1、1,第五章凝集反應(yīng),顆粒性抗原與特異性抗原結(jié)合后，在適當(dāng)?shù)碾娊赓|(zhì)存在下，形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象，稱為凝集反應(yīng)。 可溶性抗原或抗體與載體顆粒結(jié)合形成致敏顆粒后，與相應(yīng)的抗原或抗體結(jié)合，也能發(fā)生凝集反應(yīng)。,2,第一節(jié)凝集反應(yīng)的特點(diǎn) 凝集反應(yīng)的發(fā)生分為兩個(gè)階段：1、抗原抗體的特異性結(jié)合階段；2、出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。 顆粒性抗原在懸液中帶負(fù)電荷，周圍吸引一層與之牢固結(jié)合的正離子，外面又排列一層松散的負(fù)離子，構(gòu)成一個(gè)雙層電子云。在松散層內(nèi)界和外界間的電位差形成Z電位。溶液中負(fù)離子強(qiáng)度越大，Z電位也越大，Z電位使顆粒間互相排斥。,3,當(dāng)抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合時(shí)，抗體的交聯(lián)作用克服了抗原顆粒表面的Z電位，而

2、使顆粒相互靠攏，聚集在一起。 當(dāng)抗體的分子太少或分子量小，不能克服相當(dāng)厚度的離子云層時(shí)，則不能使顆粒聚集。在凝集反應(yīng)中IgM的作用遠(yuǎn)大于IgG。 為促使凝集現(xiàn)象的出現(xiàn)，可采取以下措施：1、增加蛋白質(zhì)和電解質(zhì)，縮短顆粒間的距離；2、增加溶液的黏稠度；3、用胰酶和神經(jīng)氨酸酶處理；4：以離心的方式克服顆粒間的排斥力。,4,定性檢測(cè)：以凝集現(xiàn)象的出現(xiàn)與否來判別結(jié)果的陰陽性； 半定量試驗(yàn)：將抗體標(biāo)本對(duì)倍稀釋后檢測(cè)，出現(xiàn)陽性的最高稀釋度為待測(cè)抗體的效價(jià)和滴度。 在免疫學(xué)技術(shù)中，根據(jù)參與反應(yīng)的顆粒不同，分為直接凝集反應(yīng)和間接凝集反應(yīng)。 自身紅細(xì)胞凝集反應(yīng)和抗球蛋白參與的凝集試驗(yàn)是兩種特殊的凝集試驗(yàn)。,5,第

3、二節(jié) 直接凝集反應(yīng) （direct agglutination test),直接凝集試驗(yàn)：顆粒性抗原在有電解質(zhì)的 參與下，直接與相應(yīng)抗體結(jié) 合出現(xiàn)的凝集現(xiàn)象。,凝集原(agglutinogen)：凝集反應(yīng)中的抗原,凝集素(agglutinin)： 凝集反應(yīng)的抗體,6,一、玻片凝集試驗(yàn) 在玻片上顆粒性抗原與相應(yīng)抗體直接結(jié)合，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。 定性試驗(yàn)，簡(jiǎn)便、快速，靈敏度低。此法在臨床上常用于分離培養(yǎng)陽性的細(xì)菌鑒定、ABO血型鑒定等。,7,二、試管凝集試驗(yàn) 半定量試驗(yàn)。 在試管內(nèi)顆粒性抗原與相應(yīng)抗體直接結(jié)合，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。 多用于測(cè)定抗體效價(jià)，出現(xiàn)明顯凝集的最高稀釋度為待測(cè)血清抗

4、體的效價(jià)和滴度。 為避免應(yīng)反應(yīng)條件不適當(dāng)（如pH、電解質(zhì)、 溫度等）引起的假陽性或假陰性結(jié)果，試驗(yàn) 中必需設(shè)置陰性和陽性對(duì)照。 Weil-Felix reaction、Widal reaction 。,8,第三節(jié) 間接凝集反應(yīng),將可溶性抗原或抗體預(yù)先吸附或偶聯(lián)在與免疫無關(guān)的大小合適的顆粒上，與相應(yīng)抗體或抗原作用，在適當(dāng)電解質(zhì)參與下，出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象稱為間接凝集反應(yīng)。 一、間接凝集反應(yīng)的類型： 1、正向間接凝集試驗(yàn)：用抗原致敏載體檢測(cè)相應(yīng)抗體； 2、反向間接凝集試驗(yàn)：用抗體致敏載體檢測(cè)相應(yīng)抗原；,9,3、間接凝集抑制試驗(yàn)： (1)正向間接凝集抑制試驗(yàn)： 診斷試劑：抗原致敏的顆粒載體、相應(yīng)的抗體

5、；目的檢測(cè)物：與致敏抗原相同的抗原。 檢測(cè)過程：標(biāo)本抗體抗原致敏的顆粒陽性（不凝集）；陰性（凝集）。 (2)反向間接凝集抑制試驗(yàn)： 診斷試劑：抗體致敏的顆粒載體、相應(yīng)的抗原； 目的檢測(cè)物：與致敏抗體相同的抗體。 檢測(cè)過程：標(biāo)本抗原抗體致敏的顆粒陽性（不凝集）；陰性（凝集）。,10,載體,可溶性抗原,致敏,致敏顆粒,凝集顆粒,（正向）間接凝集試驗(yàn),用特異性抗原致敏載體，檢測(cè)標(biāo)本中的相應(yīng)抗體,待測(cè)抗體,11,反向間接凝集試驗(yàn),用特異性抗體致敏載體，檢測(cè)標(biāo)本中的相應(yīng)抗原的方法,載體,已知抗體,致敏,致敏顆粒,凝集顆粒,待測(cè)抗原,12,間接凝集抑制試驗(yàn),待測(cè)抗原,已知抗體,特異結(jié)合,抗原抗體復(fù)合物,致

6、敏顆粒,用抗原致敏載體及相應(yīng)抗體作為診斷試劑，用于檢測(cè)標(biāo)本中是否存在與致敏載體相同的抗原,無凝集顆粒為陽性,13,間接凝集抑制試驗(yàn),待測(cè)抗原,已知抗體,無結(jié)合,抗原抗體分散,致敏顆粒,有凝集顆粒為陰性,14,4、協(xié)同凝集反應(yīng) 也是反向間接凝集試驗(yàn)，只是所用載體為金黃色葡萄球菌。 金黃色葡萄球菌的細(xì)胞壁含A蛋白，可以和IgG的Fc段結(jié)合，而兩個(gè)Fab段暴露在葡萄球菌菌體表面，仍然保持正常的抗體活性。利用這種特性可以將特異性IgG結(jié)合在菌體上，形成致敏顆粒，與特異性抗原相遇時(shí)，能出現(xiàn)特異的凝集現(xiàn)象。,15,原理圖,IgG,SPA,SPA- IgG,待測(cè)抗原,SPA- IgG-待測(cè)抗原凝集顆粒,混合

7、,加入,16,二、間接血凝試驗(yàn) 以紅細(xì)胞為載體的間接凝集試驗(yàn)。 將可溶性抗原(或抗體）吸附人的“O”型血紅細(xì)胞或綿羊或家兔的紅細(xì)胞，制成致敏血紅細(xì)胞，與相應(yīng)抗體（或抗原）作用，在適宜電解質(zhì)參與下，出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。 間接血凝試驗(yàn)操作簡(jiǎn)便，價(jià)格低廉，不需要特殊設(shè)備，結(jié)果也比較穩(wěn)定。但其靈敏度比不上標(biāo)記免疫，需要手工操作。,17,紅細(xì)胞,抗原,致敏,致敏紅細(xì)胞,紅細(xì)胞凝集,間接血凝試驗(yàn),間接血凝試驗(yàn)原理,待測(cè)抗體,18,三、乳膠凝集試驗(yàn) 以聚苯乙烯膠乳顆粒為載體的間接凝集試驗(yàn)。 膠乳顆粒的均一性、穩(wěn)定性好于紅細(xì)胞。 與蛋白質(zhì)的結(jié)合能力及凝集能力不如紅細(xì)胞。 靈敏度不如血凝實(shí)驗(yàn)。 白色乳膠凝集時(shí)反

8、差不大。 彩色乳膠實(shí)驗(yàn)，提高靈敏度。 四、明膠凝集試驗(yàn) 以聚苯乙烯膠乳顆粒為載體的間接凝集試驗(yàn)。 乳膠凝集試驗(yàn)與明膠凝集試驗(yàn)都已逐漸被淘汰。,19,第四節(jié) 自身紅細(xì)胞凝集試驗(yàn),反應(yīng)中的紅細(xì)胞是未經(jīng)致敏的受檢者新鮮紅細(xì)胞。主要試劑材料為抗人O型紅細(xì)胞的單克隆抗體，這種抗體能與各種血型的紅細(xì)胞結(jié)合，但不引起凝集反應(yīng)。這種抗體與另一特異性抗體連接成的雙功能抗體可用于檢測(cè)標(biāo)本中的抗原；如與特異性抗原連接，則可用于檢測(cè)標(biāo)本中的抗體。反應(yīng)中的標(biāo)本為受檢者的全血。 檢測(cè)標(biāo)本為全血，檢測(cè)速度快。 靈敏度低，不能用于HIV抗體和HBsAg檢測(cè)。,20,第五節(jié)抗球蛋白試驗(yàn) (Coombs試驗(yàn) ),診斷免疫溶血性貧

9、血的主要方法。 目的：檢測(cè)抗紅細(xì)胞不完全抗體。 不完全抗體：能與顆粒抗原牢固結(jié)合，但一般不出現(xiàn)可見反應(yīng)，多為7S的IgG。 (一)直接Coombs試驗(yàn) 測(cè)定患者紅細(xì)胞上有無附著不完全抗體。在洗滌 過的紅細(xì)胞懸液加入含抗人球蛋白的試劑，混和后 離心一分鐘促進(jìn)凝集。如果肉眼或顯微鏡下能見到 紅細(xì)胞凝集，即為陽性，說明紅細(xì)胞表面有不完全 抗體。 新生兒溶血、自體免疫溶血性貧血、輸血反應(yīng)、 某些藥物或疾病引起的免疫溶血性貧血。,21,（一）直接Coombs試驗(yàn),不完全抗體,檢測(cè)紅細(xì)胞上抗體,22,(二)間接Coombs試驗(yàn) 測(cè)定患者血清中有無游離不完全抗體。 先將受試的血清加入等量5%正常紅細(xì)胞(Rh

10、陽性的O型紅細(xì)胞)，在37溫育3060分鐘，以促使血清中的不完全抗體結(jié)合于紅細(xì)胞上(致敏)，將紅細(xì)胞充分洗滌，以后同直接試驗(yàn)。如果紅細(xì)胞發(fā)生凝集而正常對(duì)照(未經(jīng)與受檢血清溫育的正常紅細(xì)胞)不凝集，即為陽性，表明受試的血清中存在不完全抗體。多用于檢測(cè)母體Rh(D)抗體，盡早發(fā)現(xiàn)和避免新生兒溶血。,23,（二）間接Coombs試驗(yàn),檢測(cè)血清中的抗紅細(xì)胞抗體,24,第六章 沉淀反應(yīng),可溶性抗原與相應(yīng)的抗體混合，在電解質(zhì)存在的條件下，兩者比例適合，即可有沉淀物出現(xiàn)，叫沉淀反應(yīng)。 1898年Kraus首次發(fā)現(xiàn)毒素-抗毒素的沉淀現(xiàn)象； 1905年Bechgold 發(fā)現(xiàn)沉淀可以在明膠中進(jìn)行； 1965年Ma

11、ncini發(fā)明單向免疫擴(kuò)散技術(shù)； 上世紀(jì)70年代免疫濁度法出現(xiàn)。 上述技術(shù)的發(fā)明發(fā)展，使得沉淀反應(yīng)向快速、準(zhǔn) 確、微量、自動(dòng)化方向發(fā)展，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用 越來越廣泛。,25,第一節(jié) 沉淀反應(yīng)的特點(diǎn),沉淀反應(yīng)分為兩個(gè)階段： 1、抗原抗體特異性結(jié)合； 2、形成可見的免疫復(fù)合物。 經(jīng)典的沉淀反應(yīng)在第二階段觀察或測(cè)量沉淀線或沉淀環(huán)等來判斷結(jié)果，稱為終點(diǎn)法需要幾十分鐘到數(shù)小時(shí)； 在第一階段測(cè)定免疫復(fù)合物形成的速率，稱為速率法。,26,第二節(jié) 液體內(nèi)沉淀試驗(yàn),一、絮狀沉淀試驗(yàn) 抗原溶液與相應(yīng)抗體溶液混合，在電解質(zhì)存在下，抗原 與抗體結(jié)合出現(xiàn)可見的絮狀沉淀。 形成絮狀沉淀物。 (一)抗原稀釋法 將抗原作系

12、列稀釋，與恒量濃度的抗血清等量混合反應(yīng) 后，產(chǎn)生的沉淀物隨抗原量的變化而不同?？乖贵w比例適 當(dāng)時(shí)，形成的沉淀物最多。 (二)抗體稀釋法 將抗體作系列稀釋，與恒量濃度的抗血清等量混合反應(yīng) 后，產(chǎn)生的沉淀物隨抗體量的變化而不同。 (三)方陣滴定法 將以上兩種方法結(jié)合，將抗原抗體同時(shí)稀釋，找出最佳比 例。,27,二、免疫濁度測(cè)定,將現(xiàn)代化光學(xué)測(cè)量?jī)x器與自動(dòng)化檢測(cè)分析系統(tǒng)相結(jié)合，用于沉淀反應(yīng)，定量檢測(cè)微量抗原抗體。,28,經(jīng)典的沉淀試驗(yàn)有四個(gè)缺點(diǎn)無法克服：操作繁瑣；靈敏度低(10-100g)；時(shí)間長(zhǎng)；難以自動(dòng)化。 微量免疫沉淀法-免疫濁度測(cè)定，包括免疫透射濁度測(cè)定、免疫乳膠濁度測(cè)定、免疫散射濁度測(cè)定

13、。 原理：當(dāng)可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，比例適當(dāng)時(shí)，在特殊的緩沖液中快速形成一定的免疫復(fù)合物，引起液體介質(zhì)濁度發(fā)生改變，利用現(xiàn)代光學(xué)測(cè)量?jī)x器對(duì)濁度進(jìn)行測(cè)定從而檢測(cè)抗原含量。 速率比濁法和終點(diǎn)比濁法。,29,影響因素： 1、抗原抗體的比例 濁度形成的關(guān)鍵因素。 高劑量鉤狀反應(yīng)(high dose hook effect)：當(dāng)抗原過剩時(shí)，形成的IC分子小，而且容易離解，濁度反而下降。 用抗體檢測(cè)抗原，當(dāng)反應(yīng)液中抗體過量時(shí)，在一定范圍內(nèi)，IC的形成量與抗原量的遞增正比，當(dāng)抗原量遞增至抗原抗體最佳比例時(shí)，IC的形成到達(dá)高峰。如再增加抗原量，IC的形成量反而減少。因此，如檢測(cè)時(shí)抗原過量則得出錯(cuò)誤的檢測(cè)結(jié)果

14、。 反應(yīng)體系中保持抗體過量。,30,鉤狀效應(yīng)時(shí)分析濃度與檢測(cè)信號(hào)關(guān)系圖：,檢測(cè)信號(hào),抗體過剩帶,抗原過剩帶,抗原分析濃度,31,2、抗體的質(zhì)量 特異性高，無交叉反應(yīng)； 效價(jià)高，避免低效價(jià)抗體引起的非特異性濁度； 親和力高，免疫復(fù)合物形成快，結(jié)合牢固； R型抗體，等價(jià)帶寬，親和力強(qiáng)。 3、抗原抗體反應(yīng)的溶液 最適pH6.5-8.5；在一定范圍內(nèi)，離子強(qiáng) 度大，IC形成快。 4、增濁劑 PEG，tween-20。消除抗原抗體周圍的電子云和 水化層，促進(jìn)加速IC的形成。,32,免疫比濁方法分類 透射比濁法 散射比濁法 免疫膠乳比濁法,33,第三節(jié) 凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn),可溶性抗原和抗體在凝膠中擴(kuò)散，形成濃

15、 度梯度，在二者比例適當(dāng)?shù)牡胤叫纬扇庋劭?見的沉淀線或沉淀環(huán)。 一、單向擴(kuò)散試驗(yàn) (一)試管法 將混有抗體的瓊脂糖溶液倒入試管，待其 凝固后在凝膠上面加入待檢標(biāo)本，如標(biāo)本中 有相應(yīng)抗原，會(huì)從上向下擴(kuò)散，在濃度比例 合適的地方形成沉淀環(huán)。,34,(二)平板法 將混有抗體的瓊脂糖溶液制成平板，在平 板上打孔，加入標(biāo)本，如標(biāo)本中有相應(yīng)抗 原，會(huì)向四周擴(kuò)散，在濃度比例合適的地方 形成沉淀環(huán)。沉淀環(huán)的直徑或面積的大小與 抗原量有關(guān)，但不是直線相關(guān)，而是對(duì)數(shù)相 關(guān)，可通過相關(guān)公式計(jì)算。,35,示意圖,（沉淀環(huán)直徑)2,抗原濃度,1.抗體混于凝膠中 2.抗原加入孔內(nèi) 3.抗原自由擴(kuò)散,標(biāo)準(zhǔn)品抗原濃度測(cè)定,不

16、同病人抗原濃度測(cè)定,1.測(cè)定沉淀環(huán)直徑 2.在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找 相應(yīng)抗原濃度,36,沉淀環(huán)的直徑與待測(cè)標(biāo)本含量?jī)煞N計(jì)算方法,Mancini曲線： 大分子抗原 時(shí)間擴(kuò)散48h， 常數(shù)KCd2 普通坐標(biāo)紙曲線,Fahey曲線： 小分子抗原 擴(kuò)散時(shí)間24h 常數(shù)KlogCd 半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙曲線,C為抗原濃度， d為沉淀環(huán)直徑,單向擴(kuò)散試驗(yàn) （平板法）,37,T1為1624h；T2為2448h；T3為48h以上,可見T3為直線，T1為反拋物線,t1為1624h；t2為2448h；t3為48h以上,可見t1為直線，t3為反拋物線,Mancini曲線,Fahey曲線,38,二、雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn) (一)試管法

17、將混有抗體的瓊脂糖溶液倒入試管，待其 凝固后在凝膠上面加入凝固后中間加一層普 通瓊脂，凝固后將抗原加到上層待檢標(biāo)本， 抗原從上向下擴(kuò)散，抗體從下向上擴(kuò)散，在 濃度比例合適的地方形成沉淀環(huán)。 (二)平板法： 將抗原與其相應(yīng)抗體放在凝膠（如瓊脂）平板 的鄰近孔內(nèi)，使它們互相擴(kuò)散，當(dāng)擴(kuò)散到兩者濃度 比例合適的部位相遇時(shí)，即出現(xiàn)沉淀線。,39,原理示意圖,Ab,Ag,模擬圖,染色標(biāo)本圖,1.抗原抗體雙向自由擴(kuò)散 2.24小時(shí)出結(jié)果 3.呈現(xiàn)沉淀線或弧,40,結(jié)果分析： 抗原或抗體是否存在； 抗原或抗體的純度；若在兩孔內(nèi)有兩對(duì)或兩對(duì)以上的抗原抗體系統(tǒng)，就能產(chǎn)生相應(yīng)數(shù)量的分離的沉淀線。 抗原或抗體相對(duì)濃度

18、：抗原濃度越高，形成的沉淀線距離抗原孔越遠(yuǎn)，抗體濃度越高，形成的沉淀線距抗體孔越遠(yuǎn)； 抗原或抗體相對(duì)分子量：抗原或抗體在瓊脂內(nèi)的擴(kuò)散受分子量影響，分子量大者擴(kuò)散速度慢，擴(kuò)散圈小，局部濃度高，因此形成的沉淀圈彎向分子量大的一方，若二者分子量相等，則沉淀線呈直線；,41,抗原性質(zhì)：觀察兩個(gè)鄰近孔的抗原與抗體所形成的兩條線是交叉抑或相連，可用來判斷該兩抗原是否有共同成分。同樣的純抗原a放在兩個(gè)鄰近的孔中，對(duì)應(yīng)抗體放在中央孔中，兩條沉淀線在其相鄰的末端會(huì)互相連接和融合；若兩個(gè)不同的抗原a和b，則兩線互相交叉；若兩個(gè)抗原有部分相同成分a和ab，則兩線除有相連部分以外還有一伸出部分。 滴定抗體效價(jià)：固定抗

19、原濃度，稀釋抗體，出現(xiàn)沉淀線的最高稀釋度為該抗體的效價(jià)。,42,抗原、抗體相對(duì)分子量,Ag分子量大于Ab,Ag分子量等于Ab,Ab分子量大于Ag,43,三種雙擴(kuò)散,兩Ag完全相同,兩Ag完全不同,兩Ag部分相同,44,第七章 免疫電泳技術(shù),電泳分析與沉淀反應(yīng)相結(jié)合的試驗(yàn)技術(shù)。 優(yōu)點(diǎn)：1、加快沉淀反應(yīng)的速度； 2、將某些蛋白組份利用其分子 量和/或電荷的不同將其分開、 集中后，再作更細(xì)微的分析。 一、對(duì)流免疫電泳 將雙向免疫擴(kuò)散與電泳兩種方法的結(jié)合， 定向加速的雙擴(kuò)。,45,原理：在pH8.6的溶液中，大部分蛋白抗原帶負(fù)電，在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)；IgG 分子量大，帶的電荷少，在電場(chǎng)中雖也向正極移動(dòng)

20、，但速度緩慢。由于電滲引起負(fù)極移動(dòng)的潮流速度超過了IgG向正極的移動(dòng)，帶動(dòng)抗體移向負(fù)極，形成與抗原間的對(duì)流。二者相遇后，在最適比例處形成沉淀線。 陰陽極兩側(cè)打孔，陰極孔加入抗原，陽極孔加入抗體，通電后在兩者間或抗體(抗原過剩)的另一側(cè)形成沉淀線。,46,示意圖,47,對(duì)流電泳,-,+,Ag,Ab,1.Ag陽性 2.Ag弱陽性 3. Ag強(qiáng)陽性 4. Ag強(qiáng)陽性,48,優(yōu)點(diǎn)：快速，靈敏度較免疫擴(kuò)散高； 缺點(diǎn)：分辨率差，對(duì)抗原抗體比例要求高。抗原為IgG時(shí)，不能采用該方法。,49,二、火箭免疫電泳 將單向免疫擴(kuò)散和電泳相結(jié)合的一種定 量檢測(cè)技術(shù)。 原理：電泳時(shí)，含于瓊脂凝膠中的抗體 不發(fā)生移動(dòng)，而

21、在電場(chǎng)的作用下促使樣品中 的抗原向正極泳動(dòng)。當(dāng)抗原與抗體分子達(dá)到 適當(dāng)比例時(shí)，形成一個(gè)形狀如火箭的不溶性 免疫復(fù)合物沉淀峰，峰的高度與樣本中的抗 原濃度呈正相關(guān)。,50,當(dāng)瓊脂中抗體濃度固定時(shí)，以不同稀釋 度標(biāo)準(zhǔn)抗原泳動(dòng)后形成的沉淀峰為縱坐標(biāo)， 抗原濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 根據(jù)樣品的沉淀峰長(zhǎng)度即可計(jì)算出待測(cè)抗 原的含量；反之，當(dāng)瓊脂中抗原濃度固定 時(shí)，便可測(cè)定待測(cè)抗體的含量,即反向火箭免 疫電泳。,51,火箭電泳,52,沉淀峰高,抗原濃度,1.測(cè)定沉淀峰高度 2.在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找 相應(yīng)抗原濃度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,染色標(biāo)本結(jié)果,53,注意要點(diǎn)： 選擇無電滲或電滲很小的瓊脂糖，否則火箭形狀不規(guī)則； 若火箭頂部形狀呈不清晰的云霧狀，提示電泳時(shí)間不夠，未到達(dá)終點(diǎn)； 作IgG定量時(shí)，由于瓊脂中的抗IgG抗體也是IgG，免疫反應(yīng)中的抗原抗體性質(zhì)相同，由于電滲作用影響了待測(cè)IgG的泳動(dòng)，火箭峰呈紡錘狀。為了抵消電滲作用，可用甲醛使樣本IgG上的氨基甲?；?，使本來帶兩性電荷的IgG只帶負(fù)