1、實驗五、蛋黃中卵磷脂的提取、純化和鑒定，一、實驗目的、掌握從新鮮卵中提取卵磷脂的方法和原理。 卵磷脂的鑒定方法和原理。 加深對磷脂復合物類結構和性質的理解。 二、實驗內容、磷脂復合物是含有磷酸的脂質，機體主要含有兩種磷脂復合物，由甘油構成的磷脂復合物來自被稱為甘油磷脂復合物(phosphoglyceride )的神經鞘脂(sphingolipid ) (1)磷脂酰膽堿(卵磷脂) (PC )，其主要作用是控制肝脂代謝，防止脂肪肝的形成。 (2)、磷脂酰乙醇胺(腦磷脂復合物) (PE )、參與血液凝結。 (3)、磷脂酰絲氨酸(PS )； (4)、磷脂酰肌醇(PI) (5)、磷脂酰甘油(PG )；

2、(6)、二磷脂酰甘油(心磷脂復合物)。 卵黃磷脂復合物是動物胚胎磷脂復合物，含有多種膽固醇、甘油三酸酯和多種人體不可缺少的營養(yǎng)物質和微量元素體。 卵磷脂是生命的基礎物質，人的生命從始至終離不開營養(yǎng)和保護。 卵磷脂存在于每個細胞球，集中在腦、神經系統(tǒng)、血液循環(huán)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、肝、心、腎等重要器官。 卵磷脂也被稱為“第三營養(yǎng)素”。 三、實驗原理、方法和手段、原理1 :蛋黃中卵磷脂復合物含量多(10%左右)。 卵磷脂和腦磷脂復合物均溶于乙醚中不溶于丙酮，利用該性質可與中性脂肪分離卵磷脂溶于乙醇，不溶于腦磷脂復合物，利用該性質可分離卵磷脂和腦磷脂復合物。 原理2 :雞蛋磷脂復合物為白色，其中所含不飽和

3、脂肪酸容易被空氣氧化而呈現黃褐色。 雞蛋磷脂復合物被堿水解作用后可分解為脂肪酸鹽、甘油、膽堿、磷酸鹽。 甘油與硫酸氫鉀共熱，可以生成具有特殊臭味的丙烯醛的磷酸鹽在酸性條件下與鉬酸銨起作用，生成黃色磷鉬酸沉淀的膽堿在堿的進一步作用下，生成無色、具有阿摩尼亞和魚腥味的三一甲胺。 卵磷脂的鑒定完成了。 五、實驗條件1、實驗材料1枚/組2、儀器和儀器：蛋清分離器、恒溫水族箱、蒸發(fā)皿、漏斗、鐵元素架臺、磁力攪拌器、天平、25mL量筒、100mL量筒3 .試劑： 95乙醇、乙醚、丙酮、ZnCl2、無水乙醇、濾紙、10%氫氧化納金屬釷、3% 紅色石蕊試紙，硫酸氫鉀，鉬酸銨溶液，6，實驗步驟，1如果濾液保持渾

4、濁，可以再次過濾直至濾液變透明。 濾液放入蒸發(fā)皿中，用水浴箱蒸干(或者用加熱茄克衫蒸干，溫度可以達到140左右)，得到的干燥物為雞蛋磷脂復合物。 (實驗采用方法2，以減少醚的使用或盡量不使用。 方法將10g蛋黃裝入干凈的帶塞子的三角瓶中，加入95%乙醇40ml，攪拌15分鐘后，靜置15分鐘。 然后加入10ml乙醚，攪拌15分鐘后靜置15分鐘。 二次萃取過濾渣，加入乙醇和乙醚(體積比31 )的混合液30ml，攪拌靜置一定時間后的第二次過濾合并二次濾液，至少加熱濃縮量，加入一定量的丙酮除去雜質后，卵磷脂沉淀，得到卵磷脂粗糙品。 2 )、卵磷脂純化、采集一定量的卵磷脂粗品，用乙醇酐溶解，得到約10%

5、的乙醇粗提取液，加入相當于卵磷脂質量的10% ZnCl2水溶液，在室溫下攪拌0.5h，分離沉淀物，加入適量的冰丙酮(4)洗滌，攪拌1h，用丙酮無色清掃液稱重。 卵磷脂的溶解性：取干燥試管，加入少量卵磷脂，再加入乙醚5mL，用團棒攪拌使卵磷脂溶解，滴加丙酮35mL，觀察實驗現象。3 )、卵磷脂的溶解性試驗、4 )、卵磷脂的鑒定、4.1三一甲胺的檢驗，取干燥試管1根，放入少量提取的卵磷脂和10%氫氧化鈉金屬釷溶液25ml，在水浴中加熱15分鐘，在管口上放入紅石蕊試紙，觀察有無顏色變化，聞味。 過濾加熱的溶液，濾液供下次檢查。 4.2取不飽和性檢查干凈的試管，加入上述濾液10滴，再加入3%元素溴的四氯化碳溶液12滴，搖動試管，觀察發(fā)生什么現象。 4.3磷酸的檢查取1根干凈的試管，加入上述濾液10滴和95%乙醇溶液510滴后，加入鉬酸銨試劑510滴觀察現象，最后將試管放入熱水浴中加熱510分鐘，觀察有什么變化。 4.4甘油檢驗取干凈試管，加入少量卵磷脂和0.2g硫酸氫鉀，用試管夾住，用小火略加熱，卵磷脂和硫酸氫鉀混合后集中加熱，聞水蒸氣釋放之前有什么氣味。 (1)蛋磷酯類化合物的用途；(2)在壓電石英藥工業(yè)中制造