1、微生物發(fā)酵生產(chǎn)蛋白酶,一、蛋白酶,定義：催化蛋白質(zhì)中肽鍵水解的酶。根據(jù)酶的活性中心起催化作用的基團(tuán)屬性，可分為：絲氨酸/蘇氨酸蛋白酶(編號(hào)：EC 3.4.21.-/EC 3.4.25.-)、巰基蛋白酶(編號(hào)：EC 3.4.22.-).、金屬蛋白酶(編號(hào)：EC 3.4.24.-)和天冬氨酸蛋白酶 (編號(hào) ：EC 3.4.23.-)等。 蛋白酶廣泛存在于動(dòng)物內(nèi)臟、植物莖葉、果實(shí)和微生物中。微生物蛋白酶，主要由霉菌、細(xì)菌，其次由酵母、放線菌生產(chǎn)。,二、酶發(fā)酵的方式,1、固體培養(yǎng)發(fā)酵 2、液體深層發(fā)酵 3、固定化細(xì)胞或固定化原生質(zhì)體發(fā)酵,三、各種發(fā)酵方式發(fā)酵模式：,1、固定培養(yǎng)發(fā)酵： 以麩皮、米糠等為

2、培養(yǎng)基的主要原料，加入其它必需的營(yíng)養(yǎng)成分而制成的固體或半固體的麥曲，經(jīng)滅菌、冷卻后，接入產(chǎn)酶菌株，在一定條件下，發(fā)酵產(chǎn)酶。 特點(diǎn)：設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便、麥曲中酶濃度較高，特別適用于各種霉菌的培養(yǎng)和發(fā)酵產(chǎn)酶。,2、液體深層發(fā)酵：采用液體培養(yǎng)基，置于發(fā)酵容器分鐘，經(jīng)霉菌，冷卻后，接入產(chǎn)酶細(xì)胞，在一定條件下發(fā)酵產(chǎn)酶。 3、固定化細(xì)胞發(fā)酵：將活細(xì)胞固定于水不溶性載體上，利用細(xì)胞的生命活動(dòng)，進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)酶。,四、酶生產(chǎn)菌的獲得渠道,1、從菌種保存機(jī)構(gòu)和有關(guān)研究部門獲得 2、通過篩選獲得,五、培養(yǎng)基的配制,枯草桿菌ASL.398中性蛋白酶發(fā)酵培養(yǎng)基： 玉米粉8%，豆餅粉4%，麩皮3.2%，米糠1%，磷酸氫二鈉

3、0.4%，磷酸二氫鈉0.03%.,六、發(fā)酵工藝流程,保藏菌種,菌種活化,種子擴(kuò)大培養(yǎng),酶,分離純化,發(fā)酵,1）菌種保存：產(chǎn)酶菌種在選育出來以后，必須妥善保存，才能保證其產(chǎn)酶特性不變異、不死亡、不被雜菌污染。 2）菌種活化：產(chǎn)酶菌種在使用錢必須接種于斜面培養(yǎng)基上，在一定條件下，進(jìn)行培養(yǎng)，以恢復(fù)細(xì)胞的生命活動(dòng)能力。 3）擴(kuò)大培養(yǎng)：活化了的菌種，一般還要經(jīng)一級(jí)至數(shù)級(jí)的擴(kuò)大培養(yǎng)。 4）分離純化：發(fā)酵結(jié)束后得到的酶可能含有一些雜質(zhì)，所以需要進(jìn)一步分離雜質(zhì)，純化目標(biāo)酶。,七、剖析：,八、蛋白酶的應(yīng)用,蛋白酶已廣泛應(yīng)用在皮革、毛皮、絲綢、醫(yī)藥、食品、釀造等方面 。eg：皮革工業(yè)的脫毛和軟化已大量利用蛋白酶，既節(jié)省時(shí)間，又改善勞動(dòng)衛(wèi)生條件。蛋白酶還可用于蠶絲脫膠、肉類嫩化、酒類澄清。臨床上可作藥用，如用胃蛋白酶治療消化不良，用酸性蛋白酶治療支氣管炎，用憚性蛋白酶治療脈管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶對(duì)外科化膿性創(chuàng)口的凈化及胸腔間漿膜粘連的治療。加酶洗衣粉是洗滌劑中的新產(chǎn)品，含堿性蛋白酶，能去除衣物上的血漬和蛋白污物，但使用時(shí)