1、實(shí)驗(yàn)十三物理化學(xué)因素對微生物的影響,目的要求,了解常用化學(xué)藥劑對微生物的作用原理及其實(shí)驗(yàn)方法；,了解不同物理因素對微生物生長的影響及其實(shí)驗(yàn)方法。,基本原理,溫度是影響微生物生長與存活的重要因素之一。當(dāng)微生物處 于最適生長溫度時，其生長速度最快；不適宜的溫度可以導(dǎo) 致細(xì)菌形態(tài)和代謝的改變或使微生物的蛋白質(zhì)凝固變性而導(dǎo) 致菌體死亡。 根據(jù)微生物對氧的要求不同可將微生物分為專性好氧菌、兼 性厭氧菌、微好氧菌、耐氧菌和專性厭氧菌五種類型。 紫外線對微生物生長的影響隨照射劑量、時間和照射距離的 變化而不同，劑量大、時間長、距離短時易殺死微生物；劑 量小、時間短、距離長時就會有少量個體殘存下來，某些個 體

2、會發(fā)生變異。,1好氧菌；2 厭氧菌；3 兼性厭氧/耐氧菌；4 微好氧菌,O2對微生物的影響,2、紫外線對微生物的影響,基本原理,常用化學(xué)消毒劑主要有重金屬及其鹽類、酚、醇、醛等有機(jī)化合物以及碘、表面活性劑、有機(jī)染料等。它們的殺菌或抑菌機(jī)制主要是使菌體蛋白質(zhì)變性，或者與酶的-SH結(jié)合而使酶失去活性。 本實(shí)驗(yàn)是觀察常用的化學(xué)消毒劑在一定濃度下對微生物的抑菌或殺菌作用，從而了解它們的抑菌或殺菌性能。,化學(xué)藥劑對微生物的影響,實(shí)驗(yàn)器材,活材料：表皮葡萄球菌懸液； 化學(xué)藥劑：2.5%碘酒， 0.05%龍膽紫， 0.5% 84消毒液，0.25%新潔爾滅； 培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基； 器材：無菌培養(yǎng)皿，無

3、菌黑紙，紫外燈，濾紙片，移液器，鑷子，記號筆，酒精燈，火柴，涂布棒，恒溫培養(yǎng)箱,實(shí)驗(yàn)步驟,1、倒平板 將牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制成平板。 2、接種 用無菌移液管取0.2ml表皮葡萄球菌菌液于平板上，并用涂布棒涂布均勻。 3、加黑紙 打開皿蓋，用無菌黑紙遮住部分平板。 4、紫外線照射 置紫外線燈下照射30分鐘（打開皿蓋），燈與培養(yǎng)皿距離約3040cm。照射完畢，蓋上皿蓋。 5、培養(yǎng) 置37溫箱中培養(yǎng)24小時。 6、觀察 觀察并記錄培養(yǎng)基平板上的表皮葡萄球菌生長情況。,實(shí)驗(yàn)步驟,1、倒平板 將牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制成平板。 2、接種 用無菌移液管取0.2ml表皮葡萄球菌菌液于平板上，并用涂布棒涂布均勻。

4、 3、標(biāo)記 將上述已接種的培養(yǎng)皿用記號筆在皿底劃成4等份，每一等份內(nèi)標(biāo)明一種藥物的名稱。 4、加化學(xué)藥劑 用無菌鑷子將圓形濾紙片分別浸入各種藥液中，取出，除去多余藥液后，以無菌操作將紙片對號放入培養(yǎng)皿的小區(qū)內(nèi)。 5、培養(yǎng) 置37恒溫箱中培養(yǎng)24小時。 6、觀察 記錄微生物生長情況并取出測定抑菌圈大小，比較幾種化學(xué)藥劑的殺菌力強(qiáng)弱。,實(shí)驗(yàn)報告,請比較不同化學(xué)藥劑對表皮葡萄球菌的致死能力，并將結(jié)果填入下表。,表1 不同化學(xué)藥物對表皮葡萄球菌的致死能力,1、倒平板 將牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制成平板。 2、接種 用無菌移液管取0.2ml表皮葡萄球菌菌液于平板上，并用涂布棒涂布均勻。 3、標(biāo)記 將上述已接種的培養(yǎng)皿用記號筆在皿底劃成4等份，每一等份內(nèi)標(biāo)明一種藥物的名稱。 4、加化學(xué)藥劑 用無菌鑷子將圓形濾紙片分別浸入各種藥液中，取出，除去多余藥液后，以無菌操作將紙片對號放入培養(yǎng)皿的小區(qū)內(nèi)。 5、培養(yǎng) 置37恒溫箱中培養(yǎng)24小時。 6、觀察 記錄微生物生長情況并取出測定抑菌圈大小，比較幾種化學(xué)藥劑的殺菌力強(qiáng)弱。,1、倒平板 將牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制成平板。 2、接種 用無菌移液管取0.2ml表皮葡萄球菌菌液于平板上，并用涂布棒涂布均勻。 3、加黑紙 打開皿蓋，用無菌黑紙遮住部分平板。 4、紫外線照射 置紫外線燈下照射30分鐘（打