力。 用途 未應(yīng)用于消毒滅菌。主要用于裂解細胞， 提取細胞組分等。 五、微 波 從幾百兆赫至幾十萬兆赫頻率的無線電波稱為微波。微波滅菌，主要是利用微波的加熱作用完成（交變電場，分子旋轉(zhuǎn)振動、分子相互作用產(chǎn)生摩擦力，分子克服摩擦力產(chǎn)生熱量，使物品升溫，起加熱滅菌作用）。 用途 這種滅菌法，需時短、加熱均勻?？捎糜诜墙饘籴t(yī)藥用品等的滅菌。,第三章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,52,六、濾 過 通過機械阻留作用將液體或空氣中細菌等微生物除去的方法。 用途 液體培養(yǎng)基和藥物除菌。 糖培養(yǎng)液、特殊培養(yǎng)基、血清、毒素、抗毒素、抗生素、維生素、氨基酸等不能加熱滅菌的液體常用濾器

38、過濾除菌（多用蔡氏濾器、更換濾膜濾器或一次性濾器）。 病毒液分離除菌 用于病毒分離。 空氣凈化除菌 超凈工作臺、無菌隔離器、無菌操作室、實驗動物室以及疫苗、藥品、食品等生產(chǎn)中潔凈廠房的空氣過濾除菌。,第三章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,53,第二節(jié) 化學(xué)因素對微生物的影響 許多化學(xué)藥物能抑制或殺死微生物，已廣泛用于消毒、防腐及治療疾病。 防腐消毒劑 用于殺滅體外病原微生物的化學(xué)藥物稱為消毒劑；用于抑制微生物生長繁殖的化學(xué)藥物稱為防腐劑或抑菌劑，消毒劑在低濃度時只能抑菌，而防腐劑在高濃度時也能殺菌，它們之間并沒有嚴格的界限，統(tǒng)稱為防腐消毒劑。 化學(xué)治療劑 用于消除宿主體內(nèi)病原微生物或其他寄

39、生蟲的化學(xué)藥物。,第三章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,54,二者區(qū)別 消毒劑在殺滅病原微生物的同時，對動物體有損害作用，用于環(huán)境的消毒；而化學(xué)治療劑對宿主和病原微生物具有選擇性，它們能阻礙微生物代謝某些環(huán)節(jié)，使其生命活動受到抑制或使其死亡，而對宿主細胞毒副作用甚小。 一、消毒劑的種類及其應(yīng)用 消毒劑的種類很多，一般可根據(jù)用途與消毒劑特點選擇使用。 理想的消毒劑 殺菌力強、無腐蝕性、能長期保存、對動物毒性很小、無殘留污染、價格低等。,第三章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,55,消毒劑的分類 （1）使菌體蛋白質(zhì)變性 如酚類、醇類、重金屬鹽類、酸堿類、醛類； （2）損傷胞漿膜 如酚類(低濃

40、度)、表面活性劑、醇類等脂溶劑； （3）干擾細菌的酶系統(tǒng)和代謝 如氧化劑、重金屬鹽類(低度)； （4）改變核酸功能 如染料、烷化劑等。 二、影響消毒劑作用的因素 1.消毒劑的性質(zhì)、濃度和作用時間 ； 2.微生物的種類與數(shù)量 ； 3.溫度 溫度升高可增強消毒劑的殺菌效果。,第三章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,56,4.酸堿度 消毒劑殺菌作用受pH影響。如新潔爾滅pH 9時殺菌作用強。 5.有機物 環(huán)境中有機物，可降低消毒劑效果。 6.藥物頡抗 兩種消毒劑合用時，有的能相互頡抗。如陰離子劑肥皂與陽離子劑新潔爾滅。 7. 其他因素 濕度、穿透力、表面張力等。 第三節(jié) 生物因素對微生物的影響 自然界中，各種微生物之間，或微生物與動植物之間，經(jīng)常呈現(xiàn)相互影響的作用，如寄生、共生和頡抗等現(xiàn)象。,第三章,課件002,獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件,57,導(dǎo)致頡抗的原因有抗生素和細菌素、植物殺菌素、噬菌體等。 一、抗生素、細菌素素和植物殺菌 抗生素 某些微生物在代謝過程中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死另一些微生物的特殊物質(zhì)。如鏈霉素 （放線菌）、青霉菌（霉菌）和多粘菌素（細菌）。己發(fā)現(xiàn)2500多種，而最常用的只有幾十種。抗生素的抗菌作用主要是干擾細菌的代謝過程，抑制或殺滅微生物。 細菌素 是