1、第九章 特 殊 染 色,一、特殊染色的概念及意義 特殊染色為常規(guī)染色（即蘇木素、伊紅）的必要補(bǔ)充，又稱(chēng)選擇性染色，只有相對(duì)的特異性，如PAS陰性反應(yīng)它有糖元。,意義：（1）特染能顯示在常規(guī)染色切片中不明顯的部分，如革蘭氏染色、細(xì)菌染色。（2）區(qū)別HE染色中不能鑒別的組織病變，如VG染色區(qū)別膠元纖維和平滑肌。（3）顯示某些常規(guī)染色中不能著色的物質(zhì)，如網(wǎng)染才能顯示網(wǎng)狀纖維，常規(guī)HE染色是染不出來(lái)的。因此，特殊染色也是制片染色中不可缺少的組成部分，它在病理診斷常著輔助作用，也為科研提供依據(jù)。,二、學(xué)習(xí)特染技術(shù)應(yīng)掌握的重點(diǎn) （注意事項(xiàng)）（1）染色方法的成敗，應(yīng)該在溫度、濃度、時(shí)間和PH值等方面找原因。

2、（2）注意特染的應(yīng)用范圍，如某種病變應(yīng)用什么方法染色才能達(dá)到目的，一般先在HE切片所見(jiàn)的要求去選擇適當(dāng)?shù)奶厝痉椒?，一種或多種。,（3）必須掌握各種特殊染色的結(jié)果，避免導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)論或嚴(yán)重的誤診，如在網(wǎng)染時(shí)把膠元纖維誤以為網(wǎng)狀纖維。（4）盡量要陽(yáng)性切片作對(duì)照，便于選擇特染方法，并與HE切片作對(duì)照。（5）特染的組織，在其固定、脫水根據(jù)要求選擇。所用的器皿都必須化學(xué)清洗。,三、玻璃器皿的清潔 在病理實(shí)驗(yàn)室可用的玻璃器皿，都必須經(jīng)過(guò)清洗干凈才能使用，清洗的方法依玻璃器皿的新舊而不同。,1、新購(gòu)玻璃器皿的處理 對(duì)于新購(gòu)買(mǎi)的玻璃器皿應(yīng)先用洗衣粉浸泡洗刷，自來(lái)水沖洗后再用12%鹽酸水溶液浸泡數(shù)小時(shí)后，用自來(lái)

3、水沖洗干凈，必要時(shí)可用少量蒸餾水洗2次,2、使用后玻璃器皿的處理 每次使用后的玻璃器皿都必須及時(shí)徹底清洗干凈，以供下次實(shí)驗(yàn)之用，如輕視這一步驟，可用的玻璃器皿不夠干凈，則會(huì)影響染色效果，甚至導(dǎo)致染色失敗，特別在酶組化和銀離子反應(yīng)操作過(guò)程中更有嚴(yán)格的要求，使用后的玻璃器皿在一般清洗后，還要求用硫酸清洗液浸泡。,硫酸清洗液配制重鉻酸鉀 80g自來(lái)水 1000ml濃硫酸（工業(yè)用） 120m新配制的清潔液為紅褐色，反復(fù)使用一段時(shí)間后，慢慢變成綠色，說(shuō)明清潔液已失敗，不能繼續(xù)使用應(yīng)重新配制。,3、玻璃器皿的清洗方法 任何玻璃器皿都必須用自來(lái)水沖洗，然后把殘余藥液或染液洗去。 用毛刷沾洗衣粉擦干凈。 自來(lái)

4、水沖洗，蒸餾水洗2次。 把晾干的器皿輕輕置入清潔液浸泡數(shù)日。 取出器皿，用自來(lái)水把器皿內(nèi)外徹底沖洗干凈，最后用蒸餾水洗2次。 把玻璃器皿倒置于有孔架上自然晾干或溫箱中烤干，最后存放櫥內(nèi)備用。,常用的特染第一節(jié) 結(jié)締組織染色,一、膠元纖維染色（VG 染色） 膠元纖維的分部組成成分 膠原纖維是結(jié)締組織中的三種纖維之一，分布最為廣泛，含量最多。主要分布于真皮、腱、韌帶、骨、透明軟骨、動(dòng)脈、腸壁 、子宮和基底膜等。膠原纖維具有韌性大，抗拉力強(qiáng)的特點(diǎn)。膠原纖維單位主要由纖維母細(xì)胞合成。,苦味酸酸性品紅法1 VG 染液試劑配制1%酸性品紅 10ml苦味酸飽和液 90ml此液常分別配制臨用時(shí)加以混合，不能久

5、用。,【染色步驟】（1）組織固定于10%早醛液中，常規(guī)脫水包埋（2）組織切片脫臘至水。（3）V-G染液2-5（酸性品紅1：苦味酸飽和液9）（4）傾去染液，無(wú)水酒精急速脫水，用濾紙吸干（5）二甲苯透明，中性樹(shù)膠封片。,【結(jié)果】 膠元纖維呈紅色，肌纖維、胞質(zhì)及 紅細(xì)胞黃色。, 膠元纖維染色應(yīng)用 膠原纖維染色在病理診斷上主要用于鑒定梭形、纖維形細(xì)胞腫瘤的組織來(lái)源； 常常要在纖維、平滑肌和神經(jīng)三者之中作出選擇。 觀察動(dòng)脈硬化的心臟，在H切片中，心肌內(nèi)散在的小疤痕灶和心肌均被染作紅色，而作膠原纖維染色可將膠原組織和肌肉上明顯地區(qū)分開(kāi)來(lái)。 早期肝硬化用膠原纖維染色，也可使小葉之間少量增生的膠原纖維突出地顯

6、示出來(lái)。,二、 網(wǎng)狀纖維染色網(wǎng)狀纖維染色的形態(tài)特點(diǎn)和染色原理 網(wǎng)狀纖維是網(wǎng)狀結(jié)締組織內(nèi)的一種纖維。它由網(wǎng)狀細(xì)胞產(chǎn)生，網(wǎng)狀纖維細(xì)而有分支，穿行于細(xì)胞體和突之間，共同構(gòu)成網(wǎng)狀支架。這種纖維用HE染色一般不易辨認(rèn)。若用銀氨溶液浸染能使纖維變成黑色，故又稱(chēng)嗜銀纖維。,（二）網(wǎng)狀纖維染色的原理 網(wǎng)狀纖維的染色方法很多，但是染色原理基本相同，有以下方面。（1）氧化 使網(wǎng)狀纖維具有選擇性，不經(jīng)氧化的切片，常用的氧化劑是高錳酸鉀。（2）漂白 一般采用2%草酸，漂白后無(wú)色,（3）媒染 多用2%硫酸鐵氨（俗稱(chēng)鐵明礬）。這些試劑可增加網(wǎng)狀纖維對(duì)銀氨液的選擇性。（4）浸銀 也稱(chēng)鍍銀，使銀氨配位化合物與網(wǎng)狀纖維結(jié)合，帶

7、正電荷的二氨合銀Ag（NH3）+2被具有嗜銀性物質(zhì)的網(wǎng)狀纖維吸附。（5）還原 甲醛液是還原劑，能把與網(wǎng)狀纖維結(jié)合的銀氨配位化合物還原成棕黑色的金屬銀。,（三）網(wǎng)狀纖維纖維染色應(yīng)用 判定病變組織支架的破壞情況，組織、臟器網(wǎng)狀支架的存在與塌陷、完整與破壞、網(wǎng)狀纖維的分布及走行，有多少、粗細(xì)、疏密或有無(wú)斷裂形態(tài)變化。, 用于顯示和鑒別腫瘤的性質(zhì)和來(lái)源顯示和區(qū)分癌與肉瘤 來(lái)源于上皮組織的惡性腫瘤（癌）僅癌巢周?chē)芯W(wǎng)狀纖維包繞，巢內(nèi)癌細(xì)胞之間則沒(méi)有網(wǎng)狀纖維分部。來(lái)源于間葉組織的惡性腫瘤（肉瘤），瘤細(xì)胞之間往往可見(jiàn)較多的網(wǎng)狀纖存在。, 用于某些腫瘤的診斷 根據(jù)染色所顯示的網(wǎng)狀纖維多少、分布及行走特點(diǎn)，可用

8、于診斷下列腫瘤。,1）平滑肌肉 細(xì)胞之間見(jiàn)有大量平行分布的網(wǎng)狀纖維。2）纖維肉瘤 可見(jiàn)大量網(wǎng)狀纖維存在，并且密集包繞細(xì)胞。3）滑膜肉瘤 其梭形細(xì)胞也產(chǎn)生網(wǎng)狀纖維，但不如纖維肉瘤多。, 用于觀察和研究癌組織的發(fā)生、發(fā)展及其惡性程度 癌組織發(fā)生，發(fā)展過(guò)程以及癌組織生長(zhǎng)速度，可通過(guò)網(wǎng)染進(jìn)行觀察和研究，如癌巢周?chē)木W(wǎng)狀纖維包囊完整，說(shuō)明癌組織生長(zhǎng)較慢，惡性程度低；再如子宮頸鱗狀細(xì)胞癌巢周?chē)W(wǎng)狀纖維分解，說(shuō)明癌組織正在擴(kuò)散，其惡性程度較高。,(5) 用于顯示和研究肝組織病變 用網(wǎng)狀纖維的染色法，觀察肝臟病變處的網(wǎng)狀支架形態(tài)、分布特點(diǎn)及其破壞情況，可以判定和研究其病變性質(zhì)、程度及其發(fā)展與轉(zhuǎn)規(guī)。,（四） 網(wǎng)

9、狀纖維染色的注意事項(xiàng)（1）用新蒸餾水配制最好用雙蒸水配制。（2）所用玻璃器材及載玻片均要達(dá)到化學(xué)潔凈程度.（3）對(duì)已配制好的硝酸銀液和氨銀溶液，要貯存冰箱中保存待用。,（4）在染色過(guò)程中，用染氨銀染液或硝酸銀液的前后應(yīng)用蒸餾水洗浸。（5）氯化金調(diào)色和硫代硫酸鈉固定的時(shí)間不應(yīng)太長(zhǎng)，否則會(huì)引起網(wǎng)狀纖維染色變淡。（6）切片脫水后及時(shí)封片，不宜在空氣中停留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，以免產(chǎn)生色素顆粒。,【 氨銀液的配制】 1.取10%硝酸銀水溶液5ml于三角燒瓶?jī)?nèi)，一滴一滴地滴加氨水（氫氧化銨），并同時(shí)搖動(dòng)容器 2.硝酸銀遇到氨水立即產(chǎn)生沉淀，當(dāng)其沉淀物被溶解時(shí)（不能完全溶解也可） 3.再加入3%氫氧化鈉水溶液5ml。

10、溶液重新產(chǎn)生沉淀 4.此時(shí)再滴加氨水。至其沉淀被溶解后，（為避免氨水加入過(guò)量最好能有少許沉淀物為妥，以免脫片）最后加蒸餾水稀釋至50ml。 5.濾過(guò)，貯存于棕色瓶中存放入冰箱備用。臨用前取出恢復(fù)室溫再用。,【染色步驟】（1） 切片脫蠟至水洗。（2） 0.25%高錳酸鉀液氧化5。（3） 自來(lái)水洗2次。（4） 2.5%草酸液漂白1-2，水洗2。（5） 2%硫酸鐵銨媒染（鐵明礬）10。（6） 水洗，蒸餾水洗2次。（7） 滴染氨銀液1左右。,（8） 蒸餾水洗2次。（9） 10%中性早醛還原3。（10） 蒸餾水洗12次。（11） 0.2% 的氯化金調(diào)色5 水洗。（12） 5%硫代硫酸鈉固定5。（13）

11、自來(lái)水沖洗，蒸餾水洗。（14） 復(fù)染（對(duì)比染色）伊紅、中性紅、。（15） 脫水、透明、封片。,【結(jié)果】膠元纖維呈黃色，網(wǎng)狀纖維成黑色。,【染色結(jié)果】網(wǎng)狀纖維染灰黑色，膠元纖維紅色，基質(zhì) 黃色。,三、彈力纖維染色法,彈力纖維較細(xì)，直徑0.2-1微米，且堅(jiān)固，彈性大，容易伸展，纖維分枝連接成網(wǎng)，HE染色與膠原纖維著色相似，若用彈力纖維染色法，則可分辨的很清楚。,Weigert氏彈力纖維染色法： 標(biāo)本用Zenker氏液，酒精或10%甲醛固定均可。 石蠟或冰凍切片。 脫蠟至水。 水洗后，加入Weigert氏染色液2-6小時(shí)或更長(zhǎng)的時(shí)間，一般依染色液的新舊而定 。,取出后，直接浸入1%鹽酸酒精或酒精中進(jìn)

12、行分化。 如需復(fù)染細(xì)胞核，可染于明礬蘇木素溶液中10分鐘。 沖洗后，可再以V G氏染液作對(duì)比染色1-2分鐘。 95%酒精分化、脫水、透明、封固。,試劑配制： 鹽基性復(fù)紅（堿性品紅） 2g 間苯二酚（雷鎖辛） 4g 蒸餾水 200ml 30%三氯化鐵水溶液 25ml 95%酒精 200ml 濃鹽酸 4ml,先將鹽基性復(fù)紅（堿性品紅）溶于200ml的蒸餾水中， 加入4-5g間苯二酚，加溫煮沸（不停攪拌）， 然后加入25ml的30%三氯化鐵水溶液，繼續(xù)攪拌煮沸2-5分鐘，冷卻后過(guò)濾傾去濾液，將濾紙及沉淀物置于溫箱中烘干。 而后將濾紙和干燥的沉淀物一并投入燒杯，加200ml 95%酒精，小心隔水加熱，

13、徐徐攪拌使沉淀溶解，然后棄去濾紙冷卻后，補(bǔ)足因加熱蒸發(fā)的酒精。 最后加入4ml的鹽酸即可應(yīng)用。（對(duì)苯二酚可代替間苯二酚）。,【注意事項(xiàng)】 Weigert氏彈力纖維染色的配制已有許多改變，鹽基性復(fù)紅（堿性品紅）可由其它鹽基性染料取代， 配制時(shí)如將結(jié)晶紫1克加鹽基性復(fù)紅1克，則彈力纖維染成蘭綠色；全用甲紫或結(jié)晶紫，彈力纖維則呈暗綠色。,【染色結(jié)果】 彈力纖維藍(lán)黑色，膠原纖維染成紅色，肌纖維染成黃色。,小動(dòng)脈光鏡圖 (彈性染色),Verhoeff氏彈力纖維染色法： 操作方法： 切片常規(guī)脫蠟。 Verhoeff染液15-60分鐘。 以2%三氯化鐵分化（鏡下控制）。 水洗再以95%酒精洗去碘。 流水洗。

14、 以HE或VG氏染液復(fù)染。 脫水、透明、封固。,【染色結(jié)果】 彈力纖維藍(lán)黑色，其它組織視復(fù)染而定。 注意事項(xiàng)： 這種染色法染液配制簡(jiǎn)單，但對(duì)微細(xì)彈力纖維不如Weigert氏效果好。,試劑配制： 將1克蘇木素加熱溶于20ml的無(wú)水酒精， 冷卻后，加1%三氯化鐵水溶液8ml攪拌； 再加入 8ml的Lugoi碘液（碘1克，碘化鉀2克，蒸餾水100ml）攪拌混合而成。 染液僅可存放2-3周。,應(yīng)用：,1.顯示皮膚組織中彈力纖維的變化 2.顯示鑒別心血管疾病 3.顯示呼吸系統(tǒng)和腎臟疾病時(shí)彈力纖維的變化 4.對(duì)彈力纖維瘤的診斷有決定作用,四、Masson三色染色法 Masson三色染色法是由Mallory

15、氏苯胺藍(lán)菊黃G發(fā)展改良而來(lái)，但對(duì)于固定液有一定的選擇性，雖然任何固定液固定后的組織可進(jìn)行染色，但最好是用Zenker氏固定液或Bouin氏固定液固定組織。福爾馬林固定的標(biāo)本切片在染色前以3%升汞作第二次固定一小時(shí)以上，則可增強(qiáng)著色效果。,操作方法： (1)切片常規(guī)脫蠟至水，蒸餾水洗； (2)Weigent氏蘇木素液染核5分鐘； (3)自來(lái)水洗； (4)1%鹽酸分化 (5)自來(lái)水洗； (6)麗春紅-酸性品紅溶液染5-8分鐘；,(7)1%醋酸水溶液洗； (8)1%磷鉬酸分化（1-3分鐘）直到各種成分被染清晰（膠原纖維呈淡紅色，肌纖維、纖維素呈鮮紅色） (9)2%亮綠液染2-5分鐘（或用2%苯胺藍(lán)水

16、溶液替代） (10)水洗（快速） (11)常規(guī)脫水、透明、封片。,【染色結(jié)果】 膠原纖維綠色(亮綠)（或苯胺藍(lán),藍(lán)色）肌肉、纖維素紅色，紅細(xì)胞橘黃色，核藍(lán)黑色。,試劑配制： 1麗春紅-品紅溶液 麗春紅 0.7g 酸性品紅 0.30.5g 冰醋酸 1ml 蒸餾水 99ml 21%冰醋酸水溶液 冰醋酸 1ml 蒸餾水 99ml 3亮綠 亮綠 2.0g 冰醋酸 2ml 蒸餾水 98ml,第二節(jié) 脂類(lèi)染色法,脂肪和類(lèi)脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）統(tǒng)稱(chēng)為脂類(lèi)。它是構(gòu)成人體組織的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶劑中。在化學(xué)組成上，脂類(lèi)屬于脂肪酸的酯或與這些酯有關(guān)的物質(zhì)。脂類(lèi)的主要功能是氧化供能

17、。脂肪主要存積于脂肪組織中，并以油滴狀的微粒存在脂肪細(xì)胞漿內(nèi)。 在病理檢驗(yàn)中，脂類(lèi)染色法最常用以證明脂肪變性，脂肪栓子以及腫瘤的鑒別。脂類(lèi)染色使用最廣泛的染料是蘇丹染料，最常用的有蘇丹，蘇丹，蘇丹黑及油紅O等。脂肪被染色，實(shí)際上是蘇丹染料被脂肪溶解吸附而呈現(xiàn)染料的顏色。經(jīng)研究認(rèn)為組織中脂質(zhì)在液態(tài)或半液態(tài)時(shí)，對(duì)蘇丹染料著色效果最好。根據(jù)這一原理，適當(dāng)提高溫度（37-60）對(duì)組織切片染色效果是有好處的。,一、油紅染色法：,試劑配制： 油紅O 0.5g 異丙醇（含量98%） 100ml 此為油紅飽和液，可長(zhǎng)期保存?zhèn)溆谩?染色步驟： 冰凍切片 蒸餾水充分洗滌。 油紅稀釋液染10-15分鐘，避光、密封。

18、 油紅稀釋液的配制： 取油紅飽和液6毫升，加蒸餾水4毫升，靜置5-10分鐘 后過(guò)濾后使用。 60%乙醇鏡下分化至間質(zhì)清晰。 水洗。 Marry氏蘇木素復(fù)染核。 水洗。 甘油或甘油明膠封片。,【結(jié)果】 脂肪呈鮮紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)色，間質(zhì)無(wú)色,注意事項(xiàng)： 油紅染色時(shí)應(yīng)避免試劑揮發(fā)過(guò)多，否則易形成背景沉淀。 60%乙醇分化，應(yīng)于鏡下控制至脂肪組織呈鮮紅色，間質(zhì)無(wú)色時(shí)為度。,二、蘇丹(Sudan )染色法,操作方法： 固定于10%甲醛的組織。 水洗后采用冰凍或石蠟切片。 經(jīng)蒸餾水后，浸染于Harris蘇木素或明礬蘇木素中淡染1-2分鐘。 自來(lái)水沖洗。 水洗后，移入70%酒精5秒鐘。 投入蘇丹染液中約30

19、分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間，置于56溫箱中。 在70%酒精中洗滌5-10秒鐘。 洗于蒸餾水中，將切片周?chē)乃中⌒牟恋簟?甘油明膠封固。,試劑配制： 1. 蘇丹染液配法：將0.15克蘇丹溶解于100ml70%酒精或純丙酮和70%酒精混合液中（各50ml），臨用時(shí)過(guò)濾，所得濾液即為飽和濃度。 注：浸染時(shí)，容器必須蓋好，否則酒精或丙酮揮發(fā)，染料沉淀。 2.甘油明膠配制： 明膠 40g 蒸餾水 210ml 甘油 250ml 石碳酸結(jié)晶 5ml 先將明膠浸入蒸餾水中2小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間，然后加甘油和石碳酸，加熱15分鐘，搖攪直至混合液均勻?yàn)橹埂?【結(jié)果】 脂肪呈橙紅色，膽脂素呈淡紅色，脂肪酸不著色，細(xì)胞核呈藍(lán)色。,蘇

20、丹,蘇丹(Sudan )染色法： 蘇丹又名猩紅，是蘇丹的衍生物，作為脂肪染劑，經(jīng)各地實(shí)驗(yàn)證明，其結(jié)果優(yōu)于蘇丹。 其染色步驟與蘇丹染法完全相同，從略。,應(yīng)用： （1）心、腦、腎等組織器官的脂肪栓塞，脂肪染色即可判定栓子是否為脂肪滴。 （2）心臟、肝臟等脂肪變性：脂肪染色可顯示變性細(xì)胞內(nèi)的脂滴。 （3）脂肪肉瘤與其它間葉組織的惡性腫瘤的鑒別：脂肪染色即可顯示脂肪肉瘤瘤細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的脂滴。,脂肪栓塞（Fat embolism）,第三節(jié) 糖原和粘液染色, 糖原的概念 糖原（glycogen）系由糖衍化而來(lái)，是單純的多糖，正常情況下，糖原存在胞漿內(nèi)，在肝臟、心肌、骨骼、肌肉含量最多。通常根據(jù)機(jī)體能量代謝將

21、組成內(nèi)的糖原分為不穩(wěn)定性和穩(wěn)定性?xún)深?lèi)： 不穩(wěn)定性糖原正常情況下儲(chǔ)積于肝臟和肌肉，這種糖原當(dāng)身體需要能量時(shí)很容易轉(zhuǎn)化為葡萄糖。 穩(wěn)定性糖原僅以微量存積于身體的各種組織和細(xì)胞中，如神經(jīng)、上皮、軟骨細(xì)胞，以及白細(xì)胞等。,糖原易溶于水，在酶的作用下很容易分解葡萄糖更易溶于水，機(jī)體死后1小時(shí)葡萄糖可轉(zhuǎn)化為蔗糖，因此組織必須起新鮮時(shí)固定或冰凍起來(lái)，固定之前決不能用水或生理鹽水浸洗。作為糖原染色的切片，必需經(jīng)特殊固定液固定后而進(jìn)行石蠟切片，才能把糖元保存下來(lái)。, 組織固定 1）為了不使糖原損失，一般用含酒精的溶液，如AAF液2）采用低溫固定，肝組織放入冰箱，使酶分解糖原慢。進(jìn)行冰凍切片，可以顯示糖原在細(xì)胞質(zhì)

22、內(nèi)的糖元分布, 組織固定中的注意事項(xiàng)1盡可能選取小塊新鮮組織及時(shí)固定。2多次更換乙醇固定液，在4左右溫度內(nèi)固定與保存。3乙醇能沉淀和糖原，但仍可溶于水。所以最好以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳。,（四）糖原染色方法PAS法對(duì)碘酸雪夫化反應(yīng)。 它的應(yīng)用較廣泛，除用于糖元的鑒定和粘液的顯示外，還可以觀察腎小球基底膜，阿米巴滋養(yǎng)體的著色。,【雪夫氏試劑的配制】堿性品紅 1g 1 N鹽酸 20ml偏重亞硫酸鈉 1g 活性炭 2g 蒸餾水 200ml,【配法】1. 蒸餾水200ml煮沸后，加入堿性品紅1g，并不斷搖動(dòng)，使堿性品紅徹底溶解（溶解液為深紅色）。2.冷卻到50時(shí)，加入1N鹽酸20ml。3.再待

23、冷卻至35時(shí)加入2g偏重亞硫酸鈉，蓋緊膠木塞，輕輕搖動(dòng)使其溶解，4.堿性品紅明顯變化，然后放入冰箱內(nèi)24h，溶液為淡黃或淡紅色，5.用活性炭過(guò)濾使溶液呈無(wú)色無(wú)色品紅，又稱(chēng)schiff氏液。貯存于棕色瓶中放入冰箱備用。,【染色方法】（1）組織切片，脫臘至水洗。（2）蒸餾水洗。（3）1%過(guò)碘酸氧化5-10。（4）充分蒸餾水洗。（5）schiff氏液染色20（放入暗處）。（6）自來(lái)水洗10。（7）蘇木素染核（8）脫水、透明、封片,【結(jié)果】 糖原和PAS反應(yīng)陽(yáng)性物質(zhì)成紅色，細(xì)胞核藍(lán)色。,（五） 糖原染色的應(yīng)用,1證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀變性 用染色中，如胞槳內(nèi)出現(xiàn)大小不等的空泡，可能是脂肪變性，經(jīng)脂溶性溶劑的脫水透明過(guò)程所溶解而形成的空泡；也可能是糖元在經(jīng)水溶液固