1、想象一下，我們能培育抗蟲棉嗎？1.微生物生長迅速，易于控制。因此，科學家們假設，如果能將人類胰島素基因?qū)胛⑸锊⒈磉_，這不僅會解決產(chǎn)量問題，還會大大降低生產(chǎn)成本，大大降低藥品價格。假設2，微生物能生產(chǎn)像人類胰島素這樣的珍貴藥物嗎？2、這些定向基因改造的想法能實現(xiàn)嗎？經(jīng)過多年的努力，科學家們終于在20世紀70年代發(fā)明了一種新技術(shù)基因工程，它可以定向改造生物體。3.基因工程的概念，即基因工程，是指根據(jù)人們的意愿進行嚴格的設計，通過體外基因重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù)，賦予生物體新的遺傳特征，創(chuàng)造更符合人們需求的新的生物類型和產(chǎn)品。因為基因工程是在脫氧核糖核酸分子水平上設計和構(gòu)建的，所以也被稱為脫氧核糖核酸重

2、組技術(shù)或基因剪接技術(shù)。4、基因剪接技術(shù)或DNA重組技術(shù)，在體外，在基因和DNA分子水平上，賦予生物體新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需求的生物類型和生物產(chǎn)品，即切割、剪接、導入、表達、基因重組和基因工程的概念，5、基因工程育種抗蟲棉的簡要過程：選育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟是什么？需要什么工具來解決培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟？基因工程育種抗蟲棉的關(guān)鍵步驟：關(guān)鍵步驟1:從蘇云金芽孢桿菌細胞中提取抗蟲基因；關(guān)鍵步驟2:將抗蟲基因與載體連接起來；關(guān)鍵步驟3:將抗蟲基因?qū)胧荏w(棉花)細胞；7.需要什么工具來解決培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟？關(guān)鍵步驟1的工具：關(guān)鍵步驟2的工具：關(guān)鍵步驟3的工具：“分子手術(shù)刀”限制性酶，“分

3、子縫合針”DNA連接酶，“分子轉(zhuǎn)運體”基因進入受體細胞的載體，8，需要什么工具來解決培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟？“分子手術(shù)刀”限制性內(nèi)切酶，“分子縫合針”DNA連接酶，“分子轉(zhuǎn)運體”基因進入受體細胞載體，9，“DNA重組技術(shù)基礎(chǔ)工具”，本節(jié)知識內(nèi)容，1-1 DNA重組技術(shù)基礎(chǔ)工具，專題1基因工程，“分子手術(shù)刀”限制性內(nèi)切酶，“分子縫合針”DNA連接酶，“分子轉(zhuǎn)運體”基因進入受體細胞載體，10，“分子轉(zhuǎn)運體”基因識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并在每個鏈的特定位置斷裂兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。主要是原核生物，大約有4000種。1，來源：2，種類：3，作用：5，結(jié)果：兩種末端形成，1，分子刀的限制

4、性內(nèi)切酶，4，切割方法：錯切和平行切割，11，限制性內(nèi)切酶切割磷酸二酯鍵，11 2。形狀記憶合金可以識別出碳鏈和碳鏈的序列，并在碳鏈和碳鏈之間切割形成一個平端。兩種常見的限制性內(nèi)切酶，14，EcoR，粘性末端，粘性末端，15，什么是粘性末端？當限制性內(nèi)切酶從識別序列中軸線的兩側(cè)切割時，被限制性內(nèi)切酶切割的兩條單鏈DNA的切口帶有幾個突出的核苷酸，這些核苷酸是互補的并且彼此配對。這種切口被稱為粘性末端。16、Sma、平端、17、什么是平端？當限制性內(nèi)切酶從識別序列的中心軸切割時，兩條單鏈DNA的切割是平的，這種切割稱為平端。18，2，DNA連接酶的“分子縫合針”，1，作用：2，作用位點：磷酸二酯

5、鍵，DNA連接酶可以“縫合”粘性末端之間的縫隙，即連接梯子兩側(cè)扶手的裂縫，從而形成重組DNA分子。，19，大腸桿菌DNA連接酶，T4DNA連接酶，來源，功能，大腸桿菌，T4噬菌體，恢復磷酸二酯鍵，只能連接粘端，可以連接粘端和平端(低效率)，異同，3，種：20，DNA連接酶與DNA聚合酶相同嗎？21，脫氧核糖核酸連接酶，脫氧核糖核酸聚合酶，它在兩個脫氧核糖核酸片段之間形成磷酸二酯鍵，不需要模板，而是在現(xiàn)有核酸片段的3個末端添加一個單核苷酸形成磷酸二酯鍵，這需要模板，22，核苷酸分子的連接：脫氧核糖核酸聚合酶連接單鏈脫氧核糖核酸，將單個脫氧核苷酸連接到脫氧核糖核酸片段，23，3，將分子轉(zhuǎn)運體基因的

6、載體導入受體細胞，從而將外源基因?qū)胧荏w細胞的工具是載體。1.基因工程的載體被稱為：分子轉(zhuǎn)運體；2.基因工程載體來源：質(zhì)粒、噬菌體、動植物病毒；24.質(zhì)粒細菌細胞中的小環(huán)狀DNA分子。裸，結(jié)構(gòu)簡單，獨立于細菌，并能自我復制，氨芐青霉素抗性基因，質(zhì)粒，假核，大腸桿菌細胞，靶基因插入位點，復制起點，已知常用載體質(zhì)粒，25，質(zhì)粒，26，討論，2。非典病毒可以作為基因載體嗎？3，作為矢量，如果沒有切割點呢？4.攜帶目標基因的載體是否已經(jīng)進入受體細胞，如何識別？如果目標基因被導入受體細胞后不能復制呢？1.從化學成分來看，載體應該包含哪些成分？雙鏈脫氧核糖核酸，不能，不能進行脫氧核糖核酸重組，載體應該有標

7、記基因，這可能導致基因丟失，27，載體應該具備的條件，(1)它可以在宿主細胞中穩(wěn)定儲存和自我復制。(2)有一個或多個與外源基因連接的限制性內(nèi)切酶位點，(3)有一些用于篩選的標記基因，(4)對受體細胞無害且易于分離，(5)結(jié)構(gòu)簡單且大小適中，28，這是載體1的必要條件。它能自我復制并進入受體生物細胞，在其中復制和表達；2.有一個或多個限制性內(nèi)切酶位點可以與靶基因結(jié)合。3.有易于觀察的遺傳標記基因。4.它們對受體細胞無害，易于分離且安全，相對容易獲得。29.了解常用的載體質(zhì)粒，這是基因工程中常用的載體。它是一種小型環(huán)狀雙鏈DNA分子，裸露，結(jié)構(gòu)簡單，不依賴染色體或細菌假核，能自我復制。它對宿主細胞

8、沒有影響，主要存在于細菌和酵母中。最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌。課本知識復習1。基因工程也被稱為or。通俗地說，根據(jù)人們的意愿，一種生物體被提取、添加，然后放入另一種生物體的細胞中，以轉(zhuǎn)化該生物體的遺傳特征?；蚣艚蛹夹g(shù)、DNA重組技術(shù)、基因、修飾、定向、31、2、DNA重組技術(shù)的基本工具、“分子手術(shù)刀”、“分子縫合針”、“分子轉(zhuǎn)運體”、限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶、基因進入受體細胞的載體、32、3、限制性內(nèi)切酶，主要識別某種雙鏈DNA分子，并在每條鏈的特定位置打破兩個核苷酸之間的間隙。從原核生物中分離純化出兩種末端，包括特異核苷酸序列、磷酸二酯鍵、粘端、平端、33，4、“分子縫合針”DNA連接酶、1

9、、種：2、作用位點、兩種、連接粘端、Ecoli DNA連接酶、T4 DNA連接酶、磷酸二酯鍵、連接粘端和平端。作為載體通常有三個條件：在基因工程操作中，真正用作載體的質(zhì)粒是質(zhì)粒、噬菌體衍生物、動植物病毒、天然質(zhì)粒、人工修飾、并能自我復制；有切割位點；帶有遺傳標記的基因；它對受體細胞無害且易于分離，這已在35，概述，36，1的基礎(chǔ)上完成。下列說法是正確的： (一)所有的限制性內(nèi)切酶只能識別一個特定的核苷酸序列(二)，質(zhì)粒是基因工程中唯一的載體(三)，而載體必須具備的條件之一是：多個限制性內(nèi)切酶點與外源基因相連(四)，脫氧核糖核酸連接酶在粘性末端片段的堿基之間形成氫鍵(二)。選擇不屬于質(zhì)粒的基因作為載體的原因有：A、復制B、多重限制性內(nèi)切酶點C、標記基因D，即環(huán)狀DNA，D，38、連接酶連接磷酸二酯鍵，以及DNA連接酶的作用過程：二、分子縫合針DNA連接酶，39、作用，40、連接粘端，連接粘端和平端