1、2 篩選策略,營養(yǎng)缺陷性突變株,與營養(yǎng)要求有關(guān)的三類遺傳型,2）營養(yǎng)缺陷型的篩選辦法,誘變劑處理,淘汰野生型,檢出缺陷型,夾層培養(yǎng)法,限量補(bǔ)充培養(yǎng)法,逐個(gè)檢出法,影印接種法,鑒定缺陷型,菌絲過濾法,抗生素法,淘汰野生型：在誘變后的存活個(gè)體中，營養(yǎng)缺陷型的比例較低（百分之幾千分之幾）。需選用適當(dāng)?shù)姆椒ㄌ蕴瓰閿?shù)眾多的野生型菌株，達(dá)到“濃縮”極少數(shù)營養(yǎng)缺陷型的目的。,過濾法是使能在基本培養(yǎng)基上生長形成菌絲體的野生型留在濾膜上，不能生長的營養(yǎng)缺陷型孢子則能透過濾膜。,營養(yǎng)缺陷型檢出逐個(gè)檢出法,夾層檢出法,影印法,限量補(bǔ)充培養(yǎng)法（同一培養(yǎng)皿）,微量蛋白胨的基本培養(yǎng)基上 小菌落是營養(yǎng)缺陷型突變株,生長譜法

2、 方法簡便； 回變和污染不影響 結(jié)果 測(cè)定物質(zhì)可為粉末 或紙片,缺陷型的鑒定,測(cè)定一般應(yīng)分兩階段： 第一階段：測(cè)定是哪類物質(zhì)的缺陷型； 第二階段：根據(jù)第一階段確定的范圍，進(jìn)一步確定是哪種具體化合物的缺陷型；,組合營養(yǎng)物法,步驟（以氨基酸缺陷型的鑒定為例）： a. 將多種營養(yǎng)因子編組； b. 將組合液的紙片放在涂菌的基本培養(yǎng)基上培養(yǎng)； c. 結(jié)果分析；,一組：1 2 3 4 5 二組：2 6 7 8 9 三組：3 7 10 11 12 四組：4 8 11 13 14 五組：5 9 12 14 15,營養(yǎng)因子分組編排時(shí)注意； 1）每組內(nèi)無重復(fù)的營 養(yǎng)因子 2）每組中應(yīng)包含只出 現(xiàn)一次的因子 3）每

3、組中其他因子應(yīng) 分別出現(xiàn)二次,如：,一組：1 2 3 4 5 二組：2 6 7 8 9 三組：3 7 10 11 12 四組：4 8 11 13 14 五組：5 9 12 14 15,營養(yǎng)缺陷型的應(yīng)用,利用營養(yǎng)缺陷型突變株來生產(chǎn)氨基酸和核苷酸是典型的例子,抗阻遏和抗反饋突變型,抗阻遏和抗反饋突變型都是由于代謝失調(diào)所造成的，在細(xì)胞中已經(jīng)有大量最終代謝產(chǎn)物時(shí)仍然繼續(xù)不斷地合成這一產(chǎn)物。,選育結(jié)構(gòu)類似物抗性突變株,結(jié)構(gòu)類似物是指一些和細(xì)菌體內(nèi)氨基酸、嘌呤、維生素等代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相類似的物質(zhì),主要用于末端產(chǎn)物的積累,抗性突變菌株的篩選,抗生素抗性突變株,條件抗性突變,因環(huán)境不同，能表現(xiàn)為野生型菌株的特性和突變型菌株特性的突變稱為條件抗性突變或稱為條件致死突變。,以溫度敏感突變?yōu)槔?篩選方法： 用途：常用于提高代謝物產(chǎn)量 原因：是由于某一酶蛋白結(jié)構(gòu)改變后，在高溫下活力喪失 重要性：如果此酶為蛋白質(zhì)、核酸合成途徑中所需的酶，則此變異株在高溫下的表型就是營養(yǎng)缺陷型。,在富含生物素的培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵時(shí)： 先在30（允許條件）中進(jìn)行培養(yǎng)以得到大量菌細(xì)胞，適當(dāng)時(shí)間后提高溫度（ 40 ，非允許條件），即能獲得谷氨酸的過量生產(chǎn)。,應(yīng)用舉例,由谷氨酸產(chǎn)生菌乳糖發(fā)酵短桿菌2256，經(jīng)誘變處理得到溫度敏感變異