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文檔簡介
1、臨床常見病原體檢查,壓電石英檢查醫(yī)學(xué)院溫壓電石英附一壓電石英實驗診斷中心,臨床常見病原體檢查2009,主要是第一節(jié)標(biāo)本采集運輸,實驗室評價和檢查方法第二節(jié)病原體藥劑耐受力檢查第三節(jié)臨床感染常見病原體檢查第五節(jié)性傳染病病原體檢查第六節(jié)醫(yī)院感染常見病原體檢查,臨床常見抗生素發(fā)現(xiàn)和免疫策略實施以來,嚴(yán)重危害人體健康的病原體大多已消滅或基本消滅了新傳染疾病,曾滅絕的部分舊傳染疾病復(fù)活。 條件致病菌的感染比例增加。 不斷出現(xiàn)多藥耐藥性菌株,真菌感染的概率逐年增高。 -臨床病原體檢查的重要性、臨床常見病原體檢查2009、臨床病原體檢查的目的:為確定感染的發(fā)生和性質(zhì)及早明確診斷提供治療方案防止感染傳播采取預(yù)
2、防措施。 臨床病原體實驗診斷方法遵循的原則:正確規(guī)范的標(biāo)本預(yù)處理一般可以用幾個實驗室的手,首先進(jìn)行初步診斷根據(jù)初步診斷進(jìn)行化學(xué)基確診,參與治療。 臨床常見的病原體檢查2009、第一節(jié)標(biāo)本的采集和運輸、實驗室評價和檢查方法、臨床常見的病原體檢查2009、標(biāo)本的正確采集和運輸是實驗室取得正確結(jié)果的前提和基本因素。 但由于標(biāo)本采集的方法和時間、標(biāo)本來源、實驗室往往不能直接特羅爾,臨床醫(yī)師和護(hù)士對此應(yīng)予以重視。 臨床常見的病原體檢查2009,病原檢查標(biāo)本的采集和送檢的基本原則:標(biāo)本的采集應(yīng)選擇標(biāo)本的種類和采集部位,考慮有效的病程反應(yīng)。 盡量在使用抗生素前采集標(biāo)本。 采集標(biāo)本,必須嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作,防止
3、污染。 標(biāo)本采集后,盡快送到實驗室,床邊接種提高致病菌檢出率。 放標(biāo)本的容器必須滅菌處理,但使用使不得消毒劑。 處理后的標(biāo)本及容器根據(jù)生物安全要求進(jìn)行消毒處理。 臨床常見的病原體檢查2009,一、常見的檢查標(biāo)本的采集和運送檢查方法: (一)血液和骨髓適應(yīng)證:疑菌血癥、敗血癥或膿毒血癥的患者。 1 .通常采血部位為肘中靜脈,感染灶附近的血管采血,可以提高陽性率。 避免用靜脈滴注抗微生物劑采集血液標(biāo)本。 標(biāo)本采集過程必須嚴(yán)格無菌操作。 2、選擇體溫上升或峰值時間采血可提高陽性率。 臨床常見病原體檢查2009,3、3、3,采血1次量為5-10(10-20)ml,乳嬰兒子1-5ml,培養(yǎng)基與血液之比為
4、10:1為宜。 稀釋血液中的抗生素、抗體等殺菌物質(zhì)。 4、各例至少采血2次,間隔時間由病情決定,有利于提高陽性率和區(qū)分感染菌和皮膚污染菌。 臨床常見病原體檢查2009,1,1,中段尿采集:是臨床最常用的方法。 取樣前要用肥皂水和清水沖洗尿道口,拋棄排出的尿液前段,把中段或后段附近的尿液留在無菌容器中。 (二)尿液、臨床常見病原體檢查2009,2,2,尿?qū)Ч懿杉弘m然可以減少污染,但容易引起逆行感染,有必要,應(yīng)避免該方法。 對于留置導(dǎo)尿管者,用碘酒消毒尿道口的導(dǎo)尿管壁,用無菌注射器斜穿管壁吸引尿,或消毒后取下接口,丟棄導(dǎo)尿管前段尿,留下沒有污染的膀胱內(nèi)尿進(jìn)行檢查。 從集尿袋下端的管口將標(biāo)本殘留使
5、不得。 臨床常見病原體檢查2009,3、3、3,膀胱穿刺取尿液:患者恥骨上皮膚消毒后,用無菌注射器進(jìn)行膀胱穿刺。 該方法主要用于尿液厭氧菌培養(yǎng)和中段尿采集困難的嬰兒子。 臨床常見的病原體檢測2009,(三)將糞便、1、去膿血黏液部分的新鮮糞便裝入約2-3克洗滌容器檢測,也可以用雨刮器去糞便裝入運輸培養(yǎng)基檢測,提高致病菌檢出率.2 .糞便不易獲取者,如乳嬰兒子可使用直腸拭子進(jìn)行檢查。 臨床常見病原體檢查2009,(四)痰液最常見的呼吸道標(biāo)本,1、自然咳痰:清水反復(fù)漱口后用力咳嗽,從呼吸道深部咳出新鮮痰液后在無菌容器內(nèi)檢查。 痰量極少者可以用4510%氯化納金屬釷液霧化吸入導(dǎo)痰,一般早晨最初的痰較
6、好。 2 .氣管鏡下采集法、氣管穿刺法:可以減少污染,但患者有一定的痛苦,難以接受和普及。 (滿足要求的痰標(biāo)本低倍率視野下扁平上皮細(xì)胞球10個,白細(xì)胞25個),臨床常見的病原體檢查2009,3,3 .痰標(biāo)本采集后應(yīng)立即進(jìn)行檢查和處理,最好在1小時以下,室溫下延長數(shù)小時,定植于口咽部的非致病菌呈過度增長,檢出率明顯降低。 此外,上呼吸道中還存在正常菌群,在標(biāo)本采集和結(jié)果分析時應(yīng)予以考慮。 臨床常見病原體為2009,(5)檢查腦脊液等無菌體液,1 .在嚴(yán)格的無菌條件下采集標(biāo)本。 2 .盡可能多地采集標(biāo)本進(jìn)行檢查。 3 .盡快檢查或接種床邊可提高陽性率,特殊標(biāo)本需要保溫檢查。 臨床常見病原體檢查20
7、09、(6)創(chuàng)傷、組織和膿腫標(biāo)本:1、無菌生理鹽溶液清洗病灶表面后,用無菌雨刮器去除病灶深部膿液和分泌物。 2 .對未潰爛的膿腫直接用碘酒、酒精消毒皮膚后,用無菌注射器抽出膿液進(jìn)行檢查,排膿時也可在無菌雨刮器下采樣。 臨床常見的病原體檢查2009,二、標(biāo)本的素質(zhì)測評標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)本及送檢單應(yīng)寫明被檢者姓名、性別、年齡、臨床診斷、標(biāo)本來源及檢查目的、抗生素使用情況等,不接受患者信息及標(biāo)識牌。 標(biāo)本必須立即送檢,逾期標(biāo)本不予接收。 送檢容器必須完整,容器破損或標(biāo)本泄漏時不予受理。 標(biāo)本保存、運輸方式不當(dāng)?shù)?,不予接受?不接受明顯污染了的標(biāo)本。 標(biāo)本量明顯不足的標(biāo)本為不予受理。 在血培養(yǎng)以外的當(dāng)天反復(fù)申請
8、檢查的標(biāo)本被不予受理。 臨床常見的病原體檢查2009,3 .臨床病原體檢查方法,其主要手段是:1.直接顯微鏡檢查:是重要的基本方法,常作為初步診斷,陽性率相對較低。 2 .專一性抗原檢測:可作為早期快速診斷,但專一性至關(guān)重要。 例如免疫熒光技術(shù)、酶催化劑免疫技術(shù)、化學(xué)發(fā)光技術(shù)、乳膠凝集技術(shù)等。 3、核檢:近年來發(fā)展迅速,敏感性和專一性好。 例如,PCR、分子雜交、DNA序列等。 4、致病菌的分離培養(yǎng)和鑒定:雖然是確診的重要步驟,但往往需要時間。 5 .血清學(xué)檢查:通過檢查相應(yīng)的專一性抗體輔助診斷。 例如肥達(dá)氏試驗、結(jié)賬臺軍團(tuán)菌抗體檢測等。 應(yīng)進(jìn)行2份血清檢查,2次抗體效價相差4倍以上有意義。臨
9、床常見病原體檢測2009,第二節(jié)病原體藥物耐受力檢測2009,臨床常見病原體檢測2009,抗微生物劑藥物治療現(xiàn)狀及存在問題,使用增加,療效低下引起治療困難的感染,使細(xì)菌藥物耐受力惡化,引起菌群失調(diào)、雙重感染濫用,污染引起危害,一方面,藥物耐受力和發(fā)生機(jī)制、 臨床常見病原體檢查2009 1 .重點監(jiān)測耐藥菌株(1)甲氧芐啶耐受力葡萄球菌(MRS )和萬古霉素易感性降低葡萄球菌(VIS) (2)對高水平氨基糖苷類藥物腸球菌(HALR) (3)對萬古霉素耐性腸球菌(VRE )、葡萄球菌(5) 產(chǎn)生超廣譜內(nèi)酰胺酶(extendedspectrumbetalactamasesesbls )的肺炎克雷伯菌
10、和大腸菌群(6)持續(xù)高產(chǎn)染色體型內(nèi)酰胺酶(AmpC )陰溝腸桿菌, 瓦斯氣體發(fā)生劑腸桿菌細(xì)菌水平與垂直傳播抗性基因的整合子系統(tǒng)是產(chǎn)生滅活抗生素的水解作用酶催化劑和鈍化酶催化劑細(xì)菌抗生素作用靶點的變化細(xì)菌膜外排泵系統(tǒng)細(xì)菌生物膜的形成,2 .產(chǎn)生抗藥性的主要機(jī)制,臨床常見的病原體檢查2009,(1)手動試驗1 .紙片擴(kuò)散法(s ), 分子試驗分子試驗分子試驗分子試驗分子試驗分子試驗分子試驗分子試驗分子試驗分子試驗分子試驗分子試驗分子試驗分子試驗, 直接檢測臨床常見病原體檢查2009,K-B法,臨床常見病原體檢查2009,臨床常見病原體檢查2009,e試驗,臨床常見病原體檢查2009,(二)藥敏試驗
11、結(jié)果解釋,最小抗菌濃度(MIC ) :抑制細(xì)菌生長的臨床常見病原體檢測2009,敏感(s ) :檢測菌可通過檢測藥物常規(guī)接觸劑量給藥后體內(nèi)達(dá)到的血藥濃度抑制或殺菌,即該菌引起的感染可通過推薦接觸劑量(常規(guī)接觸劑量)的該抗微生物劑治療。 其體外最低抑菌濃度(MIC )在臨床上應(yīng)低于該抗微生物劑的正常用量。 銅綠假單胞菌藥物易感性實驗結(jié)果顯示,s、s、臨床常見病原體檢查2009、中度易感性(I ) :測定菌在大量投用測定藥物后可被到達(dá)體內(nèi)的血藥濃度抑制,或在測定藥物濃集部位的體液中抑制。 該細(xì)菌對這種抗微生物劑的反應(yīng)性通常低于敏感菌,而中度敏感藥即使高于大姨媽濃集部位或常規(guī)接觸劑量,也有臨床治療效
12、果。 銅綠假單胞菌藥物易感性實驗結(jié)果表明:,臨床常見病原體檢測2009,藥物耐受力(r ) :檢測菌不受體內(nèi)感染部位可達(dá)抗微生物劑濃度的抑制,感染菌對該抗微生物劑的治療不反應(yīng),增加接觸劑量或藥物富集部位也不反應(yīng)。 銅綠假單胞菌藥物易感性實驗結(jié)果顯示: r,臨床常見病原體檢測2009,對所有內(nèi)酰胺類及與酶催化劑阻化劑復(fù)方制劑耐受力及氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)脂質(zhì)、克林霉素和抗四環(huán)素等抗生素的耐藥性。 治療的優(yōu)先藥物是萬古霉素。FOX,甲氧芐啶耐受力葡萄球菌(methecillinresistancestaphylococcus,MRS )的篩選試驗,(3) .重點耐藥菌株的監(jiān)測試驗,注:OX為苯并三氮唑
13、。 FOX為頭孢替胺,臨床常見的病原體檢測為2009,CTX/CA比CTX抗菌圈或CAZ/CA比CAX 5mm為陽性2 .如果ESBLs為陽性,對青霉素類、所有頭孢菌素類及單環(huán)類抗生素的耐受力為3 .主要是大腸菌群和克雷伯菌屬等腸桿菌科細(xì)菌CAZ/CA為頭孢他啶/阿米酸,產(chǎn)生超廣譜內(nèi)酰胺酶(extend spectum -lactamase,ESBL )的兩張紙片實證試驗,臨床常見病原體檢查2009,第三節(jié)臨床感染常見病原體檢查,臨床常見細(xì)菌感染1 .細(xì)菌或其抗原檢測:直接涂片鏡檢測、培養(yǎng)、抗原檢測和分析2 .檢測抗體3 .細(xì)菌遺傳物質(zhì)檢測,臨床常見病原體檢測2009,二.細(xì)小病毒感染:1.顯
14、微鏡形態(tài)學(xué)檢測:光鏡檢測特征性細(xì)小病毒包涵體,電鏡檢測病毒粒子。 2、分離培養(yǎng):生細(xì)胞球培養(yǎng)臨床不常用。 3 .血清學(xué)檢查:臨床常用,如HIV檢查等。 4、核酸單孢雜交和PCR方法:近年來發(fā)展迅速。 臨床常見的病原體檢查2009,三.真菌感染:1.形態(tài)學(xué)檢查:重要手段。 2 .分離培養(yǎng)、鑒定。 3 .抗原檢查及血清學(xué)診斷:不常用。 4 .寄生蟲感染:1.涂膜檢查:在糞便中尋找網(wǎng)絡(luò)蠕蟲卵,外周血中尋找瘧原蟲等,是最確切的診斷方法。 2 .免疫學(xué)方法:廣泛應(yīng)用。 3.DNA探針及PCR技術(shù):近年來發(fā)展迅速。 臨床常見病原體檢查2009,5 .其他病原體感染檢查:1.支原體檢查:直接顯微鏡檢查無臨床
15、意義,分離培養(yǎng)是確診的依據(jù)。 2 .螺旋體檢查:暗視野顯微鏡檢查鉤端螺旋體是可培養(yǎng)的血清學(xué)診斷最主要的方法。 衣原體檢查:直接顯微鏡檢查是有參考價值的免疫學(xué)方法以檢測抗原或抗體為主要方法。 4 .立克次體檢查:直接檢測(免疫熒光、PCR等)動物接種血清學(xué)診斷試驗(外斐試驗等)。 臨床常見病原體檢查2009、第五節(jié)性傳播疾病病原體檢查、臨床常見病原體檢查2009、性傳播疾病(STD )是以性行為為主的一種傳染病,通稱性病。 臨床常見病原體檢測2009、HIV感染檢測篩選試驗: ELISA法確診HIV抗體試驗:蛋白印跡試驗RT-PCR篩選HIV-RNA梅毒螺旋體感染試驗: RPR快速血漿反應(yīng)素試驗
16、確診試驗: TPHA梅毒螺旋體凝血試驗臨床實驗室常見的診斷方法:臨床常見的2.PCR方法:采用早期、快速、敏感的方法,不能區(qū)分活菌還是死菌。 3、分離培養(yǎng)和鑒定:專一性高,診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”,可藥敏試驗云同步。 臨床常見病原體檢查2009,非淋菌性尿道炎實驗室檢查: 1、衣原體檢查:常用專一性抗原檢查、培養(yǎng)等。 2、支原體檢查:相關(guān)病原體主要為烏土衛(wèi)五等離子體和人型支原體,可培養(yǎng)。 臨床常見病原體檢查2009,第六節(jié)醫(yī)院感染常見病原體檢查2009,臨床常見病原體檢查2009,醫(yī)院感染是指患者住院時既無存在也無潛伏期,醫(yī)院內(nèi)發(fā)生的感染,包括在醫(yī)院內(nèi)獲得并出院后發(fā)病的感染。 醫(yī)院里發(fā)生的傳染病。 今天醫(yī)院的一個非常重要的問題。 臨床常見的病原體檢查2009、傳染源和病原體:傳染源主要來自住院患者、醫(yī)療從業(yè)者、造訪者及醫(yī)院環(huán)境、醫(yī)療器械、血液制品的污染等。 最常見的病原體是細(xì)菌,多以革蘭氏陰性桿菌為主。 易感性高的人:常見于免疫力低下狀態(tài)的住院患者。常見臨床類型:下呼吸道感染是最常見的醫(yī)院感染類型,此外,也常見泌尿道感染、手術(shù)切口感染、胃腸感染、血液感染、皮膚和軟組織感染等。
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