1、乙型肝炎病毒標志物檢測,概述,乙型肝炎病毒（ HBV ）是一種嗜肝脫氧核糖核酸病毒,屬于包膜病毒。 在全世界廣泛流行，估計全球半數(shù)以上人口已被HBV感染過，5%的人口為HBV慢性感染 中國：乙肝高發(fā)區(qū)，人群HBsAg的檢出率達9.8%,HBV形態(tài)與基因結構,嗜肝DNA病毒科(Hepadnaviridae) 電鏡：3種形態(tài),乙型肝炎病毒,小球形顆粒 空心包膜，不含核酸 管形顆粒 兩者均為過剩的病毒外殼，僅含HBsAg，無感染性,“空心湯團”,形態(tài)與基因結構,Dane顆粒（完整的病毒）形態(tài),HBsAg,HBcAg,HBV DNA,DNAP,（外膜蛋白）,（核衣殼蛋白）,HBeAg,HBV Vira

2、l Genome Organization,HBsAg,HBcAg,HBeAg,3200 Base Pair Genome,Hepatocyte receptor bindng site,HBV DNA Polymerase,Protein that transactivates transcriptional promotors,圖4-2 血清中的Dane顆粒和外膜顆粒毒粒有雙層外 膜(), 含核心 （ ）,乙型肝炎病毒（電鏡） DANE氏顆粒直徑42NM 核心直徑27NM,乙肝六項檢測,參考值：ELISA法為陰性 放射免疫分析（RIA）法為陰性,HBV抗原抗體系統(tǒng),HBsAg：表面抗原，是

3、HBV的外殼，不含DNA, 其本身不具有傳染性，但常與HBV同時存在，常被 作為傳染性標志之一。是HBV感染的基本標志， 也是最早出現(xiàn)的血清學標志之一。 HBsAg陽性見于： 乙肝的潛伏期、急性期 慢性乙肝 病毒攜帶 與HBV感染有關的肝硬化和原發(fā)性肝細胞癌 注意 HBsAg陰性并不能完全排除HBV感染,HBV抗原抗體系統(tǒng),抗-HBs ：特異性中和抗體、保護性抗體，可阻止 HBV穿過細胞膜進入新的肝細胞。 抗-HBs陽性：可提示對乙肝病毒有一定程度的免疫力 見于：注射乙肝疫苗或乙肝高效價免疫球蛋白(HBIG) 后，產(chǎn)生的主動或被動免疫。 乙型肝炎恢復期， 隱性感染的健康人，自身產(chǎn)生了免疫力,H

4、BV抗原抗體系統(tǒng),HBcAg（核心抗原）：一般情況不易從血清中檢測到 游離的HBcAg。 HBcAg陽性提示患者血清中有感 染的HBV存在，其含量較多表示復制活躍，傳染 性強，預后較差。 抗-HBc：非中和抗體，分IgM、IgG和IgA三型 抗-HBc IgM：通常在出現(xiàn)癥狀時即可檢出，一般持續(xù)約6個月，提示HBV 復制，是急性感染的重要指標，也是慢性活動性肝炎的重要標志 抗-HBc IgG：在抗-HBc IgM下降及消失后出現(xiàn)，可伴隨感染者終生存在，是既往感染過HBV的指標。,HBV抗原抗體系統(tǒng),HBeAg陽性： 與HBsAg平行出現(xiàn)，較HBsAg消失早 意義：表示乙肝處于活動期，并有較強的

5、傳染性。 HBsAg持續(xù)陽性可轉為慢性或肝硬化。孕婦陽 性可垂直傳播。 抗-HBe陽性率：慢性乙肝為48%，肝硬化為68.3%，肝 癌為80% 在HBeAg消失后出現(xiàn) 表示HBV在體內復制減少或傳染 性減弱或消失。 乙肝急性期即出現(xiàn)陽性者，易進展為慢性乙肝。,血清學檢測的臨床意義,HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc 臨床意義,急性或慢性感染(大三陽),+,-,+,-,+,+,+,+,乙肝后期或慢性感染(小三陽),-,-,+,+,-,-,-,潛伏期或急性乙肝早期,-,-,+,+,+,痊愈或恢復期,有免疫力,-,-,-,-,-,+,+,+,-,-,痊愈,有免疫力,疫苗接種或

6、曾經(jīng)感染過,有免疫力,乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S1和前S1 抗體測定,概念：乙肝病毒表面抗原蛋白前S1位于HBV病毒顆粒的表面，是乙肝病毒識別肝細胞表面特異性受體的主要成分，是乙肝病毒復制和活動的標志物。 參考值：ELISA法或放射免疫分析（RIA）法： Pre S1為陰性 抗Pre S1為陰性 臨床意義： 1、非常重要的傳染性指標，作為病毒復制的標志較 HBeAg敏感。 2、前S1抗原陰轉越早、抗Pre S1陽轉越早，患者病程 越短、預后越好。,乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S2和前S2 抗體測定,概念：乙肝病毒表面抗原蛋白前S2 （Pre S2）位于 HBV病毒顆粒的表面蛋白成分，是乙肝病毒

7、侵入肝細 胞的主要結構成分；乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S2 抗體是乙肝病毒HBV的中和抗體。 參考值：ELISA法或放射免疫分析（RIA）法： Pre S2為陰性 抗Pre S2為陰性 臨床意義： 1、Pre S2為陽性提示HBV復制異?；钴S，有傳染性。 2、抗Pre S2為陽性，見于乙肝急性期及恢復早期， 提示HBV已被清除，預后較好。,乙型肝炎病毒DNA測定,概念：乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）呈雙股環(huán)形，是HBV的基因物質，也是乙型肝炎的直接診斷證據(jù)。 參考值：實時熒光定量PCR法:陰性 臨床意義： 1、HBV-DNA 陽性：是診斷乙肝的佐證，提示HBV復 制及有傳染性。 2、也用

8、于監(jiān)測應用HBsAg疫苗后垂直傳播的阻斷效 果，若HBV-DNA陽性，表明疫苗阻斷效果不佳。,乙型肝炎病毒YMDD變異測定,概念： YMDD（酪氨酸-蛋氨酸-天門冬氨酸-天門冬氨酸）位點是HBV反轉錄酶的活性部分，屬高度保守序列。在HBV的反轉錄過程中，YMDD位點中的YM能與模板核苷末端糖基相作用，影響寡核苷酸與模板鏈的結合。 參考值：實時熒光定量PCR法、基因芯片分析、焦磷酸測序法和基因克隆與測序法：該位點序列為酪氨酸-蛋氨酸-天門冬氨酸-天門冬氨酸 臨床意義：,臨床意義：YMDD是HBV反轉錄酶發(fā)揮催化活性所必需的關鍵結構。 目前臨床上廣泛使用的胞苷類似物拉米夫定等抗病毒藥物，作用靶位主要