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1、注意: 不要打開培養(yǎng)皿!,實驗5 厭氧細(xì)菌和白喉桿菌,實驗?zāi)康模?了解厭氧菌的培養(yǎng)方法及其常用培養(yǎng)基介紹. 熟悉常見厭氧菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征和厭氧培養(yǎng)基內(nèi)生長現(xiàn)象. 熟悉白喉桿菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征. 實驗內(nèi)容： 厭氧培養(yǎng)方法介紹和厭氧培養(yǎng)示教. 常見厭氧菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察. 厭氧培養(yǎng)基上厭氧菌的生長現(xiàn)象觀察. Albert染色觀察白喉桿菌形態(tài)結(jié)構(gòu).,一、厭氧菌培養(yǎng)方法 厭氧菌所需的氣體環(huán)境: 無游離氧，5%-10%的CO2 1.化學(xué)方法 2.物理學(xué)方法 3.生物學(xué)方法,1 化學(xué)法： 保險粉法: Na2S2O4+2NaHCO3+O2=2CO2+Na2SO4+Na2SO3+H2O 產(chǎn)氣袋法：KMB4+H2O

2、H2+O2 H2O 焦性沒食子酸法： 焦性沒食子酸+堿液+O2焦性沒食子橙,鈀,2 物理法： 抽氣換氣法,厭氧手套箱,3 生物法,牛乳基,庖肉基,庖肉培養(yǎng)基: 生成不飽和脂肪酸、還原性谷胱甘肽 肉湯 肉渣 凡士林 牛乳培養(yǎng)基:pH6.8 牛奶(糖 、蛋白） 石蕊(pH指示劑8,藍(lán)色) 凡士林.,保險粉法培養(yǎng)破傷風(fēng)桿菌。（示教）,2.常見厭氧菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察（示教鏡）,破傷風(fēng)梭菌的芽胞：正圓形、比菌體大，位于菌體末端（特殊染色，x1000）,產(chǎn)氣莢膜桿菌粗大的菌體和寬厚莢膜（負(fù)染，x1000）,雙岐桿菌：G+b，有時有分支生長（GS，x1000）,3.厭氧培養(yǎng)基上厭氧菌的生長現(xiàn)象觀察,乳糖 酸+氣體 牛乳 酪蛋白 凝固 沖爛,“洶涌發(fā)酵”現(xiàn)象的發(fā)生機理：,產(chǎn)氣莢膜梭菌,4. Albert染色觀察白喉桿菌形態(tài)結(jié)構(gòu),呂氏血清斜面培養(yǎng)基-白喉桿菌 （1）制片：涂片干燥固定 （2）Albert染色步驟： 染液A： 3-5 min，水洗. 染液B： 1 min，水洗，干燥。 （3）油鏡觀察：形態(tài)，排列，異染顆粒.,典型排列呈L, V 型或柵欄狀，一端或兩端有比菌體

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